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Máster CITURME POP FarmaciaMáster en Ciencia, Tecnología yUso Racional del Medicamento
Programa Oficial de Posgrado: “Farmacia”
EDUCACIÓN PARA LA SALUD EN EDUCACIÓN PARA LA SALUD EN OFICINA DE FARMACIAOFICINA DE FARMACIA
HEMATOLOGÍAHEMATOLOGÍA
Dr. Alfonso MateDpto. Fisiología y ZoologíaFacultad de Farmacia. Universidad de Sevilla
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#Organización
LABORATORIO DE HEMATOLOGÍALABORATORIO DE HEMATOLOGÍA
g•Circuito de autoridad
•Circuito de material de trabajo•Circuito de información
#Laboratorios. Localización y estructuraÁ•Área de trabajo
•Espacios secundarios
•Espacio de circulación
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MESAS MODULARES DE LABORATORIO
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1. Zona de espera
ó
EXTRACCIONES
2. Recepción
3. Áreas de extracción
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#Facultativos
J f i i
PERSONAL DEL LABORATORIO
•Jefe servicio
•Jefe sección
#Enfermería
•Supervisor DUE
•Enfermeros
•TEL
•Auxiliares de clínica
#Personal administrativo
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#Laboratorio de Urgencias
FORMAS DE TRABAJO EN DIFERENTES LABORATORIOS
g•Funciona las 24 h
•Número de pruebas limitado
•Respuesta lo más rápida posible
•Problemas de calibración, reproducibilidad
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FORMAS DE TRABAJO EN DIFERENTES LABORATORIOS
#Laboratorio Programadog
•Horario de recepción de muestras limitado
•Todo tipo de pruebas
•Tiempo estandarizado para cada prueba
•El control de calidad tiene mejores resultados
•Agrupa determinaciones menos frecuentes
•Resultados más fiables con mayor rendimientode trabajo y menor coste
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#Partes de un volante
VOLANTES
•Datos del paciente
•Peticionario
•Datos de la muestra
•Pruebas solicitadas
•Sección del laboratorio a la que va dirigidaSecc ó de a o a o o a a que a d g da
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#Características de un volante
VOLANTES
•Autocopiable o no
•Automatizable
•Números y etiquetas
#Tipos de volantes
•Blancos o abiertos•Blancos o abiertos
•Preestablecidos
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VOLANTES
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•Tipos
INFORMES
•Integrados
•Elaborados
•Archivos de informes
•Solicitud de copia de informes
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#Aparatos más comunes•Lavadora de material de vidrio, lavado de pipetas
APARATOS
•Baño de ultrasonidos•Estufa de secado, autoclaves
•Frigoríficos, cámara fría, congelador, máquina de hielo
•Relojes avisadores con o sin cronómetro•Baños con o sin termostatos
•Sistema purificadores de aguas: desionizador
•pH-metros•pH-metros
•Bombas de vacío
•Bombas peristálticas
•Ordenadores. Impresoras•Sistema de alimentación ininterrumpida (SAI)
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#Separación , manejo y preparación de muestras•Centrífugas
APARATOS
•Diluidores automáticos
•Agitadores
•Dispensadores o dosificadores•Procesadores de muestras automatizados
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CentrifugasBaños Reloj
Bombas de vacío
Desionizador
pH-metros
BalanzasCentrifugas
Bombaperistáltica
Termostato
AgitadoresDosificadores
Baño de limpiezade ultrasonido
EstufaMáquinahielo
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•Aparatos para la realización de técnicas ópticas
•Espectrofotómetros
APARATOS
•Espectrofotómetros
•Fluorómetros
•Fotómetros de llama
•Fotómetros de absorción atómica
•Nefelómetros (turbidímetros)
•Autoanalizadores
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•Otros aparatos
•Lector de ELISA
APARATOS
•Lector de ELISA
