禽流感抗体检验及其他动物疫病及动物源性产品检验
珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心徐海聂
2013.11.01
主要内容
一、禽流感抗体检验
二、其他动物疫病及动物源性产品检验
1.1 前言
珠海毗邻澳门，澳门市场供应的活鸡和冰鲜鸡鸭主要来自珠海。珠海局辖区有？个供港澳活禽养殖场，禽流感检验检疫是我们动检室的主要检测任务之一，同时也是活禽养殖场高度关注的一个问题。活鸡出口港澳离境前我们动检室要批批检测禽流感病毒核酸和抗体，抵达澳门后澳门民政总署化验所还要高比例抽检禽流感病毒核酸和抗体，只要珠澳两地哪个实验室的检测结果有问题，无论是病毒核酸阳性还是抗体不达标，该批活鸡便不能出口或遭遇退货、销毁。 2012年农业部更换 H5疫苗毒株，新疫苗使用几个月后抗体监测结果出现异常，让我们认识了一个看似简单的禽流感抗体检测 HI实验以前不曾重视的技术细节 ----抗原毒株对检测结果的影响。
1.2 流感病毒分类
根据核蛋白（ NP ）和基质蛋白（ MP ）的不同流感病毒分为 A 型、 B 型和 C 型。三者在电镜形态、基因组组成、蛋白编码机制、表面蛋白变异频率和感染宿主范围均有不同。
A 型流感病毒可感染多种动物，包括人。所有的禽流感病毒均为 A 型流感病毒。
B 型和 C 型流感病毒主要感染人， C 型流感病毒也可感染猪。
禽流感（ Avian Influenza， AI ）是正粘病毒科 A 型流感病毒引起的一种禽类传染病，禽流感病毒（ AIV ）可感染几乎所有野生及家养禽类。
高致病性禽流感（ HPAI ）是世界动物卫生组织（ OIE ）规定的必须通报的疫病，也是我国农业部规定的一类动物传染病。
1.2 流感病毒分类
1.3 禽流感病毒基因组
1.4 禽流感病毒的毒力分类1.高致病性禽流感病毒株（ HPAIV） H5N1、 H7N3、 H7N72.低致病性禽流感病毒株（ LPAIV） H9N23.无致病性禽流感病毒株
禽流感病毒的寄生感染部位： 1 、低致病性（ LPAI）：呼吸道、肠道。 2 、高致病性（ HPAI）：全身。
1.5 本室禽流感抗体检测主要实验类型
血凝及血凝抑制试验 （ HA / HI ）
琼脂免疫扩散试验 （ AGID ）
酶联免疫吸附试验 （ ELISA ）
血凝及血凝抑制试验 （ HA / HI ）
琼脂免疫扩散试验 （ AGID ）
酶联免疫吸附试验 （ ELISA ）
1.5.1 血凝及血凝抑制试验（ HA/HI ）
1.5.1 血凝及血凝抑制试验（ HA/HI ） 血凝试验（ HA ） 病毒粒子上的血凝素蛋白与特定红细胞（ red blood
cell, RBC ）表面相应受体结合，引起 RBC 凝集。
血凝抑制试验（ HI ）： 病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体所抑制，
即抗体与病毒结合后，病毒表面的血凝素无法吸附于红细胞表面的受体上，用免疫血清阻止红细胞凝集的现象，称为血凝抑制。即抗体与血凝素结合，封闭血凝素，使之不能与红细胞结合。
试验特点
血凝和血凝抑制试验由于能同时进行大量样本分
析 , 试验过程易于操作，以及结果快速、准确、灵敏、
廉价等特点。
1.5.1 血凝及血凝抑制试验（ HA/HI ）
应用：血凝和血凝抑制试验是各地疫病诊断、流行病学调查、免疫程序制定及免疫效果监测等的主要手段之一。
珠海局应用：血凝和血凝抑制试验多用于出口港澳活禽的禽病血清学监测，如：离境前禽流感 H5 亚型抗体的检测；注册养禽场新城疫抗体的免疫效果监测；H7、 H9 亚型禽流感抗体检测；鸡产蛋下降综合征抗体检测。
1.5.1 血凝及血凝抑制试验（ HA/HI ）
1.5.2 琼脂免疫扩散试验（ AGID ）
血凝及血凝抑制试验 （ HA / HI ）
琼脂免疫扩散试验 （ AGID ）
酶联免疫吸附试验 （ ELISA ）
AGID 的原理是，抗原和特异性抗体在琼脂凝胶中相向扩散，当二者相遇时产生沉淀，这种沉淀稳固在凝胶中产生可见的沉淀线，沉淀线的形成也是抗原和抗体浓度最适宜之处。
