8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
1/44
Dra. Tertia Hutabarat
Departemen Mikrobiologi FK UKI
07 Juni 2010
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
2/44
Digunakan untuk 2 tujuan :
1. Mendeteksi antibodi yang belum diketahui dengan
menggunakan antigen yang diketahui.
2. Mengenali antigen (kuman) yang belum diketahui dengan
menggunakan antibodi yang diketahui.
Sifat antibodi
Bereaksi spesifik dengan antigen yang menimbulkannya
REAKSI ANTIGEN – ANTIBODI IN VITRO
( SEROLOGI )
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
3/44
ANTIBODI ANTIGEN HASIL REAKSI
PRESIPITIN SOLUSI / LARUTAN PRESIPITASI / ENDAPAN
AGLUTININ SEL / PARTIKEL AGLUTINASI / GUMPALAN
LISIN SEL LISIS
OPSONIN SEL / PARTIKEL FAGOSITOSIS
ANTITOKSIN TOKSIN NETRALISASI
ANTIBODI KUMAN / VIRUS NETRALISASI
NETRALISASI INFEKTIF
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
4/44
Antibodi !eimbang Antigen
antibodi
antigen
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
5/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
6/44
0,5 ml 0,5 ml0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml0,5 ml
serum
NaCl
0,5 ml
K
1/2 1/4 1/8 1/16 1/32
Antigen
Anti
gen
Buang
1. Presipitasi pada taung
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
7/44
Antigen
1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 K
Na Cl
Antiserum!
Antiserum
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
8/44
Presipitat
1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 K
Titer antigen : ……..
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
9/44
"#AK!I $"#!I$ITA!I
2. DIFU!I %A&DA M#&U"UT 'U(HT#")'&*
Ag A Ag A
Ab A
Ag A( Ag A+
Ab A(
Ag A Ag (
Ab A(
Antigen A dan A
ID#&TIK Antigen A( dan A+
!#MI ID#&TIK
Antigen A dan (
&'& , ID#&TIK
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
10/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
11/44
"#AK!I $"#!I$ITA!I
('&T'H. $#"('+AA& ELEK - OUCHTERLONY
KUMA& DIFT#"I
A&TIT'K!I&
DIFT#"I
$"#!I$ITAT
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
12/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
13/44
-. DIFU!I TU&%%A) "ADIA)
!I&%)# "ADIA) IMMU DIFFU!I'&
/ !"ID
A&TI+'DI
A&TI%#&
$"#!I$ITAT
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
14/44
!"#S$ "%&'$"S$
%U&A , D#T#"MI&A!I KUMA&
, D#T#K!I A&TI+'DI DA)AM !#"UM
(A"A MIK"'!K'$IK
!U!$#&!I
DA)AM &a(l
A&TI+'DI
/!#"UM
!$#!IFIK
$ K
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
15/44
M"#*S#*+$# ( !"#S$ ,$D"& )
+uang
&a() 03 ml
!erum 03 ml
03 ml 03 ml 03 ml 03 ml 03 ml 03 ml
1 2 - 4 3 5 76K
Antigen a8 03 ml
$engen9eran
:erum
; < 16= 1615 16-2 1654
$engen9eran
ak>ir < 16= 1615 16-2 1654 1612=
Ha:il 6 Titer , , ,
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
16/44
-!$S "$%! H ' DA& ?i
@#I) F#)I /1B17 Proteus
?I /?irulen:i
' /!omatik 6 badan
H /Flagel
Antigen H Antibodi H Aglutina:i :eperti aCan
Antigen ' Antibodi ' Aglutina:i :eperti pa:ir
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
17/44
1 2 - 4 3 5 76K
"%&'$"S$
1620 1640 16=0 16150 16-20 16540
"%&'$"S$ *
Titer .. E
Titer E
1620 1640 16=0 16150 16-20 16540
1 2 - 4 3 5 76K
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
18/44
!"#S$ +*/*!
1 2 - 4 3 5 76K
1620 1640 16=0 16150 16-20 16540
"'*"%&'$"S$
1620 1640 16=0 16150 16-20 16540
Titer . E
Titer . E
1 2 - 4 3 5 76K
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
19/44
"#AK!I !I)A&%
, dapat merugikan
, dapat menguntungkan
A+
(D
D
#
F
!erum anti ter>adap kuman I / Antibodi A + ( D +ereak:i :ilang
dengan kuman II / ada antigen D .
Untuk mengata:i >al ini !erum monoalen / Antibodi monoklonal
Detek:i RICKETTSIOSIS /inGek:i Rickettsia menggunakan antigen
Proteus "eak:i @#I),F#)I
I II
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
20/44
!"#S$ #*"%&'$"S$
$A"TIK#)
/)AT#K! +#&T'&IT
A&TI%#&
A&TI+'DI
"#AK!I A&TI%#& A&TI+'DI $'!ITIF A%)UTI&A!I
/)AT#K! 6 +#&T'&IT
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
21/44
H#MA%)UTI&A!I
A%)UTI&A!I !#) DA"AH M#"AH
DA$AT T#"JADI
1. A&TI+'DI T#"HADA$ A&TI%#& $ADA $#"MUKAAA& !#) DA"AH M#"AH
!DM !DM
!DM !DM
A&TI%#&
A&TI+'DI
('&T'H $#&TUA& %'). DA"AH
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
22/44
2. ?I"U! 6 "I(K#TT!IA
M#M$U&*AI H#MA%)UTI&I& DA$AT M#&%%UM$A)KA&
!#) DA"AH M#"AH.
