STUDI MORFO-EKOTIPE DAN KARAKTERISASI MINYAK ATSIRI, ISOZIM, DAN DNA PALA BANDA
(Myristica fragrans Houtt) MALUKU
ILYAS MARZUKI
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR
2007
SURAT PERNYATAAN
Saya menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa segala pernyataan dalam
disertasi yang berjudul:
Studi Morfo-Ekotipe dan Karakterisasi Minyak Atsiri, Isozim, dan DNA Pala Banda (Myristica fragrans Houtt) Maluku
merupakan hasil penelitian saya bersama tim pembimbing. Hak atas kepemilikan in-
telektual data dan hasil dari penelitian ini merupakan milik peneliti dari Institut Per-
tanian Bogor dengan mempertimbangkan kontribusi tim peneliti, publikasi, dan pe-
manfaatan data yang didapat. Disertasi ini belum pernah diajukan untuk memperoleh
gelar pada program sejenis di perguruan tinggi lain. Semua data dan informasi yang
digunakan telah dinyatakan dengan jelas dan dapat diperiksa kebenarannya.
Bogor, Januari 2007
Ilyas Marzuki NRP: A156010101
ABSTRACT
ILYAS MARZUKI. Study on Morpho-ecotype and Characterization of Essen-tial Oil, Isozyme, and DNA for Banda Nutmeg (Myristica fragrans Houtt), Moluc-cas. Advised by H.M.H. BINTORO DJOEFRIE, SANDRA ARIFIN AZIZ, HERDHATA AGUSTA, and MEMEN SURAHMAN.
Banda nutmeg is an important spice crop economically and ecologically. The crop has long been growing and adapting well in Moluccas and North Moluccas areas. The objectives of the study are to explore the morphological and agronomic aspects of the plant in two different areas, Moluccas and North Moluccas, to estab-lish a nutmeg descriptor as a guide for nutmeg description, to extract oil in nutmeg and characterize its volatile components, and to profile the isozymes and DNA of the plant. Three locations in Moluccas i.e. Banda, Ambon, and Luhu, and another three in North Moluccas i.e. Ternate, Tidore, and Bacan were selected as sampling sites. Nutmeg trees with 25 to 50 cm in girth growing at two elevations, 0 to 50 m above sea level (asl) and 250 to 300 m asl were used as observational samples. For mor-phological and agronomic observations, 21 plant characters and two ripening levels of fruit (immature, 3 to 5 months and mature, > 7 months) were used. Oil in nutmeg and mace was extracted using hydrodistillation method and the essential components of it were identified and characterized by Gas Chromatography - Mass Spectrometry (GC-MS). For isozyme identification, four isozyme systems were applied: peroxi-dase (PER), aspartate aminotransferase (AAT), esterase (EST), and acid phosphatase (ACP). For DNA analysis, two decamer primers, OPE 10 and OPE 11, were used in PCR amplifications using Randomly Amplified Polymorphism DNA (RAPD) proce-dure. DNA amplification ran for 45 cycles, and the PCR products were visualized and binary scored (1 for present band, 0 for absence). Isozymes visualized in dendo-gram display. Similarity index (SI) and Nei’s genetic identity and distance of the DNA were calculated as well. Morphological data collected were subjected to Bar-tlett test and UPGMA cluster analysis, whilst agronomic and proximate data were analyzed with Anova and T test and Dunnett’ test, respectively. Oil contents and essential components of nutmeg were analyzed with Anova and Bartlett test.
Results showed that Moluccas was characterized by mountainous physiogra-phy, tectonic hilly areas, volcanic, and karst with a slope of 10 to 40%. Ecotypes of Banda and Ambon consisted mainly of volcanic soils, whereas Luhu consisted of se-diment. Generally, Moluccas has climate IIIC type, except Banda has IIB. Annually, Moluccas receives rainfall 2,029 to 2,951 mm with two patterns, fluctuate (multiple wave) and double (double wave), temperature 22.1 to 31.0 oC, relative humidity 82.1 to 85.5%. It has climate IIIC (Tidore and Bacan) and IVB (Ternate) types with fluc-tuate and bimodal rainfall patterns with solar radiation 57 to 59%. Meanwhile, North Mouluccas was characterized by volcanic hilly landscape, tectonic, and karst soils with slope of 25 to 45%. Temperature regime is between 23.6 and 30.1 oC, relative humidity 83%, and solar radiation 58%. Of 21 morphological plant characters obser-ved, 17 showed a high stability in phenotype. The altered phonotypic characters in-cluded fruit colour, shape and length of peduncles, and fruit size index. Cluster analysis revealed that nutmeg trees could be grouped into three categories according to their morphology, in which 90% of the studied trees were similar to Banda type. In general, productions (fruit, seed, and mace) were not significantly different bet-ween the two elevations. Generally, nutmeg production in Banda ecotype was higher
than other ecotypes. Moreover, proximate analysis showed that water and pectin contents of the nutmeg from Banda ecotype were significantly different from the re-maining. Protein, fat contents, and EP, however, were not significantly diffe-rent. Based on climatic, soil, and nutmeg characteristics, Moluccas and North Moluccas can be divided into four morpho-ecotypes, i.e. Banda (covering Banda and Ambon), Luhu, Ternate (covering Ternate and Bacan), and Tidore ecotypes. In this study, four nutmeg descriptors representing each ecotype have been established. Another results showed that nutmeg originated from Banda, Ambon, Luhu, Ternate, and Bacan pro-duced uncolored nutmeg oils, whereas that from Tidore was pale yellow. Oil con-tents of mature nut of Banda, Ambon, and Luhu were 11.69, 11.92, and 9.99%, respec-tively; meanwhile those in Ternate, Tidore, and Bacan were 7.9, 59.61, and 8.64%, consecu-tively. In addition, the immature seeds showed a higher level of oil content. Oil contents of Banda, Ambon, and Luhu were respectively 13.07, 12.82, and 11.27%, whilst those of Ternate, Tidore, and Bacan were 13.32, 11.99, and 11.03%, res-pectively. Furthermore, nutmeg oil of Moluccas has specific gravity ranged from 0.897 to 0.909 g/ml; refraction index, 1.489 to 1.491; optical rotation, +11.40 to +16,30; and evapora-tion residue, 0.7 to 0.9%. For North Moluccas, the specific gravity was 0.884 to 0.910 g/ml, the refraction index, 1.486 to 1,491, the optical rotation, +18.2 to +40.0, and the evaporation residue, 0.9 to 1.0%. GC-MS analysis revealed that nutmegs from Moluccas consisted of 28 to 31 components of essential oils, and North Moluccas, 29 to 31 compo-nents. The analysis also showed that nutmeg from Banda ecotype comprised 52.8% monoterpene hydrocar-bon (MH), 21.11% oxygenated monoterpene (OM), and 18,04% aromatic compound (AC); Ambon’s, consisted of 45.12% MH, 24.51% OM, and 16.97% AC; and Luhu’s was composed of 56.06% MH, 27.34% OM, and 13,62% AC. The same analysis re-vealed that North Moluccas’ nutmegs contained 29 to 31 essential oil components. Ternate’s nutmeg comprised 37.22% MH, 20.12% OM, and 2.80% AC; Tidore’s, 57.99% MH, 13.50% OM, and 24.27% AC; and Bacan’s, 50.45% MH, 11.64% OMT, and 34.15% AC. Further analysis revealed that there were four important volatile oils fractions in nutmegs, namely myristicin, elemicin, safrole, and eugenol. In Moluccas, it was found that nutmeg contained 5.57 to 13.76% myristicin, whereas in North Moluc-cas, myristicin content was 5.97 to 11.42%. In addition, it was found that safrole content ranged from 0.97 to 2.46% in Moluccas, and 1.49 to 3.37% in North Moluccas. In con-clusion, Oil of Banda nutmeg shows a high stability in all physico-chemical properties, except the optical rotation. Besides, Banda’s nutmeg has a higher content in aromatic compound myristicin. Isozyme analysis showed that AAT of Moluccas nutmeg pro-duced zymogram with monomorphic bands, whereas that of North Moluccas revealed a slightly polymorphic. Low level of polymorphic in ACP was also detected. However, in EST isozyme, nutmeg of Moluccas and North Moluccas showed monomorphic pat-terns. In RAPD analysis, Moluccas nutmeg showed monomorphic DNA bands, whilst North Moluccas revealed a low level of polymorphism. With OPE-11, Moluccas nutmeg has similarity index, SI, ranged from 0.83 to 1.00, and North Moluccas from 0.73 to 0.86. With OPE-10, SI ranged from 0.95 to 1.00 for Moluccas, and 0.78 to 0.83 for North Moluccas. In summary, it can be stated that Banda nutmeg generally has a rela-tively high stability in morphological, isozymes and DNA charac-teristics.
ABSTRAK
ILYAS MARZUKI. Studi Morfo-ekotipe dan Karakterisasi Minyak Atsiri, Isozim, dan DNA Pala Banda (Myristica fragrans Houtt) Maluku. Di bawah bimbingan H.M.H. BINTORO DJOEFRIE, SANDRA ARIFIN AZIZ, HERDHATA AGUSTA, dan MEMEN SURAHMAN.
Pala Banda adalah tanaman rempah yang memiliki peranan penting baik secara ekonomi maupun ekologi. Pala tumbuh dan beradaptasi sangat baik di daerah Malu-ku. Penelitian bertujuan mengeksplorasi lebih jauh aspek ekologi, morfologi dan agronomi pala Banda di Maluku dan Maluku Utara; membuat deskriptor sebagai pedoman pendeskripsian sifat-sifat pala; mengekstraksi minyak pala dan karakteri-sasi komponen atsirinya; dan mengidentifikasi isozim dan DNA pala Banda. Tiga sampling di Maluku, yaitu Banda, Ambon, dan Luhu, serta tiga lainnya di Maluku Utara: Ternate, Tidore, dan Bacan dipilih sebagai lokasi penelitian. Pohon pala produktif berlingkar batang 25 sampai 50 cm, tumbuh di dua elevasi, 0 sampai 50 m di atas permukaan laut (dpl) dan 250 sampai 300 m dpl, digunakan sebagai bahan pengamatan. Untuk studi morfologi dan agronomi, 21 sifat morfologi tanaman dan dua tingkat kemasakan buah (muda, 3 sampai 5 bulan dan tua, > 7 bulan) dipelajari. Minyak biji dan fuli pala diekstrak secara hidrodistilasi, sementara isolasi dan iden-tifikasi komponen atsiri minyak pala dilakukan dengan metode Gas Kromatografi-Spektometri Massa (GC-MS). Analisis isozim menggunkan empat jenis enzim: peroksidase (PER), aspartat aminotransferase (AAT), esterase (EST), dan asam fosfatase (ACP); dan analisis DNA dengan RAPD. Dalam analisis isozim digunakan bufer Tris-HCL dengan pH 7,5 dan gel pati 10%. Elektroforesis dilakukan pada arus tetap 18 mA selama 5 jam. Gel diwarnai sesuai sistem pewarna tiap isozim dan difik-sasi dalam larutan fiksatif. Pada analisis RAPD, DNA daun pala beku diekstrak kemudian diamplifikasi menggunakan primer dekamer OPE-10 (GACTCTCAGG) dan OPE-11 (GAGTCTCAGG). PCR berlangsung 45 siklus. Produk amplifikasi dipisahkan dalam 1,5% gel elektroforesis dan diwarnai etidium bromida. Pita DNA divisualisasi dan diskor secara biner, 1 bila ada pita dan 0 bila tidak ada. Indeks kesamaan (SI) DNA dihitung termasuk identitas dan jarak genetik.
