Éléments utiles au diagnostic de malignité
Biologique…
… et clinique
HyperlymphocytoseMonocytopénie et leucopénieNeutropénieParaprotéineHypogammaglobulinémie, β2 microglobuline, LDHHyperéosinophilie…
AdénopathieSplénomégalie
Incidence
LBGC diffus (30 %)LBGC diffus (30 %)
Lymphome folliculaire (22.1 %)Lymphome folliculaire (22.1 %)L du MALT (7.6 %)L du MALT (7.6 %)
LLC/LL (7.6 %)LLC/LL (7.6 %)
LT Mature (7.6 %)LT Mature (7.6 %)
MCL (6.7 %)MCL (6.7 %)
LBGC mLBGC méédiastin (2.4 %)diastin (2.4 %)
LBLB anaplasiqueanaplasique (2.4 %)(2.4 %)
BurkittBurkitt (2.5 %)(2.5 %)
LZM (1.8 %)LZM (1.8 %)
LLA T (1.7 %)LLA T (1.7 %)
LLP (1 %)LLP (1 %) Autres (7.4 %)Autres (7.4 %)
Lymphome B matures : 4 % des nouveaux cancers chaque année
WHO (2001)
Pathologie lymphoïde B
Antig
ène
Antig
Antig
èè nene
MoelleMoelleosseuseosseuse
LymphocyteB mémoireCentrocyte
Centroblaste
Cellule dumanteau
Cellule de lazone marginale
Plasmocyte
Celluleplasmocytoïde
Immunoblaste B
Cellule Bnaïve
Lymphoblaste Bprécurseur
Lymphome BLymphome B àà grandes cellulesgrandes cellules LymphomeLymphomelymphoplasmocytairelymphoplasmocytaire
LLCLLCLLCLLC
MyMyéélomelomeLymphomeLymphomede la zonede la zonemarginalemarginale
LymphomeLymphomefolliculairefolliculaire
LymphomeLymphomefolliculairefolliculaire
LymphomeLymphomedu manteaudu manteau
Organe lymphoOrgane lymphoïïdedesecondairesecondaire
MoelleMoelleosseuseosseuse
ParacortexParacortex etet medullamedullaLLALLA--B/LLB/LL--BB
Leucémie lymphoïde chronique
Petite cellule au contour cytoplasmique régulier, au rapport N/C élevé et aunoyau à chromatine condensée en mottePrésence de masse de Gümprecht (fragilité cellulaire)Rares paraimmunoblastes ou prolymphocytes
Morphologie habituelle
Leucémie lymphoïde chroniqueVariantes morphologiques
LLC pleiomorpheLLC à cellules de taille moyenne et rapport N/C faible à flexionplasmocytoïdeLLC riche en prolymphocytes
Confirmation du diagnostic par cytomConfirmation du diagnostic par cytoméétrie en fluxtrie en flux
<10 % prolymphocytes
10 – 55 % prolymphocytes
>55 % prolymphocytes
LLC
LLC/PL
Leucémie prolymphocytaire
ScattergrammeScattergramme ((biparambiparaméétriquetrique))
DiffusionDiffusion àà 9090 °° (granularit(granularitéé))
Diff
usio
n ax
iale
(tai
lle)
Diff
usio
n ax
iale
(tai
lle)
LymphocytesLymphocytes
MonocytesMonocytesGranulocytesGranulocytes
SSéélection de lalection de lapopulationpopulationintintééressanteressantegrâcegrâce àà la crla crééationationdd une rune réégiongiondd intintéérêtrêt
DDéébrisbris
IntensitIntensitéé de fluorescencede fluorescence
CD4 FITCCD4 FITC
- +
Histogramme (Histogramme (monoparammonoparaméétriquetrique))
ScattergrammeScattergramme ((biparambiparaméétriquetrique))
ÜÜ Expression desExpression desmarqueurs fluorescentsmarqueurs fluorescents
CD3 +CD3 + CD3 +/CD8+CD3 +/CD8+
CD8 +CD8 +CD3CD3 --/CD8/CD8 --
ÜÜ Obtention duObtention dupourcentagepourcentage
Pathologie lymphoïde B non hodgkinienne
Antig
ène
Antig
Antig
èè nene
MoelleMoelleosseuseosseuse
LymphocyteB mémoireCentrocyte
Centroblaste
Cellule dumanteau
Cellule de lazone marginale
Plasmocyte
Celluleplasmocytoïde
Immunoblaste B
Cellule Bnaïve
Lymphoblaste Bprécurseur
CD20+CD20+,, cIgMcIgM++
CD23+CD23+
cIgcIg++
CD5+CD5+
CD5+/CD5+/--
CD10+CD10+
CD23CD23--Organe lymphoOrgane lymphoïïdede
secondairesecondaire MoelleMoelleosseuseosseuse
ParacortexParacortex etet medullamedulla
CD79aCD79aCD10CD10TdTTdTCCµµ
CD20,CD20, CD5+CD5+,, sIgMsIgM+, D++, D+CD5CD5--, CD23, CD23--
IgMIgM++
immunophénotype :CD19+, CD20+(faible), CD5+, CD23+, IgS faible
Leucémie lymphoïde chronique
Score de Matutes : 4 à 5/5
IgS
CD5
CD23
CD79b
FMC7
1 point
Faible
+
+
-/faible
-
0 point
Fort
-
-
+
+
Ces cellules d’un même patient vous semblent-ellesmonomorphes?
