Diagnostic immunologique deshépatites auto-immunes.
11stst AlgerianAlgerian LiverLiver Day de la SAHGEEDDay de la SAHGEED09 Mai 201509 Mai 2015
Pr SALAH S.S.Pr SALAH S.S.,, HAMDI A., ADMAN S, ATTAL N.MCAMCA -- Chef deChef de LaboratoireLaboratoire d’Autod’Auto--ImmunitéImmunité
DépartementDépartement d’Immunologied’Immunologie -- InstitutInstitut PasteurPasteur d’Algéried’AlgérieFaculté de Médecine d’AlgerFaculté de Médecine d’Alger -- Université d’Alger 1Université d’Alger 1
MAI du foie : affections où les lésions des organes cibles résultent dudéclenchement d’une RI dirigée contre des auto-antigènes :
- hepatocytes (HAI 1 et 2)- et les voies biliaires intra et extra hépatique (CBP et CSP).
La mise en évidence d’Auto-anticorps spécifiques peut aider au DIAGNOSTIC. Les AAc peuvent également s'observer :
aAc associés
Prédominance féminine.
HAI -1 (tout âge), HAI-2 ( enfant, adulte jeune).
Hépatopathies auto-immunes types I et II
Critères de diagnostique des HAI
Aspect histologique
Aspect biologique
Score ≥ 6:probableAIH; ≥7:definite
AIH.
AAN LKM-1
IFI sur coupes RFE de rat : Technique indispensable de 1ère INTENTION.Fluorescenceintense destubulesproximaux
Techniques de détection (sceening)MF*MF*
Titres varientavec stades de
la maladie
Sen 70%
Peu Spé
ML(Actine)
LC-1
HAI-1 HAI-2Fluorescence H.Hépatocytes autour desveines centro-lobulaires (-)
Fluorescencedes muscleslisses (F-Actine)
Sen 85%
Spé 80%
Titres varientavec stades de
la maladieSen 85%
Spé 100%
POSITIF> 1/80
MF*MF*Aspects d’IFI sur HEp-2 des auto-anticorps retrouvés lors des HAI.
Techniques de détection (sceening)
HomogèneHomogène MouchetéMoucheté MLML
Sen 35% Sen 35%
Auto-anticorps Cible antigénique Tech. dépistage Tech.d’identification
Sensibilité et affectionsassociées
Anti- ML(ASMA)
F-actine IFIdiluer a 1/40
IMMUNODOTELISA
IFI VSM 47
85% HAI-115% HAI-CBP
Anti-SLA/LP t-RNP(ser)sec. Non détectableen IFI
ELISAIMMUNODOT
15%-30% HAI-1HAI-CBP
AANNEGATIVESPOSITIVES :
(si MAI associées)
IFIDiluer 1/80
ELISAIFF
IMMUNODOT
70%HAI-1
Auto-anticorps et HAI
AANNEGATIVESPOSITIVES :
(si MAI associées)
IFIDiluer 1/80
ELISAIFF
IMMUNODOT
70%HAI-1
Anti-LKM1P4502D6/CYP2D6 enzyme
de détoxificationIFI
diluer a 1/40IMMUNODOT
ELISAIFF
85 %HAI-2
Anti-LC1(Associé LKM1)
L’enzyme du métabolismede l’histidine la (FTDC)
IFIDiluer 1/40
IMMUNODOTELISA
30-40%HAI-2
Anti-ASGP-R
Glucides au sein d’épitopesconformationnels sur la
structure hétéro-oligomérique du R.
IFISouvent associés
aux autresauto-anticorps
ELISA 50-90%HAI-1 ou HAI-2
ou CSP, …
≥ 1/40
Ac anti-mitochondries (AMA) de type M2(95% des cas)
Cirrhose Biliaire Primitive (CBP)
FOIEREIN
Fluorescenceintense destubulesdistaux
IFIIFI sursur coupes RFE de rat :coupes RFE de rat : Technique indispensable de 1Technique indispensable de 1èreère INTENTIONINTENTION..
Techniques de détection (sceening)MF*MF*
Sen 80-95%
Spé > 95%
Pas de valeurPc
ESTOMAC
Fluorescenceintense destubulesdistaux
Fluorescenceintense descellulespariétales
Fluorescenceintense destubulesdistaux
Pas de valeurPc
Techniques de détection (sceening)MF*MF*
Aspects d’IFI sur HEp-2 des anti-Mitochondries.
Aspect cytoplasmique de type GRANULAIRE
Anticorps anti-gp210Anticorps anti-gp210
Glycoprotéine des pores nucléaires
Sen 10-25%
Spé > 99%
Marqueur demauvais Pc
Aspect cerclés des noyaux x 400Aspect cerclés des noyaux x 400 Aspect type pores nucléairesAspect type pores nucléaires
Aspect de fluorescence du noyau de type MEMBRANAIRE
Marqueur demauvais Pc
Ac anti-Sp100Ac anti-Sp100
Structure : protéinesoluble acide de 53 kDa
Sen 10-30%
Spé > 99%Marqueur demauvais Pc
Sen 10-30%
Spé > 99%
Ac anti-PMLAc anti-PML
Speckeled protein (100KDa)
Single nuclear dots (2-5)Single nuclear dots (2-5) Multiple nuclear dots (6-12)Multiple nuclear dots (6-12)
Aspect de fluorescence du noyau de type GRANULAIRE
4% HAI, 1%HCV4% HAI, 1%HCV
Détection des auto-anticorps(Techniques d’IDENTIFICATION-CONFIRMATION)
Spé > 95% Spé 98-100%
Marqueurmauvais Pc
Spé > 99%
Détection des auto-anticorps(Techniques d’IDENTIFICATION-CONFIRMATION)
Sous unités E2 du : -complexe Pyruvate déshydrogénase (PDC-E2)-complexe à chaine ramifiée 2-oxo déshydrogénase acide (BCOADC-E2)-complexe 2-oxo glutarate déshydrogénase (OGDC-E2)
Sen +++
Bassendine et al, Sem Liv Dis, 1997
Il s’agit d’une technique en test unitaire.
La durée du test est rapide (1H30).
Elle permet d’identifier la cible antigénique de l’auto-Ac (IFI + ou IFI -).
C’est une technique complémentaire a l’IFI.
Identification des auto-anticorps (Immuno-DOT)
HAI-2 CBPHAI-1
Techniques de détection (sceening)
Merci pour votre attention Merci pour votre attention