Hasil penelitian menunjukkan agroekologi Maluku dicirikan oleh fisiografi pegunungan, perbukitan tektonik, vulkanik, dan karst dengan kelerengan 10-40%. Wilayah Ambon dan Banda (Maluku) sebagian besar tersusun dari tanah berbahan induk vulkanik, sementara Luhu adalah sedimen. Sebagian besar wilayah Maluku bertipe iklim IIIC kecuali kepulauan Banda, IIB. Wilayah Maluku menerima curah hujan 2.029-2.951 mm/tahun dengan pola fluaktuatif (multiple wave) dan ganda (double wave), suhu udara 22,1- 31,0 0C, kelembaban udara 82,1-85,5%, dan penyi-naran matahari 57- 59%. Maluku Utara dicirikan oleh tanah yang berbahan induk sedimen dan plutonik dan didominasi fisiografi perbukitan/pegunungan vulkan, tektonik, dan karst dengan kelerengan 25-45%. Iklim Maluku Utara bertipe IIIC (Tidore dan Bacan) dan IVB (Ternate) dengan pola hujan fluktuatif dan ganda. Suhu udara 23,6-30,1 0C, kelembaban udara 83% dan penyinaran matahari 58%. Diantara 21 karakter morfologi tanaman yang diamati, 17 memperlihatkan fenotipe yang stabil. Sifat-sifat morfologi yang cenderung berubah menurut ekotipe adalah warna buah, bentuk pangkal buah, panjang tangkai buah, dan indeks ukuran buah. Analisis klaster menunjukkan pohon-pohon pala menurut karakter morfologinya mengelom-pok ke dalam tiga kelas yang mana 90% mengikuti karakteristik pala dari ekotipe
Banda. Secara umum produksi pala di ekotipe Banda lebih tinggi daripada ekotipe lainnya, dan tidak memperlihatkan perbedaan berarti antara dua elevasi. Analisis proksimat memperlihatkan kadar air dan pektin daging buah pala ekotipe Banda ber-beda secara nyata dengan lainnya, tetapi kadar protein, lemak, dan EP tidak berbeda. Berdasarkan karakteristik iklim, tanah, dan tanaman pala, Maluku dan Maluku Utara dapat dibagi ke dalam empat morfo-ekotipe: Banda (yang mencakup Banda dan Am-bon), Luhu, Ternate (yang meliputi Ternate dan Bacan), dan Tidore. Pada pene-litian telah dihasilkan deskriptor pala Banda yang masing-masing mewakili tipikal ekotipe. Hasil lainnya menunjukkan pala yang berasal dari ekotipe Banda, Ambon, dan Luhu menghasilkan minyak pala yang tidak berwarna, sedangkan minyak pala Tidore berwarna kuning pucat. Kadar minyak pala tua ekotipe Banda, Ambon, dan Luhu berturut-turut adalah 11,69; 11,92; dan 11,03%. Hasil selanjutnya memperli-hatkan biji pala muda mengandung minyak yang lebih tinggi. Kadar minyak pala ekotipe Banda, Ambon, dan Luhu masing-masing 13,07; 12,82; dan 11,27%; dan Ternate, Tidore, dan Bacan adalah 13,32; 11,99; dan 11,03%. Analisis fisiko-kimia menunjukkan minyak pala Maluku memiliki bobot jenis 0,897-0,909 g/ml; indeks bias 1,489-1,491; putaran optik (+11,4)-(+16,3); dan sisa penguapan 0,7-0,9%. Pala Maluku Utara memiliki bobot jenis 0,884-0,910 g/ml; indeks bias 1,486-1,491; putaran optik (+18,2)-(+40,0); dan sisa penguapan 0,9-1,0%. Analisis GC-MS menunjukkan pala dari Maluku tersusun dari 28-31 komponen atsiri, dan Maluku Utara 29-31 komponen. Minyak atsiri pala ekotipe Banda tersusun atas 52,8% hidrokarbon monoterpen (HM); 21,11% monoterpen teroksigenasi (MT), dan 18,04% senyawa aromatik (SA); pala ekotipe Ambon mengandung 45,12% HM; 24,51% MT; dan 16,97% SA; dan pala Luhu, memiliki 56,06% HM, 27,34% MT, dan 13,62% SA. Analisis yang sama menunjukkan pala Maluku Utara terdiri atas 29-31 komponen. Komponen atsiri pala ekotipe Ternate adalah 37,22% HM; 20,12% MT; dan 2,80% SA; pala dari Tidore tersusun dari 57,99% HM; 13,50% MT; dan 24,27% SA; dan pala ekotipe Bacan mengandung 50,45% HM; 11,64% MT; dan 34,15% SA. Empat komponen utama senyawa aromatik minyak atsiri pala Banda, yaitu miristisin, elemisin, safrol, dan eugenol. Pala dari Maluku mengandung miris-tisin 5,57-13,76%; sementara Maluku Utara 5,97-11,42%. Kadar safrol pala dari Maluku 0,97-2,46% dan Maluku Utara 1,49-3,37%. Hasil secara umum menunjuk-kan pala Banda di enam ekotipe stabil dalam sifat fisiko-kimia kecuali putaran optik. Kadar senyawa aromatik miristisin pala ekotipe Banda adalah yang tertinggi. Anali-sis isozim menunjukkan bahwa zimogram AAT pala Maluku monomorfik, sedang-kan Maluku Utara agak polimorfik. Isozim EST pala kedua daerah monomorfik. Pada analisis RAPD, pala dari Maluku memperlihatkan pola pita DNA monomorfik, tetapi sedikit polimorfik untuk pala Maluku Utara. Dengan primer OPE-11, pala Maluku memperlihatkan indeks kesamaan (SI) 0,83-1,00; dan Maluku Utara 0,73-0,86. Dengan OPE-10, SI pala Maluku 0,95-1,00; dan 0,78-0,83 untuk Maluku Utara. Dengan demikian dapat dinyatakan bahwa secara umum pala Banda Maluku dan Maluku Utara memiliki stabilitas yang cukup tinggi dalam sifat morfologi, isozim, dan DNA.
© Hak Cipta milik Institut Pertanian Bogor, tahun 2007 Hak Cipta Dilindungi
Dilarang mengutip dan memperbanyak tanpa izin tertulis dari
Institut Pertanian Bogor, sebagian atau seluruhnya dalam bentuk apa pun, baik cetak, fotokopi, mikrofilm, dan sebagainya.
STUDI MORFO-EKOTIPE DAN KARAKTERISASI MINYAK ATSIRI, ISOZIM, DAN DNA PALA BANDA
(Myristica fragrans Houtt) MALUKU
ILYAS MARZUKI
Disertasi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Doktor pada Program Studi Agronomi
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR
2007
Judul Disertasi : Studi Morfo-ekotipe dan Karakterisasi Minyak Atsiri, Isozim, dan DNA Pala Banda (Myristica fragrans Houtt) Maluku
Nama Mahasiswa : Ilyas Marzuki
Nomor Pokok : A156010101
Program Studi : AGRONOMI
Disetujui,
Komisi Pembimbing
Prof. Dr. Ir. H.M.H. Bintoro Djoefrie, M.Agr Dr. Ir. Sandra Arifin Aziz, M.S K e t u a Anggota Dr. Ir. Herdhata Agusta Dr. Ir. Memen Surahman, M.Sc Anggota Anggota Diketahui,
Ketua Program Studi Agronomi Dekan Sekolah Pascasarjana Dr. Ir. Satriyas Ilyas, M.S Prof. Dr. Ir. Khairil A. Notodiputro, M.S
Tanggal Ujian: 9 November 2006 Tanggal Lulus:
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan pada tanggal 17 September 1964 di Makassar, Sulawesi
Selatan, anak kelima dari enam bersaudara dari pasangan Marzuki Puang Nuntung
(alm.) dan Basse Daeng Ngai. Tahun 1993 menikah dengan Rosmiyati Sukur dan
dikarunia tiga orang anak: Tami Fajriah Marzuki, Jakarawi Fachreza Marzuki,
dan Maisya Finistri Marzuki.
Penulis menamatkan pendidikan formal di SD Negeri 7 tahun 1977, SMP
Negeri 1 tahun 1981, dan SMA Negeri 178 Jurusan IPA tahun 1984 yang ketiga-
nya terletak di Sungguminasa, Kabupaten Gowa, Sulawesi Selatan. Penulis me-
raih gelar Sarjana Pertanian Ir. di Universitas Hasanuddin (UNHAS) Makassar ta-
hun 1989, gelar Magister Sains M.Si. pada Program Studi Agronomi, Sekolah
Pascasarjana Institut Pertanian Bogor (SPs IPB) tahun 1997. Tahun 2001 penulis
melanjutkan pendidikan doktor pada program studi yang sama di SPs IPB.
Penulis adalah staf dosen pada Jurusan Budidaya Pertanian, Fakultas Perta-
nian, Universitas Pattimura (UNPATTI) Ambon dari 1991 hingga sekarang. Ta-
hun 2000 sampai 2001 diperbantukan mengajar pada Jurusan Biologi, Fakultas
MIPA, Universitas Negeri Makassar (UNM). Atas nama Lembaga Penelitian IPB,
penulis bekerja sebagai konsultan pada Evaluasi Proyek JBIC-Bappenas INP
22/23 tahun 2002/2003.
PRAKATA
Puji syukur kami panjatkan ke hadirat Allah SWT atas limpahan rahman dan
rahim-Nya kepada penulis sehingga mampu menyelesaikan studi S3 di Sekolah
Pascasarjana Institut Pertanian Bogor (SPs IPB).
Disertasi yang berjudul, "Studi Morfo-ekotipe dan Karakterisasi Minyak
Atsiri, Isozim, dan DNA Pala Banda (Myristica fragrans Houtt) Maluku", meru-
pakan tugas akhir studi doktor di SPs IPB. Masalah pala Banda dipandang perlu
dan penting diangkat dalam sebuah tulisan akademik sebab pala merupakan
komoditas perkebunan penting dan menjadi andalan terutama bagi daerah Maluku
dan Maluku Utara. Pala telah banyak membantu petani secara ekonomi di dua
daerah ter-sebut. Disertasi mengangkat tiga topik berlainan yang saling terkait:
Kajian mor-fologi, agronomi, dan pembuatan deskriptor pala banda (Myristica
fragrans Houtt); Karakterisasi Komponen atsiri pala Banda; dan Identifikasi
isozim dan DNA pala Banda.
Dalam pelaksanaan penelitian penulis banyak mendapatkan bantuan baik
dari perorangan maupun lembaga atau instansi tertentu. Oleh karena itu, pertama-
tama penulis menyampaikan ucapan terima kasih kepada Pemda Maluku atas
dukungan sebagian dana pelaksanaan penelitian. Terima kasih disampaikan
kepada Bapak Drs. Muhammad Sukur dan stafnya di Balai Pengkajian Teknologi
Pertanian (BPTP) Maluku Utara atas bantuan yang diberikan selama survei
tanaman pala di Ternate, Tidore, dan Bacan. Ucapan serupa diberikan kepada
laboran yang telah membantu secara teknis dalam analisis DNA di Laboratorium
Pusat Kajian Buah-Buahan Tropika (PKBT) IPB, dan juga kepada Bapak Prasetyo
atas bantuannya dalam analisis isozim di Laboratorium Pusat Studi Ilmu Hayati,
IPB. Ucapan teri-ma kasih juga disampaikan kepada laboran di Laboratorium
Pengujian Minyak Atsiri, Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat
(BALITTRO), Cimanggu, Bogor atas bantuan teknis yang diberikan dalam
analisis minyak pala dan proksi-mat buah. Kepada Drs. M. Hadad, E.A, APU,
penulis menyampaikan pengharga-an atas dukungannya dalam pelaksanaan survei
pala di Maluku Utara.
Ucapan terima kasih dan penghargaan secara khusus disampaikan kepada
Ketua Komisi Pembimbing Prof. Dr. Ir. H.M.H. Bintoro Djoefrie, M.Agr atas
bimbingan dan arahan akademis yang diberikan selama penelitian dan penulisan
disertasi. Terima kasih dan penghargaan juga disampaikan kepada Anggota Ko-
misi Dr. Ir. Sandra Arifin Aziz, M.S, Dr. Ir. Herdhata Agusta, dan Dr. Ir. Memen
Surahman, M.Sc atas bantuan dan bimbingan yang diberikan kepada penulis
sehingga penelitian dapat diselesaikan.
Semoga disertasi ini dapat memberikan manfaat bagi para pembaca. Terima
kasih.