!DM !DM
!DM !DM
?I"U!
H#MA%)UTI&I&
"#AK!I I&I DA$AT DIHAM+AT ')#H A&TI+'DI
"#AK!I HAM+ATA& H#MA%)UTI&A!I
?I"U! A&TI+'DI
!DM!DMHAM+ATA&
H#MA%)UTI&A!I
!#) DA"AH M#"AH
A&TI+'DI
!DM
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
23/44
-. !#) DA"AH M#"AH !#+A%AI $#M+A@A A&TI%#&
!DM
!#) DA"AH M#"AH DA$AT DI)A$I!I D#&%A& A&TI%#&
DI$#"MUKAA&&*A.
A&TI%#& A&TI+'DI *A&% !#!UAI
H#MA%)UTI&A!I
K#U&TU&%A& M#MUDAHKA& M#)IHAT HA!I) "#AK!I /$A"TIK#) +#!A".
DI!#+UT JU%A H#MA%)UTI&A!I $A!IF
Antigen
!#) DA"AH M#"AH *A&%
DI)A$I!I D%& A&TI%#&
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
24/44
Ag Antibodi ( Anti
!DM
!"#S$ +!%$#"" #*M+&!M!
!I!TIM H#M')I!A
!DM
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
25/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
26/44
1 2 3 4 5 6 " 8 #/K1 10/K2
$iter %em&lisin ' $aung (e 4
1/4000 ) 1 unit
*ntu( rea(si + diguna(an 2 unit ) 2 - 1/4000
) 1/ 2000
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
27/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
28/44
1 2 3 4 5 6 " 8/K
-at unit ) taung (e 3
*ntu( - pengi(atan (&mplemen diguna(an 2 ull unit
) 2 - 0,35 ) 0," ml
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
29/44
"#AK!I $#&%IKATA& K'M$)#M#&
A&TI%#& &a()
!#"UM
K'M$)#M#&
!I!TIM H#M')I!A!DM A&TI !DM
$K
H#M')I!A
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
30/44
$'!ITIF %ATIF
"#MMI&%
$ K $ K
$ K
li:i: li:i: li:i:
tidak
li:i:
tidak
li:i:
tidak
li:i:
"S$& !"#S$ +!%$#"" #*M+&!M!
$
$
$K K
K
"#AK!I $#&%IKATA& K'M$)#M#&
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
31/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
32/44
Reaksi Flokulasi
Partikel antigen (berupa lipid) dicampur dengan antibodi
(Reagin) Flokulasi.
Digunakan pada STS (Serology Test for Sypilis).
Tes non-spesifik pada sifilis.
!. Tes "DR# ("enereal Disease Researc #aboratory)Antigenerum pasien NaCl
P K P K
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
33/44
2. $es RPR apid Plasma eagin.
$ntigen diikatkan dengan carcoal % serum&plasma pasien
carcoal menggumpal ('arna itam).
Antigenerum pasien NaCl
P K P K
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
34/44
. Tes $*+
ila(u(an dalam taung dengan 3 pengeneran'
0,05
Ag0,025 0,0125
0,15
erum
3'1 6'1 12'1
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
35/44
!
! !
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
36/44
#&*M# )I&K#D IMMU&'!'"+#&T A!!A* #)I!A
!olid p>a:e
Antigen
Human,Ig
Anti, >uman Ig
enim
:ub:trat (>romogen
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
37/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
38/44
IMU&'F)U'"#!#&!
1. T#! )A&%!U&%
Antigen
Antibodi g dilabel
dgn Gluore:ein
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
39/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
40/44
2. T#! TIDAK )A&%!U&%
Antigen
Human Immunoglobulin
Anti human Immunoglobulin
ang dilabel dgn Gluore:ein
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
41/44
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
42/44
-. T#! L!A&D@I(H
!el pla:ma
Antibodi di dalam
!el pla:ma
Antigen
Antibodi ang dilabel
dengan Gluore:ein
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
43/44
Untuk diagno:a adana inGek:i pada pemerik:aan antibodi dari
:erum penderita diperlukan dua kali pemerik:aan :erum aitu
!erum pada ma:a akut dan :erum pada ma:a konale:en
/ma:a penembu>an dengan interal Caktu 7 >ari atau lebi>
dan ada kenaikan titer antibodi :ebanak 4N atau lebi>.
8/18/2019 Kuliah Ag-Ab in Vitro FK-UKI 060610
44/44