AGID 是用来检测 A 型流感病毒型特异性血清抗体的一项试验，即抗核蛋白（ NP ）和基质蛋白（ MP ）的抗体。因而， AGID 适用于检测所有 A 型流感病毒感染后的血清抗体。另外， AGID 也适应于鉴定流感病毒。
此法优点是简单易行，但缺点是敏感性较差，易出现假阳性。
1.5.2 琼脂免疫扩散试验（ AGID ）
血凝及血凝抑制试验 （ HA / HI ）
琼脂免疫扩散试验 （ AGID ）
酶联免疫吸附试验 （ ELISA ）
1.5.3 酶联免疫吸附试验（ ELISA ）
ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
1.5.3 酶联免疫吸附试验（ ELISA ）
1.6 血凝与血凝抑制试验操作 血凝试验 （ HA ） 试验材料和试剂 器材： 96 孔 V 型微量反应板、振荡器、 25μl微量移液器； 试剂： 0.01mol/L pH7.2磷酸盐缓冲生理盐水（ PBS）或 阿
氏液； 1%鸡红细胞（ RBC）悬液； 标准 H5亚型禽流感病毒抗原、标准阳性血清、标准阴性血
清 （由哈尔滨兽医研究所维科生物技术开发有限公司提供）
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
HA 操作步骤
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
结果判读 血凝价 1:512 （ 29 ）
以红细胞发生完全凝集的病毒悬液的最高稀释倍数作为该病毒液的红细胞凝集效价。
将病毒做 1:512 倍稀释，取 25ul 病毒液可使25ulRBC 发生凝集，即一个血凝单位。
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
血凝抑制试验（ HI）
4 HAU 抗原配制
根据前图的结果，配置 4 HAU 的病毒抗原，即抗原效价为 29 （ 1 ： 512 ）， 4HAU 抗原稀释倍数为27 （ 1:128 ）。
对照设置
阳性对照 阴性对照 空白对照 抗原回归
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
HI 操作步骤
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
对照判读
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
结果判读
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
结果判读抗体血凝抑制价：以完全抑制４个 HAU 抗原的血清最高稀释倍
数 作为 HI滴度。
以稀释倍数表示： 1:512 、 1:256 、 1:128 、 1:64 、 1:32、 1:16
1/512 、 1/256 、 1/128 、 1/64 、 1/32、 1:64
以 2 的指数表示： 29 、 28 、 27 、 26 、 25 、 24
以 2 的对数表示： log29 、 log28 、 log27 、 log26 、 log25 、
log24
9log2 、 8log2 、 7log2 、 6log2 、 5log2 、 4log2
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
注意事项 工作抗原滴度
4 HAU 工作抗原一定要配制准确，抗原偏高，检测结果偏低；反之，抗原偏低，检测结果偏高。
4 HAU 工作抗原需现配现用，每次实验抗原回归一定要做。
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
注意事项 禽流感 H5抗原毒株型别 毒株来源不同的抗原存在抗原性差异，分别用 Re-5 株、 Re- 6 株两种抗原检测同一批鸡血清，结果存在差异。
抗原与疫苗毒株同源，用 Re-5 株抗原检测 Re-5免疫抗体，用 Re-6株抗原检测 Re-6免疫抗体，检测结果与理论值相符。
