RNA de interferncia O que ?
uma fita que se liga ao mRNA de um gene interrompendo indiretamente a sntese protica;
Mediado por pequenos RNAs de fita dupla;
Silenciamento por inibio da traduo e/ou degradao do RNAm;
RNA de interfernciaDescrito pela primeira vez em petnias;
Plantas transgnicas, super expressando genes para produo de pigmentos;
Apresentavam flores brancas devido inibio da sntese do pigmento por silenciamento do transgene e do gene endgeno;
cossupresso;
Em 1998, o mecanismo de interferncia comeou a ser elucidado.
RNA de intefernciaImportncia:
- Mecanismo de defesa do organismo (antiviral);
- Silenciamento ps-transcricional de genes;
- Permite estudar a funo de genes especficos.
RNA de interfernciaCaractersticas:
Presente em muitos organismos;
Atua como mecanismo de defesa endgeno em nematoides, plantas e fungos;
Os dsRNAs envolvidos neste processo, podem ser classificados em trs principais:
miRNAssiRNAsshRNAs
miRNAs (microRNAS) Pequenos dsRNAs endgenos;
Silenciadores ps-transcricionais, inibindo a traduo do RNAm-alvo em protena;
Sua descoberta: Caenorhabditis elegans;
Conhecidos como reguladores fundamentais da expresso gnica em plantas e animais.
miRNAs (microRNAS)Os genes que codificam miRNAs so transcritos pela RNA polimerase II;
Formam o pri-miRNA (longo microRNA primrio);
clivado por um complexo proteico: RNAse III (Drosha) e protena Pasha;
A clivagem resulta no microRNA precursor (pr-miRNA);
Contendo cap 5 e cauda poli(A)
O pr-miRNA exportado para o citoplasma (exportina-5);
clivado pela Dicer gerando um miRNA maduro;
A Dicer envolvida na incorporao de uma das fitas do miRNA a um complexo denominado RISC;
.
miRNAs (microRNAS)
O complexo RISC permite o pareamento entre a fita do miRNA incorporado e a regio homloga do RNAm-alvo por complementaridade de bases.
Complementaridade total ocorre degradao do RNAm;
Complementaridade parcial ocorre represso da traduo e posterior degradao do RNAm.
miRNAs (microRNAS)
siRNA (short interfering RNAs)So molculas sintticas de dupla fita de RNA;
Atuam por meio de pareamento a sequncias complementares ao RNA mensageiro alvo;
Causando sua degradao: silenciamento especfico do gene;
Silenciamento do gene-alvo possibilita a obteno de informaes sobre a funo exercida na clula pela protena que esse gene codifica;
siRNA (short interfering RNAs)As protenas argonautas so tambm responsveis pela seleo da fita do siRNA que ser incorporada ao RISC.Pareamento a sequncias complementares ao RNA mensageiro alvoSilenciamento especfico do gene
Existem trs atributos importantes para se projetar e selecionar um siRNA:
Potncia;Especificidade;Estabilidade s nucleases;
Um dos fatores crticos para o sucesso da tcnica de RNAi a capacidade do siRNA em silenciar especificamente o RNAm-alvo;
Tambm podem reconhecer e interferir com a expresso de RNAs mensageiros que apresentam homologia parcial com o RNAm-alvo. siRNA (short interfering RNAs)
shRNAs (short hairpin RNAs)So RNAs de dupla fita;
Construdos para apresentar uma estrutura semelhante aos miRNAs;
Podem ser introduzidos prontos na clula ou transcritos dentro da clula;
O transcrito processado pela Dicer da mesma forma que os miRNAs.
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um evento conservado durante a evoluo, ocorrendo em vrios organismos eucariontes e atuando como mecanismo de defesa. Esse rna serve para proteger os organismos de ataques de vrus e para eliminar produtos de transcries anmalas. Os RNAs dupla fita so classificados de acordo com sua origem e funo em pelo menos 3 categorias.