Bogor, Januari 2007
Ilyas Marzuki
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR TABEL ...................................................................................... xv
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xvii
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xviii
PENDAHULUAN
Latar Belakang .................................................................................. 1 Ruang Lingkup dan Kerangka Penelitian ......................................... 3 Tujuan dan Manfaat Penelitian ......................................................... 5
TINJAUAN PUSTAKA
Tanaman Pala .................................................................................... 6 Morfologi Tanaman .......................................................................... 9 Kondisi Umum Ekotipe Maluku dan Maluku Utara ......................... 11 Minyak Pala dan Komponen Atsiri ................................................... 13 Pemanfaatan Pala .............................................................................. 16 Karakteristik Tanaman: Isozim dan DNA ........................................ 17
KAJIAN MORFOLOGI, AGRONOMI, DAN PEMBUATAN DESKRIPTOR PALA BANDA (Myristica fragrans Houtt)
Abstrak .............................................................................................. 19 Abstract ............................................................................................. 20 PENDAHULUAN ............................................................................ 21 BAHAN DAN METODE ................................................................. 24 HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 29 KESIMPULAN ................................................................................. 67
KARAKTERISASI KOMPONEN ATSIRI PALA BANDA (Myristica fragrans Houtt)
Abstrak .............................................................................................. 67 Abstract .............................................................................................. 68 PENDAHULUAN ............................................................................ 69 BAHAN DAN METODE ................................................................. 73 HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 79 KESIMPULAN ................................................................................. 101
IDENTIFIKASI ISOZIM DAN DNA PALA BANDA (Myristica fragrans Houtt)
Abstrak .............................................................................................. 102 Abstract ............................................................................................. 103 PENDAHULUAN ............................................................................ 104 BAHAN DAN METODE ................................................................. 108 HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 113 KESIMPULAN ................................................................................. 122
PEMBAHASAN UMUM ......................................................................... 124
KESIMPULAN DAN REKOMENDASI .................................................. 130
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 133
LAMPIRAN ............................................................................................... 140
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Spesies utama genus Myristica dan sinonimnya ................................ 9
2. Karakteristik minyak pala East dan West Indian ................................ 13 menurut British Standards Institution for nutmeg oil
3. Sifat-sifat morfologi tanaman pala dan kategori pengukurannya ...... 25
4. Letak astronomi lokasi sampling di Maluku dan Maluku Utara ........ 29
5. Kondisi iklim lokasi penelitian di Maluku tahun 2005 ...................... 31
6. Kondisi iklim lokasi penelitian di Maluku Utara tahun 2005 ............ 32
7. Sifat fisik dan kimia tanah lokasi penelitian ...................................... 34
8. Sifat morfologi tanaman pala dan skor pengukurannya ..................... 36
9. Uji ragam Bartlett karakter morfologi pala Banda ............................... 39
10. Klaster dan jarak sentroid 21 karakter morfologi pala Banda ............ 40
11. Koefisien korelasi tinggi pohon, jumlah cabang, dan ........................ 41 lingkar batang pohon pala dari Maluku
12. Koefisien korelasi tinggi pohon, jumlah cabang, dan ........................ 41 lingkar batang pohon pala dari Maluku Utara
13. Regresi Produksi buah (Y) terhadap tinggi pohon, ............................. 42 jumlah cabang, dan lingkar batang tanaman pala.
14. Rata-rata produksi buah pala dari Maluku dan .................................. 43 Maluku Utara pada dua elevasi
15. Rata-rata produksi biji pala di Maluku dan ......................................... 43 Maluku Utara pada dua elevasi
16. Rata-rata produksi fuli pala di Maluku dan Maluku Utara ................ 44
17. Indeks ukuran buah dan biji pala (ID) ................................................ 44
18. Kadar air buah pala Maluku dan Maluku Utara ................................. 45
19. Kadar protein buah pala Maluku dan Maluku Utara ........................... 45
20. Kadar lemak buah pala Maluku dan Maluku Utara ........................... 46
21. Kadar pektin buah pala Maluku dan Maluku Utara ........................... 46
22. EP buah pala Maluku dan Maluku Utara ............................................ 46
23. Eigenvalues matriks korelasi KU variabel iklim dan tanah ............... 47
24. Eigenvektor lima KU variabel iklim dan tanah .................................. 48
25. Eigenvalues matriks korelasi KU gabungan variabel iklim, tanah, dan karakteristik tanaman pala ...................................... 49
26. Eigenvektor lima KU gabungan variabel iklim, tanah, dan karakteristik pala ................................................................................ 51
27. Deskriptor pala Banda (M. fragrans Houtt) empat ekotipe ............... 53 di Maluku dan Maluku Utara
28. Sifat fisiko-kimia minyak pala East Indian dan West Indian ............. 70
29. Syarat mutu minyak pala Indonesia menurut SNI ............................. 70
30. Kadar minyak biji tua pala dari Maluku dan Maluku Utara ............. 80
31. Kadar minyak biji muda pala Maluku dan Maluku Utara ................... 80
32. Kadar minyak fuli pala Maluku dan Maluku Utara ........................... 81
33. Kadar air biji tua pala Maluku dan Maluku Utara ............................. 81
34. Kadar air biji muda pala Maluku dan Maluku Utara ......................... 82
35. Kadar air fuli pala Maluku dan Maluku Utara ................................... 82
36. Bobot jenis minyak pala distilasi dari Maluku ................................... 83 dan Maluku Utara
37. Indeks bias minyak pala distilasi dari Maluku ................................... 84 dan Maluku Utara
38. Putaran optik minyak pala distilasi dari Maluku ................................ 84 dan Maluku Utara
39. Sisa penguapan minyak pala distilasi dari Maluku ............................ 85 dan Maluku Utara
40. Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Banda ........................... 86
41. Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ambon .......................... 88
42. Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Luhu .............................. 90
43. Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ternate ......................... 92
44. Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Tidore ............................ 93
45. Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Bacan ............................. 95
46. Komponen atsiri utama minyak pala Banda ...................................... 96
47. Komposisi bahan untuk pewarnaan isozim ........................................ 109
48. Indeks Kesamaan (SI) pola pita DNA pala Banda ............................. 118 yang diamplifikasi dengan primer OPE-10 dan OPE-11
49. Identitas genetik dan jarak genetik pala enam ekotipe ....................... 118
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Kerangka pemikiran dan alur penelitian .............................................. 4
2. Pohon pala M. fragrans Houtt (a), M. argentea Warb (b) dan ............ 7 M. succedanea Reinw (c)
3. Beberapa komponen atsiri pala Banda ................................................ 14
4. Kondisi suhu dan kelembaban daerah Maluku, tahun 2005 ................ 30
5. Pola suhu dan kelembaban ekotipe Ternate, Maluku Utara ................. 32
6. Dendogram 21 sifat morfologi tanaman pala Banda ........................... 40
7. Plot KU1 dan KU2 variabel iklim dan tanah ....................................... 49
8. Plot KU1 dan KU2 gabungan variabel iklim, tanah, dan ................... 50 Karakteristik pala
9. Karakteristik warna minyak pala Banda Maluku dan Maluku Utara ... 81
10. Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Banda .................... 87
11. Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ambon .................. 89
12. Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Luhu ..................... 89
13. Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ternate ................. 91
14. Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Tidore ................... 94
15. Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Bacan .................... 94
16. Struktur kimia eter aromatik utama minyak atsiri pala ....................... 96
17. Zimogram isozim AAT pala Maluku .................................................. 113
18. Zimogram isozim AAT pala Maluku Utara ........................................ 113
19. Zimogram isozim ACP pala Maluku ................................................... 114
20. Zimogram isozim ACP pala Maluku Utara .......................................... 114
21. Zimogram isozim PER pala Maluku ................................................... 115
22. Zimogram isozim PER pala Maluku Utara ......................................... 115
23. Zimogram isozim EST pala Maluku ................................................... 116
24. Zimogram isozim EST pala Maluku Utara .......................................... 116
25. Pola pita DNA M. fragrans dengan primer OPE-10 ........................... 117
26. Pola pita DNA M. fragrans dengan primer OPE-11 ........................... 117
27. Dendogram enam ekotipe pala Banda menurut pola DNA ................. 119
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1. Standar karakteristik pala ........................................................................ 140
2. Deskriptor pala Banda versi Indonesia ..................................................... 142
3. Deskriptor pala Banda versi Inggris (internasional) .................................. 152
4. Kelas iklim di Indonesia dan karakteristiknya ........................................ 165
5. Matriks korelasi analisis komponen utama gabungan variabel ................ 166 iklim, tanah, dan tanaman pala.
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH
AAT Aspartate Aminotransferase. ACP Acid Phosphatase. Amplifikasi Penggandaan fragmen DNA melalui sintesis sekuen
nukleotida. BSN Badan Standardisasi Nasional. Dendogram Tampilan hierarki pengelompokan individu berdasarkan
kesamaan (similarity) atau perbedaan (dissimilarity) karakter.
DNA Deoxyribonucleic Acid. East Indian Tipe/produk pala yang berasal dari wilayah timur,
khususnya dari Indonesia. Elektroforesis Pemisahan biomolekul (misalnya protein dan DNA)
berdasarkan perbedaan muatan listrik. EST Esterase. GC-MS Gas Chromatography-Mass Spectrometry. GCNA Grenada Cooperation Nutmeg Association. Identitas genetik Indeks genetik (nilainya 0,0-1,0) yang menggambarkan
kemiripan pola pita DNA. Isozim Protein enzim yang memiliki beberapa struktur berbeda
namun mengkatalisis reaksi biokimia yang sejenis. IPGRI International Plant Genetic Resources Institute. Jarak genetik Indeks genetik (nilainya 0,0-1,0) berdasarkan perbedaan
pola pita DNA. Kromatogram Tampilan hasil analisis kromatografi senyawa volatil
dalam bentuk puncak-puncak kurva (peak). Minyak atsiri Minyak dengan sifat volatil (volatile oil). Morfo-ekotipe Tipe atau jenis tanaman berdasarkan karakteristik tanah,
iklim, dan morfologi tanaman pada ekologi tertentu. OPE 10 atau OPE 11 Primer acak dengan 10 pasang basa nukleotida (dekamer) PCR Polymerase Chain Reaction. PER Peroxydase. RAPD Random Amplified Polymorphic DNA. SI Similarity index. SNI Standard Nasional Indonesia. West Indian Tipe/produk pala yang berasal dari wilayah barat,
khususnya dari Grenada. Zimogram Tampilan pita-pita isozim dalam gel elektroporesis.
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Pala Banda (Myristica fragrans Houtt) adalah tanaman asli Indonesia yang
berasal dari kepulauan Maluku (Purseglove et al. 1981) dan termasuk tanaman
penting diantara tanaman rempah-rempah. Tanaman pala menghasilkan dua pro-
duk bernilai ekonomi cukup tinggi, yaitu biji pala dan fuli yang menyelimuti biji.
Kedua produk tersebut menghasilkan minyak pala, atsiri, rempah, dan bahan obat.
Selain itu, pala dimanfaatkan sebagai pengawet makanan dan minuman (Ojechi et
al. 1998). Minyak pala mengandung senyawa atsiri yang memiliki khasiat farma-
kologis sehingga dapat dimanfaatkan sebagai antimikroba atau bioinsektisida
(Stecchini et al. 1993). Selain dimanfaatkan untuk minyak atsiri, daging buah pala
juga digunakan dalam industri manisan, sirup, dan selai.
Produksi pala Indonesia tahun 2000 tercatat sekitar 20 ribu ton yang diha-
silkan pada areal 60,6 ribu ha (Ditjen Perkebunan 2000). Areal tanaman pala ter-
sebar di 14 provinsi di Indonesia. Negara-negara utama produsen pala adalah In-
donesia, Grenada, Sri Lanka, Trinidad, China dan India (GCNA 2001). Ekspor
pala dunia 76% berasal dari Indonesia, 20% dari Grenada, dan selebihnya dibagi
bersama oleh Sri Lanka, Trinidad, dan Tobago (Mark dan Pomeroy 1995). Ada ti-
ga produk pala yang bernilai ekspor: biji pala, fuli (mace), dan minyak atsiri. In-
donesia tahun 2000 mengekspor sekitar 8 ton biji pala dan lebih dari 1 ton fuli ke
berbagai negara (Anonim 2001).
Minyak pala terutama dihasilkan melalui distilasi biji pala dan fuli. Distilasi
uap (steam distillation) dan distilasi air (hydrodistillation) merupakan dua metode
ekstraksi minyak yang bekerja berdasarkan suhu dan tekanan uap. Metode distilasi
dapat menghasilkan minyak 5 sampai 15% bobot pala. Pala menghasilkan minyak
yang peka cahaya dan suhu, tidak berwarna, kuning pucat atau hijau muda dengan
aroma khas pala (Peter 2001). Minyak pala larut dalam alkohol tetapi tidak larut
dalam air.
Minyak pala digolongkan ke dalam tipe East Indian dan West Indian. Ke-
dua tipe tersebut berbeda dalam beberapa karakteristik seperti misalnya aroma dan
mutu. Minyak pala East Indian, yang sebagian besar berasal dari Indonesia, lebih
unggul dibandingkan dengan minyak pala West Indian karena memiliki aroma
2
yang lebih disukai dan banyak mengandung komponen eter fenil propanoid (Ma-
sada 1976) dan terpen (Lewis 1984). Selain itu, minyak pala East Indian dila-
porkan kaya senyawa aromatik miristisin (hingga 14%) dibandingkan minyak pala
West Indian yang kandungannya kurang dari 1%.
