8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
1/83
SEMINARSKI RAD
TEMA:KLINIKAENZIMOLOGIJA:biohemija,
ijagnostika aplikacija,analitikemetode
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
2/83
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
3/83
Klinika enzimologija
Klinika enzimologija je primjena nauke o enzimimana ijagnozu i lijeenje bolesti.
* Oreivanje enzimskih aktivnosti koristi se danas uijagnostici ovih patolokih stanja i poremedaja:
1. Enzimopatija (uroene greke metabolizma ). Bolesti
koje zbog potpunog nedostatka ili deficita nekogvitamina mijenjaju normalni tok metabolikihprocesa.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
4/83
2.Steenih deficita enzima, obino zbogotedenja funkcije nekog organa npr. smanjenjesinteze enzima u jetri,
3. Patolokih stanja u kojima dolazi do lezijedelija koje sare enzime, pa enzimi izlaze iz tihotedenih delija u ekstracelularnu tekudinu.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
5/83
Enzimi se sintetiziraju u delijama i najvedi ionjih jeluje u delijama, ok se samo manjibroj enzima ( probavni ) izluuje iz delija ukojima su nastali i djeluju negdje drugo u
organizmu.
Prema mjestu gdje djeluju enzimi se mogu
podijeliti u 2 grupe:
Delijski enzimi
Sekretorni enzimi
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
6/83
Delijski enzimi ( aspartat-aminotransferaza,alanin-aminotransferaza, laktat-
dehidrogenaza, kreatin-kinaza i dr. ).
Njihova aktivnost u serumu se povedava
prilikom otedenja delija koje ih sari.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
7/83
Sekretorni enzimi:
Djeluju u krvoj plazmi ( holinesteraza, faktorukolagulacije ). Njihova aktivnost u serumu sesmanjuje zbog funkcionalne insuficijencijeizazvane otedenjem delija.
Djeluju u probavnom traktu ( amilaza, lipaza,pepsin, tripin ).
Njihova aktivnost u serumu se povedava zbog
otedenja delija u kojima se enzimi sintetizirajuili se smanjuje zbog funkcionalnog otedenjaorgana.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
8/83
*Aktivnost enzima u ekstracelularnoj tekudini jerezultat:
ulaska enzima u tekudinu iz izumrlih delija,
egraacije i izluivanja enzima iz organizma
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
9/83
Prema tome, poviena aktivnost enzima userumu moe biti posljeica:
Pojaane sinteze
Poremedaja propusnosi delijske membrane
Nekroze delija
Smetnje u sekreciji Smetnje u eliminaciji enzima iz cirkulacije
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
10/83
Dalje, enzime moemo poijeliti:
Prema distrubuciji u organizmu na: organski nespecifini enzimi- enzimi koji
sudjeluju u energetskoj razmjeni materije
odnosno enzimi koji sudjeluju u procesima u
kojima se stvara energija.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
11/83
organski specifini enzimi - sudjeluju u
metabolikim procesima koji se ovijaju samooreenim organima ( npr amilaza, lipaza )
organski specifini izoenzimi ( npr. izoenzimiLDH: LDH 1 i 2 u miokardu ; LDH 4 i 5 u jetri )
Prema istribuciji u deliji :- citosolni enzimi ( ALT, LDH, ALD )
- enzimi delijskih organela
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
12/83
Enzimska slika miokarda, jetre i miida
Enzim Miokard Jetra Skeletni miid
AST +++ +++ +++
ALT ++ +++ ++
YGT + +++ +
GLDH + +++ -
SDH + +++ +
CK ++ + +++
LDH +++ +++ +++
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
13/83
AKUTNI KORONARNI SINDROM
Predstavlja skup klinikih simptoma
uzrokovanim naglim nastankom poremedajakrvotoka u koronarnim krvnim sudovima iposljeinom ishemijom ogovarajudeg ijelamiokarda.
Obuhvata nestabilnu anginu pektoris i infarktmiokarda. Glavni simptom je prsna bol.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
14/83
ENZIMI U DIJAGNOSTICI BOLESTI SRCA
Srani miid sarava mnogo enzima kojisudjeluju u energetskom metabolizmu srca, a
najznaajniji su : kreatin kinaza, laktatdehidrogenaza , aspartat aminotransferaza ,
alanin aminotransferaza, glutamatdehidrogenaza.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
15/83
Naveeni enzimi nisu strogo specifini zamiokard jer su prisutni i u nekim drugim
organima. Tokom nekroze stanica , oslobaaju
se u sistemsku cirkulaciju.
U sluajevima malog non Q infarkta ,
nestabilne angine pektoris i miokarditisanjihove koncentracije su relativno niske
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
16/83
IJAGNOSTIKI ZNAAJ OREIVANJA CK MB
CK- MB je klasini marker akutnog infarkta miokara saznaajnom ijagnostikom osjetljivodu i specifinodu.
Oreivanje aktivnosti CK-MB je danas zamijenjenooreivanjem masene koncentracije CK-MB , ime seznaajno povedava njegova ijagnostika vrijenost i utoku rane faze AIM i u sluajevima manjih infarkta.
Koncentracija CK-MB kao ranog biljega AIM raste 2 do 6sata nakon infarkta , osee najviu vrijenost nakon 24sata , a moe ostati poviena 2 o 3 ana nakon AIM.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
17/83
BB IZOENZIM GLIKOGEN- FOSFORILAZE
Veoma osjetljiv srani marker, sa specifinodukoja je usporediva sa onom za CK-MB .
Znaajna koliina GPBB je u stanicama miokaravezana za mikrosomsku membranu i estice
glikogena i gradi funkcionalnu jedinicu tzv.netopivi sarkoplazmatski retikulo- glikogenski
kompleks.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
18/83
GPBB je specifian pokazatelj otedenja stanica
miokarda kao i ishemije srca.
U akutnoj ishemiji i u AIM , usljed porasta u
koncentraciji cAMP, aktivira se glikogen-
fosforilaza , funkcionalni kompleks se raspada i
GPBB se oslobaa u cirkulaciju.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
19/83
Dinamika promjene koncentracije srcanih enzima u bolesnika sa
AIM
Sranienzim Povedanje(h) Maksimum Normalizacija(dani)
CK-MB 2-6 12-24 3
AST 2-6 12-24 3
LDH oko 12 48 6-8
Najvie poraste aktivnosti CK (20-40 puta), AST (10puta), LDH (5-6 puta).
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
20/83
BOLESTI JETRE I UNIH PUTEVA
Jetreni enzimi se mogu podijeliti u 3 grupe :
1.Enzimi koji se proizvoe u hepatocitima i potom izluujuu krv gdje obavljaju svoju funkciju. U ovu grupu spadaju
faktori koagulacije i acetilholineteraza.Ko hroninih oboljenja jetre smanjuje se sinteza ovihenzima i njihova aktivnost u serumu.
2. Indikatorski enzimi, koji su prisutni u hepatocitima gdjesujeluju u metabolikim reakcijama: transaminaseALT i ASR, LDH, GLDH, yGT, ALP, aldolaze.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
21/83
Nakon lezije jetrenog parenhima; ukazuju naotedenje jetrenog parenhima, a funkcija mozebiti ouvana. Infektivni hepatitis, akutni
hepatitis, ciroza jetre.
3. Enzimi epitelnih stanica unih puteva
GGT (gama glutamil transferaza), ALP ( alkalnafosfataza ), LAP (leucin aminopeptidaza )
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
22/83
Povedanje aktivnosti indikatorskih enzima userumu ukazuje na otedenje jetrenogtkiva.Pri tome jetrena funkcija moe biti
ouvana.
***Enzimi ove grupe su dobri pokazatelji
holesteraze pa su stoga korisni uiferencijalnoj ijagnozi utica.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
23/83
KLINIKO BIOHEMIJSKI ZNAAJ POJEINIH
ENZIMA
Kliniko-biohemijski znacaj LDH ( LAKTATDEHIDROGENAZA )
LH je enzim prisutan u razliitim koliinama ucitoplazmi svih tjelesnih delija.
Poviena aktivnost LH u serumu se uoava umnogim patolokim stanjima pa nema velikuijagnosticku i iferencijalno ijagnostiku vrijenost(LDH nije specifican samo za jedan organ).
Stoga je potrebno kvantitativnom analizom odreditiizoenzime, jer to moze upudivati na organ koji jeoteden.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
24/83
Glavni ijagnostiki znaaj oreivanja LH userumu je otkirivanje manjih otedenja tkiva,kaa olazi o proputanja u plazmi.
Kako je LDH koncetracija u tkivima 500 puta
via nego u plazmi otedenje male koliine
tkiva moe ovesti o znaajnog povienjaaktivnosti u serumu.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
25/83
U hepatobilijarnim bolestima poviena jerazina izoenzima LH 5, specifinog zajetru.
Razina LH je via o AST u sluajevimaakutne nekroze jetrenog parenhima
uzokovanog trovanjem, najede gljivama.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
26/83
LDH je tetramer sastavljen iz dvije vrste
polipeptidnih lanaca: H (heart) I M (muscle) lanci.
Kombinacijom ovih lanaca nastaje pet izoenzima
koji se mogu nadi u tkivima.
