5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
1/22
ELEKTROFORESIS
Disusun Oleh:
Kelompok IVBertha Dwi Julinta Lase NIM 121524024
Ainul Mardiah NIM 121524022
Fhizri Ayuningtyas NIM 121524031
Fauzi NIM 121524033Tarry Hayati Tamimi NIM 121524040
6/18/2014 1
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
2/22
6/18/2014 2
Pengertian dan Jenis
a. Pengertian
Elektroforesis adalah suatu teknik
pemisahan/analisis kualitatif suatu zat
dengan bantuan arus listrik.
Prinsip pemisahan dalam elektroforesis
didasarkan atas perbedaan migrasi komponen
pada fasa pendukung, karena adanya perbedaanmuatan dan massa molekul.
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
3/22
6/18/2014 3
Pengertian dan Jenis
Teknik Elektroforesis
Dibedakan atas Teknik
Konvensional Kapiler
Dibedakan atas Teknik
Frontal (moving boundary):tak berpendukung
Zonal :berpendukung
b. Jenis-jenis Teknik Elektroforesis
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
4/22
6/18/2014 4
Pengertian dan Jenis
T.E.F. konvensional :
Ukuran alat /jumlah cuplikan/fasa pembawacukup besar
Menggunakan arus listrik dengan tegangan
tidak terlalu besar ( beberapa puluh voltsaja)
Proses lama (lebih dari 0,5 jam)
Teknik Elektroforesis Konvensional dibagi menjadi 2yaitu:1. elektroforesis larutan (moving boundary electrophoresis)
2. elektroforesis daerah (zone electrophoresis).
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
5/22
1. Elektroforesis larutan (moving boundary electrophoresis)
Pada teknik elektroforesis larutan, larutan penyangga yang
mengandung makro-molekul ditempatkan dalam suatu kamartertutup dan dialiri arus listrik. Kecepatan migrasi dari makro-
molekul diukur dengan jalan melihat terjadinya pemisahan
dari molekul (terlihat seperti pita) di dalam pelarut.
2. Elektroforesis daerah (zone electrophoresis) adalah
menggunakan suatu bahan padat yang berfungsi
sebagai media penunjang yang berisi (diberi) larutanpenyangga.
6/18/2014 5
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
6/22
6/18/2014 6
Pengertian dan Jenis
T.E.F. kapiler :
Ukuran alat /jumlah cuplikan/fasa pembawa
sangat sedikit/kecil
Proses cepat (kurang dari 0,5 jam)
Pendukung:pipa kapiler terbuat dari gelas dengan
panjang bermeter-meter.
Elektrolit: larutan bufer
Memerlukan larutan elektrolit dan komponen cuplikan
sedikit (mikro).
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
7/22
6/18/2014 7
Kegunaan/Manfaat
Kegunaan / manfaat
Pemisahan dan analisis senyawa bermuatan
Pemisahan dan analisis makromolekul sepertiprotein, polisakarida, as. Nukleat
Pemisahan dan analisis campuran senyawa
bermuatan dan tak bermuatan ( untuk E.F.kapiler)
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
8/22
6/18/2014 8
Peralatan dan cara Kerja
Gambar Alat Elektroforesis
Senyawa tidak berwarna dapat
dilihat dengan paparan sinar UV
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
9/22
6/18/2014 9
Peralatan dan cara Kerja
Komponen utama alat
1. Larutan elektrolit
2. Zat pendukung
3. Elektroda
Adalah larutan pembawa komponen
umumnya bufer dengan pH tertentu.
tempat pemisahan terjadi, biasanya berupa
kertas (selulosa asetat, selulosa nitrat), gel
kanji, gel poliakrilamid, busa poliuretan,
agar-agar.
katoda dan anoda yang dihubungkan
Dengan arus listrik.
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
10/22
6/18/2014 10
Peralatan dan cara Kerja
Cara Kerja
1. Wadah dijenuhkan dengan larutan elektrolit
2. Cuplikan ditotolkan pada fasa pendukung
3. Pendukung dengan tootolan cuplikan dijenuhkan
dengan uap elektrolit.
4. Ujung-ujung pendukung dicelupkan ke dalam
elektrolit
5. Kedua elektroda dihubungkan
6. Pemisahan dimulai
7. Hasil pemisahan dihubungkan dengan detektor
untuk keperluan analisis kualitatif dan kuantitatif
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
11/22
6/18/2014 11
Pemisahan dengan Teknik Elektroforesis
Proses Pemisahan
Untuk Melihat Animasi Klik di sini!