Pala, fuli, oleoresin, dan minyak atsiri dipakai dalam industri pangan dan
minuman. Pala yang berbentuk bubuk banyak digunakan terutama dalam industri
pengolahan pangan. Di Asia Tenggara, China dan India, pala dalam bentuk utuh
dan bubuk digunakan silih berganti. Pala merupakan bahan bumbu standar pada
banyak makanan di Belanda. Pala dan oleoresin digunakan sebagai rempah dalam
penyiapan daging, sup, saus, makanan yang dipanggang, permen, puding, serta
bumbu daging dan sayur.
Indonesia memiliki sumberdaya genetik pala yang besar dengan pusat asal
tanaman di Kepulauan Maluku. Keragaman tanaman ditemukan di Pulau Banda,
Siau, dan Papua (Hadad dan Hamid 1990). Sebagai pusat asal (center of origin),
Indonesia perlu mengambil peran yang lebih besar dalam pengelolaan, pengem-
bangan, dan pemanfaatan tanaman pala. Pala sebagai komoditas penting perlu di-
kelola dan dimanfaatkan secara optimal guna mendukung pembangunan pertanian
di Indonesia.
Salah satu upaya yang perlu dilakukan dalam pengelolaan pala adalah
identifikasi dan karakterisasi, baik pada tingkat morfologi maupun molekuler. Iso-
zim adalah marka biokimia dan genetik yang berguna serta merupakan penduga
keragaman genetik dalam populasi tanaman. Identifikasi dan karakterisasi pala se-
cara lengkap sangat diperlukan bagi upaya konservasi plasmanutfah, pengemban-
gan varietas, dan perlindungan indikasi geografis pala. Karakterisasi pala pada
tingkat morfologi diperlukan terutama untuk keperluan identifikasi fenotipe dan
perubahannya terkait dengan ekotipe atau perubahan lingkungan. Selain identifi-
kasi morfologi, identifikasi molekuler isozim dan DNA juga penting dilakukan.
Secara bersama-sama identifikasi morfologi dan molekuler sangat membantu da-
lam pengembangan komoditas pala di masa yang akan datang. Oleh sebab itu, ke-
giatan penelitian pala yang dilaksanakan melalui suatu program yang terencana
dengan baik dan didukung oleh berbagai pihak akan mempercepat upaya-upaya
mengatasi persoalan yang dihadapi oleh komoditas tersebut.
3
Ruang Lingkup dan Kerangka Penelitian
Penelitian terdiri atas tiga aspek kajian dan masing-masing kajian berkaitan
satu dengan yang lain. Aspek pertama mencakup kajian morfologi, agronomi, dan
pembuatan deskriptor pala Banda menurut ekotipe di Maluku dan Maluku Utara.
Aspek kedua, kajian fisiko-kimia minyak pala dan komponen atsiri pala Banda.
Aspek ketiga, karakterisasi pala pada level biokimia isozim dan DNA. Ketiga as-
pek kajian tersebut dirumuskan masing ke dalam tiga subjudul penelitian sebagai
berikut.
1. Kajian Morfologi, Agronomi, dan Pembuatan Deskriptor Pala Banda;
2. Karakterisasi Komponen Atsiri Minyak Pala Banda Maluku; dan
3. Identifikasi Isozim dan DNA.
Dalam pelaksanaan penelitian, kegiatan lapangan, sampling, pengamatan,
dan analisis laboratorium selanjutnya disusun ke dalam satu kerangka penelitian
seperti tampak pada Gambar 1. Penelitian pertama mencakup sampling tanaman
pala Banda di Maluku dan Maluku Utara untuk mengkaji karakteristik aspek eko-
logi, morfologi tanaman, dan agronomi. Data agroekologi yang diperoleh yang
mencakup iklim, tanah, topografi selanjutnya digunakan untuk penyusunan des-
kriptor pala yang diperlukan sebagai pedoman deskripsi tanaman.
Sampling tanaman dilakukan untuk mendapatkan bahan pala untuk ekstraksi
minyak dan identifikasi komponen atsiri. Ekstraksi menggunakan metode hidro-
distilasi, sedangkan identifikasi dengan teknik GC-MS. Melalui kegiatan karakte-
risasi minyak pala, sifat fisiko-kimia, dan komponen/komposisi senyawa atsiri,
karakteristik pala Banda dapat teridentifikasi lebih lengkap.
Pada bagian akhir penelitian, identitas molekuler isozim pala Banda divisua-
lisasi menggunakan prosedur gel elektroforesis. Seperti halnya isoszim, DNA pa-
la Banda diamplifikasi PCR menggunakan dua primer dekamer, yaitu OPE-10 dan
OP-11. Fragmen-fragmen DNA hasil amplifikasi kemudian diisolasi dan divisua-
lisasi juga secara gel elektroforesis. Secara keseluruhan, tiga subpenelitian yang
dijelaskan di atas secara utuh membentuk satu kesatuan tema penelitian yang
menjadi kerangka pemikiran dan alur kegiatan penelitian. Secar skema kerangka
penelitian diringkaskan seperti tampak pada Gambar 1.
4
PENELITIAN 1 PENELITIAN 2 PENELITIAN 3
Gambar 1 Kerangka pemikiran dan alur penelitian.
Maluku: Banda, Ambon, Luhu
Minyak pala
Maluku Utara: Ternate, Tidore, Bacan
Populasi pala Banda
Karakterisasi: • Kondisi Ekologi • Morfologi Tanaman • Aspek Agronomi
sampling
Data agroekologi pala Banda
sampling Pala menurut ekotipe
Komponen At-siri
Hidrodistilasi
GC-MS
Deskriptor pala
Data fisi-ko-kimia
Identifikasi Molekuler Pala Banda
Isozim: PER, AAT, EST, dan ACP
DNA: RAPD
Data bioki-mia/molekuler
Amplifikasi PCR Gel elektroforesis
5
Tujuan dan Manfaat Penelitian
Penelitian dimaksudkan untuk mengeksplorasi lebih jauh karakteristik dan
potensi pala Banda yang ada di Maluku dan Maluku Utara untuk pengembangan
komoditas lebih lanjut. Selain itu, untuk mengetahui stabilitas karakter pala Ban-
da pada enam ekotipe berbeda.
Penelitian bertujuan untuk: 1) mengkarakterisasi pala Banda dari aspek eko-
tipe, morfologi tanaman, dan agronomi, 2) membuat deskriptor pala Banda berda-
sarkan ekotipe tipikal Maluku dan Maluku Utara, 3) mengekstraksi minyak pala
dan mengidentifikasi komponen atsiri penyusunnya, dan 4) mengidentifikasi iso-
zim dan DNA.
Manfaat yang diperoleh dari penelitian adalah tersedianya data dan informa-
si ilmiah mengenai pala Banda menurut ekotipe yang terdapat di Maluku dan Ma-
luku Utara. Data dan informasi yang dihasilkan merupakan bahan ilmiah yang
penting bagi upaya pengembangan komoditas pala pada tingkatan yang lebih
tinggi. Selain itu, dengan tersedianya data potensi biofarmaka minyak atsiri pala
maka akan membuka peluang bagi pengembangan pala ke arah agroindustri.
TINJAUAN PUSTAKA
Tanaman Pala
Pala (Myristica fragrans Houtt) tergolong ke dalam famili Myristicaceae
yang menurut taksonomi tumbuhan terletak antara Annonaceae dan Lauraceae
(Joseph 1980). Famili Myristicaceae memiliki 18 genus dan sekitar 300 spesies.
Myristica adalah genus terbesar dengan 72 spesies yang diketahui banyak tersebar
mulai dari India dan Sri Lanka sampai ke timur mulai dari Malaysia hingga ke
Australia bagian timur laut, Taiwan dan Pasifik termasuk Kepulauan Solomon, Fi-
ji dan Samoa (Purseglove et al. 1981). Sebagian besar spesies genus Myristica,
yaitu sekitar 34 spesies, endemik ditemukan di Papua sehingga oleh beberapa pe-
neliti Papua dipandang sebagai pusat asal dan penyebaran tanaman pala.
Spesies utama pala yang telah dibudidayakan adalah M. fragrans Houtt, M.
succedanea Warb, dan M. argentea Reinw. Dua spesies pertama banyak dijumpai
di Maluku dan Maluku Utara, sedangkan yang terakhir banyak terdapat di Papua.
1. Myristica fragrans Houtt
Tanaman pala Banda sejak tahun 1834 telah menyebar luas ke berbagai
tempat seperti misalnya ke Grenada, Pinang Malaysia, Sri Lanka, dan Kerala In-
dia (GCNA 2001). Di Indonesia, jenis tersebut sudah dikembangkan secara ko-
mersial di beberapa daerah, seperti di Manado, Aceh, Makassar, Papua, dan Bo-
gor.
Spesies M. fragrans Houtt memiliki 44 kromosom somatik (2n) yang bersi-
fat holokinetik, yaitu mempunyai berkas gelendong yang menyelimuti seluruh
kromosom (Purseglove et al. 1981). Dalam taksonomi, spesies tersebut sinonim
dengan M. officinalis L.f., M. moschata Thumb, dan M. aromatica Lamk (De
Guzman dan Siemonsma 1999). Di Indonesia jenis tersebut lebih dikenal seba-
gai pala Banda dan diketahui merupakan pala yang bernilai ekonomi paling tinggi.
Pala Banda berbentuk pohon yang tidak meranggas (evergreen) dengan
tinggi 4 hingga 10 m, kadang mencapai 20 m (Gambar 2a). Umumnya tanaman
bersifat diosius (dioecious) atau berumah dua namun kadang ditemukan yang mo-
nosius (monoecious) atau berumah satu (Purseglove et al. 1981). Seluruh bagian
tanaman bersifat fragran atau beraroma khas pala. Tanaman memasuki fase gene-
7
ratif setelah berumur 5 hingga 7 tahun yang ditandai dengan terbentuknya bunga.
Tanaman yang berbunga jantan akan berkembang menjadi pohon jantan yang ti-
dak menghasilkan buah, sementara yang berbunga betina akan menghasilkan ta-
naman betina yang menghasilkan buah. Hingga kini jenis kelamin pala belum bisa
diketahui sampai bunga terbentuk meskipun telah dilakukan penelitian hingga ke
tingkat molekuler.
(a)
(b)
(c)
Gambar 2 Pohon pala M. fragrans Houtt (a), M. argentea Warb (b) dan M. succedanea Reinw (C). (Inzet: buah).
Buah pala menghasilkan dua produk berbeda yaitu biji pala dan fuli. Biji
pala adalah bagian utama buah yang menghasilkan bahan rempah. Biji mencapai
umur matang setelah enam hingga sembilan bulan. Fuli pala merupakan arilus biji
yang berubah warna menjadi merah darah pada saat biji atau buah berumur tujuh
sampai sembilan bulan.
Beberapa sifat buah M. fragrans Houtt, yaitu untuk setiap 100 g mengan-
dung 10 g air, 7 g protein, 33 g mentega pala, 5 g minyak atsiri, 30 g karbohidrat,
11 g serat, 2 g abu (De Guzman dan Siemonsma 1999). Dalam minyak pala
terdapat senyawa aromatik miristisin yang bersifat halusinogenik dan toksik.
2. Myristica argentea Warb
Spesies tersebut di Indonesia lebih dikenal sebagai pala Papua atau pala
Irian. Jumlah kromosom somatik atau genom diploidnya adalah 44 (De Guzman
dan Siemonsma 1999). Pohonnya lebih besar dari pala Banda dan dapat mencapai
8
tinggi 15 sampai 20 m dengan daun yang tebal dan lebar (Gambar 2b). Batang
berwarna gelap atau sawo kehitaman.
Bunga jantan berbentuk infloresens yang terdiri atas 3 sampai 5 bunga.
Bunga betina ukurannya lebih kecil bunga jantan dan biasanya tunggal. Spesies
tersebut memiliki ciri khas dari buahnya yang besar dan lonjong. Begitu pula
dengan biji yang dihasilkan yang dapat mencapai ukuran panjang 4 cm. Buah
terbelah saat mencapai umur masak. Buah tanaman tersebut memiliki kandungan
komponen atsiri safrol yang tinggi (De Guzman dan Siemonsma 1999). Daging
buah yang tebal menjadikan pala Papua sesuai untuk industri manisan atau asinan
pala.
