UNOESTE Universidade do Oeste Paulista

MANTIDA PELA ASSOCIAO PRUDENTINA DE EDUCAO E CULTURA APEC

Reconhecida pela portaria ME n 83/87 D.O.U. 16/02/87

DISCIPLINA DE BIOQUMICA

Prtica: CARACTERIZAO DE UMA ENZIMAIntroduo:A urease uma enzima que catalisa a hidrlise da uria em amnia e CO2. Ela est presente em algumas bactrias e plantas, pode ser encontrada com facilidade na soja.Objetivo:Caracterizar os mecanismos de atuao de uma enzima.Procedimento:1. Identificao de uma protena Reao de Biureto- Marcar dois tubos A e B- No tubo A, colocar 10 gotas de soluo de extrato de soja e adicionar 2mL de reativo de biureto. Misturar.- No tubo B, colocar 2 mL de gua destilada e 2mL de reativo de biureto. Misturar.Resultados:2. Ao sobre o substrato- Marcar dois tubos C e D.- No tubo C, colocar 3 ml de uria a 1%, duas gotas de vermelho fenol e 5 gotas de extrato de soja e agitar.- No tubo D, colocar 3 mL de gua, duas gotas de vermelho fenol e 5 gotas de extrato de soja e agitar.Resultados:3. Desnaturao pelo calor

- Marcar um tubo E, colocar 5 gotas de extrato de soja e 1mL de gua destilada. Agitar e levar ao banho maria fervente por 10 min.- Acrescentar neste tubo 3 mL de uria 1% e 2 gotas de vermelho fenol. Agitar .Resultado:4. Ao de Inibidores

- Marcar um tubo F, colocar 5 gotas de extrato de soja e 5 gotas de cloreto de mercrio 5%. Agitar.- Acrescentar 3mL de uria 1% e 2 gotas de vermelho fenol. Misturar.Resultados:5. Especificidade Enzimtica:- Marcar um tubo G, colocar 3 mL de tiouria a 1%, 5 gotas de extrato de soja e 2 gotas de vermelho fenol. AgitarResultados: