34
Lampiran 1. Komposisi dan Cara Pembuatan Medium PDA.
Medium Potato Dextrose Agar (PDA) (Comrnom Wclth Mycologal Institute CMI,
1983 dalam EWina, 2001).
Bahan:
Kentang : 200g
Agar-agar : 20g
Dextrosa : 20 g
Amoksilin : 0,5 g
Akuades : ± 1 liter
Catalan: Bahan untuk pembuatan 1 liter PDA
Cara:
> Kentang dibersihkan kemudian dikupas kulitnya dan dipotong dadu
dengan ukuran ± 1 cm.
> Potongan kentang direbus dengan 500 ml air liingga mendidili dan lunak.
Lalu saring larutan hingga didapat ekstrak kentang.
> Campurkan 20 gram agar-agar yang telah disiapkan dengan 100 ml air
kemudian diaduk sampai merata, tambahkan dengan dextrosa, amoksilin
dan larutan ektrak kentang.
> Tambah volume larutan hingga menjadi 1 liter, kemudian rebus kembali
hingga agak mendidih sambil diaduk.
> Kemudian larutan dimasukkan dalam ericnmeyer lalu tutup dengan kapas
dan aluminium foil.
> Selanjutnya stcrilisasi dalam auto clave pada suhu I I O ' C Jaii u k-itum ;
atm selama ± 20 mcnit.
> Agar yang sudah jadi dapai digunakan bngsung.
35
Lampiran 2. Bagan Percobaan Uji Penghamba<an Parogen Pada Cawan Petri (in vitro)
a
Keterangan:
a = jarak antar ulangan (5 cm)
b = jarak anlar perlakukan (5 cm)
Cll-Ct6 = periakuan (konsentrasi)
1-V = Ulangan
36
Lampiran 3. Bagan Percobaan Uji Pengaruh Senyawa Kitosan Pada Buah Kakao Terhadap Jamur Phytophthora paimivora {in vivo)
IV V
Act3^ V
A I u u
Keterangan:
Perlakukan dan ulangan disusun dalam rak-rak percobaan.
a = jarak antar buah dabm kotak (10 cm)
Ctl-Ct6 = periakuan (konsentrasi kito^n)
I-V = Ubngan
37
Lampiran 4. Skema Tahapan Ekstraicsi Kitosan Dari Kulit Udang Putih
Metode ektraksi kitosan dari kulit udang (Yunizal, 2001)
( Kulit dan cangkang kepala udang segar
r Pencucian
) I
Proses Deproteinisasi
Pencucian dan Netralisasi
Pengeringan Oven
Proses Dimineralisasi
Pencucian dan Netralisasi
Pengeringan Oven
Kit in ) Proses Diasetilasi
Pencucian dan Netralisasi
1 Pengeringan ()\cn
38
Lampiran 5. Tabei Sidik Ragam Masing-masing Periakuan
a. Masa Inkubasi Uji Pengaruh Senyawa Kitosan Pada Buah Kakao Terhadap Jamur Phytophthora palmivora (hari)
ANOVA
masainkubasi
SK df JK KT F.hit Sig. periakuan 5 12.975 2.595 13.251* .000 Galat 24 4.700 .196 Total 29 17.675
KK = 0.184 * = s i g n i f i k a n
MODEL REGRESI POLYNOMIAL MASA INKUBASI
Dependent Mth R s q d . f . F S i g f bO b l b2
mas a i n k u L I N .893 3 25.00 .015 1.4800 .0600 m a s a i n k u QUA .896 2 8.59 .104 1.6800 .0371 .0006
m a s a i n k u = masa i n k u b a s i
b. Diameter Koioni (mm)
Anova
SK Db JK KT F.hit Sig.
Periakuan 5 3789.035 757 807 182.056* .000 Galat 24 99.900 4.163 Total 29 3888.935 K K p l =8.36% * = Signifikan
R e g r e s i p o l i n o m i a l
Dependent Mth R.sq d . f . F ^\ zf •-'̂ b l b2
Pertambahdn OUA O.-r-- / -^l.-i. : '.'?724 0.0673 diameter
Kon.scntr;t.si I c rKi ik - 2{b2)
-3.9724 2(0.0673)
- 29.5
39
c. Persentase Penghambatan Koioni Jamur (%)
Anova
SK Df JK KT F.hit Sig.
Periakuan 4 13845.197 3461.299 125.291* .000 Galat 20 552.520 27.626 Total 24 14397.716
K K p l = 11.09% * = Signifikan
MODEL REGRESI POLYNOMIAL PERSENTASE PENGHAMBATAN
Dependent Mth Rsq d . f . F S i g f bO b l b2
pe r s e n t a LIN pe r s e n t a QUA
.904
.990 3 28.17 2 94.58
.013 -15.886
.010 -73.558 3.1638 9.754 9 -.1648
pe r s e n t a = persentase
Konsentrasi terbaik = -2(62)
9.7549 -2(-0.1648)
= 29,6
d. Intensitas Serangan (%)
Anova
df JK KT F. hit Sig.
Periakuan 5 1306.789 261.358 6.566 .001 Galat 24 955.255 39.802 Total 29 2262.044
KK= 19.96%
MODEL REGRESI INTENSITAS SERANGAN PADA BUAH
Dependent Mth Rsq d.f. F S i g f bO b l b2
i n t e n s i t LIN . ̂ 0̂5 3 ": m t e n s i t Q':;-. .• • • >• -...^07 -.0016
40
Lampiran 6. Foto Hasil Uji Penghambatan Patogcn Pada Cawan Petri (in vitro)
a. Foto pertumbuhan diameter koioni jamur 1 hasi setelah inokulasi (HSI)
C t l I H S I .
Ct3 IHSI Ct4 1 HSL C t S l H S l
41
Lampiran 7. Foto Hasil Uji Pengaruh Senyawa Kitosan Pada Buah Kakao Terhadap Jamur Phytophthora palmivora (in vivo)
a. Foto Intensitas Serangan 3 Hari Setelah Inokulasi
42