-Relativni udjeli izoenzima u serumu bolesnika ovise
o jaini otedenja tkiva ili organa iz kojeg potjeuili o njihovom biolokom poluivotu.
-Razliiti izoenzimi imaju razliito vrijeme
poluraspaa pa se razliito ugo mogu pratiti ukrvi.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
27/83
Diferencijacija izoenzima
Elektroforezom na celogelu mogu se razdvojiti izoenzimi LDH :
Izoenzim Struktura Zona Rel.vrijednost Bolest
LDH1 H4 Alfa1-globulini 0,36-0,52 Infarkt miokrada
LDH2 H3M Alfa1-globulini 0,27-0,52 Infarkt miokardaLDH3 H2M2 Beta-globulini 0,05-0,20 Pludna embolija
LDH4 HM3 Beta/gama-globulini 0,00-0,06 Bolesti jetre i miida
LDH5 M4 Gama-globulini 0,00-0,03 Bolesti jetre i miida
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
28/83
Izoenzimi koji sare H pojeinice putuju bre,
ok izoenzimi koji sare M pojeinice putujusporije a LH1 putuje najbre, a LH 5 najsporije.
U dijagnostici su istaknuta tri elektroforetska
izoenzimska uzorka:
1. Anodna skupina(brzi): LHD1 I LHD2 (miokard,eritrociti, bubrezi)
2. Katodna skupina (spori): LDH4 I LDH5 (jetra,skeletni misici, maligna tkiva)
3.Srednja skupina: LDH3 (limfaticko tkivo,trombociti, maligna tkiva)
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
29/83
LDH1 sadrzi najvise dikarboksilnihaminokiselina, a LH5 bazinih.
Monomer H je karakteristian za miokar.
Ova podjedinica prevladava u tkivima sa
povedanom potronjom kisika.
Monomer M potide iz miida ijetre.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
30/83
Preovlaava u tkivima sa visokom glikolitikomaktivnodu HBH (2-hidroksibutiratdehidrogenaza):
predstavlja LDH1 i 2 koji reagiraju sa
supstratom 2-hidroksibutiratom;
znaajan u ijagnostici infarkta miokara.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
31/83
Oreivanje aktivnosti LH u serumu posebnoje znaajno u ijagnosticiranju infarktamiokarda, te jetrenih, krvnih i malignih bolesti.
Eritrociti i leukociti sare mnogo LH pa suvrijednosti ovog enzima u serumu jako
poviene u hemolitikoj i pernicioznoj anemiji.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
32/83
Aktivnost LH u likvoru je poviena u vie o
90% sluajeva bakterijskog meningitisa i u 10%
sluajeva virusnog meningitisa.
Porast aktivnosti izoenzima 1 i 2 upuduje na
opseno otedenje i loiju prognozu.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
33/83
NADPovisna izocitrat dehirogenaza (ICD)
Katalizira oksidativnu dekarboksilaciju izocitratapreko oksalosukcinata u 2- oksoglutarat.
Enzimije strogo specifina za -izocitrat i ovisan oNADP.
Prisutna u srcu, jetri, skeletnim miidima,bubrezima, eritrocitima, trombocitima,
adrenalnom tkivu. Enzimska aktivnost ICD u serumu prvenstveno
potie iz jetre.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
34/83
Postoje 2 genetski razliita izoenzima: citosolni imitohondrijski; citoplazmatski enzima dominira u
jetrenim ekstraktima, a mitohondrijski u ekstraktimasranog miida.
Poviena aktivnost ICD je veoma osjetljiv indikatoroboljenja jetre.
Virusni hepatitis i infektivna mononukleoza su
pradene veoma visokim vrijenostima IC u serumu;akutne upale bilijarnog trakta su pradene povienomaktivnodu IC.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
35/83
Sorbitol dehidrogenaza (SDH)
Katalizira reverzibilnu reakciju oksidoredukcijefruktoze i sorbitola. Specifina za jetru.
Enzim je lokalizovan u citoplazmi i mitohondrijamajetrenih delija, a njegova aktivnost u serumu jeveoma niska.
Aktivnost SH je poviena u bolestimahepatobilijarnog sistema ( akutni hepatitis ).
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
36/83
Glutamat dehidrogenaza
Katalizira reverzibilnu oksidativnu dezaminaciju L-glutamata, uz NA(P), pri emu nastaje 2-oksoglutarna kiselina.
Lokaliziranaje u mitohonrijama jetre, sranogmiida, bubrega.
Znaajno povienje aktivnosti u serumu u cirozijetre, intoksikaciji halotanim i drugimhepatotoksinim agensima.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
37/83
Gama glutamil transferaza (GGT, yGT)
Metabolika uloga GGT;
- Locirana je na mjestima gje se vri apsorpcija iliprijenos aminokiselina kroz delijske membrane.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
38/83
Sudjeluje u gama glutamilnom ciklusu ikatalizira tri tipa reakcija:
1.Hidroliza-hirolitiko otcjepljenje glutaminske
kiseline2.Vanjska transpeptidacijaprenoenje
glutamilnog ostatka na akceptor
3.Unutarnja transpeptidacijastvaranje gamaglutamil glutaminskih peptida
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
39/83
Prenosi se gama glutamilni ostatak saglutationa na aminokiselinu koja se potomprenosi kroz delijsku membranu, a energija zatransport potie iz hirolize peptine veze u
glutationu.
Elektroforezom na celogelu u serumu zdravih
ljudi razdvajaju se dva izomera: GGT1i GGT2.Znaajna aktivnost u jetri, bubrezima, epiteluunih kanala, egzokrinom pankreasu, prostati.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
40/83
>>Porast aktivnosti GGT u serumu je osjetljiv
pokazatelj otedenja jetre: opstruktivna utica,
holangitis, akutni infektivni hepatitis, cirozajetre, primarne i sekundarne neoplazme u jetri
( promjene aktivnosti se javljaju prije i
izraenije su negoli u rugih jetrenih enzima).
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
41/83
>>Aktivnost GGT je normalna u kotanim
oboljenjima, to se koristi u iferencijalnojijagnozi kotanih bolesti s obzirom naaktivnost ALT.
>>Visoka aktivnost GGT u prostati, povienaaktivnost GGT ko razliitih bolesti bubrega(pojava u urinu).
>>GGT moe posluiti kao marker za procjenunefrotoksinosti lijekova.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
42/83
ASPARTAT- AMINOTRANSFERAZA (AST)
ASTenzim koji katalizira reverzibilnu reakciju transaminacijeizmeu L-asparaginske kiseline i 2-oksoglutarne kiseline.
Oreivanje aktivnosti AST u serumu ima ijagnostikoznaenje u bolestima srca i jetre. Aktivnost AST naglo raste
u serumu bolesnika sa svjeim infarktom miokara.Aktivnost poinje rasti 6 - 8 sati nakon infarkta miokarda iostie maksimum nakon 18- 48 sati. Nakon toga aktivnostopaa i vrada se na normalu u roku o 3-5 dana. Porast
aktivnosti proporcionalan je stepenu otedena miokara.Za razliku o sranog infarkta aktivnost AST u serumuostaje normalna kod angine pectoris.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
43/83
ALANIN AMINOTRANSFERAZA (ALT)
ALT slino AST ima znaajnu ulogu u metabolizmuaminokiselina, proteina i ugljikohidrata. Enzim je
lokalizovan u citoplazmi delija a nalazi se gotovo u
svim organima izuzev kostima i zubima. Najvie ga ima u jetri, potom u skeletnim miidima,
srcu, bubrezima, pankreasu, eritrocitima.
Smatra se specifinim jetrenim enzimom. Poto je
ALT tipian citoplazmatski enzim, on, i ko manjihotedenja izlazi u cirkulaciju.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
44/83
Aktivnost ALT u serumu povedava se koraznih oboljenja hepatobilijarnog trakta.
Najvedi porast aktivnosti nalazi se u aktivnominfektivnom hepatitisu 70-100 puta u odnosu
na gornju referentnu vrijednost.
Pri tome se povisuje i aktivnost AST, ali u
manjem obimu, tako da De Ritisov omjeropada do vrijednosti od 0,65.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
45/83
De Ritisov omjerjeste omjer aktivnosti AST i
ALT ( AST/ALT) . Njegova vrijednost manja od 1
upuduje na blae ostedenje jetre, najedeupalne naravi.
U pradenju alkoholne apstinencije, aktivnostiAST, ALT i GGT u kombinaciji, imaju veliku
ijagnostiku osjetljivost (95%) i ijagnostikuspecifinost (80%).
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
46/83
U hroninom hepatitisu aktivnost je obinonormalna, a umjereno poviena u opstruktivnojutici.
Aktivnost ALT se izrazito raste kod stanja:
nekroza jetrenih delija, ok, moizitis, miokaritis.
U sranom infarktu i miidnoj istrofiji aktivnostALT u sermu obino je normalna.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
47/83
ALKALNA FOSFATAZA (ALP)
Alkalna fosfataza je grupno-specifini enzim kojikatalizuje hidrolizu monoestra fosfatne kiseline
i alkohola.
Optimalni pH za jelovanje enzima je izmeu9.8 i 10.5, a zavisi od vrste supstrata i vrste
pufera.
Pokazuje najjau aktivnost u alkalnomporuju, zato se i naziva alkalna fosfataza.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
48/83
Enzim je prisutan najvie u epitelu tankog creva,
bubrenim tubulima, kostima, jetri, placenti ileukocitima.
ALP u serumu zdravih odraslih osoba uglavnompotie iz jetre, a u serumu jece i iz kostiju.
Ima veliku ijagnostiku vrijenost u bolestimajetre i unih puteva i u bolestima kostiju.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
49/83
Oreivanje aktivnosti ALP moe posluiti kao
indeks bolesti jetre i kostiju u korelaciji sa ostalimklinikim pokazateljima, a moe posluiti i kaotumorski marker.
Izolirano povienje aktivnosti ALP, ka su ostalepretrage normalne, pojavljuje se u granulomatozi
i arinim jetrenim bolestima kao to su apscesi,
tumorkse infiltracije, parcijalna opstrukcija unihputeva i dr.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
50/83
Postoji nekoliko razliitih izoenzima alkalnefosfataze u zavisnosti od porijekla tkiva iz kojih se
izoluje, pa tako rugaija je struktura izoenzimaALP u tkivu jetre, a rugaija u tkivu kostiju.
Vrijednosti serumske alkalne fosfataze variraju i u
zavisnosti o pola i starosti. Vede vrenosti se
sredu ko trunica i jece u periou rasta irazvoja.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
51/83
Normalne vrednosti u krvi:Mukarci: 60142 U/Lene: 50153 U/L
*Poviene vrijednosti mogu da ukazuju napovedanu razgranju kostiju i na mogudi razvojosteoporoze, na bolesti kostiju.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
52/83
Karakteristino je povienje u sluajevimapostojanja prepreke u unim putevima ali ikod oboljenja jetre.
Izolovano povienje aktivnosti ALP u starijihosoba bez simptoma nekog oboljenja nije znak
bolesti.
Za utvrivanje porijekla ALP u serumu
potrebno je odrediti aktivnost izoenzima ALP.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
53/83
Smjernice za upotrebu aktivnosti ALP u
diferencijalnoj obradi jetrenih bolesti kod odraslih
1. Poviena aktivnost ALP - Oreiti aktivnost 5 NT
ILI GGT;
Ukoliko su referentne vrijednosti moguda jebolest kostiju, a ako su poviene vrijenosti ona
se radi o opstruktivnoj jetrenoj bolesti.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
54/83
2. Opstruktivna jetrena bolest - Uraditi UZ i/ili CT ;
Ukoliko su proireni uni putevi mogude je prisustvokamenaca ili otedenja nekog poruja, a ako su normalniuni putevi ona se sumnja na bilijarnu cirozu.
3. Ako ijagnoza unih kamenaca nije sigurna, uraitiperkutanu holangiografiju za ijagnozu sklerozirajudegholangitisa, suenja ili kamenca.
4. Moguda bilijarna ciroza zahtijeva oreivanjeantimitohondrijalnih antiijela, pa ukoliko je rezultat
pozitivan radi se o primarnoj bilijarnoj cirozi.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
55/83
5'- NUKLEOTIAZA (5 NT)
Enzim koji je iroko rasprostranjen (jetra, bubrezi,prostata, sjemenici, pluda, hipofiza ). Uglavnom jevezan za plazma proteine. Katalizira hidrolizu ribo ietoksiribonukleoti 5- monofosfata na
ogovorajude nukleozie i ortofosfat.
Aktivnost enzima povedava se ko bolestimahepatobilijarnog trakta ukljuujudi cirozu jetre,hronini alkoholizam, a svoju najviu vrijenostosee u jetrenoj opstrukciji.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
56/83
Zbog svoje specifinosti za jetru, ima oreene
prednosti u odnosu na ALP.> Pojaana aktivnost 5-NT izmjerena je kod 92%
bolesnika s opstrukcijskom uticom, 70% bolesnika s
parenhimskom boledu jetre i 81% bolesnika smetastazama u jetri.
> akle, povedana aktivnosti ukazuje na: Holecistitis,holangitis, opstrukcije.
> Aktivnosti mu je 2-6 puta poviena u intra iekstrahepatalnoj bilijarnoj opstrukciji.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
57/83
-GLUTATION-TRANSFERAZA (GST-)
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
58/83
Velika su grupa izoenzima molekulske mase oko
23000-30000 Da koja katalizira konjugaciju epoksida,slobodnih radikala, alifatskih i aromatskih elektrofilnih
spojeva s glutationom.
GST enzimi su smjeteni u citosolu, a aktivnost im jeizmjerena u mitohondrijima.
Glutationski konjugati izluuju se iz organizma putemui ili urina. Najosjetljiviji i brzoreagirajudi pokazateljhepatocelularnog otedenja.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
59/83
KREATIN-KINAZA (CK)
Creatine + ATP -----------> phosphocreatine + ADP
Poloaj ravnotee za ovu reakciju zavisi o pH. Pri
neutralnom pH favorizirana je reakcija sinteze ATP.Fosfokreatin slui kao rezerva energije tokomkontrakcije miida.
Kreatin kinaza je dimer, sastavljen od dvamonomera. Skeletni miidi sare M, a mozak B(Brain) subjedinicu.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
60/83
Tri razliite izoforme CK mogu a se formiraju i
to BB(ili CK-1) ; MB(ili CK-2) ; i MM P(CK-3).
Povedanaje aktivnost CK -2 (MB) u akutnom
infarktu miokarda.
Stanja ko kojih se nalaze poviene vrijenosti
CK su: srani infarkt, povree miida,progresivna miidna istrofija, hematolokebolesti, moani uar praden nekrozom.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
61/83
Aktivnost Ck se povedava pri trovanjusedativima i alkoholom, zatim kod karcionomaprostate, bubrega i pluda.
Aktivnost CK je znatno povedana u trauminakon nekoliko sati, a u moanom uarunakon 24-72h.
Neki lijekovi kao na primjer prednizon,steroidi i citostatici smanjuju aktivnost CK.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
62/83
NEURON SPECIFINA ENOLAZA ( NSE )
NSEje izoenzim glikolitikog puta koji se moepronadi samo u mozgu i neuroenokrinom tkivu. Ucitoplazmi neurona je prisutan izoenzim yy NSE.
NSE se nalazi kod tumora CNS-a,neuroblastoma,melanoma i karcinoma titne lijeze,bubrega, testisa i guterae.
Meutim, kao tumorski marker koristi se iskljuivo zaijagnozu neuroblastoma i karcinoma pluda malihdeija (mikrocelularni karcinom).
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
63/83
Mjerenje NSE ko ove vije bolesti prua informacije
o stupnju bolesti, prognozi i ogovoru na lijeenje.
U ishemijskom moanom uaru znatno se povedavaaktivnost NSE u likvoru, sa maksimalnom vrijenodu
3-5 dana.
Koristanje parametar u pradenju lijeenja i akutnihkomplikacija cerebrovaskularnih bolesti.
Nespecifian pokazatelj vrste patolokih promjena uCNS.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
64/83
Referentni interval:
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
65/83
GLUKOZA-6-FOSFAT DEHIDROGENAZA (G-6-PDH)
Enzimciklusa pentoza-fosfata, metabolikog putakoji orava razinukoenzimanikotinamid adenindinukleotid fosfata(NADPH) u stanicama
(najznaajnije ueritrocitima).
Put pentoza fosfata proizvodi u citosoluNADPHi riboza-5-fosfat. NADPH se upotrebljava ureduktivnoj biosintezi, a riboza-5-fosfat usintezi DNK, RNKi nukleotidnih koenzima.
http://hr.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Ciklus_pentoza-fosfata&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Koenzim&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Nikotinamid_adenin_dinukleotid_fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Nikotinamid_adenin_dinukleotid_fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Eritrocithttp://hr.wikipedia.org/wiki/Citosolhttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Riboza-5-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/DNKhttp://hr.wikipedia.org/wiki/RNKhttp://hr.wikipedia.org/wiki/RNKhttp://hr.wikipedia.org/wiki/DNKhttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Riboza-5-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Riboza-5-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Riboza-5-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Riboza-5-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Riboza-5-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Citosolhttp://hr.wikipedia.org/wiki/Eritrocithttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Nikotinamid_adenin_dinukleotid_fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Nikotinamid_adenin_dinukleotid_fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Koenzim&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Ciklus_pentoza-fosfata&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Ciklus_pentoza-fosfata&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Ciklus_pentoza-fosfata&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Enzimhttp://hr.wikipedia.org/wiki/Enzim8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
66/83
G-6-PDH je enzim koji kataliziradehidrogenaciju glukoza-6-fosfatato je ujeno iprvi korak u ciklusu pentoza fosfata. Put pentozafosfata je jedini izvor NADPHu eritrocitima.
Njegova uloga u eritrocitima je da reduciradisulfidni oblik glutationa(GSSG) u sulfhidridnioblik (GSH).