•RIA, contadores radiaciones beta y gamma
•Electroforesis: fuente alimentación, cubetas, fotodensitómetro
•Analizadores electroquímicos: iones, gases
•Bilirrubinómetro
•Osmómetro
•Citómetro de flujo
•Cromatógrafos
•Termociclador
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FluorímetroEspectrofotómetros
Fotómetro de llama
Autoanalizador RIA
Electroforesis
EAACitómetro de flujoCromatógrafos
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#Fase preanalítica
•Solicitud de las pruebas
CONTROL Y GARANTÍA DE CALIDAD
•Solicitud de las pruebas
•Preparación del paciente
•Obtención de las muestras
•Transporte al laboratorio
•Calibración instrumental, preparación soluciones
#Fase analítica → Realización técnica de las pruebas#Fase analítica → Realización técnica de las pruebas
•Selección correcta de las técnicas
•Utilización de materiales de control
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#Fase postanalítica
CONTROL Y GARANTÍA DE CALIDAD
•Validación de los resultados
•Limpieza instrumentos, eliminación muestras
•Emisión del informe
Garantía de calidad integralCCICCIEECBPL
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RECOGIDA Y MANIPULACIÓN DE MUESTRASRECOGIDA Y MANIPULACIÓN DE MUESTRASCOLORANTES EN HEMATOLOGÍACOLORANTES EN HEMATOLOGÍA
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Composición
Clasificación•Albúminas (54%)Proteínas
•Globulinas α,β,γ (38%)
•Fibrinógeno (7%)
•Otras (1%)
Funciones
•Transporte
•Regulación pH sanguíneo
•Defensa inmunitaria
plasmáticas
•Hemostasia
•Nutritiva
•Viscosidad
•Presión oncótica =
= presión coloidosmótica
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#Punción venosa
•Región antecubital yugular o femoral en RN dorso de
NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA
•Región antecubital, yugular o femoral en RN, dorso dela mano y pie en ancianos y obesos
•Punción limpia. Evitar coágulos
•En pacientes con terapia de anticoagulante se debepresionar la herida durante 10 min.
•Procedimiento
Brazo caliente y cinta elástica en el brazo
Cerrar el puño para ver las venas
Limpiar con solución desinfectante
Realizar punción limpia
Liberar el compresor
Abrir puño y extraer aguja. Presionar
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#Punción venosaTubos estériles al vacío con anticoagulante
NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA
•Tubos estériles al vacío con anticoagulante
•En el caso de jeringa y aguja se llenan de sangre los tubos
(que llevan anticoagulante), quitando previamente la aguja y
resbalando la sangre por la pared de los tubos, y se mezcla por
inmersión
•Tubos bien identificados. Botón rojo muestras infecto-
contagiosas
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#Punción capilar
M t d ñ difi lt d
NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA
•Muestras de sangre pequeñas o dificultades pararealizar la venopunción
•Pulpejo del dedo, lóbulo oreja o talón del pie (RN)
•Lancetas estériles con un tope
•Técnica:
VasodilataciónVasodilatación
Desinfectar y secar
Pinchar con la lanceta, desechar las primeras gotas yllenar el capilar o pipetas
•Extensiones de sangre periférica, Hematocrito, Hb
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#Utilidades anticoagulantes
ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA
•Obtener plasma o muestras de sangre total
•Estudiar características morfológicas
•Realizar recuentos celulares
#Propiedades anticoagulantes
•No alterar la morfología de los leucocitos
•No alterar el tamaño eritrocitario
•No producir hemólisis
•Impedir agregación plaquetaria
•Máximo tiempo de conservación de la muestra
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#EDTA
Ef t l t b l C
ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA
•Efecto quelante sobre el Ca
•EDTA-Na2