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
12/22
6/18/2014 12
Pemisahan dengan Teknik Elektroforesis
Pada fasa
pendukung
Setelah
Melalui
detektor
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
13/22
6/18/2014 13
Pemisahan dengan Teknik Elektroforesis
Perhatikan migrasi komponen berikut ini pada waktu yang sama
Untuk Animasi Klik Di sini!
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
14/22
6/18/2014 14
Faktor-faktor yang Mempengaruhi Pemisahan
Faktor yang mempengaruhi pemisahan
dengan Elektroforesis Daerah
1. Kemobilan ion/partikel ():
2. Derajat onisasi
3. Pembentukan Kompleks Bermuatan
4. Konsentrasi larutan elektrolit
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
15/22
6/18/2014 15
Kelebihan/Kelemahan Teknik Elektroforesis
Kelebihan Teknik Elektroforesis
Mudah untuk molekul besar dan bermuatan.
Dapat digabungkan dengan kromatografi
(Lempeng tipis).
Lebih cepat dari kromatografi biasa.
Alat dan teknik sederhana.
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
16/22
6/18/2014 16
Kelebihan/Kelemahan Teknik Elektroforesis
Kelemahan Teknik Elektroforesis
Sulit untuk analisis kuantitatif, kecuali denganEF tidak berpendukung.
Kelemahan teknik ZEF dapat diatasi dengan
elektroforesis kapiler
Sukar mendeteksi konsentrasi rendah.
Sukar untuk senyawa tidak bermuatan.
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
17/22
6/18/2014 17
Teknik Elektroforesis Kapiler
Teknik Elektroforesis Kapiler
Karakteristik
Elektrolit: larutan bufer
Tegangan 10.00030.000 V.
Mekanisme berbeda dari EF konvensional.
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
18/22
6/18/2014 18
Teknik Elektroforesis Kapiler
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
19/22
6/18/2014 19
Teknik Elektroforesis Kapiler
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
20/22
6/18/2014 20
Beberapa Diagnostik Kesehatan YangMenggunakan Elektroforesis
1. Pemeriksaan Protein
Pemeriksaan protein elektroforesis merupakan pengukuran protein
dalam darah dengan menggunakan metode elektroforesis, yaitu
memisahkan protein berdasarkan sifat fisik protein itu sendiri (albumin,
alpha1-globulin, alpha2-globulin, beta-globulin, dan gamma-globulin)
Manfaat Pemeriksaan : Skrining, diagnosis dan evaluasi beberapapenyakit atau kondisi seperti hepatitis (autoimun), sirosis, inflamasi kronik,
abnormalitas alpha1-antitrypsin.
Persyaratan & Jenis Sampel : Serum 0.3 MlNilai Rujukan :Protein Elektroforesis(A/G rasio) : 1.39 - 2.23%,
Protein Elektroforesis(albumin) : 60.3 - 71.4% (4.6 - 5.4 g/dL),
Protein Elektroforesis(alfa-1) : 1.4 - 2.9% (0.1 - 0.2 g/dL),
Protein Elektroforesis(alfa-2) : 7.2 - 11.3% (0.5 - 0.85 g/dL),
Protein Elektroforesis(Beta) : 8.1 - 12.7% (0.6 - 1.0 g/dL),
Protein Elektroforesis(Gamma) : 8.7 - 16.0% (0.6 - 1.2 g/dL)
http://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesishttp://prodia.co.id/kimia/protein-elektroforesis5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
21/22
6/18/2014 21
Analisa Hb Elektroforesa meupakan pemeriksaan untuk
mendeteksi beberapa jenis Hb (S atau D; C atau E) secara
kualitatif atau semi-kuantitatif. Pemeriksaan ini juga
mampu memisahkan HbA dan HbA2.
Manfaat Pemeriksaan:Mendiagnosis hemoglobinopati danthalassemia, dan evaluasi kondisi anemia hemolitik.
Persyaratan & Jenis Sampel:1 mL Darah EDTA
Nilai Rujukan: HbA : 95-98%
HbA2 : 1,5-3,5%
HbF : 2,0%
2. Analisis Darah (Hb)
5/24/2018 Kelompok 4 - Elektroforesis
22/22
TERIMA KASIH
6/18/2014 22
Recommended