3. Myristica succedanea Reinw
Pala M. succedanea Reinw terdapat banyak di Maluku Utara, yaitu di Ter-
nate, Tidore, Bacan, dan Halmahera. Di Maluku Utara spesies tersebut dikenal
sebagai pala Patani. Tinggi pohon mencapai 10 sampai 20 m (Gambar 2c). Kanopi
pohon M. succedanea Reinw berbentuk piramida hingga lonjong dengan perca-
bangan yang agak teratur (Hadad 1992). Bunga jantan dalam beberapa buah atau
infloresensia dan beraroma. Sementara bunga betina lebih pendek dari bunga jan-
tan dan biasanya tunggal.
Buahnya agak lonjong dengan biji yang bulat sampai lonjong. Pala jenis
tersebut meskipun menghasilkan fuli yang tebal, kualitasnya lebih rendah diban-
dingkan dengan pala Banda. Sebagian besar spesies genus Myristica berbentuk
pohon tropik yang bersifat tak meranggas, tumbuh di daerah hutan hujan tropis di
dataran rendah hingga ketinggian 400 m dpl namun beberapa spesies ditemukan
tumbuh di pegunungan dengan elevasi hingga 700 m dpl (Purseglove et al. 1981).
Dalam penamaan spesies pala seringkali dijumpai beberapa kesamaan na-
ma atau sinonim. Tabel berikut memuat nama-nama spesies utama pala dan sino-
nimnya. Nama M. fragrans Houtt misalnya, mempunyai empat sinomin, yaitu M.
argentea Warb satu sinonim, dan M. Succedane Reinw tiga sinonim. Kejelasan
nama spesies pala sangat penting untuk menghindari penamaan ganda bagi spesies
yang secara botani adalah sama. Tabel 1 berikut memuat beberapa nama sino-
mim spesies pala.
9
Tabel 1 Spesies utama genus Myristica dan sinonimnya
Spesies Sinonim Nama umum SumberM. fragrans Houtt M. officinalis L
M. moschata Thunb M. aromatica Lamk Pala Banda
(1)
M. ambeinensis Gandoger (2) M. argentea Warb M. finschii Warb Pala Papua/pala
Makassar (1)
M. succedanea Reinw M. radja Miquel M. schefferi Warb M. speciosa Warb
Pala Halmahera (1)
M. fatua Houtt - Pala jantan (1) Ket.: (1) Purseglove et al., 1981; (2) Groome, 1970.
Selain empat spesies di atas, dikenal pula spesies Myristica ekotipe Malabar
yang disebut Myristica malabarica L, dan Virola surinamensis Rol. (Groome
1970). Spesies V. surinamensis Lamk adalah jenis pala liar yang berkembang di
ekotipe Suriname dan tidak dibudidayakan karena tidak memiliki nilai ekonomi
yang berarti.
Studi genetik pada tanaman pala sangat sedikit dilakukan. Di Indonesia,
hampir tidak ada laporan yang memadai mengenai aspek genetik maupun pemu-
liaan pala. Studi sitologi yang dilaporkan oleh Purseglove et al. (1981) menyata-
kan bahwa M. fragrans Houtt memiliki kromosom somatik 2n sebanyak 42, de-
ngan kromoson dasar diduga sebanyak 7 buah. Penelitian lainnya melaporkan
bahwa pala memiliki kromosom 2n = 44 (Peter 2001).
Morfologi Tanaman
Tanaman pala berbentuk pohon berukuran sedang, tajuk umumnya konikal
atau semi piramida, daun agak kaku dan tak-meranggas. Tinggi rata-rata antara 4
sampai 10 m namun kadang mencapai 20 m atau lebih. Tanaman dikembangkan
terutama dari biji. Di Indonesia, hampir seluruh pertanaman berasal dari biji,
tetapi di Grenada sebagian besar perkebunan pala awalnya menggunakan bibit
vegetatif. Pohon pala yang berumur lebih dari 30 tahun dapat mencapai lingkar
batang 150 hingga 180 cm. Pohon pala di perkebunan Plaisance estate, Grenada
ada yang mencapai umur hingga lebih 80 tahun dengan lingkar batang 200 sampai
250 cm (GCNA 2001).
10
Pala umumnya bersifat diosius (bunga jantan dan betina terdapat pada tana-
man yang berbeda) tetapi kadang dijumpai monosius yaitu bunga jantan dan be-
tina terletak pada pohon yang sama. Pengamatan di hutan pala Maluku dan Malu-
ku Utara menunjukkan bahwa berdasarkan letak bunga, terdapat tiga tipe tanaman
pala yaitu tanaman jantan, tanaman betina, dan tanaman hermaprodit. Tanaman
jantan didominasi oleh Myristica fatua Houtt, betina oleh M. fragrans Houtt, dan
hermaprodit di antara keduanya. Pada pala tidak dikenal bunga hermaprodit.
Tanaman pala jantan dicirikan oleh habitus yang lebih kecil dari tanaman
betina, memiliki cabang yang lebih tegak, daun lebih kecil dan menghasilkan ba-
nyak bunga jantan dalam bentuk rangkaian yang membawa 3 sampai 15 bunga per
rangkaian. Jumlah bunga betina antara 1 sampai 3 per rangkaian. Bunga betina
dan jantan keduanya berbentuk oval berwarna kuning gading dengan ukuran pan-
jang sekitar 4 sampai 8 mm. Dalam perkebunan pala, umumnya rasio pohon jan-
tan terhadap betina dipertahankan 1:10 (Hadad 1990).
Struktur dan sifat tanaman pala yang menyerupai pohon menjadikan tana-
man tersebut sebagai tanaman hutan yang berfungsi menghijaukan kawasan lereng
pegunungan yang penting dalam mencegah erosi. Pala memiliki sistem perakaran
yang dangkal namun ekstensif, satu akar tunggang dan beberapa cabang akar se-
kunder yang menyebar hanya beberapa cm di bawah permukaan tanah. Kedala-
man akar tanaman sekitar 3,5 sampai 5 m. Pala memiliki sistem perakaran yang
dangkal sehingga mudah tumbang oleh terpaan angin kencang. Pada tahun 1955
tercatat 80% populasi tanaman di perkebunan pala di Grenada rusak oleh badai
angin 'Janet' (Muller et al. 1980).
Pembungaan pala terjadi pada waktu yang sama antara pohon monosius dan
diosius. Umumnya bunga muncul pertama kali ketika tanaman mencapai umur 5
sampai 7 tahun. Tanaman pala berbunga lebat dua kali setahun, yaitu April sam-
pai Mei dan November sampai Desember. Di beberapa daerah di Maluku terjadi
sedikit variasi dalam musim berbunga (maju atau mundur) dari dua periode yang
disebut di atas. Bunga pala berkembang menjadi buah dan siap dipanen setelah 7
sampai 9 bulan. Setelah mencapai umur lebih dari 7 bulan, buah terbelah dua dan
melepaskan biji sebagai pertanda kematangan. Masa berbunga dan berbuah tana-
11
man pala akan terus berlangsung silih berganti tanpa ada batas yang jelas antara
musim pertama dan berikutnya.
Penyerbukan bunga pada tanaman pala tidak sepenuhnya dipahami. Bebera-
pa laporan menyebutkan penyerbukan pala dibantu oleh sejenis ngengat yang dis-
ebut 'mibone'. Pengamatan di Maluku dan Maluku Utara menunjukkan bahwa
ngengat dan semut hitam kemungkinan berperan dalam penyerbukan sebab kedu-
anya seringkali hadir pada waktu tanaman pala dalam fase pembungaan. Semut
sangat tertarik oleh nektar yang dihasilkan bunga jantan maupun betina. Pendapat
serupa juga disampaikan oleh Cruickshank (1973). Flach (1966) berpendapat
bahwa pala tergolong ke dalam tanaman yang menyerbuk silang obligat.
Kondisi Umum Ekotipe Maluku dan Maluku Utara
Maluku Tengah yang mencakup Pulau Ambon, Kepulauan Banda, dan Pulau
Seram terletak pada 2,50 - 7,50 Lintang Selatan dan 126,50 - 132,50 Bujur Timur.
Kawasan tersebut dibatasi oleh Laut Seram di Utara, Laut Banda di Selatan, Pulau
Buru di Barat, dan perairan Papua di Timur.
Luas wilayah Maluku Tengah sekitar 257.890 km2 dengan luas daratan
19.594 km2. Luas Pulau Ambon, Kepulauan Banda, dan Pulau Seram dan pulau-
pulau sekitarnya masing-masing 761 km2, 172 km2, dan 18.679 km2. Maluku
tengah juga merupakan daerah bergunung. Gunung Salahutu merupakan gunung
tertinggi (1.038 m dpl) yang terletak di Pulau Ambon, gunung Api di Kepulauan
Banda (667 m dpl), dan gunung Binaya di Pulau Seram (3.027 m dpl).
Iklim Maluku Tengah dipengaruhi oleh iklim laut dan angin munson, dan
oleh karenanya disebut beriklim tropik monsoon (BPS Maluku 2003). Suhu udara
di Pulau Ambon berkisar 23,6 dan 30,1 0C; kelembaban relatif 84%, dan tingkat
penyinaran sekitar 59%. Hujan banyak turun pada bulan Juni sampai Agustus
dengan rata-rata 218 mm/bulan. Di Kepulauan Banda, suhu berkisar 22,6 dan
30,7 0C. Hujan banyak terjadi pada bulan April hingga Mei dengan curah hujan
rata-rata 250 mm/bulan dengan pola yang tidak jelas. Penyinaran matahari sekitar
65,2% dan kelembaban relatif 80,5%. Di Pulau Seram, suhu udara berkisar 22,1
dan 31 0C, tingkat penyinaran matahari 59%, dan kelembahan udara 85,4%.
Seperti di Pulau Ambon, frekuensi hujan tertinggi di Pulau Seram terjadi pada
bulan Juni sampai Agustus dengan rata-rata 185 mm/bulan.
12
Wilayah Maluku memiliki areal sekitar 472.142 ha yang potensial untuk
pengembangan komoditas unggulan tanaman industri seperti cengkeh dan pala.
Untuk komoditas perkebunan seperti kelapa, kakao, dan kopi robusta tersedia
lahan seluas 443.438 ha, dan kopi arabika serta kayu manis dengan luas 29.864
ha. Tanaman perkebunan lainnya yang dapat dikembangkan adalah jambu mete,
sukun, kemiri, kapuk randu, atau kayu-kayuan dengan luas tersedia 120.442 ha.
Tanaman hortikultura buah-buahan tahunan yang diunggulkan adalah manggis,
salak, durian, lengkeng dengan luas tersedia 617.401 ha. Pengembangan lahan
basah atau sawah diarahkan pada areal dengan luas 265.386 ha, sedangkan untuk
lahan kering, komoditas yang diunggulkan adalah padi gogo, jagung, dan kacang
tanah dengan luas 114.948 ha. Untuk pengembangan perikanan air payau
(tambak) tersedia areal 26.466 ha. Komoditas pala di Maluku Tengah dikembang-
kan di atas areal lebih dari 5,2 ribu ha. Menurut data tahun 2003, luas areal pala
di Pulau Ambon, Banda, dan Seram Barat masing-masing 449, 18, dan 128 ha
dengan produksi berturut-turut 41, 244 dan 10 ton.
Sementara itu, komoditas unggulan yang direkomendasikan untuk Maluku
Utara adalah cengkeh dan pala dengan luas sekitar 498.125 ha. Maluku Utara
memiliki areal pala sekitar 9.833 ha dengan produksi 5,9 ton. Pada areal yang
sama juga dapat dikembangkan tanaman hortikultura buah seperti manggis, salak,
durian, dan lengkeng (BPS Maluku Utara 2003).
Komoditas tanaman tahunan yang diunggulkan adalah kelapa dan kakao
yang dikembangkan pada daerah-daerah dataran rendah dengan luas tersedia
sekitar 62.285 ha. Untuk pertanian dataran tinggi, pengembangannya diarahkan
pada produksi kopi arabika atau kayu manis dengan luas sekitar 62.285 ha.