•EDTA-K3. Para recuento celular en autoanalizador
#Heparina
•Impide el paso protrombina → trombina
•No modifica las características celulares de leucocitos y
eritrocitos, pero proporciona color azul en los frotis de
tinciones panópticas
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#Citrato sódico
I id i i ió d l C
ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA
•Impide ionización del Ca
•Se utiliza en:
Pruebas de hemostasia (1:9)
VSG (1:4)
#Oxalato sódico
•Pruebas de hemostasia (1:4)
#ACD (Ácido cítrico 0,9 g; Citrato sódico 2 g; Dextrosa 2 g;
H2O 120 mL)
•Bancos de sangre (1:4)
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Materiales: Portaobjetos esmerilados, limpios y libres de grasa
EXTENSIONES DE SANGRE
CubreobjetosMétodo de los dos portaobjetos:
Depositar una gota de sangre en un extremo del portaobjetos
Colocar otro portaobjetos sobre el anterior con la gota de sangre, con una inclinación de 45º
Desplazarlo hacia atrás hasta entrar en contacto con la gota y permitir que, por capilarización, la gota se extienda a lo largo del canto del portaobjetosdel canto del portaobjetos
Deslizar el segundo portaobjetos inclinado sobre el primero de manera suave y rápida, para permitir que la gota de sangre queda extendida
A mayor inclinación, extensión más gruesa. Menor inclinación = extensión más fina
Secado a temperatura ambiente
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Realización de un frotis
EXTENSIONES DE SANGRE
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Método de los dos cubreobjetosPartes de un frotis
EXTENSIONES DE SANGRE
Métodos de los dos cubreobjetos:
D b i li i Dos cubres sin grasa limpios y secos
Colocar en uno una pequeña gota de sangre
Sujetarlo por los vértices e invertirlo colocándolo sobre el otro rotándolo 45 º
Por capilaridad se extiende la gota
Secar
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#Para el laboratorio de hemostasia (citrato Na)
•PPP (1500 g 15 min ): TP TTPA fibrinógeno
PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
•PPP (1500 g 15 min.): TP, TTPA, fibrinógeno
•PRP (<500 g 15 min.): Determinación de plaquetas
#Para el laboratorio de hematimetría (EDTA-K3)
•Recuentos celulares
•Recuento de reticulocitos
•Hb
•Hematocrito
•Índices eritrocitarios
•Índices plaquetarios
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#Tipos de colorantesBá i ( ió i ) b fili
COLORANTES EN HEMATOLOGÍA
•Básicos (catiónicos): basofilia
•Ácidos (aniónicos): acidofilia
•Neutros (aniónicos y catiónicos): acidofilia o basofilia
#Tipos de tinciones•Tinción pancromática: azul de metileno, eosina, Wright
i ió ó i•Tinción panóptica: May-Grünwald-Giemsa
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#Terminología•Acidofilia: A ide po colo antes ácidos (e g eosinófilos)
COLORANTES EN HEMATOLOGÍA
•Acidofilia: Avidez por colorantes ácidos (e.g. eosinófilos)
•Basofilia: Avidez por colorantes básicos (e.g. basófilos)
•Azurofilia: Coloración violácea-rojiza (y no azul)
•Hipocromía: Falta de intensidad en la coloración
(e.g. Anemia ferropénica)
•Hipercromía: Refuerzo de la tinciónHipercromía: Refuerzo de la tinción
•Anisocromía: Distintas intensidades de la coloración
en el mismo tipo de células
•Policromasia: Distinto color en el mismo tipo celular
Velocidad de sedimentación globular
(VSG): factores que influyen
ESTUDIO DE LOS ERITROCITOSESTUDIO DE LOS ERITROCITOS
•Físicos
•Químicos
•Biológicos: embarazo y menstruación
•Plasmáticos: albúmina ↓VSG / fibrinógeno y globulinas ↑VSG
Soporte pipetas Westergreen
Plasmáticos: albúmina ↓VSG / fibrinógeno y globulinas ↑VSG
•Eritrocitarios: carga eléctrica, número, tamaño y forma
•Factores ajenos a la sangreAnticoagulante, hemólisis, limpieza material
Inclinación tubo, burbujas de aire, vibraciones, Tª, diámetro tubo