抗原与疫苗毒株不一致，用 Re-6 株抗原检测 Re-5免疫抗体，用Re-5 株抗原检测 Re-6免疫抗体，结果异常偏低，超出 OIE规定的检测要求，不能采用。
在日常检验检疫试验中，一定要选择与疫苗毒株同源的抗原进行检测，避免用错抗原误判检测结果。
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
注意事项 PBS NaCl浓度
配制 1%红细胞的 PBS中 NaCl浓度不能低。盐浓度低，红细胞易破裂，易溶血，血球保存时间短。
1.6 血凝与血凝抑制试验操作
1.不同厂家禽流感 H5N2疫苗免疫效果比较研究
2.禽流感 H5N1 Re-5株和 Re-6株抗原比对实验
3.禽流感 H7抗体 HI、 ELISA 检测
1.7 禽流感抗体科研简介
1.7.1 不同厂家禽流感 H5N2 疫苗免疫效果比较研究 H5N2禽流感油乳灭活疫苗免疫后 HI抗体消长规律及出
口港澳活鸡 HI抗体统计分析
不同厂家 H5N2禽流感油乳灭活疫苗免疫效果比对小型试验、田间试验
重组禽流感病毒灭活疫苗 (H5N1亚型， Re-1株 ) 免疫效果实验
1.7.1 不同厂家禽流感 H5N2 疫苗免疫效果比较研究
四种疫苗免疫效果比较
45 HI天二免 抗体消长曲线
012345678
0 20 40 60 80 100 120 140鸡日龄
log2
ＨＩ抗体（
） A2
B2
C2
D2
36 HI天二免 抗体消长曲线
012345678
0 20 40 60 80 100 120 140鸡日龄
log2
ＨＩ抗体（
）
A1
B1
C1
D1
不同疫苗差异显著性分析
B1 C1 D1
A1 0.074 0.001** 0.000**
B1 0.110# 0.003**
C1 0.122#
36日龄组平均 HI抗体滴度 t 检验 P 值
B2 C2 D2
A2 0.444# 0.010* 0.001**
B2 0.057# 0.005**
C2 0.369#
45日龄组平均 HI抗体滴度 t 检验 P值
经统计学 t 检验两种疫苗 H5平均抗体滴度， A 疫苗与 B 疫苗、 B 疫苗与 C 疫苗、 C 疫苗与 D 疫苗差异不显著（ P>0.05） , A疫苗与 C 疫苗、 A 疫苗与 D 疫苗、 B 疫苗与 D 疫苗差异极显著（ P<0.01）。
1.7.1 不同厂家禽流感 H5N2 疫苗免疫效果比较研究
A HI疫苗 抗体消长曲线
012345
0 20 40 60 80 100 120 140
鸡日龄
log2
ＨＩ抗体（
）
A1
A2
B HI疫苗 抗体消长曲线
0123456
0 20 40 60 80 100 120 140
鸡日龄
log2
ＨＩ抗体（
）
B1B2
C HI疫苗 抗体消长曲线
01234567
0 20 40 60 80 100 120 140
鸡日龄
log2
ＨＩ抗体（
）
C1
C2
D HI疫苗 抗体消长曲线
0
2
4
6
8
0 20 40 60 80 100 120 140
鸡日龄
log2
ＨＩ抗体（
）D1D2
不同二免时间比较
二免时间推迟，抗体维持时间较长，抗体下降时间相应推迟， 64日龄以后 ,45日龄二免组比 37日龄二免组同期抗体水平普遍高 0.5～ 1 log2，仅 D 组在 113日龄后又趋于一致。统计学 t 检验 A 、 B 、 C 、 D 四种疫苗不同二免时间的 HI抗体消长曲线， P 值依次为 0.130、 0.740、 0.489、 0.913，差异均不显著。
1.7.1 不同厂家禽流感 H5N2 疫苗免疫效果比较研究
B C D 、 、 疫苗 抗体消长曲线
-2
0
2
4
6
8
10
0 20 40 60 80 100鸡日龄
HI抗体（
log2）
B疫苗C疫苗D疫苗
B 、 C 、 D 三种疫苗比较
鸡只免疫接种后， D 疫苗抗体上升速度最快；达到免疫保护抗体水平 4 log2所需时间最短，维持较高抗体水平时间最长，至 84日龄出口上市时，抗体滴度最高，≥ 4 log2的样品数量最多。
