This article was downloaded by: [University of Florida]On: 04 October 2014, At: 04:09Publisher: Taylor & FrancisInforma Ltd Registered in England and Wales Registered Number: 1072954Registered office: Mortimer House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH,UK

Archiv für TierernaehrungPublication details, including instructions for authorsand subscription information:http://www.tandfonline.com/loi/gaan19

Zur gaschromatographischenBestimmung der flüchtigenFettsäuren aus demPansensaft mit Hilfe desFlammenionisationsdetektorsDr. rer. nat. Hildegard Wittenburg aa Oskar-Kellner-Institut für Tiereernährung Rostockdes Forschungszentrums für TierproduktionDummerstorf-Rostock der Deutschen Akademie derLandwirtschaftswissenschaften zu BerlinPublished online: 08 Sep 2009.

To cite this article: Dr. rer. nat. Hildegard Wittenburg (1970) Zurgaschromatographischen Bestimmung der flüchtigen Fettsäuren aus dem Pansensaftmit Hilfe des Flammenionisationsdetektors, Archiv für Tierernaehrung, 20:5, 391-397

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I Arch. TiererirBliruii!2 11~1. 2 0 . 10iO 11. 5 . S. 301-397 * Berlin I Oikrr-Kellrrcr-Institut fiir Tirrrri~dliruiiz Rostock cles E’orschunzszcnt runis f i lr Ticrproiluktloii Duniriicrstorf-Rvstork iler Dciitscheii Akndciiiic der Liiid~~irtsclirfts~~lseeiisc.Ii~ftcii zu nerliii (Dircktor: I’rof. nr. \V. LACBE)

IIildegard WITTESDURO

Zur gaschromatograpliisclien Bestimmung der fliiclitigen Pettsiiiuren nus dem Pansensaft init Hilfe cles Plammenionisationscletektors

1. Einlcit ung

Die bislicr von uns rcr6ffentlichtcn Gclinlts\wrtc an fliiclitigen Fcttsiiurcn (FFS) aus Pansensiiftcn [8, 9, 10, 15, 161 konntcn nur durch Anwendung einer nrbcits- und zcitnuf\rcndigcn 3IetIiotIik tlcr Aufnrbcitung dcs Pnrisensoftes und (lcr gnschronintogrnphisclicii Annlysc niit der \\’iirincleitf~higkeitsnieBzcllo als net cktor crlialten wcrden 11 11. Eine ~~-cscntliclic Pereinfncliung des Annlysen- gnnges crimrtcten wir durcli dic Anwendung der gnscliroriiatogrnpliisclicn Ann- IJW niit eineni Flanimcnionisntionsdctcktor, dcr cine gcgeniibcr tlcr Wtirnio- ~eitfiiliigl~eitsniclzclle urn den Falitor 102 bis 1 O’J Ii6lierc Empfintllichkeit l int untl infolgc seiner Uncnipfindlicli1;cit gcgcniiber U’asser die dirclctc Annlysc \-on wiiBrigcn Liisungcn crmijglicht. Ober den dircktcn Einsntz \-on ~nnscnsnft (- 9!Pf0 Wnsser) in tlic gnschromnto,araphiscl~c Analysc mit deni Flnmrnen- ionisntionsdetektor gibt cs in der Literatur nntcrscliiedliclic 3Icinungcn. Wdi- rcntl EJIERY 11. n. [S] sonic DECKER [3], SCIIWAK [IS], BR~~GUEJIAXS 11. a. [l] und GIESECRE 171 die fluclitigcn Fettsiiuren nus dcm Pansensaft Jirekt gaschromato- graphisch bestinimtcn, wciscn KAUFNASX und ROIIR [12] darniif Iiin, dnl3 cine solchc Arbcitswcisc niclit gcringe Sch~vicrigl;citcn mit sicli bringt . Dicsc wcrtlcn eiiierseits durcli den gcringcn Tr.-Subst .-Gclinlt Zuni andcrcn nbcr ancli durcli die groBc Anzahl von Substnnzcn, die olinc zcitrnubendcn RcinigungsprozeB iiiclit nus clcm Pansensaft entfernt wcrden kiinncn, verursaclit . I<AUFJlAKS und ROIIR fnnden in eigencn Vcrsuchen rnit rerscliicdcnen Siiulcn und Siiulcn- fiillungcn sowie niit Vorsiiulcn, dnIl sclion nncli wenigcn Chromatogrnmmcn von Panscnsiiftcn cin Siiulen\vcchsel crfordcrlicli wurde. D a l i c r trenncn sic aucli zur gascliroinat ographischcn Analysc init dem Floniniciiionisationsdctel;tar cnt - sprecliend den Angabcn von FESXER und ELLIOT [GI dic PFS durcli Wnsser- dnnipfdestillation vorlier nus deni Pansensaft ab. Bei dcn andercn Autoren [I, 3, 5, 181 findet inan kcinc Angnben dariiber, iiacli wicvicl Analyscn Siiulcn- ncchsel erfordcrlicli wurdc. Dicsc Frngc ist nbcr f & dio Durclifiilirung \-on Serien- nnalyscn von groler Bcdeutung. Thcorctisch ist cine ausrcichcndc Trennlcistung jeder Siiulc urn so liingcr zii cr\vnrten, j c rcincr (Ins Substanzgernisch ist, dns getrennt iverden SOH. Aucl~ ELEJIA [41, SCIIJIEKEL [I71 und KROJIASS 11. a. [14] 2;.