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Resultados VSG:•En mm a la 1ª(a) y 2ª(b) hora•Índice de Katz: (a + b/2)/2Los valores normales de referencia son:
Velocidad de sedimentación globular
•Recién nacidos: de 0 a 2 mm/h.•Lactantes: hasta 10 mm/h.•Hasta la pubertad: hasta 11mm/h.•Hombres jóvenes: hasta 10 mm/h.•Hombres adultos: hasta 12 mm/h.•Hombres mayores: hasta 14 mm/h.•Mujeres jóvenes: hasta 12mm/h.•Mujeres adultas: hasta 19 mm/h.•Mujeres mayores: hasta 20 mm/h
•VSG aceleradaSoporte pipetas Westergreen
VSG acelerada•Embarazo, puerperio, lactante y senectud•Anemia intensa•Procesos inflamatorios infecciosos: Infecciones agudas y crónicas•Inflamaciones y disproteinemias no infecciosas: gota, neoplasias, infartos, traumatismos
•VSG retardadaRecién nacidosHipoproteinemia por dilución plasmática sin anemia
HEMOGRAMA
•Parámetros cualitativos
OTROS MÉTODOS PARA EL ESTUDIO DE OTROS MÉTODOS PARA EL ESTUDIO DE LOS ERITROCITOSLOS ERITROCITOS
Morfología celularFórmula leucocitaria
•Parámetros cuantitativosHemoglobinaHematocrito
Recuentos celularesRecuentos celularesÍndices eritrocitarios: VCM, HCM, CHCMRecuento de reticulocitos
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Anisocitosis (tamaño)•Macrocitosis•Microcitosis
Alteraciones morfológicas de los eritrocitos
Poiquilocitosis (forma)•Esferocitosis
•EliptocitosisD epanocitosis
•Esquistocitosis•Megalocitosis•Microesferocitosis
•Drepanocitosis•Dianocitosis•Equinocitosis•Estomatocitosis•Dacriocito•Acantocito
Alteraciones morfológicas de los eritrocitos
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Alteraciones morfológicas de los eritrocitos
Anisocromía (coloración)•Hipocromía
Alteraciones morfológicas de los eritrocitos
Inclusiones eritrocitarias•Punteado basófilo•Anillos de Cabot
•Hipercromía•Policromasia
•Anillos de Cabot•Cuerpos de Howell-Jolly•Parásitos (Plasmodium)
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Alteraciones morfológicas de los eritrocitos
Hemograma: Parámetros cuantitativos
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Cifra total de leucocitos
Valores normales5 10 x 109/L
Hemograma: Parámetros cuantitativos
10.02 ×109/L LEU5 – 10 x 109/L
89.7 NEU 8.986.0 LINF .601.9 MONO .191.2 EOS .12
.5 BASO .05
% ×109/L
Fórmula leucocitaria
Rango de normalidad:Neutrófilos: 60-70%Linfocitos: 20-40%Monocitos: <10%Eosinófilos <5%Basófilos <1-3%
Parámetros eritroides
Hemograma: Parámetros cuantitativos
Número de hematíes:• Mujeres: 3.5-5.0 ×1012/L• Hombres: 4.0-5.5 ×1012/L
Hemoglobina:
3.96 ×1012/L HEM13.4 g/dL Hb44.1 % Hct111.4 fL VCM33.7 pg HCM30.3 g/dL CHCM20.4 % RDW
Hemoglobina:• Mujeres: 12-15 g/dL• Hombres: 14-17 g/dL
Hematocrito:• Mujeres: 36-46 %• Hombres: 42-52 %
Volumen corpuscular medio:• Normocíticos: 80-95 fL
Mi i i 80 fL• Microcitosis: < 80 fL• Macrocitosis: > 95 fL
Hemoglobina corpuscular media:• Valor normal: 27-31 pg
Concentración corpuscular media de hemoglobina:• Valor normal: 32-36%
Número de plaquetas:• V.N.: 150-400 ×109/LVolumen plaquetario:• V.N.: 7,5-9,5 fL
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Automático: Autoanalizadores // Manual: Cámara de Neubauer
Recuento manual (cámara de Neubauer)
•Dilución muestra
Métodos de recuento celular sanguíneo
GR: Líquido de Hayem o s.s. (dilución: 1:100)
GB: Líquido de Türk (dilución 1:10)
Plaquetas: solución oxalato (dilución 1:100)
•Recuento al microscopio
•Cálculos•Cálculos
Métodos de recuento celular sanguíneo
Cámara Neubauer
Retícula cámara NeubauerAutoanalizador
Mide los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio, desplazando su propio volumen de electrolito. Este es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. Controlando la cantidad de suspensiónque circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas.