Tanaman pangan lahan basah yang dapat dikembangkan di daerah Maluku Utara
adalah padi sawah dengan luas 290.266 ha, dan pada lahan tersebut dapat
diusahakan tanaman palawija dan atau hortikultura sayuran/buah. Untuk tanaman
pangan lahan kering yang diunggulkan adalah padi gogo, jagung, dan gembili
dengan luas tersedia 140.532 ha. Wilayah Maluku Utara juga direkomendasikan
bagi penanaman tanaman hortikultura buah-buahan unggulan seperti jeruk dan
mangga dengan luas 665.723 ha. Tanaman pangan secara terbatas juga
direkomendasikan. Untuk tanaman pangan lahan basah tersedia lahan seluas
13
290.266 ha. Tanaman pangan lahan kering mencakup lahan untuk pengembangan
tanaman gembili dengan luas 140.532 ha. Pengembangan untuk perikanan
tambak tersedia areal seluas 26.466 ha. Untuk hutan produksi, lahan tersebut
diarahkan peruntukannya untuk kawasan hutan dengan luas tersedia 1.888.464 ha,
dan untuk kawasan konservasi seluas 805.541 ha.
Minyak Pala dan Komponen Atsiri
Minyak pala terutama dihasilkan melalui proses distilasi biji pala dan fuli.
Distilasi uap (steam distillation) dan distilasi air (hydrodistillation) merupakan
dua metode ekstraksi minyak yang bekerja berdasarkan suhu dan tekanan uap.
Metode distilasi dapat menghasilkan minyak 5 sampai 15% bobot pala. Pala
menghasilkan minyak yang tidak berwarna, kuning pucat atau hijau muda, peka
cahaya dan suhu, dan beraroma khas pala (Peter 2001). Minyak pala larut dalam
alkohol tetapi tidak larut dalam air.
Dikenal dua tipe minyak pala, East Indian dan West Indian. Minyak pala
East Indian dan West Indian berbeda dalam aroma dan mutu. Minyak pala East
Indian, yang sebagian besar berasal dari Indonesia, lebih unggul daripada minyak
pala West Indian karena memiliki aroma yang lebih disukai dan mengandung
komponen eter fenil propanoid (Masada 1976) dan terpen (Lewis 1984) yang
tinggi. Selain itu, minyak pala East Indian dilaporkan kaya senyawa aromatik mi-
ristisin (hingga 14%) jika dibandingkan dengan minyak pala West Indian yang
kandungannya kurang dari 1%.
Tabel 2 Karakteristik minyak pala East dan West Indian menurut British Standards Institution for nutmeg oil
Karakteristik (pada 20 oC ) East Indian West Indian
Warna : Tak berwarna-kuning Tak berwarna-kuning pucat Bobot jenis (g/ml) : 0,885 - 0,915 0,860 - 0,880 Putaran optik : 8,00 - 25,00 25,00 - 450 Indeks bias : 1,4750 - 1,4880 1,4720 - 1,4760 Kelarutan dlm etanol 90% : 3,0 volume 4,0 volume
Minyak fuli diperoleh melalui distilasi uap arilus kering dan menghasilkan 4
sampai 17% minyak. Minyak fuli berwarna bening, merah cerah, atau merah bata
14
dengan bau dan citarasa khas pala. Selain biji dan fuli, dari daun juga dapat dipe-
roleh minyak namun konsentrasinya lebih rendah (kurang dari 1%). Secara kimia,
minyak pala sama dengan yang dari biji dan fuli, tetapi bau dan citarasanya ber-
beda. Ekstraksi minyak atsiri dapat dilakukan dengan beberapa metode. Ekstraksi
minyak atsiri dari bahan fuli lebih baik menggunakan metode karbon dioksida cair
dan pekat karena menghasilkan minyak dengan mutu dan citarasa yang lebih baik
dibandingkan dengan cara distilasi uap (Naik et al. 1988).
Minyak atsiri mengandung beberapa komponen atau senyawa, sebagian be-
sar penting bagi industri. Karena aromanya yang khas, minyak atsiri pala banyak
dimanfaatkan sebagai bahan dalam industri kosmetik. Selain itu, minyak atsiri
juga banyak digunakan dalam industri farmasi. Sifat-sifat farmakologi pala
ditentukan oleh senyawa yang terdapat di dalam komponen atsiri. Laporan
mengenai komponen atsiri pala pertama kali disampaikan oleh Power dan Salway
(1907, 1908).
CH3
CH3H3C
α-pinen
CH3
H3C
H3C
α-felandren
H2C
H3CCH 3
Sabinen
CH3
H3C
H3C
Terpinen
CH3
CH3
O
H3C
Kamfor
H3C
H3C
HO
Linalol
CH3
CH3
CH2
Kamfen
CH2
CH2
CH3
Mirsen
Gambar 3 Beberapa komponen atsiri pala Banda.
Sejumlah komponen atsiri yang berhasil diisolasi dari minyak pala dan fuli
tergolong hidrokarbon monoterpen, monoterpen teroksigenasi, dan eter aromatik
(Purseglove et al. 1981). Senyawa utama dari kelompok hidrokarbon monoterpen
adalah pinen dan sabinen, dan dari kelompok eter aromatik adalah miristisin. Eter
15
aromatik, seperti miristisin, safrol, dan elemisin merupakan komponen atsiri yang
menentukan citarasa dan karakteristik farmakologis minyak pala.
Analisis GC memperlihatkan terdapat 33 senyawa atsiri dalam minyak pala
dan 51 dalam minyak fuli. Kedua minyak komposisinya secara kualitatif sama,
perbedaannya hanya pada kuantitas. Minyak pala mengandung sekitar 76,8%
monoterpen; 12,1% monoterpen teroksigenasi; dan 9,8% eter fenil propanoid,
sedangkan minyak fuli mengandung 51,2% monoterpen; 30,3% monoterpen
teroksigenasi; dan 18,8% eter fenil propanoid (Mallavarupu dan Ramesh 1998).
Komposisi minyak atsiri bervariasi menurut lokasi geografis pala (Baldry et al.
1976; Masada 1976; Lawrence 1981; Kumar et al. 1985; Copalakrishnan 1992).
Pala M. fragrans Houtt dari Indonesia dilaporkan mengandung 2% miristisin
dibandingkan dengan 0,13% pada M. argentea Warb. Miristisin tidak ditemukan
dalam M. muelleri L. Kadar safrol, yang diduga bersifat karsinogenik, kadarnya
adalah 0,13; 0,15; dan 0,24% masing-masing dalam M. fragrans Houtt, M.
argentea Warb, dan M. muelleri L. (Archer 1988). Fraksi miristisin bersama
dengan elemisin menentukan sifat halusinogenik pala. Komposisi atsiri dalam
minyak pala berubah pada penyimpanan jangka panjang. Selama penyimpanan
dan transportasi, minyak pala harus terhindar dari cahaya langsung dan disimpan
dalam wadah yang tertutup rapat pada suhu tidak lebih dari 25 oC. Penyimpanan
yang lama merusak komposisi minyak.
Minyak pala mengandung mentega pala. Dalam mentega pala terdapat
sekitar 25 sampai 40% minyak lemak. Minyak lemak pala diperoleh dengan
mengepres biji pala atau dengan mengekstrak menggunakan pelarut. Minyak
lemak berbentuk setengah-padat, atau lemak berwarna coklat kemerahan dengan
bau dan citarasa khas pala. Minyak lemak larut sempurna dalam alkohol panas
tetapi larut sebagian dalam alkohol dingin. Minyak lemak juga larut bebas dalam
kloroform atau larutan yang mengandung trimiristin (84%), asam oleat (3,5%),
bahan resin (2,3%), asam linoleat (0,6%), asam format dan serotat dalam volume
rendah. Trimirisitisin adalah trigliserida asam miristat yang berbentuk padat
berwarna abu-abu kekuningan. Beberapa laporan menyebutkan bahwa mentega
pala terbaik berasal dari pala East Indian. Minyak lemak digunakan dalam
16
industri parfum dan farmasi. Dalam farmasi, jenis minyak tersebut dimanfaatkan
sebagai bahan obat balsem dan rematik.
Pemanfaatan Pala
Pala dan fuli keduanya dimanfaatkan dalam industri farmasi. Pala dalam
bentuk bubuk jarang digunakan secara tersendiri namun dicampur dengan bebe-
rapa bahan obat. Penggunaan minyak atsiri dalam aromaterapi kian meningkat.
Komponen utama pala dan fuli, yaitu miristisin, elemisin dan isoelemisin jika dis-
ajikan dalam bentuk aroma akan berkhasiat sebagai penghilang stres. Di Jepang,
banyak perusahaan menggunakan pengharum udara yang beraroma pala untuk
memperbaiki lingkungan udara tempat bekerja.
Pala sebagai obat lebih banyak digunakan di Timur daripada di Barat. Seba-
gai obat, pala memiliki sifat stimulatif dan karminatif. Biji pala mengandung ba-
han obat yang bersifat karminatif, deodoran, astringen, narkotik, aprodisiak dan
baik untuk mencegah pilek, dan mual/muntah. Sifat antioksidan pala telah dila-
porkan oleh beberapa peneliti (Madsen dan Bertelsen 1995; Lagouri dan Boskou
1995).
Minyak pala berguna dalam pengobatan penyumbatan kandung kemih, hali-
tosis, dispepsia, flatulens, impotensi, insomnia, dan penyakit kulit. Minyak pala
juga secara eksternal berguna sebagai bahan stimulan dan penawar iritasi. Seba-
gian besar sifat farmakologis pala ditentukan oleh senyawa-senyawa yang terkan-
dung di dalam minyak atsiri. Minyak atsiri fuli memiliki banyak sifat fisiologis
dan organoleptik yang sama dengan minyak atsiri biji pala. Mentega pala meru-
pakan stimulan eksternal yang bersifat sedang dan dimanfaatkan dalam bentuk lo-
tion, minyak rambut, plaster yang dipakai mengobati rematik, kelumpuhan, dan
nyeri (Mallavarapu dan Ramesh 1998).
Pala dan fuli keduanya mengandung bahan aktif miristisin yang bersifat nar-
kotik. Mentega pala mengandung elemisin dan miristisin yang juga memiliki
pengaruh narkotik dan psikotropik (Masada 1976). Penggunaan mentega pala
yang berlebihan menyebabkan narkosis, delirium, gejala epilepsi dan bahkan
kematian. Selain itu, menimbulkan konstipasi sementara dan kesulitan buang air
kecil serta meningkatkan timbunan lemak pada organ hati. Pala bubuk kadang-
kadang digunakan sebagai obat halusinogenik, tetapi pengunaan tersebut berba-
17
haya karena jika berlebihan dapat menimbulkan efek narkotik, gejala delirium,
dan kejang-kejang epilepsi yang tampak 1 sampai 6 jam sesudah pema-kaian
(Shulgin 1963).
Minyak pala digunakan dalam kosmetik, yaitu untuk parfum dan pengharum
ruangan karena sifat aromatiknya. Minyak fuli memiliki sifat fisiko-kimia dan
organoleptik yang hampir sama dengan minyak pala. Minyak fuli dalam jumlah
terbatas dimanfaatkan dalam industri parfum dan sabun .
Komponen mirisitisin yang berkhasiat halusinogenik dilaporkan dapat digu-
nakan sebagai bahan insektisida yang efektif (Ejechi et al. 1998). Kamfen yang
terdapat dalam minyak atsiri pala digunakan dalam pembuatan kamfer dan se-
nyawa lainnya yang bersifat antibakteri, anticendawan, dan antiserangga (Huang
et al. 1997). Pinen, komponen atsiri lainnya, digunakan dalam pembuatan kam-
fer, pelarut, bahan pembantu pembentukan plastik, parfum dan minyak pinus sin-
tetik. Dipentin dimanfaatkan dalam pembuatan resin dan dipakai sebagai bahan
pembasah (wetting agent) dan perata larutan (dispersing agent). Asam miristat di-
gunakan dalam pembuatan sabun, deterjen cair, shampoo, kream cukur, parfum,
plastik; bahan pencampur pada pembuatan karet, dan cat minyak; bahan untuk
pembuatan ester untuk citarasa dan parfum dan sebagai bahan aditif makanan. Si-
fat larvasida juga dilaporkan dimiliki oleh fuli sebagaimana dilaporkan Nakamura
et al. (1988) dalam penelitiannya dengan larva Toxocara canis L.
Karakteristik Tanaman: Isozim dan DNA
Selain karakter morfologi, isozim dan DNA lebih banyak digunakan sebagai
karakter atau penciri tanaman karena lebih stabil dan terpercaya. Isozim atau
isoenzim merupakan protein enzim yang memiliki beberapa bentuk namun meng-
katalisis reaksi yang sama (Adam 1983). Umumnya isozim dikendalikan oleh lo-
kus kodominan yang diwariskan menurut kaidah Mendel dan banyak lokus isozim
diekspresikan pada seluruh tahap atau siklus pertumbuhan (Hamrick 1989).