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302 \ Y I ~ E S B C P . G . I~estlniniunz der flllrlitlzcn Fettsi,trp,i

fiilireii dnlier \-or der gnscliro~i~atogrnpliisclie~i Aiialysc niit dem Flt~111iienio11i. sationstlctcktor cine Rcinigung des Pnnsensnftes d i i ~ ~ l i ~ ~ ' n s s c ~ c l n n ~ p f d c s t i l l n ~ ~ ~ ~ ~ durch.

Als stationiirc Plinsc knnien Diiitliylliesylscbnzinnt + Sebazinsiiure (200,'o~llf Cclite 545) [3, 181, I7ersnmid 000 (150,'o) und Isopht~ials?iure (5%) auf Chroino- sorb 11' [I], [ 121 Neope~itylglykolsnkzinat (200,'o) und o-Phosphorsiiurc (20/6) auf Firebricli sowic Diiitly.lcnglykolsukzinnt ( 15y0) und o-Pliospliorsiiure (2%) arlf Firebrick [ i ] , Neopentylglgkolsukzinnt-Phospliors8iire (so/o) auf Chroniosorb M7AW [4], Twccn 80 (20%) + o-Phospliordure (24/") auf Chromosorb \\' [17] und 200/,, Carbowas 4000-Tcreplitlialsiiiure nuf Chrornosorb 11' [14] zur An- wendung. Unabhiingig von der statioiiiircii Phnsc crrcichtcn die genannten Autoren anniilicrnd glcicli gute Auftrennungen der FFS, so dnfl keinein dem fur die stationiire Pliose vcrwcndeten Substanzgeniiscli der Vorzug zu gcbcn ist.

Beim Arbeiten in wiiBriger L6sung bestelit die Gefnlir, daB Anteile der FPs mchr oder 11-cniger fcst nni SiiuIenniaterinl adsorbiert werden. Diesen in cler englischen Lit cratur als ,,nieniory" odcr ,,glrosting" bezeiclincteii Stcircffekt konnte DECKER [3] durch eine Bei~i~iscliung \-on 5o/, Aincisensiiure zuiii Pansen. saft untcrdriicken, was aucli \-on nndcrcn Aiitorcn iibernoniinen wurde [2, 18).

-

2. Eigenc Untersucliungcn

Zur Rationnlisierung unserer serieniniifligcii Ainlysen dcr FFS nus Pansen- siiftcn setzten wir den Gnscliroinntograplicii GCIIF 18.3 mit. Flnmmenionbntions- detektor dcr Rrnia 11'. Giedc, Bcrlin, ein.

2.1. 170rbercitung dcs Pnnsensoftes fiir die Gnsclirotnntogrnpliic

Die rnittels Sclilundsondc ron Schafen, Kiilien bzw. Bullen gezogeneii Pnnsen- snftproben [I 11 wurdcn 10 Min. bei 6000 U/AIin. zentrifugiert. AnschlieBend wurdc zii 6 nil zentrifugicrteni Pansensaft 0,6 1111 Anieiscnsiiure p. a. zugcgebcn [3]. Danncli wurdc noclimnls 10 AIin. bci 6000 U/JIin. zentrifugiert und j e nncli Konzcntmtion an FFS 1-3 pl des Zentrifngntcs dirckt niit einer Nikroinjek- tionsspritzc (Firinn Zininieriiianii, Leipzig) in den Gnschromntogrnplic~i ein- gcgcben.