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Histogramas de distribución de volumen•Amplitud distribución eritrocitaria ADE 11.5-14.5 %
•Amplitud distribución plaquetaria ADP
Amplitud de distribución eritrocitaria y plaquetaria
VCM bajo VCM normal VCM altoADE normal Microcítica pura: Normocítica Macrocítica pura:
α,β talasemia Aplasia
Amplitud de distribución eritrocitaria. Reticulocitos
ADE aumentado Microcítica A: Normocítica A: Macrocítica A:A. ferropénica A. inflamatoria A. megaloblásticaβ talasemia
Recuento de reticulocitos
ANISOCITOSIS
Recuento de reticulocitos•Sangre y azul cresilo brillante•Extensión de sangre•Número: 5-15 reticulocitos/1000 GR
Disminución reticulocitos : Anemia arregenerativaAumento de reticulocitos: Anemia regenerativa
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El hierro en el organismoDe transporteDe depósito
ANEMIAS MICROCÍTICASANEMIAS MICROCÍTICAS
pFuncional
El hierro de transporte• Índice de saturación de la transferrina (IST)• Capacidad total de saturación de la transferrina (CTST)
El hierro de depósitoF iti• Ferritina
• Hemosiderina
Anemia ferropénica: métodos de estudioEtapas de la deficiencia férricaDatos de laboratorio
TF-Fe 3+ PRECIPITACIÓN TF + Fe 2+
REDUCCIÓN
Fe 2+ + Cromógeno Compuesto coloreado
Determinación de la sideremia
Anemia ferropénicaSIDEREMIA A. enfermedades crónicas
Anemia inflamatoria
Valores normales: hombres = 80-150 μg/dL; mujeres = 60-140 μg/dL
Hemocromatosis
Talasemias
SIDEREMIA A. sideroblástica
Alcohol (hepatitis agudas y crónicas)
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Capacidad total e índice saturación transferrina
CTST : Medida indirecta de TF (todo el Fe está unido a la TF)
Suero problema + exceso de Fe satura la TF
Determinación de sideremia después de eliminar exceso de Fe libre
Valores normales: 2,5-4 g/L
IST (33%): depende de la sideremia
A mayor sideremia, mayor IST y viceversaSi disminuye la ferritina, aumenta la CTST
Anemia ferropénica:Di i id i•Disminuye sideremia
•Disminuye IST•Disminuye ferritina•Aumenta CTST
Trastornos utilización de Fe por bloqueo de los depósitos:•Disminuye sideremia•Disminuye IST•Ferritina y CTST valores normales
Determinación de la ferritinemia
Ferritina: compuesto hidrosoluble de Fe3+ unido a una proteína (apoferritina). Fe depósito en hígado, médula ósea, bazo
Determinación por radioinmunoanálisis (RIA) o inmunorradiométrica (IRMA)
IRMA:Muestra + antiferritina humana – fase sólida Incubación, lavado
Extracción Ab marcado no unido
Radioactividad unida proporcional a la ferritina en la muestra
Valores medios normales: 123 µg/L (hombres) / 56 µg/L (mujeres)
Anemia ferropénica: Disminuye ferritina
Sobrecarga férrica: Aumento ferritina
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Hemosiderina: Fe de depósito (insoluble). Fe2+ + apoferritina. Es el hierro no hemínico de los eritroblastos; abundante en las células macrofágicas (SMF)
Eritroblastos con hemosiderina = sideroblastos
Fundamento:
Tinción de Perls del aspirado de médula ósea
Fe2+-apoferritina ClH apoferritina + Fe2+
Fe2+ + Ferrocianuro potásico Ferrocianuro férrico (azul verdoso)
TP: Presencia de hemosiderina en el citoplasma de cualquier tipo de células, de una extensión de sangre o de médula
Método:
1 Fijar con alcohol metílico1. Fijar con alcohol metílico2. Introducir la extensión fijada en solución clorhídrica de ferrocianuro a Tª ambiente3. Lavar4. Contrateñir con hematoxilina de Harris5. Lavar con agua y con etanol, lavar, secar y observar gránulos intensos color azul-
verdoso que se observan en la zona de macrófagos
Utilidad:
Estudio del Fe medular para conocer las reservas de Fe
V l l F h í i d l it l d l it bl t
Tinción de Perls del aspirado de médula ósea
Valora el Fe no hemínico del citoplasma de los eritroblastos
