Využití rutinního stanovení koncentrací moderních hypotenziv metodou LC/MS/MS v léčbě i v monitorování
efektu léčby u jedinců s hypertenzí
B. Sokolová, T. Gucký, M. Branný, V. Krečman, H. Skřičíková, L. Hebká, D. Stejskal,
Hypertenze – vysoký krevní tlak
nejčastější kardiovaskulární onemocnění
diagnóza hypertenze je založena na opakovaném a reprodukovatelném zjištění zvýšeného krevního tlaku
trvalá arteriální hypertenze poškozuje krevní cévy v ledvinách, v srdci a mozku, zvyšuje incidenci ledvinového selhání, ischemické choroby srdeční, srdečního selhání a iktu.
epidemiologické studie ukazují, že rizika poškození ledvin, srdce i mozku jsou v přímé souvislosti s mírou zvýšení krevního tlaku
konkrétní příčinu hypertenze lze určit pouze u 10 – 15 % pacientů (stenóza renální arterie, Cushingova choroba,…)
u pacientů, u nichž se organická příčina hypertenze zjistit nedá, hovoříme o esenciální hypertenzi – zvýšení krevního tlaku bývá obvykle způsobeno kombinací četných faktorů
genetické faktorypsychický stresfaktory prostředí a výživy (zvýšený přívod kuchyňské soli, snížený přísun
draslíku a vápníku)
bylo zjištěno, že účinné medikamentózní snížení krevního tlaku zabraňuje poškození krevních cév a podstatně snižuje morbiditu a mortalitu
hypertenze je multifaktoriální onemocnění, a proto se k její léčbě používajílátky s různým mechanismem účinku, které jsou rozděleny do 5 skupin
1) Diuretika
2) Látky blokující sympatický nervový systém
3) Blokátory vápníkových kanálů
4) Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI) a antagonistéangiotensinu II (AATII)
5) Vazodilatační látky
Často se k léčbě používá dvojkombinace nebo trojkombinace antihypertenziv (vyjímkou ale nejsou ani čtyři nebo pět současně užívaných antihypertenziv)
Diuretika
snižují krevní tlak tím, že snižují množství sodíku v organismupostačují zajistit přiměřenou farmakoterapii při mírné a středně závažné
hypertenzi.při těžších hypertenzích se používají v kombinaci s dalšími antihypertenzivy
furosemid hydrochlorothiazid
chlorthalidon
Látky blokující sympatický nervový systém
Centrálně působící látky
tlumí funkci sympatického nervového systému. Přesný mechanismus účinku není dosud přesně znám.u pacientů se středně těžkou až těžkou hypertenzí
klonidin
moxonidin
rilmenidin
Látky blokující sympatický nervový systém
β‐sympatolytika
působí inhibičně na adrenergní β‐receptoryu pacientů se středně těžkou až těžkou hypertenzí
metoprolol
bisoprolol
betaxolol
carvedilol
Blokátory vápníkových kanálů
inhibují vstup vápníku do buněk hladkého svalstva artériímají rovněž antianginózní a antiarytmické účinky
amlodipin felodipin
verapamil
Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI)
tyto látky inhibují enzym, který je zodpovědný za vznik angiotenzinu II (způsobuje arteriální vazokonstrikci a zvyšuje retenci sodíku)
trandolapril ramipril
perindopril
Antagonisté angiotensinu II (AATII)
působí selektivněji něž ACEImají schopnost blokovat účinky angiotenzinu dokonaleji, protože vytvořit
angiotenzin II mohou i jiné enzymy
telmisartan valsartan
losartan
Proč stanovovat antihypertenziva
při terapii více léčiv je častá non‐compliance pacientů
nutnost monitoringu antihypertenziv u osob s torpidní hypertenzí, u kterých se přikročí k terapii metodou renální denervace
metoda se může uplatnit při intoxikaci léky uvedených skupin
Příprava vzorku
50 μl séra se smíchá s 10 μl IS (klonidin‐d4, carvedilol‐d4, furosemid‐d5). vzorek se precipituje 50 μl 10% kyseliny trichloroctovécentrifugace 10 min při 10000 ot.50 μl supernatantu se přepituje do vialky5 μl se nastříkne do LC/MS/MS systému
LC/MS/MS metoda
LC – Waters 2695, MS ‐ QuatroPremierkolona: Synergy Polar (150 x 2,6 mm)MFA: 0,01 M octan amonný s 0,1% kys. mravenčí, MFB: ACNgradientový mód: 0 ‐ 7 min: 25% MFB – 90% MFB, 7‐10 min: zpět na výchozí
podmínky
ESI + , ESI‐ (furosemid, hydrochlorothiazid)
Látka Rt (min) Přechod (m/z) Mód
Metoprolol 3.89 268 → 115 pozitivní
Bisoprolol 6.04 326 → 115 pozitivní
Betaxolol 7.43 308 →115 pozitivní
Carvedilol 9.17 407 →223 pozitivní
Amlodipin 8.43 431 →234 pozitivní
Felodipin 10.22 338 →300 pozitivní
Verapamil 9.03 455 →165 pozitivní
Perindopril 6.64 369 →172 pozitivní
Trandolapril 8.58 431 →233 pozitivní
Ramipril 8.02 417 →234 pozitivní
Losartan 8.25 423 →207 pozitivní
Valsartan 8.81 436 →235 pozitivní
Telmisartan 10.00 515 →275 pozitivní
Moxonidin 3.31 242 →205 pozitivní
Rilmenidin 6.58 181 →95 pozitivní
Klonidin 4.72 230 →213 pozitivní
Furosemid 10.80 329 →204 negativní
Hydrochlorothiazid 5.14 296 → 269 negativní
Chlorthalidon 4.84 322 →240 pozitivní
Clonidin‐d4 (IS) 4.78 234 → 216 pozitivní
Carvedilol‐d4 (IS) 9.10 411 → 228 pozitivní
Furosemid‐d5 (IS) 10.87 334 → 226 negativní
Diuretika
Chlorthalidon
Centrálně působící látky
β‐sympatolytika
Amlodipin
Felodipin
Verapamil
Blokátory vápníkových kanálů
Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI)
T im e2 .0 0 4 .0 0 6 .0 0 8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0
%
0
1 0 0
2 .0 0 4 .0 0 6 .0 0 8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0
%
0
1 0 0
2 .0 0 4 .0 0 6 .0 0 8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0
%
0
1 0 01 2 0 6 2 1 s a r ta n y_ 1 0 0 4 : M R M o f 1 C h a n n e l E S +
T IC6 .0 8 e 3
1 0 .0 0
1 2 0 7 3 0 v a ls a r ta n 1 : M R M o f 1 C h a n n e l E S + T IC
3 .0 4 e 48 .8 1
1 2 0 7 1 7 lo s a r ta n 1 1 S m (M n , 5 x 4 ) M R M o f 1 C h a n n e l E S + T IC
1 .0 2 e 38 .2 5
2 .1 6 1 4 .3 2
Losartan
Valsartan
Telmisartan
Antagonisté angiotensinu II (AATII)
Blízká budoucnost
převedení metody na nový přístroj QTRAP 4500 (Ab Sciex)stanovení dalších látek
perindoprilátramipriláttrandolaprilátspironolakton a metaboitemindapamidamilorid
Děkuji za pozornost