2.2. Herstellung clcr Trennsiinlc

Porolitli (0,2-0,3 niiii) wurde niit 15OiO Hartwachs RS (VEB Berlin-Clicniie), gelcist in Chloroform, impriigniert 1131. Knch Abdanipfen des CHCI, untcr Riilireii auf eirieni Wasserbad nvrde tlas Alaterial 7-8 Std. bei i i O "C ausgelicizt. Einc 3 m lange Siiulc (4 mni 0) wurdc niit dein Jlntcrinl (ctwa 23 g) gefiillt und die fertigc Siiulc nochmals einige Std. Lei 170 "C ausgeheizt. Nacli Einbari in den Gascliroruntogr~plien wirde (lie Siiule Lei durchstriiniendeni Stickstoff utid 150 "C rnclirere Tngc genltert, bis eine cin\mntlfrcic Grunrllinic roni Sclireibcr registricrt wiirde.

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3.3. Beclingnngen fiir clic gnschroiiiatographisclie Annlysc tler FFS niit. deni Flnmnicnioriisntionstlete1;tor

-Ms Trlgergns tlient Reiriststiclistoff, nls Flniiimgns Wnsscrstoff, tler \-or Ein- tritt, in den Gascliromatograplien clurch cin Gnsrcinigungsfiltcr (Fiillnng halb I l l i t deni Kontakt Nr. 7748 lint1 hnlb init JIolsieb 4A von Leunn) gelcitct. wird. Die Gnsges~li\\indiglieitcn bctrngcn fiir X2: 2 1/Std., fiir H2: 2 l/Std. iind fiir Luft : 20 l/Std. Dic Thcrmostnteiitc~iipcrntiir betrlgt 150 “C. Es wirtl bei eineni Eiiignngs”’it1erstnnd dcs Elcktroiiletcr\-crstHrl;ers ~ 0 1 1 1010 0 ~ i n t l dcr Enipfintl- 1 ichkci t ss t ufe 3 gcnrbei t ct .

2.4. Ainlysc von Testgc~nisclicn tler FlzS i n M’nsscr

Abb. 1 zeigt dns Gascliroiiiatogrniiiiii eincr wiiDrigen Tcstl6sung. Dic selir gute duftrcnnung des Siiurcgcmisches \\urde in 25 hIin. crreicht.

Abb. 1. Chronintogrninni einer Tcstlijsmg

Zur Oberpriifurig der Gciinuigkcit und Reprodiizicrbarkeit dcr Annlyscn- crgcbnissc dcr gnsclironiat ogrnphischcn Trennungcn dcr FFS m r d c n ziiniichst wiiflrigc Tcstgcmisclie niit unterscliicdlichcni AIolprozcnt -Vcrliiiltnis an FFS und loo/, Ameiscnsiiurczusntz untcrsuclit . Zwisclicn den \-erscliiedcncn Testgemi- schen \viirden i -2mnl j c 5 ,ul 2041igc Aineisens5urc zur Rcinignng der Siiulen 1-011 evtl. fcstgcliaItcnen Siiurcrcsten (memory-Effelit) cingcspritzt. Tab. i zeigt. die Ergebnissc dcr Untcrsiicliungen tler Testgciiiisclic, die nncli der Drciccbs- metliotlc unter An\rcndung \-on Eiclifnktorcn nusgewcrtct w-urtlcn.

Dic nus jc 4 Einzclnnalysen crlinltcnen ;\Iittclwcrte neiclien nbsoliit 11111’ gering- fiigig voni thcorctischcn Gclinlt dcr Testlbsungcn nb, die ~Iittel\\.ertstrcuungen liegcn bis auf wenige Ausnnliiiicri unter 1 O,’o. Die Ergebnissc der giisclironinto- grnpliischcn Annlyse tler Tcstl6sungen zcigcn, dn13 ninii init dcm Flanimcnioni- sntionsdetelrtor die Siiurcli nus niihiger L6mng rccht gcnnu bcstimnicn kniin.