1.7.1 不同厂家禽流感 H5N2 疫苗免疫效果比较研究
免疫二次与免疫三次比较
三次免疫比二次免疫平均抗体滴度高，尤其在 56日龄峰值以后优越性更加明显。但是，据出口公司反映，部分供澳活鸡在澳门屠宰后胴体上有很明显的肿块，影响市场售价；养殖场也反映，鸡体注射疫苗部位可能出现较大水肿，并且注射35天后仍不能完全吸收。我国农业部门规定，为了保证鸡肉品质，上市前 28天内不再进行灭活疫苗的注射免疫。考虑到供澳活鸡一般 85日龄左右上市， 60日龄实施三免将不符合这一规定，同时胴体上的肿块也难以完全吸收。既然二免已能满足检疫要求，因此不建议对供澳活鸡实施三次免疫。
二免三免效果比较
- 2
0
2
4
6
8
10
0 20 40 60 80 100 120
鸡日龄
HIlo
g2抗体（
）
二免三免
1.7.1 不同厂家禽流感 H5N2 疫苗免疫效果比较研究
H5N1疫苗与 H5N2疫苗比较
鸡只接种疫苗后抗体达到保护水平 4 log2的时间， H5N1疫苗为 5 周， H5N2疫苗为 7 周；抗体≥ 4 log2的有效免疫保护期，H5N1疫苗为 6 周， H5N2疫苗为4 周；最高平均抗体峰值， H5N1疫苗为 8 log2， H5N2疫苗为6.3 log2； 84日龄鸡只上市时的平均抗体滴度， H5N1疫苗为 6.44 log2， H5N2疫苗为4.20 log2。数据显示，对于供港澳活鸡的免疫效果， H5N1疫苗好于 H5N2疫苗。
选择同一禽流感疫苗生产厂、相同的 14日龄首免 45日龄二免的免疫程序，引用实验三和实验四田间实验试验数据，比较 H5N1疫苗与 H5N2疫苗（ B 疫苗）对供港澳活鸡的免疫效果。
H5N1 H5N2与 免疫效果比较
-2
0
2
4
6
8
10
0 20 40 60 80 100
鸡日龄
HIlo
g2抗体（
）H5N2H5N1
1.7.1 不同厂家禽流感 H5N2 疫苗免疫效果比较研究结果： 不同厂家的 H5N2 疫苗免疫效果存在差异，以 D 疫苗免疫效果最好 ,
然后依次为 C 疫苗、 B 疫苗、 A 疫苗。 推荐禽流感灭活疫苗对供港澳肉鸡的免疫程序为：首免 14 日
龄， 0.3ml/ 只，颈部皮下注射；二免 45 日龄， 0.5ml/ 只，胸肌注射。
对于供港澳肉鸡的禽流感免疫效果， H5N1 疫苗好于 H5N2 疫苗。 同一厂家不同批号的禽流感疫苗免疫效果存在一定的差异。 毒株来源不同的抗原可能会存在抗原性差异，因而使检测同一血清的
结果有差别，如禽流感 H5 HI 抗原有 H5N1 Re-1 株、 Re-4 株、 Re-5 株，分别用不同抗原检测同一批鸡血清，结果有约 1 log2 的差异，疫苗与抗原同源检测结果高。
1.7.2 禽流感 H5N1 Re-5株和 Re-6株抗原比对实验 首免二免均用 Re-5株疫苗 检测 8批 108份鸡血清
8 批 Re-5 株抗原检测结果平均值全部高于 Re-6 株检测结果，两种抗原检测结果相差 2.1 log2～ 5.6 log2 ，平均 4.1 log2 。
单份血清两抗原检测结果极差可达 10 log2 ，样品 Re-5 株抗原检测结果抗体非常高而 Re-6 株抗原完全检不出抗体。
33 份样品 Re-6 株抗原检测结果阴性（滴度＜ 4 log2 ）而 Re-5 株抗原检测结果阳性（滴度≥ 4 log2 ）。
检测结果还显示， Re-5 株抗原检测结果标准差比 Re-6 株抗原检测结果标准差小，批内各样品 Re-5 株抗原检测结果抗体滴度水平比较集中整齐， Re-6 株抗原检测结果抗体滴度水平分散，高低不齐， 4批 Re-6 株抗原检测结果抗体不达标（每批 14 份样品要求 10 份以上滴度≥ 4 log2 ）的样品 Re-5 株抗原检测符合出口要求。
1.7.2 禽流感 H5N1 Re-5株和 Re-6株抗原比对实验 首免二免均用 Re-6株疫苗 检测 35 批 490 份鸡血清
35 批 Re-6 株抗原检测结果平均值全部高于 Re-5 株检测结果，两种抗原检测结果相差 1.7 log2～ 5.7 log2 ，平均 4.2 log2 。