Karakter DNA lebih unggul bila digunakan sebagai karakter penciri tanaman
sebab memiliki kestabilan yang sangat tinggi dan bahkan variasi lingkungan ham-
pir tidak mengubah karakteristiknya. Sistem RAPD yang menggambarkan poli-
morfisme DNA merupakan metode identifikasi yang memiliki kelebihan diban-
dingkan metode morfologi dan isozim. Metode RAPD tidak memerlukan penge-
18
tahuan latar belakang genom organisme yang dipelajari, dapat menggunakan pri-
mer universal, analisis mudah dan sederhana, hasil yang cepat dan cukup baik. Se-
lain itu, RAPD tidak memerlukan enzim rekstriksi, menggunakan sampel DNA
relatif sedikit, dan tidak menggunakan pelabelan radio aktif.
KAJIAN MORFOLOGI, AGRONOMI, DAN PEMBUATAN DESKRIPTOR PALA BANDA (Myristica fragrans Houtt)
Abstrak
Pala Banda adalah tanaman rempah yang memiliki nilai ekonomi dan ekologi.
Pala tumbuh dan beradaptasi baik pada agroekologi Maluku. Penelitian bertujuan mengeksplorasi lebih jauh aspek ekologi, morfologi, dan agronomi pala di Maluku dan Maluku Utara, dan membuat deskriptor pala menurut ekotipe. Aspek ekologi yang dipelajari mencakup kondisi iklim, fisik/kimia tanah, dan fisiografi. Untuk studi morfologi, 21 sifat tanaman pala diamati dan skor/diukur lalu dianalisis dengan metode analisis klaster multivariat dan uji kesamaan ragam Bartlett-T. Untuk kajian agronomi digunakan pohon pala produktif berlingkar batang 25-50 cm dan tumbuh di dua elevasi, 0-50 m di atas permukaan laut (dpl) dan 250-300 m dpl. Pengamatan mencakup produksi, produktivitas, dan karakteristik proksimat buah. Data agronomi dianalisis dengan uji-T dan uji Dunnett. Data ekologi, morfologi, dan agronomi selanjutnya disusun menjadi suatu deskriptor dengan mengacu pada prosedur Tropical Fruit Descriptors IPGRI. Analisis komponen utama (PCA) dilakukan untuk variabel agroekologi.
Hasil menunjukkan bahwa agroekologi Maluku dicirikan oleh fisiografi pegunungan, perbukitan tektonik, vulkanik, dan karst dengan kelerengan 16-40%. Wilayah Ambon dan Banda sebagian besar tersusun dari tanah yang berbahan induk vulkanik, sementara Luhu berbahan sedimen. Iklim sebagian besar wilayah Maluku bertipe IIIC kecuali kepulauan Banda yang bertipe IIB. Wilayah Maluku mendapat curah hujan 2.029-2.951 mm/tahun dengan dua pola, fluaktutif (multiple wave) dan ganda (double wave), suhu 22,1-31,0 0C, kelembaban 82,1- 85,5%, dan penyinaran matahari 57-59%. Sementara itu, Maluku Utara dicirikan oleh tanah yang berbahan induk sedimen dan plutonik dan didominasi oleh fisiografi perbukitan/pegunungan vulkan, tektonik, dan karst dengan kelerengan 25-45%. Iklim Maluku Utara tergolong tipe IIIC (Tidore dan Bacan) dan IVB (Ternate) dengan pola hujan fluktuatif dan ganda. Suhu udara 23,6-30,1 0C, kelembaban 83% dan penyinaran 58%. Di antara 21 karakter morfologi tanaman yang diamati, 17 menunjukkan stabililitas yang tinggi (90%). Sifat morfologi yang cenderung berubah menurut ekotipe adalah warna buah, bentuk pangkal buah, panjang tangkai buah, dan indeks ukuran buah (IDbuah). Analisis klaster menunjukkan pala menurut karakter morfologi mengelompok ke dalam tiga kelas, 90% menyerupai karakteristik pala Banda. Produksi buah, biji, dan fuli di dua elevasi tidak menunjukkan perbedaan berarti. Secara umum produksi pala di ekotipe Banda lebih tinggi dibandingkan produksi ekotipe lainnya. Analisis proksimat memperlihatkan kadar air daging buah pala ekotipe Banda berbeda secara nyata dengan ekotipe lainnya. Rata-rata kadar air pala ekotipe Banda 79,5%. Perbedaan juga tampak dalam kandungan pektin. Protein, lemak, dan proporsi daging buah (EP) secara statistik tidak berbeda nyata. Berdasarkan kondisi iklim, tanah, dan karakteristik tanaman pala, Maluku dan Maluku Utara dapat dikelompokkan ke dalam empat morfo-ekotipe: ekotipe Banda meliputi Ambon dan Banda, ekotipe Luhu, ekotipe Ternate yang meliputi Ternate dan Bacan, dan ekotipe Tidore. Penelitian juga menghasilkan deskriptor pala masing-masing menurut ekotipe.
Kata kunci: Pala Banda, morfologi, ekotipe, deksriptor.
20
STUDY ON MORPHOLOGY, AGRONOMY, AND DESCRIPTOR MAKING FOR BANDA NUTMEG (Myristica fragrans Houtt)
Abstract
Banda nutmeg is an important spice crop economically and ecologically.
The tree has long been growing and adapting well in Moluccas areas. The ob-jectives of the study are to explore morphological and agronomic aspects of the plant in two different areas, Moluccas and North Moluccas, and to establish a des-criptor as a guide for description of nutmeg characteristics. For morphology study, 21 characters of the plant were observed and analyzed using cluster method of multivariate analysis and Bartlett’T test. For agronomic study, trees with 25 to 50 cm in girth growing at two elevations, 0 to 50 m above sea level (asl) and 250 to 300 m asl were used. Agronomic observations included production, producti-vity, and fruit proximate characteristics. Data collected were subjected to T and Dunnett tests. Furthermore, based on ecological, morphological, and agronomic data, a nutmeg descriptor was composed according to Tropical Fruit Descriptors procedure of IBPGR.
Results showed that Moluccas was characterized by mountain physiography, tectonic hilly areas, volcanic, and karst with slope of 16 to 40%. Ecotypes of Banda and Ambon mainly consisted of volcanic soils, whereas Luhu consisted of sediment. Generally, Moluccas has climate IIIC type, except Banda with IIB. Annually, the area received rainfall 2,029 to 2,951 mm with two different pat-terns, fluctuate (multiple wave) and bimodal or double (double wave); tempera-ture 22.1 to 31.0 oC, relative humidity 82.1 to 85.5%, and solar radiation 57 to 59%. Meanwhile, North Mouluccas was characterized by volcanic hilly land-scape, tectonic, and karst soils with slope of 25 to 45%. The area has climate IIIC (Tidore and Bacan) and IVB (Ternate) types with fluctuatiate and double rainfall patterns. Temperature regime was between 23.6 and 30.1 oC, relative humidity 83%, and solar radiation 58%. Of 21 morphological plant characters observed, 17 showed a high stability in phenotype. The altered phenotypic characters included fruit colour, shape and length of peduncles, and fruit size index. Cluster analysis revealed that nutmeg trees could be grouped into three categories according to their morphology. Ninety percent of the studied trees foolowed with Banda type. Productions (fruit, seed, and mace) were not significantly different between the two elevations in both Moluccas and North Moluccas. Generally, nutmeg produc-tion in Banda ecotype was higher than that in other five ecotypes. Moreover, proximate analysis showed that water and pectin contents of the nutmeg from Banda ecotype were significantly different from the remaining ecotypes. Protein, fat, and EP, however, were not significantly different. Based on climatic, soil, and nutmeg characteristics, Moluccas and North Moluccas can be divided into four ecotypes, i.e. Banda (covering Banda and Ambon), Luhu, Ternate (covering Ter-nate and Bacan), and Tidore ecotypes. In this study, four nutmeg descriptors representing each ecotype have been established.
Keywords: Banda nutmeg, morphology, ecotype, descriptor.
21
PENDAHULUAN
Pala (Myristica fragrans Houtt.) adalah tanaman yang penting karena
menghasilkan bahan rempah dan minyak atsiri yang bernilai ekonomi cukup ting-
gi. Komoditas pertanian unggulan di Maluku selain cengkeh adalah pala yang ke-
duanya banyak dibudidayakan oleh masyarakat setempat dalam bentuk perkebu-
nan rakyat (Kaya et al. 2002).
Pala dan fuli adalah dua bagian berbeda yang dihasilkan dari buah tanaman
pala. Tanaman pala berasal dari kepulauan Banda, Maluku. Spesies dari genus
Myristica tersebar mulai dari India dan Asia Tenggara sampai Australia bagian
utara dan Kepulauan Pasifik. Sinclair (1958) mencatat ada sekitar 75 spesies pala
yang ditemukan di wilayah tersebut. Daerah utama pala adalah Indonesia, daerah
yang dikenal sebagai sumber pala East Indian, dan Grenada yang dikenal sebagai
sumber pala West Indian. Pala juga berkembang dalam jumlah terbatas di Sri
Lanka, India, China, Malaysia, Sumatera Barat, Zanzibar, Mauritus, dan
Kepulauan Solomon (Peter 2001).
Pala tergolong ke dalam famili primitif Myristicaceae dengan 18 genus dan
300 spesies. Myristica merupakan genus yang paling primitif dari famili Myristi-
caceae (Sinclair 1958). Warming (1890) dan Talbot (1902) berpendapat bahwa
Myristicaceae berhubungan sangat dekat dengan Lauraceae. Tidak demikian hal-
nya dengan pendapat Wilson dan Maculans (1967), berdasarkan studi morfologi
dan anatomi, mereka berkesimpulan bahwa Myristicaceae lebih dekat dengan An-
nonaceae dan Canellaceae. Myristica dianggap sebagai anggota famili Magno-
liales atau secara taksonomi sama (Dahlgren 1983).
Tanaman pala berbentuk pohon yang tidak meranggas dengan tinggi 5 sam-
pai 15 meter, kadang mencapai 20 m. Batang mengandung cairan sel (sap) yang
berwarna coklat kemerahan, berdaun hijau berukuran panjang 5 sampai 15 cm dan
lebar 2 sampai 7 cm yang tersusun secara berselang seling di sepanjang ranting.
Permukaan atas daun licin mengkilap. Bunga pala umumnya diosius atau berumah
dua, tetapi bunga jantan dan betina kadang dijumpai pada pohon yang sama (mo-
nosius).
Pohon pala umumnya tidak berbunga sampai mencapai umur sekitar 5 sam-
pai 7 tahun. Pohon pala yang telah memasuki tahap reproduktif akan terus mem-
22
produksi buah hingga mencapai umur sekitar 75 tahun. Puncak produksi terjadi 2
sampai 3 kali dalam setahun.
Pala dipetik bila telah mencapai umur panen yang ditandai dengan terbelah-
nya buah. Buah yang terbelah akan segera jatuh dari pohonnya dan mengeluarkan
biji berwarna coklat kehitaman yang diselimuti arilus atau fuli yang berwarna me-
rah darah. Biji pala menjadi kering dalam seminggu dengan sinar matahari.
Pohon pala umumnya bersifat diosius atau berumah dua yaitu bunga jantan
dan bunga betina terletak pada pohon yang berbeda. Pala umumnya menyerbuk
silang dan penyerbukannya dibantu oleh sejenis semut yang disebut Formicomum
braminus L, Anthridae (Amstrong dan Drummond 1980). Buah pala berbentuk
seperti pendulus, piriform, kuning gading, panjangnya sekitar 7 sampai 10 cm,
terbelah menjadi dua saat masak, menghasilkan biji berbentuk seperti buahnya
dan berwarna hitam kecoklatan dengan panjang 2 sampai 3 cm. Biji diselimuti
arilus yang disebut fuli yang berwarna merah darah, namun ditemukan varian pala
'Holland' yang menghasikan fuli warna gading. Biji pala memiliki endosperma
ruminat dan dipandang sebagai yang primitif diantara tumbuhan berbunga (Corner
1976).
Biji pala dan fuli merupakan produk utama pala Banda dan secara komer-
sial dipandang sebagai rempah. Pala dan fuli memiliki aroma khas pala yang
sama. Selain pala dan fuli beberapa produk lainnya juga penting. Oleoresin atau
mentega pala dan minyak atsiri adalah produk pala lainnya yang banyak
dimanfaatkan dalam industri pangan, farmasi, dan parfum.
Pala banyak diproduksi di daerah tropik, khususnya Indonesia dan Grenada.