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2.6. Annlysc tlcr FFS nus Pnnsensnft probcn

-4bb. 2 zcigt (Ins Gaschromntogrnnim der Trennung der FFS mis dem Panscn- snft ciner Kuli. Infolge dcr hohcn Einpfindlicli1;cit dcs Flammcnionisn- tionsdctelitors betriig dic Einspritzung niir 2 P I .

xl\bb. 2. Chromrtogrnmm cines Paiisensnftes

Bei tier scrienmlfligcn Annlysc tlcr Pnnscnsiiftc nuf ihren FFS-Gelinlt. ~ c r - fnlircn \\ir PO, dnB ;van jcdcr Probe 2 gnschroinntogrnpfiiscl~c Trcnniingen tlurchgcfiilirt wertlen, dcren Ergcbnissc geniittelt wcrtlcn. In Tab. 2 sind cinigc IIUS unscren laufencleri Unt crsnchungen an Kiihcn, Bullen iincl Kiilbern ausgc- wHlilte Beispielo zusn~ii~~~cngestell t , unl die Reproduzicrbnrkeit der Ergcbnisss zii cliarakterisiercn.

Die Ergebiiissc cler Pnnsensaftnnn- lyse zeigen, dnR die 13estimniung cler FFS mis Pnnsensaft, mit dcr gleiclleil Gennuigkeit. erfolgt, wic nus \v,iflrigcil TestlBsungen (s. Tab. 1). Die in1 Unter- scliictl zurTest16sungilll Pnnsensaft cnt- hnlt cncn zniilrciclrcn ~‘crnnrcinigunge~i stBren den Trennrorgn~lg nicht, so dnn

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\VITTESBCRG, Dcstiinniuiig der fl0clitlgrn Fettdurrn 396

einwandfrci aus\s-ert bare Cliroiiiat ograiiiiiie erlialt en wurcleii.Die Trcnnsii.ulc zcigt c nacli iiber 1000 Annlyseii iiocli I i d ~ i ~ Arizcjclicn cincr Qunlitfits\-erniindcruii~ uiid ist, rlnlicr fiir scricnniiinigc Bcstiinmungen gut, gccignct. Schon 1 Std. riacll dcr Paiisensnft,probcnnlinic k6nncn tlic Ergebriissc tlcr gnsclironintogr~pliisclic~l Annlysc dcr FFS vorliegen.

Zlls~llllllcllfnssuIl~

Die fliiclitigcn Fcttsfiurcn nus l'niisciisnftprobci1 1-011 Iiiilic~i, IGilbern untl Sclinfcn k6nncn nach Zusatz 1-011 iO0,'O Amcisendure dirckt RUS der w8Brigcn L6sung gascliroiunt ographiscli niit tlciii Flnmnicnionisntionsdetektor bcstiiiiiiit wcrdcn. Mach iiber 1000 Clirornotogranimen zcigtc tlic Trcnnsfiulc (15% Hart- 1vaclis RS auf Porolith) einc unveriindcrt gute Trcnlilcistung. Die Gcnauigkeit des ~7erfahre~is \\-iirdc durch die Analgse \-on 'l'cstgcmisclien iibcrpriift.

Su nininry

IIilrlcgard \\'ITTESCURC

Estimation By Gas ChroIi~atograpliy of I'olatilc Fat ty Acids froni Ru- ininal Bluid Using a Flniiic Ionisation Detector

Estimation of \Tolatile Fnt ty Acids in Saniplcs of Riiiiiinal Fluid froin COWS,

cal\-cs and shccp is possiblc by direct gaschromatographic aiialysis of a n nqiicous solution after addition of lO",'O of foriiiic acid using a flnnie ionisntion detector. Tlic good scparating capacity of tlic column rcniniiietl unchnngcd cven wlicn 1000 chromatograms had bccii run tlirougli tltc column (150,'0 of hard \\-as 011

Porolitli iiinterinl). Tho accuracy of the tccliiiiquc \vns clicclml by annlyzing teat niisturcs.

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Eirigrgangen: 10. Februnr I070

Frau B. PETERS sci fiir wrtVolle tcclinisclie Jlitarbrit bcstens gcdniikt.

.insclirift dcr Xutoriii: Dr. rcr. nnt. HILDEOARD \VITTEXDURG Osknr-Kellner-Institut fiir Tierernrilirung Rostock clcr Dcutsclicn Akadeiiiic der L~nd~rirtscJrnftsi,.issc~~sclinftcii zu Berlin 2.3 Rostocli 1, Justus-ron-Licbi6-StrlDc D

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