单份血清两抗原检测结果极差可达 9 log2 ，样品 Re-6 株抗原检测结果抗体非常高而 Re-5 株抗原完全检不出抗体。
182份样品 Re-5 株抗原检测阴性而 Re-6 株抗原检测阳性。
21 批 Re-5 株抗原检测结果抗体不达标的样品 Re-6 株抗原检测符合出口要求。
1.7.2 禽流感 H5N1 Re-5株和 Re-6株抗原比对实验
首免 Re-5 株疫苗二免 Re-6 株疫苗 检测 25 批 346份鸡血清
两种抗原检测结果平均值互有高低， 14 批 Re-5 株抗原检测结果高于Re-6 株检测结果，两种抗原检测结果相差 0.1 log2～ 5.6 log2 ，平均 1.5 log2 ； 1 批两种抗原检测结果平均值相等； 10 批 Re-6 株抗原检测结果高于 Re-5 株检测结果，两种抗原检测结果相差 0.1 log2～ 5.2 log2 ，平均 1.7 log2 。
单份血清两抗原检测结果极差可达 9 log2 。部分样品 Re-6 株抗原检测结果高 Re-5 株抗原检测结果低，相反，部分样品 Re-5 株抗原检测结果高 Re-6 株抗原检测结果低，也有部分样品两种抗原检测结果相近。
2 批 Re-5 株抗原检测结果抗体不达标的样品 Re-6 株抗原检测结果符合出口要求， 2 批 Re-6 株抗原检测结果抗体不达标的样品 Re-5 株抗原检测符合出口要求。
1.7.2 禽流感 H5N1 Re-5株和 Re-6株抗原比对实验 免疫背景不详 检测 14批 209份鸡血清
两种抗原检测结果平均值互有高低， 7 批 Re-5 株抗原检测结果高于 Re-6 株检测结果，两种抗原检测结果相差 0.5 log2～ 4.1 log2 ，平均 1.7 log2 ； 7批 Re-6 株抗原检测结果高于 Re-5 株检测结果，两种抗原检测结果相差 0.3log2～ 5.6log2 ，平均 3.7 log2 。
4 批 Re-5 株抗原检测结果抗体不达标的样品 Re-6 株抗原检测符合出口要求。 2 批 Re-6 株抗原检测结果抗体不达标的样品 Re-5 株抗原检测符合出口要
求。
1 批 60份外单位委托检验的非出口鸡血清， Re-5 株抗原检测结果最高 5 log2 ，最低 0 log2 ，平均 3.7 log2 ，阴性样品 20份，达不到农业部规定的 70%阳性的免疫要求；而用 Re-6 株抗原检测，结果均在 6 log2 以上，平均 7.5 log2 ，抗体滴度高而整齐，符合农业部的免疫要求。
1.7.2 禽流感 H5N1 Re-5株和 Re-6株抗原比对实验
澳门验证结果 注册场 总批次 Re-5 不满
意批次不满意
百分比 %
Re-6 检测批次
Re-6 不满意批次
场一 38 34 89.47 28 0
场二 41 21 51.22 19 0
场三 22 1 4.55 1 0
场四 12 1 8.33 1 0
场五 8 2 25 1 0
场六 13 7 53.85 6 0
总计 134 66 49.25 56 0
1.7.2 禽流感 H5N1 Re-5株和 Re-6株抗原比对实验结论： 毒株来源不同的抗原存在抗原性差异，分别用 Re-5株、 Re-6株两种抗原
检测同一批鸡血清，结果存在差异。 抗原与疫苗毒株同源，用 Re-5株抗原检测 Re-5免疫抗体，用 Re-6株抗
原检测 Re-6免疫抗体，检测结果与理论值相符。 抗原与疫苗毒株不一致，用 Re-6株抗原检测 Re-5免疫抗体，滴度平均低
4.1 log2；用 Re-5株抗原检测 Re-6免疫抗体，滴度平均低 4.2 log2，结果偏差大，超出 OIE规定的检测要求，不能采用。
首免 Re-5株二免 Re-6株疫苗的鸡血清和免疫背景不详的鸡血清，由于二次免疫使用的疫苗和二次免疫时间的不同， Re-5免疫抗体和 Re-6免疫抗体对检测结果的贡献不同，两种抗原的检测结果可能有差异，在一种抗原检测结果阴性时建议用另一种抗原再行检测。
在日常检验检疫试验中，一定要选择与疫苗毒株同源的抗原进行检测，避免用错抗原误判检测结果。
主要内容
一、禽流感抗体检验
