BiotecnologBiotecnologBiotecnologBiotecnologBiotecnologBiotecnologBiotecnologBiotecnologíííííííía y a y a y a y a y a y a y a y proteproteproteproteproteproteproteproteíííííííínas nas nas nas nas nas nas nas recombinantesrecombinantesrecombinantesrecombinantesrecombinantesrecombinantesrecombinantesrecombinantes
• Ingeniería Genética = Metodología del DNA
recombinante:
BiotecnologBiotecnologííaa
Herramientas y métodos que permiten la
manipulación del material genético in vitro
•La Ingeniería Genética se sustenta en
técnicas que permiten aislar, caracterizar y
manipular DNA (secuenciación, síntesis de
oligonucleótidos, PCR, etc.)
• Endonucleasas de restricción
• Ligasas
• Fosfatasas
• Cinasas
• Polimerasas
• Transcriptasa reversa
• Helicasas
IngenierIngenieríía Gena Genéética tica
Enzimas fundamentalesEnzimas fundamentales
1. Obtención del gen de interés
2. Clonación del vector
3. Transformación de la bacteria o levadura que producirá la proteína
4. Selección de la cepa productora
5. Proceso de producción
6. Extracción de la proteína recombinante
7. Purificación del producto
8. Formulación
Producción de proteínas
recombinantes
Producción de proteínas
Gene de interés
Producción de proteínas
Gene de interés
Vacunas de DNAVacunas de DNA
Gene de interGene de interééss
Vacunas de DNAVacunas de DNA
Gene de interGene de interééss
Vacunas de DNAVacunas de DNA
Bibliotecas de DNA humanoBibliotecas de DNA humano
Vacunas de DNAVacunas de DNA
Bibliotecas de DNA humanoBibliotecas de DNA humano
Obtención del gen de interés
BamHI (G GATCC) BamHI
Gen de interés
Gen de interés
Clonación del vector
BamHI
ligasas
ligasas
ligasas
BamHI
48 h después
Plásmidos y proteínas recombinantes
ProteProteíínas nas recombinantesrecombinantes