Tu reakciju katalizira glutation-reduktaza. Ulogareduciranog oblika glutationa je inaktivacijaoksidanasa koji napadaju eritrocite.
http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glukoza-6-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=NADPH&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Glutationhttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glutation-reduktaza&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glutation-reduktaza&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glutation-reduktaza&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glutation-reduktaza&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Glutationhttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=NADPH&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glukoza-6-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glukoza-6-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glukoza-6-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glukoza-6-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Glukoza-6-fosfat&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenaze8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
67/83
Manjak enzima glukoza-6-fosfat
dehidrogenazenasljeni je poremedaj ovog enzima.
Hemolitika anemija zbog eficitaG-6-PDHje primjerbolesti za iji je razvoj osim genetske pologe
potreban i utjecaj okoline.
Deficit G-6-PDH predstavlja enzimopatiju koja
prvenstveno pogaa eritrocite te im smanjujemogudnost a se sami brane o tetna jelovanjaoksidanasa te se razvija slika hemolitike anemije.
http://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Glukoza-6-fosfat_dehidrogenazahttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Hemoliti%C4%8Dka_anemija&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Hemoliti%C4%8Dka_anemija&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Hemoliti%C4%8Dka_anemija&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Hemoliti%C4%8Dka_anemija&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Glukoza-6-fosfat_dehidrogenazahttp://hr.wikipedia.org/wiki/Glukoza-6-fosfat_dehidrogenazahttp://hr.wikipedia.org/wiki/Glukoza-6-fosfat_dehidrogenazahttp://hr.wikipedia.org/wiki/Glukoza-6-fosfat_dehidrogenazahttp://hr.wikipedia.org/wiki/Glukoza-6-fosfat_dehidrogenazahttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenazehttp://hr.wikipedia.org/wiki/Manjak_enzima_glukoza-6-fosfat_dehidrogenaze8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
68/83
Sama genska podloga ne dovodi i do
manifestacije bolesti.
Kliniki oitovanje eficita G-6-PDH razvija se tekkaa eritrociti ou u kontakt s oksiansima, a tose najede ogaa kaa eritrociti ou u kontakt
s nekim lijekovimaili toksinima.
Najedi lijekovi koji izazivaju manifestnu slikujesu: antimalarici, sulfonamidi, aspirin(u visokim
dozama), nesteroidni antiinflamatorni
lijekovi,nitrofurantion, fenacetini drugi.
http://hr.wikipedia.org/wiki/Lijekovihttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Toksin&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Antimalarici&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Sulfonamidi&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Aspirinhttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Nitrofurantion&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Fenacetin&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Fenacetin&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Nitrofurantion&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Aspirinhttp://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Sulfonamidi&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Antimalarici&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Toksin&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/wiki/Lijekovi8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
69/83
Takoer, esti uzrok hemolize su i zarazejer fagocitne staniceoslobaaju slobone raikale.Kongenitalna nesferocitna hemolitikananemija
koja nije uzrokovana lijekovima karakteristina jeza stanovnike sjeverne Evrope.
-U oba tipa uzrok hemolize je deficit ili nedostatak
G-6-PH koja je ukljuena u antioksiativnu zatitudelija.
http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Fagocitne_stanice&action=edit&redlink=1http://hr.wikipedia.org/w/index.php?title=Fagocitne_stanice&action=edit&redlink=18/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
70/83
* Poviena aktivnost u eritrocitima izaziva:pernicioznu anemiju, aplastine anemije,leukoze, razne infekcije, jaa otedenja jetre,
hipertireozu i infarkt miokarda.
Metode oreivanja se temelje na optikom
testu.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
71/83
ENZIMI U URINU
Pojava enzima u urinu oznaena je kao enzimurija.Nain ospijevanja enzima u urin moe biti pofiziolokim i patolokim uvjetima.
>>Nain dospijevanja enzima u urin pod fiziolokimuvjetima:
1. Enzimi sa mol masom manjom od 80000;
2. Dezintegracija bubrenog tkiva
(tubularni epitel je bogat enzimima.);
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
72/83
3. Enzimi iz epitela ovonih mokradnih kanala;4. lijeze urigentalnog trakta (ACP, beta-
glukuronidaza, aminotransferaza).
Nain dospjevanja enzima u urin pod patolokimuvjetima:
1. Povedana propusnost glomerulaserumskienzimi;
2. Intenzivan raspa delija bubrenog epitela iporemedaji njihove propusnosti;
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
73/83
3. Tumori urigentalnog trakta- enzimi zdravog i
bolesnog tkiva;
4. Upalni procesi: enzimi leukocita;
5. Krvarenja u urigentalnom traktuenzimi eritrocita;
6. Bakterijske upale bubrega i mokradnih kanala -enzimi bakterija.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
74/83
Enzimi koji u urinu imaju kliniki znaaj su: LH,GLDH, alanin aminopeptidaza, alfa-glukozidaza,
beta-galaktozidaza, ALP, lizozim.