二、其他动物疫病及动物源性产品检验
2.1 主要检验业务主要检测范围
禽病 猪病 马病 牛病 犬病 鱼病 虾病 动物源性成分鉴别 动物源性滋补品鉴别
2.2 主要实验方法
血凝和血凝抑制试验 (HA / HI)
琼脂免疫扩散试验 (AGID)
酶联免疫吸附试验 (ELISA)
反转录聚合酶链式反应（ RT-PCR
）
荧光 RT-PCR
2.3 掺假肉类 DNA 鉴定（ 13种）
牛肉、羊肉、猪肉、鸭肉、鸡肉等肉类掺假检测鉴定。
牛成分 GB/T 20190-2006
SN/T 2051-2008
羊成分 GB/T 20190-2006
SN/T 2051-2008
猪成分 GB/T 21101-2007
SN/T 2051-2008
鸡成分 SN/T 2978-2011
鸭成分 SN/T 2727-2010
脊椎动物成分 ZHJS 001-2006
哺乳动物成分 GB/T 21103-2007
狗成分 GB/T 21105-2007
兔成分 GB/T 21102-2007
骆驼成分 GB/T 21100-2007
鹿成分 GB/T 21106-2007
马成分 GB/T 21107-2007
鱼成分 SN/T 2867-2011
2.4 名贵滋补品掺假鉴别（ 4 种）
燕窝
鱼翅鹿茸花胶
2.4 名贵滋补品掺假鉴别（ 4 种）检验方法
提取脊椎动物成分 DNA↓
PCR 技术扩增 DNA↓
测序↓
序列比较
2.5 禽病检验项目和检测标准（ 11种）
禽流感 SN/T 1182-2010GB/T 18936-2003GB/T 19438.1-2004GB/T 19438.2-2004H5GB/T 19438.3-2004H7GB/T 19438.4-2004H9
新城疫 SN/T 0764-2011GB/T 16550-2008
喉气管炎 SN/T 1555-2005
鸡白痢 SN/T 1222-2012
传染性支气管炎 SN/T 1221-2003GB/T 23197-2008
传染性法氏囊病 GB/T 19167-2003
禽痘 SN/T 1557-2005SN/T 1226-2003
鸡产蛋下降综合征 SN/T 1468-2004
马立克氏病 GB/T 18643-2002
禽衣原体病 SN/T 1395.1-2004
鸭病毒性肝炎 SN/T 1418-2004
2.6 猪病检验项目和检测标准（ 14种）
口蹄疫 SN/T 1181-2010GB/T 22915-2008ZHFB 004-2004ZHFB 005-2004ZHFB 009-2001
猪瘟 GB/T 16551-2008SN/T 1379-2010SN/T 0762-2011
甲型流感 GB/T 27539-2011ZHJS 001-2009
Ⅱ型猪链球菌 GB/T 19915.1-2005GB/T 19915.2-2005GB/T 19915.7-2005
猪繁殖和呼吸综合征 GB/T 18090-2008ZHJS 015-2007
伪狂犬病 NY/T 678-2003SN/T 1698-2010ZHJS 118-2010GB/T 18641-2002
猪细小病毒病 SN/T 1919-2007SN/T 1874-2007ZHJS 117-2010
猪传染性胃肠炎 SN/T 1446-2010
猪水泡病 GB/T 22917-2008SN/T 2702-2010
猪圆环病毒 SN/T 2708-2010GB/T 21674-2008
副猪嗜血杆菌 ZHJS 119-2010
猪传染性胸膜肺炎 SN/T 1447-2011
猪痢疾 SN/T 1207-2011
猪尿兽药残留检验项目和检测标准（ 1 种）
盐酸克伦特罗
GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定
2.7 马病检验项目和检测标准（ 4 种）
马传染性贫血 SN/T 1358.2-2005
SN/T 2717-2010
马焦虫 SN/T 1678-2005
SN/T 2693-2010
马鼻疽 SN/T 2018-2007