Determinar el número de precipitados de hemosiderina (sideroblastos):Grado 0: Ausente Grado I: DisminuidoGrado II: Normal Grado III: Aumentado
Ferropenia: 0-ISobrecarga: II-III
Tinción de Perls
Sobrecarga: II III
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Sideremia IST CTST Ferritina Sideroblastos EritropoyesisIneficaz
Diagnóstico diferencial anemias microcíticas
Anemia ferropénica NO
A. enfermedades = NOcrónicas
A. sideroblásticas SI
(en anillos)(en anillos)
β Talasemia minor SI
Anemia ferropénica A. sideroblástica
Diagnóstico diferencial anemias microcíticas
ß Talasemia minor Tinción de Perls
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Megaloblastosis y anemias megaloblásticas: métodos de estudioVCM >100 fL
95% Anemias megaloblásticas
ANEMIAS MACROCÍTICASANEMIAS MACROCÍTICAS
95% Anemias megaloblásticas
5% Anemias macrocíticas no megaloblásticas•Alcoholismo•Aplasia medular•Embarazo•Enfermedad hepática crónica•Ictericia obstructiva•NeoplasiasNeoplasias
Causa: alteración síntesis de DNA: piel, boca, intestino•Serie eritropoyética•Serie granulopoyética •Serie megacariocítica•Disminución reticulocitos
Anemias megaloblásticas pordéficit de ácido fólico•Dieta inadecuada
Ácido fólico y vitamina B12 en la maduración celular
Anemias megaloblásticas pordéficit de vitamina B12
•Dieta inadecuada (vegetarianos)•Aumento necesidades
•Síndrome malabsorción
•Interferencia metabólica de losfolatos: alcohol, medicamentos
•Malabsorción de vitamina B12
(anemia perniciosa)
Médula ósea Sangre periférica
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Indicador de función ileal y de disponibilidad de factor intrínseco (FI) gástrico 1. 1 mg B12 v.p. + 1 mg 57Co-B12 v.o.2. Determinar eliminación urinaria de B12 (normal = 10%)
Absorción intestinal de B12: Prueba de Schilling
Si no hay radioactividad en orina, no ha sido absorbida (se elimina por heces)
3. Si existe un trastorno de absorción, el resultado será inferior al 10%,realizándose la 2ª fase (adición de FI a la cobalamina administrada v.o.)
Si se normaliza la eliminación urinaria en la 2ª fase → anemia perniciosa
Anemia perniciosa
• Anemia macrocítica normocroma
• Leucopenia
• Trombopenia
• MO: Megaloblastosis en la serie roja
Anemias hemolíticas
• Hemólisis intravascular
ANEMIAS NORMOCÍTICASANEMIAS NORMOCÍTICAS
• Hemólisis extravascularHemoglobinemiaHemoglobinuria↓ haptoglobina↑ LDH
BilirrubinemiaEsplenomegalia↓ haptoglobina↑ LDH
• Intracorpusculares • ExtracorpuscularesMEMBRANOPATIAS
ENZIMOPATIAS
HEMOGLOBINOPATIAS
INMUNITARIAS
NO INMUNITARIAS
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Valores de referencia: 120 ± 15 díasValores inferiores → proceso hemolítico
Supervivencia eritrocitaria
Hemoglobinopatías estructurales: Hb S (anemia de células falciformes)
A. hemolíticas intracorpusculares: hemoglobinopatías
Hb A1: 95-98% Hb A2: 2-3% Hb F: 0,8-2%
Hemoglobinopatías estructurales: Hb S (anemia de células falciformes)
•Hb S produce manifestaciones en Hb S/S (homocigotos) y en desoxigenación
•Hb S se demuestra por:
Electroforesis de Hb en acetato de celulosa (pH = 8,6)
Técnica de falciformación: sangre en medio pobre en oxígeno → drepano-
citos → A. falciforme
Método falciformación
Gota sangre diluida en un portaobjetos. Cubreobjetos cuyos bordes son sellados.Después incubación 37 ºC 1 h eritrocitos falciformes
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Talasemias
Talasemia menor
A. hemolíticas intracorpusculares: hemoglobinopatías
Talasemia mayor(A. de Cooley)
Estudio de las anemias hemolíticas inmunitariasPrueba de Coombs indirecta o antiglobulina indirecta (PAI)- Especificidad de un Ac incompleto que al unirse al Ag in vitro, NO es capaz de aglutinarlo. Se necesita antiglobulina humana para conseguir la aglutinación y comprobar la existencia del Ac.