Na primjer, Alaninskaaminopeptidaza je enzimkoji se koristikao biomarkerza etekciju otedenjabubrega.
On se moe koristiti u ijagnozi pojeinih
tipova bubrenih poremedaja. Ona je prisutna uvisokim nivoima u urinu, kad postoji problem sabubrezima
http://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%95%D0%BD%D0%B7%D0%B8%D0%BChttp://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%91%D0%B8%D0%BE%D0%BC%D0%B0%D1%80%D0%BA%D0%B5%D1%80http://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%91%D1%83%D0%B1%D1%80%D0%B5%D0%B3http://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%9D%D0%B5%D1%84%D1%80%D0%BE%D0%BB%D0%BE%D0%B3%D0%B8%D1%98%D0%B0http://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%A3%D1%80%D0%B8%D0%BDhttp://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%A3%D1%80%D0%B8%D0%BDhttp://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%9D%D0%B5%D1%84%D1%80%D0%BE%D0%BB%D0%BE%D0%B3%D0%B8%D1%98%D0%B0http://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%91%D1%83%D0%B1%D1%80%D0%B5%D0%B3http://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%91%D0%B8%D0%BE%D0%BC%D0%B0%D1%80%D0%BA%D0%B5%D1%80http://sr.wikipedia.org/wiki/%D0%95%D0%BD%D0%B7%D0%B8%D0%BC8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
75/83
Aminopeptidaza N je locirana u malim crevima i
renalnoj mikrovilarnoj membrani, kao i drugim
delijskim membranama.
U tankim crevima aminopeptiaza N uestvuje u
finalnom stupnju varenja peptida generisanihhirolizom proteina gastrinim i pankreatikimproteazama.
Njena funkcija u epitelu i rugim tipovima delija nijepotpuno razjanjena.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
76/83
Veliki ekstracelularni karboksiterminalni omen saripentapeptidnu konsenzus sekvencu koja je
karakteristina za lanove zink-vezujudemetaloproteinazne superfamilije.
Poreenjem sekvence sa poznatim enzimima oveklase je pokazalo da su CD13 i aminopeptidaza N
ientini.
Na stabilnost enzima u urinu utie temperatura, pH,vrijeme zaravanja u mokradnom mjehuru.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
77/83
Aktivnost enzima u urinu se moe izraziti na litar24-satni urin ili nodni urin (8-10h).
Povedana enzimurija moe se pojaviti ko sljeedihstanja: aktivnog i hroninog glomerulonefritisa,aktivnog i hroninog pijelonefritisa, enemskenefropatije, malignih tumora bubrega, ijabetikenefroskleroze.
U krizama obacivanja alogenog bubrenogtransplantata povedava se izluivanje AAP,lizozoma, beta glukuronidaze, mitohondrijskeAST.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
78/83
Pomodu multimolekularnih oblika ALP u urinumoemo zakljuiti koji je organ oteden, jetra,placenta kotana sr ili r.
Mitohondrijska AST se izluuje urinom nakonhirukih operacija i u krizi obacivanja
bubrenog transplantata.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
79/83
METODE OREIVANJA AKTIVNOSTI ENZIMA
Zajeniki princip: jelovanje enzima nasupstrat,nakon ega se mjeri ili koncentracija nastalogprodukta ili smanjenje koncentracije supstrata.
Oreivanjem koncentracije nastalogproukta,zapravo se oreuje brzina enzimatskereakcije ( katalitika aktivnost ili katalitikakoncentracija ).
Poto se oreuje brzina enzimske reakcije, uvjetireakcije moraju biti strogo definirani.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
80/83
1.metode jedne take
2.kinetike metode (metode kontinuiranog
mjerenja)
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
81/83
1. Bioloki materijal se inkubira sa supstratompropisano vrijeme,zatim se prekida inkubacija, te
izvoi hemijska reakcija kojom se oreujekoncentracija nastalog produkta.
Kako se mjerenje vri jenom poslije fiksnogvremena inkubacije,nazivaju se jednim imenom
metoe jene take.
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
82/83
2. Ko kinetikih metoa mjeri s inicijalna brzinaejstva enzima. Buudi a se mjerenje vrikontinuirano tokom oreenog vremenskogperioda,nazivaju se I metodama kontinuiranog
mjerenja.
>>Prve metode kontinuiranog mjerenja su se
temeljile na optikom testu (oksiacija iliredukcija NAD(P)).
8/21/2019 KLINIKA ENZIMOLOGIJA biohemija, dijagnostika aplikacija,analitike metode.pptx
83/83
HVALA NA PANJI !!!