1. Oui
2. Non
3. Je ne me prononce pas
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1. Oui
2. Non
3. Je ne me prononce pas
Ces cellules d un même patient vous semblent-elles monomorphes?
Monomorphe : pourquoi ?
Taille variable, rapport N/C variableCytoplasme légèrement basophileNoyau irrégulier, replié (en forme de poing fermé)Noyau parfois nucléolé
Immunophénotype :CD19+, CD20+ (forte densité), CD5+, CD23-, IgS forte densité.
Lymphome du manteau
Cytogénétique et biologie moléculaire :t(11;14), gène Bcl1, hyperexpression de protéine cyclin D1
Évolution morphologique :Apparition d’éléments blastiques de plus grande taille (formeblastoïde)ð Analyse du contenu en ADNð Tétraploïdie
Quelle est la particularité de ces cellules ?
1. Petite taille2. Noyau clivé3. Noyau à chromatine mottée4. Rapport N/C élevé5. Noyau blastique
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1. Petite taille
2. Noyau clivé
3. Noyau à chromatinemottée
4. Rapport N/C élevé
5. Noyau blastique
Quelle est la particularité de ces cellules ?
Lymphome folliculairePrésence de centrocytes typiques
petites cellules, chromatine compacte non mottéeclivages nucléaires bien visiblescytoplasme peu abondant, de basophilie faible
Lymphome folliculaire (phase leucémique)
14
18
der(14)
der(18)
Génétique :t(14;18) et ses variantes t(2;18)et (18;22) (70 à 95%)réarrangement du gène BCL2(85% des cas)
Immunophénotype :CD19+, CD20+, CD10+/-, CD5-, CD23+/-, CD44-, CD38 -/+(faible densité)
Technique Fish
Caryotype
Quelle particularité morphologique peut-onrelever dans cette petite galerie ?
1. Ces cellules sont blastiques2. Les noyaux sont mottés3. Certains éléments possèdent des villosités4. On observe parfois des prolongements cytoplasmiques5. Les noyaux sont irréguliers6. Toutes ces cellules sont normales
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1. Ces cellules sont blastiques
2. Les noyaux sont mottés
3. Certains éléments possèdent des villosités
4. On observe parfois des prolongementscytoplasmiques
5. Les noyaux sont irréguliers
6. Toutes ces cellules sont normales
Quelle particulartité morphologique peut-on relever dans cette petite galerie ?
Leucémie à tricholeucocytes (HCL)
Tricholymphocytes :• Cellule souvent de taille moyenne à grande• Contours cytoplasmiques irréguliers (villosités) sur tout le pourtour de la cellule• Cytoplasme plus ou moins abondant et peu basophile• Noyau parfois irrégulier, réniforme………• Noyau à chromatine peu condensée parfois fine contenant parfois un nucléole
Quel est l’intrus ?
Monocyte
Leucémie à tricholeucocytes (HCL)
Particularité :Leucopénie et monocytopénie
Immunophénotype :FSC faible et SSC moyen <> lymphocytes FSC faible et SSC faibleCD19+, CD20+, CD103+, CD25+, CD123+, CD24-, IgS à forte densité
Ne pas confondre avec : SLVL
Lymphome de la zone marginalesplénique (LZMs ou SLVL)
Immunophénotype :CD19+, CD20+, CD5-, CD103-, CD24+, CD123-
Morphologie :Souvent hyperlymphocytose (<> HCL)Petit lymphocyte à rapport N/C élevé et à noyau à chromatine condensée
souvent en mottes (comme dans la LLC)Villosités polarisées (> 20 % de lymphocytes villeux)
Que pensez vous des cellules de cette galerie ?
1. Contexte réactionnel2. Hémopathie chronique3. Présence de cellules anormales jeunes4. Sans avis
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1. Contexte réactionnel
2. Hémopathie chronique
3. Présence de cellulesanormales jeunes
4. Sans avis
Que pensez vous des cellules de cette galerie ?
Leucémie Lymphoblastique Aiguë
Eléments parfois de petite taille pouvant être confondus avec despetits lymphocytes mûrs