Transcript
Page 1: Caffeine does not affect excitotoxic brain lesions in newborn mice

�������� �����

�������� ��� �� ����� ��������� ���� ������� ��� ��� ����

����� ������ ���� ����� �� �������� ������ ���� �������

������� � ���� ��� ������� �� ���������� �!�����"��# $�%&��� �� ��'(� ��!# ���# )�����* ������� + ��,#

)����- �� ��������# ��� ����# )�����

��� �� �� �� �� ���� �������� � � �� ����� �� �� �� � ������ �������� ��� � ������� �� ���� � ��� ��� � � ����� !����� �" �� �� �� � �� ����� � ����� � �� �� # � $���� � �� �� �� �� ��� �� �������������� �� � ������ $ �����$� � ����� �� �� � ��! ���� ���� ���� ���� �# ��� � ���� � � ! ��� ��� �� �� ����� � ��! ���� ����� �%����� ��" �� ���� ��� �# ��� �� $����� ��� ��� ���� � ���� ���� � � �����" �� � ���� ���� �� ���� � ������ ��� �� �������������� ����� ��� ��� � ����� � ����� �� �� �� �� �������"

.�-���� / � ���� �����" ��� �����&��������� " ' ��! ���� ���� � �%����� ��" '� �� �� � �����"

�����������

�������� �� ������� ����� �� ���� ���������������� ������ �� ��� ��������� �������������� ���� ��� ������ ���������� ���� �������� ������� ������ ��� �� ��� ���������� ������� �� ��� ������������� ����� � ������ �� �� ���������� �� ����� ��� ��������� ��������� ����� �� ������������ ��������� ��� ����� ���� �� ��� ������� ����������� ���������� ��������� �� ��������� �������� ���������� �������� ��� ����� ��� ������������� ������� �� ����� ��������� ����� ��� ������� ��� ������� �� ������ ������������������

�� ���� ������� ��������� �� �������� ������������ ���� ����� �� ������� ������� � �����!��������� ������� ������ � ������� ���������� �� �������� ��� ���������� ����� �������"��� �� ��������� �� �������� �� ����� �������� ���������� ���� ��������� �������� �����������

��������� �� ��������� ��� ��������� �� ������������� ����� ��� ��� ��������� ���� �� �������

#�������� �������� ������� ��� ���� �������� ��� ��������� ������ ������� �� ���$�� ������������

�������������� ��"�������� ��� ���� ��������� ����������� ����� ������ �������� �� ����������� ������������� %� �� "�������� ������������� �� �������� ������� �� ����� ��������� ���� ��������� ��� ��� ���� ������� &����� ��� ���� �������� ��� �������� �� ��������������� ������� �� � �������� ��� ����� ��� �����!��������� ��'� �����"��� ����������� �������� �� �������� ���� �������� ��

�� �� ��� ��� �������� ��� ������� �� �������� ���� ������ ����� �� �������������� ��"���������(���� ������ ������� �����"��� ������� ������� ���������������� ��"�������� ��� �� ������ � ������������� �������������� �� ��� ������������������� ��������� �� ������� ������������� %�� ����� ��� ������� ��� ��� �� ����������� ��� ���������������� �� � �������� ������������� �� ���� �������������� �� �������������� ��"���������

�����

��� ������������ ��������� ��� ��������� ��������� ���� ��������� �� ��� �)*#+,� &����

���( )*")*+,- .��"/**)"*012 �!������ ����� �� ����(--���"�� ��������" �� ������&��� 0������ �� �������� ��������- /**)3 �( )4)5)4+

)*1*5,216-*)-*+-*)4)7+ 8,+"** � /**) ���� �� '� ������ � ������� 9� � ��

������� ����������� ������ ����������� �������� ����������������&�������/ &� '� �� �� �� ��# 9 �!� � � ������� ' :�������� # ;�<����� ��� ���& �� :# 06 =�!� 9 :���� �# >�2+*)1 '����# >��� "�'����/ �� �� ��?���"��� ��"��

Page 2: Caffeine does not affect excitotoxic brain lesions in newborn mice

������ ��� ������ � ��� ������������� ��������������� �� ��������� � ������������ ������������� �� ������ ��-���������� .),-�/ ��������������� ��������� �� ��� �� ������0�������� ���� �1����� ��2���������� .�,3�/ ��� "���������������� �� ��������� �� .3/ � 1 �� ���������.*���� *� 4��� ,5 6*�/ ������ �� � ����������� ����� ������ .3&*/!7�7�8 ������ ���� ���� ��'����� �������������� �� ������������� *�������� ���� %�� ��'������� ���� ��������� ����� �9����� ������ ������ �� � ���������� ��������������� �� �������� ������������������ %�������� ��� �������� � �� ���� ��� �������������� �� ��� ����� �"�� �� ��� �������������� ������ ��� ����� ���������� � �� ���� ��� ������� ����� �������������� ����� ��� 0 �� .�� ��� ������������ �����/ ���� ��� '������ ������� ����������� �������� ������ %�� � �� ������ ������'����� �� � 07������� ���������

�� � ����� ��� �� ����������� �7 ��� ������'����� ���������������� ���� � �� .������� :;77��� �7;77 ����/ ���� �7 ��$"� �������� .�7 ��$"��������� ������� 3�������� �������� ��� <�=������� �>���������� 3���� 3���� ?�����/ �� 37 ������� ���� 1 ��$"� �������� .�7 ��$"� ���������������/ �� 3� �� 30� �������� ��� ������ �� � 1�������� �� 3&* ��� �������� .� � @/ �������� ������� ����� �� 3&*� %��� �������� ��� ����� ������� �������� ������� �� ���� �������� ��������� �� �������� ��������� ���� �����

�� � ������ ���� �� ����������� ��1 �� ��������.1 ��$"� �������� �������/ ������ �� �77 �� 3&*���� ������������ ���������������� �� ������������ .� � 0/ ���� ���� .������� :;77 ����7;77 ����/ ������� ���� ���� �� � .#/ : �� �:�������� ���� .� � 0/ �������� �77 �� 3&* ������#����� ������� ��� ��� �7 ���������������� ������� ��'����� ���� ��������� �� 3�� %�� ��� �� ������'������ ������� ��� �� ���� ��� ������� �� ���������� �������� ���������� �� �������� ���������� ����������� ������� �� ��� ����������

?����� � ������ ���� �� �������� ������� �����'����� ���������������� ���� �77 �� 3&* �����.�������� � � 0/ �� ���������� ���1 ��$"� ��������.�1 ��$"� �������� �������/ .� � 0/ ���� ���� .������� :;77 ��� �7;77 ����/ ������� #: ���#��� %����� ������� ��� ��� �� ������������������� ���� ��� ��� ��������� ��'�������� %��� ��� ������������� ��� ����� �� ���� ��� �������� ��������� � ������ ���� �� ��������� ����� ����� � ��������� ���� ������ ���� ��� ����� ��� ����� �������� �� ������� ���������� �� �������� ��������A����� ������ �������� �������������� ��������� ������������� �������� ������ � ��������������������� �� ��� ������������ �� ��� ��������������� ���� ��� ������������� �������� ����

�������� ���� ��������� %���� ��������� ���������������� ��� ��� ���� �� �� ���������� �������� ���� ���� �� �������� �������� �������� ����������������� �� �������� ����� ������������ .������� �����/�

3�� ���� ���������� 9 �� � ����� �����������'������ ��� ����� ������ ����� �� ��������� ������������� �������� �1 �� ����" ���� �� ��� ���� ����� ������� ��� ������� ���� ���� � ������� %�������� ���� ��������� ��� ������� ��������� ������� ������� ���� �� ��� ��������� ����� �������� ��������� ��� ����������� ������������� �� ���������� �������� ���������������� �������� �� ������� �������� ����� ��� ����� ������ ���������� %����������� ��� ��� �� �� ����� �� ��� ������ �����+����� ���� ��������� �� ����� �*#, �������������� ���� ��� ���� ��������� � ���*�����>� �������

�� ���

(� ��� ��� ������� �� ����� ������ ��� ��������������� ������ ��������� ��'������ ����������� ��� �����!������ ������� �� ���� �� ��� ����%���� ��������� �������������� ���� ������������� ��� ����� �� ���� ��������� ���������������'������ ��� ���� ��� �������� �� ����� �������� ������� �� ������ �� � �������� ���������������

��������� ��'������ ������ �������� .���� �������� ��� ������ �� ��� �������� ���������������� ����;:77�B2 �� @@��:9 �� �� @@2�B: �� �� �������������� ���� 3&* ������� 37 ��� 30 #: ��� #�: ��#: ��� #�� ����������� / ��� �������������� � ��������� ������ ������� .2�0�B� �� 0�7�9� �� ��0�2�9: �� �� ������� ������� ���� 3&* �������37 ��� 30 #: ��� #�: �� #: ��� #�� ����������� /.?��� �/� %�� �������� ������ ��� � ����� ���� ��������� ������� ���� ��������� ��� ������������� ��� �� ������������� �� ���� �� ��� C ���C�� )��� �� ��� ����� ��������� �� �������� ���������� ������� �� �� ����������� ��������� �� ���������������� ��� ������� �� ��� ���������������� �������� .:97�9: �� ��09�@9 �� ����0����: �� �� ������� ������� ���� ��������������� 37 ��� 30 #: ��� #�: �� #: ��� #�� ����������� / ��� ����� ������ .0�1�B� �� �B����7 �� �� �97�1� �� �� ������� ����������� �������� ������� 37 ��� 30 #: ��� #�: ��#: ��� #�� ����������� / ������� .?��� �/� ����������������� �� ��� ������ �������� �� ������ �������� ������� �� ��� ��������� �������� ��������������� �� �� ���������� ������������ ������ �� ������ ���� �� ��������� ��'�������

��� 1������� ������/ � 2�3� � ��"

Page 3: Caffeine does not affect excitotoxic brain lesions in newborn mice

� �� ��

%�� ������� ��� ������ ���� �� � ������ ������� �������� ����������� ������ �� ��� ������������������� ������ �����"��� ���� ����������������"�������� �������� ��� ��� ���������� ������������ ������� ��� ��������� �������� �� ��������������� ������ � ��� ��������� �������� ����"����� %�� ������� �� ����� ������� �� �������� ������������������ �������� ����� ������� �������� ����� ������� ��� �� �� ��������� ���� ����������� �������� �� � ��� ����� �� �������� � �����!��������� �������� %���� ������ ������ � ��������� �� ��� ��������� ������ �� ��� ������� ��������� ������� �������� �������� ���� ��������� %������������ ������� �� �������� ���� ��� ������� ��������� �� ��� ���������� �������� ����� ����

����� ���$���� ���� ����� �� ����� ������ �������� ������ ,������� ����� �������������� ��������� �������� ���� ��� ���������� ���� �� ������ ���� �� ��� ��������� �������� ���������� 4�"����� ��� ���� �� ��� ������� ��� ������ ���� ���������������������� �� �������� ������� ���� ��������� ����������� �������������� ����� �������������� %�� ���������� ������� ��� ������� �������� ��� ���� �������� �� ��������� �� �������������� �� ��������� ��������� �� ��� ��������� �������� ������� ��������� �� ��� ���������������� �� ������ ��� ��������� ������� ����������� ��������� �� �������� ���� ���������������� ���� �������� ��������

<������ ������� ����� ������ ���������� ���� �������� �������������� �� �������� ������� �������� �� �������� �� ��������� ���� ���� ������������������ ������ ���� ������� ��� ���" �� ���������

1������� ������/ �������� ��� �� ����� ������� ��������� ����� ���

�!� �� �� �� �� ��� �� $����� � �� � ������ $ �����$� ����� � �����"�"�� � ��� !��� ������� � � ����� ������� ����� � ����� ���� � �� ���� ��� ��. � � �� '/ ��� ����� � �� �� �� �� '6"�" =���� ��. � � ���� ���� ��� ���� # ������� �� ���� �� � ������ ���� @�����A ��� �� ���� ���� � ���� � ����@������ ���A" =" =���� �� � ��� $��� � �� ��� �� � �� � '* �� '," =��( 0* ��"#"�" =��� � �� � �� �� � �� � ���� �� �� ���� �� ���� ��� ���� ���� � � ����� �� �� �������� �������� ������ �$���9B"'��� @A �� ������ @&5A � � $��� � �� ��� �� �� '* �� ', @A# 6 �� )6 @&A �� 6 �� )) @A" ���� ��� ��� ��. � � ��'/ ��� ��C �� ����� � ����� ��� � � ���� � �� '6" ��� �� ��� � �� ��! � �� $��%&��"

Page 4: Caffeine does not affect excitotoxic brain lesions in newborn mice

����������� ������ �� �������� ������� ��������� �������� �� ��� �������� ������� ������ ������������������� ��������� �������� ��� ������������������ �������� �� ���� �������� ��� ��� �������� ������� �� ��� ������� �� ����������������� ��� �� �������������� ��"�������� ����������������� ���������������� ���� �� ����� �� �� ��� ������� �� ��� ������� ��������������� �� ������ ������� ��� ������ ����� �������� �� ��� ����� ��� ����� ����� �� ���� *�������������� ����� �� ���� �������� ����������� ������������ ����� ��� ������������� ������ ����� ��������� �2 ��� 0� ���"� �� ���������; ����������� ������ ��� ��� ������������ ��� ���������� ��� ��������� ����������� ��������� ����������������� ���� ����� ������ ��� ������� �� �������� ��������� �� ���� �� ��� ����� ����� ��� ������������ ��� � ������ ������������������

#������������ �������� ��� ���� ����� �� ������������������ � ������� �� �������� ������������������ � ������� �� ����" ��������� �� ��� ���������������� ��� ������� ��,3���������� �������� "����� .3D�/ ������� ��� -���� ���������������� ��������� �� ��������� ��� ����� ��������� �� ��� �������������� ����������� ������� �� ��� ������������ �� ��������� ������� ���� ��� ��� �� ���� ������������ �������� ���� ��������� ���� ����� ���� �������������� ������� �������� ������� ������ ��������� ����������� ��������������� ������� �� ��������� ��� ����� �

�� ��������� ��� ������� ��� ������� ������" �� ������� �� �������� �� � ���� ����� ���������������� ��"��������� ?����� ��������������� ������� �� �������� �� ������������������ �������� ������� �� �� ���� �� ��� �������� ������� �� �� �������� �� ��������� ���� ������������ ����� �� ����� ������ ����� ��������� ������������ ����������� �������������

���������������

*������� � ��� �)*#+, ���������� 3������� <�=����� �� 3���� ��� ?�������� E���� ��,������

���������

� <���������*���� -F *���� 3� ,��� ��������� ���������� ��� ����� �� ������� �������� �� ���� ������������ ��� �777A �-777�27�

� <���������*���� -F *���� 3� 3���� ������ ���� ���������� ��� ���������� �� ����� �� ������� ���������� ���� �������� ���� ��� �777A �-77720��

� ?������� && &����� D <����� F �� ��� ������� ���������� �� ��� ����� ���� ������� ��������� �� ����������� ��������� �� ��� ���������� ��� ����� �� ����@@@A ��; :0!�00�

� 5����� # ����� , ?���� � &��������� +� ������������ ��������� ��� ��������������� ��� � � � ��� � �@@BA ��; 07!2:�

� E��� < 5������ < )�"��� < �� ��� ,�������� ��������������"�� ������� �� ��������� ��� ��������� ����� ����� � ��������� �� �������� �������� � ������ �� �@@:A ���; �2@!�11�

� -� ����� 3 &�������� E ���������� + �� ��� ������������������ �� ��������� ��� ����� �� �������������������� ��������� �� ��� ��������� �� ����� ����������� ������� ���� ��� ����������� ������� ���� ��� �@@9A ��; 07�!07@�

� )����� � -��� E� 3�������� ����������� �������������������� ���������� �� ������ ����������� �������; � ������ �� ���� ��� ����������� ������� �� ������ �@@2A ��; 10�!120�

������� � ����� +G 4����� *� -���������� ����������� �� ��������� �� ������ ����� ������ ������������ ��� ���� ���"� �� ��� ��� ��� �@@:A���; 01�!012�

� (����� -+� ������������ �������� ���� ������������ ����� ��� ������ ��� ��� ��� �@@9A ��; �71!��0�

� (����� -+� ��� ��������� �������� ���� ������������ ���������� ��� ������ !�� ��� ��� �@@0A �; 0�0!0�B�

�� #����� 3 ,����� * E������� 3� #������������������������ �� ����� ����������� ���� � ��������������� �� ��� ����������� ������� �� ��� ����������� ������������� ������ ��; +����� - .��/�"����� �����#������� (���; �����E��� C����� �@@1; ��!00�

�� #����� 3 ,����� ) &������ � E������� 3� )�������� �������� ����������� �� ��� ������ ��; +���� � *��������� *F .���/ ����� ������ ����$�� ����������; #������� *������ 3�������� �@@�; ��!22�

�� ,����� * ,"���� + E������� F? �� ��� #����� ����������� �� ����� �����������; �� ��������������� ����� �� ������ ��� ��� ����� ��������"��������� � ��������� ��� ���� �@@1A ��; 01:!0B7�

�� ,�-����� F( F������� ,C� 3� ���������� ���������� ���������� ����� �� ��������� ����� ���������� ������� ������ � ���� ������������ ������ ��� �@@7A ��; 2�!B7�

�� &��� # ���� 6 ?������� && <������ <� %�������� �� ���� ���� �������� ��������� �� � �����!�������� ����� ������ �� ��� �������� ������ ����@@1A �; 0��!0�:�

�� -�������� ,� E������ F #����� 3 E������� 3����� �������������� ���������� ��������������� ���� ����� ������ ������� �� ������� ����� � �������� ���� �@@:A �; 0�0!0�:�

�� -�������� ,� 3��"�� F +����� F� �� ���3������������� � ��"���� ��� �������"���@ ����������� ����������� ������� �� ��� ������� ��������������� ��� ���� �777A ��; 12!90�

��� 1������� ������/ � 2�3� � ��"

Page 5: Caffeine does not affect excitotoxic brain lesions in newborn mice

� E������� 3 &���� 4 +��������� 3 �� ��� )�������������� �� ��� ���������� ����� � � �������������������� �� ���������� ���������� ������������������� � ����� �� ��� ��� �@@@A �; ��7B!���0�

�� E������� 3 ,����� * <��� F, �� ��� C������������������� ������� �������� ����������� ���� ����� ����� ����� ���������� ������ � ���� %����� �@@BA �;0@7!0@B�

� E������� 3 ,����� * ,����� F4 �� ��� +�������� ���������������� ������ �� ���������� ����������������� �� ��� ����� ���������� ����� � �������"����� � ��� ����������������� ������� "�������������; �� ���� ��� �� ���� ������� � ��� ����@@:A �; �1B2!�1:2�

�� ,����� * &������ � +� ���"��� F, �� ��� E� �������������� ��� )5 � ������ ��������� ������� ������������� ���� ����� ������� �������� ������������������� ������ ��� �@@@A ��; 00B!02��

�� ,����� * E������� 3 E������� F? #����� 3�3��������� � �������� �� ����������� ������������ �� ��� ���������� �����; �� ������ ����� ����������� ������������ ������� ��� !�� ����� �����@@1A ��; 2B0!2:2�

�� %������ *4 ,����� * &������� � �� ��� ������� ������ ��������� �� �������� ����������� ������� �� �������� �������������� ����� ������� ��� �������77�A ��; 19!B��

�� ,����� * E������� 3 C���,�����?��� E �� ������������������ ����������� �� ���� ������������� ����� ���� ���� � ������� ��� ��� �@@BA���; ��0!��9�

�� *���� ) &��� ) #����� 3 E������� 3� �������������� �� ���� �������� ���������� �� �������������� ��������� ��� ��� ��� �777A ���; ��0!��B�

�� *���� ) ,�� � &������� ? �� ��� ���������������������������� ������� ����������� �� ���� ����������������� ���� ���� �� �������� ��,3���������� ������� "����� .3D�/ ����������� ��������� �77�A ��; �� ������

�� 4��� 4 <������� # ,����"����� �� )������ ���������� ���� ��� �� ��� ��������� ��������

�� �������� ���� ������� �� � �� � 0� ���"� �����������; � 1� ��� ����������� ��������� ��� !������� ���� �@@:A �; ��!07�

� 3����� +# 4������ �< ������ &� �� ��� 5������� ������� ���� �� �2!�9 ���"�> ���������; ���)���������������� ������� &����� '��� �� �@@BA�; :7@!:�2�

�� (��� )* ,����� ) �������� D �� ��� )����������� ������������� ��������� ����� �������� �������� ������ #3���� *�� E���� ��( ��$� � !���777A ���; 0B:!0:2�

� &������� F3� * ������������ ����������� ������������� �� ��� ��������� ���������� � ��������� ���� �@@BA ���; �B!00�

�� ��������� E,� #������� ����������� �� ������������ ��� ��� �������� ���������� ���� �� ����������������� ����� ���� � �@@1A �; 0@B!27��

�� F����� F4 E����� ?<� %������������ �����������;������ ����� ��� ��������� ��� ���������� ������������ ��; E����� ?< 4������ � -������ #� .���/ ������������$ )��� ��� * '�(�� ��� ����������$� ����������$�� &�����; F (����� 3*E ���� �@:0;:B!@0�

�� C���� FF� �����$� �+ ��� ��(���� 3�����������; (&*������ �� �@@1�

�� ����� (� C���� FF� +������� �� ����������� � �������� � ���� ���������� �� ������ ����� ������������ ��� �@B@A ��; ����!���2�

�� ,����� * -������ & E����� ) �� ��� ����������������� ����� ���� ����� ��� ��������� � �������� ��������� �� ������� ��� ����� ������������� ��� �@@0A ��; B�9!B�@�

�� -�� F( 6"��� - F������� D�� �������� ����������� ������ ����� ��� ��������; ��������������������� ���� �� ��� �� ��������� ������������; E������ # &��"�� &? .���/ ���� � ��� ����� ������� ��������� ����� �� &�����; *������� �@:B; �0!�9�

�� *� ��� *<� ��������� �� � �������� �� ������������� ������� �� ���������� ��; -��� 3& .��/��++����, ����� ����� +�� �� ��� ����� �� &�����;*������� �@:2; ��@!�2��

1������� ������/ �������� ��� �� ����� ������� ��������� ����� ���