非洲马瘟 SN/T 1692.1-2006
2.8 牛病检验项目和检测标准（ 10种）
口蹄疫 SN/T 1181-2010GB/T 22915-2008ZHFB 004-2004ZHFB 005-2004ZHFB 005-2001
蓝舌病 SN/T 1165.2-2002SN/T 1165.1-2002GB/T 18089-2008
病毒性腹泻 SN/T 1129-2007
牛地方流行性白血病 SN/T 1917-2007SN/T 1917-2007
牛传染性鼻气管炎 SN/T 1164.3-2006SN/T 1164.1-2011SN/T 1918-2007
赤羽病 SN/T 1128-2007
炭疽 SN/T 1700-2006SN/T 2358-2009
布氏杆菌病 SN/T 1088-2010ZHJS 002-2008
结核病 GB/T 18645-2002
副结核病 SN/T 1084-2010
2.9 犬病检验项目和检测标准（ 1 种）
狂犬病
GB/T 14926.56-2008实验动物 狂犬病病毒检测方法
GB/T 18639-2002狂犬病诊断技术
2.10 水生动物检验项目和检测标准（ 17种）
鲤春病毒血症 SN/T 1152-2011GB/T 15805.5-2008OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.3.8 章
真鲷虹彩病毒病 SN/T 1675-2011OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.3.7 章
鱼病毒性神经坏死病 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2006版 2.1.7 章
病毒性出血性败血症病毒 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.3.9 章
传染性造血器官坏死病毒 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.3.4 章GB/T 15805.2-2008
传染性肌肉坏死 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.2.3 章
麻疹 WS 296-2008
锦鲤疱疹 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.3.6 章SN/T 1674-2011
2.10 水生动物检验项目和检测标准（ 17种）
对虾白斑病 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.2.6 章SN/T 1151.2-2011
对虾黄头病 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.2.8 章SN/T 1151.4-2011
对虾 Taura 病 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.2.5 章SN/T 1151.1-2011
对虾杆状病毒 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2006版 2.3.4 章SN/T 1151.5-2003
对虾传染性皮下和造血器官坏死病
OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2012版 2.2.2 章SN/T 1673-2005
寄生虫 SN/T 1748-2006
霍乱 SN/T 1870-2007SN/T 2332-2009
斑节对虾杆状病毒 OIE 《水生动物疫病诊断手册》 2006版 2.3.5 章
海洋哺乳动物布氏杆菌病 OIE 《陆生动物诊断试验和疫苗手册》 2009版 2.4.3 章
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