A. hemolíticas extracorpusculares
1. Ac anti D libres en el plasma de embarazada Rh (–)
2. Ag Du
Prueba de Coombs directa (PAD)
- Reconoce Ac unidos a la membrana de los GR
- Antiglobulina + eritrocitos recubiertos de Ac. Aglutinación → hemólisis in vivo
1. Anemia hemolítica autoinmune
2. Anemia hemolítica recién nacido
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Test deCoombs
A. hemolíticas extracorpusculares
LEUCOCITOSLEUCOCITOSMÉTODOS GENERALES DE ESTUDIOMÉTODOS GENERALES DE ESTUDIO
en banda
en banda e ba da
en banda
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Leucocitos. Métodos generales de estudio
Leucocitos. Métodos generales de estudio
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Método visual (manual)•100-200 leucocitos
•Calidad extensión
Recuento diferencial de leucocitos (RDL)
Zona de recuentoTinciónExperiencia
Método automático•10.000-30.000 leucocitos
•Medida volumen + análisis citoquímico
Recuento diferencial de leucocitos (RDL)
q
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Valores de referencia del RDL
Absoluto (x 109/L) Relativo (%)
Alteraciones cuantitativas
ALTERACIONES EN EL RDL
•Aumento de una subpoblación
•Disminución de una subpoblación
•Presencia de blastos (células inmaduras)
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(> 7,5 x109/L)
Alterac. cuantitativas: Aumento de una subpoblación
(> 0,5 x109/L)
(> 0,15 x109/L)
Alterac. cuantitativas: Aumento de una subpoblación
(> 4 x109/L)
(> 0,8 x109/L)
, mononucleosis infec.
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(< 1,8 x109/L)
Alterac. cuantitativas: Disminución de una subpoblación
(< 1,5 x109/L)
Mielemia
Alterac. cuantitativas: Presencia de blastos
• Asociada a leucocitosis y neutrofilia
• Mielocitos + metamielocitos + promielocitos +
neutrófilos en banda
• Patologías
Reacción leucemoide (infecciones inflamación)Reacción leucemoide (infecciones, inflamación)
SMPC: LMC, policitemia vera, trombocitemia esencial
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Eritroblastosis
• Eritroblastos + proeritroblastos
Alterac. cuantitativas: Presencia de blastos
• Patologías
Extramedulares: erit. fetal, anemias
Medulares: diseritropoyesis, eritremias
Presencia de blastos• Blastos en generalg
• Patologías
Leucemias agudas
Linfoma leucemizado
Alteraciones nucleares
Alteraciones cualitativas en neutrófilos
AnomalíaPelger-Hüet
(SMD, SMPC, LMA)
Núcleoen anillo
(SMD, SMPC)
Núcleohipersegmentado
(SMD, LMC)
Palillos de tambor(drum stick)
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40
Alteraciones citoplasmáticas
Alteraciones cualitativas en neutrófilos
Hipogranulación(SMD, SMPC, LMA, LMMC)
(normal) Hipergranulación(infecciones, quemaduras)
GranulaciónAlder-Reilly
Alteraciones citoplasmáticas
Alteraciones cualitativas en neutrófilos
Cuerpos de Döhle(infecciones, quemaduras,
SMD, SMP)
Bastones de Auer(LMA, Leucemia
promielocítica)
Astillas(Leucemia
promielocítica)
AnomalíaChediak
(LMA)
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Alteraciones nucleares
Alteraciones cualitativas en linfocitos
Cromatina hipercon-densada (grumelèe)
(LLC)
Linfocito bilobulado
Linfocitocon nucleolo
Alteraciones citoplasmáticas
Alteraciones cualitativas en linfocitos
Tricoleucocito(tricoleucemia)
Linfocito velloso(linfoma esplénico)
Linfocito urópodo