Produksi pala dunia sekitar 12.000 ton per tahun dengan tingkat permintaan
sekitar 9.000 ton per tahun. Produksi fuli sekitar 2.000 ton. Produksi dan pangsa
pasar ekspor pala dan fuli dunia 75% dikuasai oleh Indonesia dan 25% oleh Gre-
nada. Negara lainnya yang memproduksi pala dalam jumlah relatif kecil adalah
India, Malaysia, Papua Nugini, Sri Lanka, dan Kepulauan Karibia.
Produksi pala banyak dihasilkan di pulau Siauw dan Sangihe, Sulawesi
Utara; Ambon dan Banda di Maluku; Ternate, Tidore, dan Bacan di Maluku
Utara; serta Papua. Daerah-daerah tersebut dikenal oleh dunia internasional
sebagai penghasil pala yang beraroma sangat khas dan diperdagangkan sebagai
23
pala East Indian. Grenada, di lain pihak, menghasilkan pala West Indian yang
dicirikan oleh aroma yang lebih rendah dari East Indian dan warna minyak pala
yang dihasilkan lebih pucat. Pala 'Bombay' adalah jenis West Indian yang dalam
jumlah kecil diekspor Amerika Serikat. Pasar impor utama produk pala adalah
Masyarakat Ekomomi Eropa, Amerika Serikat, Jepang, dan India. Singapura dan
Belanda adalah negara pengekspor-ulang utama. Amerika merupakan pasar pala
terbesar dan mengimpor pala terutama jenis East Indian dari Indonesia sekitar
65% dari total impor pala per tahun.
Penelitian bertujuan untuk mengkarakterisasi pala Banda dari aspek ekotipe,
morfologi tanaman, dan agronomi. Selain itu penelitian dilakukan untuk menyu-
sun suatu deskriptor yang merupakan pedoman umum pendeskripsian tanaman pa-
la.
24
BAHAN DAN METODE
Studi Morfologi dan Agronomi
Studi ekotipe pala menggunakan pendekatan karakteristik ekologi yang
mencakup tanah, fisiografi lahan, dan iklim; dan pendekatan karakteristik tanaman
pala itu sendiri khususnya karakteristik morfologi, produksi dan buah. Sampling
dilakukan di enam ekotipe di wilayah Maluku dan Maluku Utara. Di Maluku dipi-
lih tiga ekotipe: Ambon, Luhu, dan Banda; dan di Maluku Utara, sampling men-
cakup tiga ekotipe: Ternate, Tidore, dan Bacan. Sampel tanah komposit di tiga ti-
tik diambil pada daerah perakaran tanaman pala di masing-masing ekotipe.
Untuk kajian morfologi dan agronomi digunakan pohon pala produktif be-
rumur lebih dari 15 tahun sebagai bahan sampling. Di Maluku, sampling untuk
identifikasi morfologi tanaman dilakukan di tiga ekotipe: Ambon, Luhu, dan Ban-
da. Di Maluku Utara, sampel tanaman juga diambil di tiga ekotipe: Ternate, Ti-
dore, dan Bacan.
Studi morfologi tanaman dilakukan pada bulan Desember 2005 bertepatan
dengan waktu panen pala. Pada setiap lokasi dipilih enam pohon dan dari setiap
pohon masing-masing diambil sepuluh pengamatan. Karakteristik yang dipakai
sebagai penciri morfologi tanaman mengacu pada pedoman Tropical Fruit Des-
criptors (IPGRI 1980) yang dimodifikasi. Penciri dimaksud mencakup sifat-sifat
seperti tercantum dalam Tabel 3.
Pengukuran panjang, lebar, dan lingkar batang pohon memakai meteran; di-
ameter buah, biji, dan cabang dengan jangka sorong; bobot buah, biji, dan fuli
dengan neraca digital; dan warna daun, buah, biji, dan fuli dengan skala warna
Munsel Color Chart. Sifat-sifat morfologi dikarakterisasi sebagai variabel nomin-
al atau pengukuran. Variabel nominal selanjutnya diberi skor nilai untuk memu-
dahkan kuantifikasi.
Pohon-pohon pala yang produktif dan berukuran lingkar batang sekitar 25
sampai 50 cm digunakan sebagai populasi penelitian. Dalam populasi di setiap
lokasi dipilih secara acak 10 pohon, dan pada setiap pohon diambil 10 sampel
untuk pengamatan karakteristik tanaman. Untuk pengamatan produksi pala,
sampel diambil di dua elevasi yang berbeda yaitu di ketinggian 0 sampai 50 m dpl
(di atas permukaan laut) dan di 250 sampai 300 m dpl. Pengamatan produksi
25
dilakukan dua kali dalam setahun, April sampai Mei 2005 dan Desember hingga
Januari 2006.
Tabel 3 Sifat-sifat morfologi tanaman pala dan kategori pengukurannya
Sifat Morfologi Skor/Pengukuran Deskripsi Ukuran daun (indeks) Indeks Panjang daun dibagi lebar
Bentuk ujung daun 1, 2, 3, 4 1= sangat tajam; 2= tajam; 3= sedang; 4= obtus
Warna daun tua 1, 2 1= hijau; 2= hijau tua Tekstur daun 3, 5, 7 3= lunak; 5= sedang; 7= keras Sudut petiola 1, 2, 3 1= <450; 2= 450-900; 3= > 900 Tepi daun 1, 2 1= lurus; 2= bergelombang Sudut cabang primer 1, 2, 3 1= <450; 2= 450-900; 3= > 900
Bentuk pohon 1, 2, 3, 4 1= kolom; 2= piramidal; 3= obovat; 4= oval
Panjang tangkai bunga (cm) Kuantitatif Pengukuran dalam sentimeter Diameter bunga (cm) Kuantitatif Pengukuran dalam sentimeter Jumlah bunga per rangkai Kuantitatif Pengukuran diskret
Bentuk buah (ID) Oblat (1), Bulat (2), Oval (3), Agak lon-jong (4), Lonjong (5)
1= ID <1,0; 2= ID 1,0-1,15; 3= ID 1,16-1,25; 4= 1,26-1,51; 5= ≥ 1,51
Warna buah tua 1, 2, 3 1= kuning; 2= kuning kehijauan; 3= kuning kecoklatan
Bentuk ujung buah 1, 2, 3 1= tumpul; 2= bulat; 3= runcing
Bentuk pangkal buah 1, 2, 3, 4 1= cekung; 2= cembung; 3= da-tar; 4= runcing
Diameter tangkai buah (cm) Kuantitatif Pengukuran dalam sentimeter Panjang tangkai buah (cm) Kuantitatif Pengukuran dalam sentimeterWarna diskolorisasi/getah buah 1, 2 1= coklat; 2= coklat tua
Bentuk biji (ID) Oblat (1), Bulat (2), Oval (3), Agak lon-jong (4), Lonjong (5)
1= ID <1,0; 2= ID 1,0-1,15; 3= ID 1,16-1,25; 4= 1,26-1,51; 5= ≥ 1,51
Warna biji tua 1, 2 1= hitam mengkilap; 2= coklat kehitaman
Warna fuli 1, 2 1= merah darah ; 2= kuning gading
Pengukuran karakteristik tanaman meliputi produksi buah, biji, dan fuli.
Untuk mendapatkan data detail mengenai karakteristik buah, dilakukan pengujian
proksimat yang meliputi kadar air, protein, lemak, pektin, dan EP (edible portion
of flesh). Penentuan kadar air, lemak, dan pektin menggunakan metode AOAC
(AOAC 1995); dan kadar protein dengan metode semi mikro Kjeldahl dari
AOAC. Prosedur analisis proksimat buah pala adalah sebagai berikut.
1. Penentuan kadar air
26
Sekitar 5 g daging buah pala ditimbang kemudian dimasukkan ke dalam la-
bu yang berisi 60 sampai 100 ml toluen. Campuran dipanaskan di atas pemanas
listrik mulai dengan suhu rendah selama 45 menit hingga suhu tinggi selama 1
sampai 1,5 jam. Volume air yang terdistilasi kemudian dicatat. Untuk penetapan
faktor distilasi caranya sama dengan penetapan sampel, namun menggunakan
akuades 3 sampai 4 g. Faktor distilasi diperoleh dengan membagi berat air yang
didistilasi dengan volume air yang terdistilasi. Kadar air dalam bahan dihitung
dengan formula:
V adalah volume air yang terdistilasi, W bobot awal sampel, dan Fd adalah faktor
distilasi.
2. Penentuan kadar protein dengan metode Kjeldahl
Sebanyak 0,l g sampel yang telah dihaluskan dimasukkan ke dalam labu
Kjeldahl-30 ml kemudian ditambahkan 2,5 ml H2SO4 pekat, 1 g katalis dan batu
didih. Sampel dididihkan hingga cairan berubah menjadi jernih. Campuran
dipindahkan ke dalam labu destilasi yang berisi 15 ml NaOH 50% lalu dibilas
dengan air suling. Labu erlenmeyer yang berisi HCl 0,02 N diletakkan di bawah
kondensor yang sebelumnya telah diberi 2 tetes indikator (campuran metil merah
0,02% dalam alkohol dan metil biru 0,02% dalam alkohol dengan perbandingan
2:1). Ujung tabung kondensor diletakkan terendam dalam labu larutan HCl
kemudian didistilasi sampai tersisa sekitar 25 ml destilat dalam labu erlenmeyer.
Ujung kondensor dibilas dengan sedikit air destilata dan bilasannya ditampung
dalam erlenmeyer selanjutnya dititrasi dengan NaOH 0,02 N sampai terjadi
perubahan warna hijau menjadi ungu. Penetapan blanko dilakukan dengan cara
yang sama. Kadar protein bahan ditetapkan dengan rumus sebagai berikut.
Pada formula di atas, y adalah volume NaOH titer blanko, z volume NaOH titer
sampel, N normalitas NAOH, dan W bobot sampel.
V Kadar air (%) = ⎯⎯ x Fd x 100%
W
(y – z) x N x 0,014 x 6,25 Kadar protein (%) = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 100%
W
27
3. Penentuan kadar lemak
Dua gram sampel bebas air diekstraksi dengan pelarut eter dalam alat
soxhlet selama 6 jam. Hasil ekstraksi diuapkan dengan cara diangin-anginkan
kemudian dikeringkan dalam oven pada suhu 105 °C selama 1 jam. Ekstrak selan-
jutnya didinginkan dalam desikator hingga bobotnya tetap. Kadar lemak dihitung
dengan rumus:
A adalah bobot lemak (g), B bobot contoh awal (g).
4. Penentuan kadar pektin
Sebanyak 50 g sampel yang telah diparut dimasukkan ke dalam gelas piala-
500 ml yang berisi 400 ml HCl 0,05 N. Sampel dibiarkan terekstrak hingga 2 jam
pada suhu 80 sampai 90 °C. Campuran kemudian dipindahkan ke labu takar-500
ml dan diisi akuades sampai tanda tera lalu dikocok hingga merata. Ekstrak
disaring dengan kertas Whatman nomor 4 dan filtrat dimasukkan ke labu erlen-
meyer.
Untuk penetapan sampel, masing-masing aliguot dipipet 200 ml dan dima-
sukkan ke dalam gelas piala-500 ml yang berisi 250 ml akuades. Campuran dinet-
ralkan dengan penambahan NaOH 1 N dan 10 ml indikator PP NaOH 1 N sambil
diaduk kemudian dibiarkan semalam.
Sebanyak 50 ml asam asetat 1 N ditambahkan ke campuran, 5 menit ke-
mudian ditambahkan lagi 25 ml kalsium klorida 1 N, diaduk sampai merata. La-
rutan dibiarkan selama 1 jam kemudian dididihkan selama 2 menit. Larutan dis-
aring dengan kertas saring yang disegari air panas lalu dikeringkan dalam oven
102 °C selama 2 jam. Setelah didinginkan dalam desikator, ekstrak ditimbang di
dalam wadah timbangan tertutup. Endapan dicuci dengan air panas yang hampir
mendidih sampai bebas klorida (diuji dengan perak nitrat). Kertas saring yang
berisi endapan dipindahkan ke dalam wadah timbangan, dikeringkan pada suhu
100 °C semalam selanjutnya didinginkan dalam desikator lalu ditimbang. Kadar
pektin dalam bahan dihitung dengan menggunakan formula berikut.
A Kadar lemak (%) = ⎯ x 100% B
28
Pada rumus di atas, a adalah bobot kertas saring kosong, b bobot kertas saring
akhir, dan W bobot sampel awal.
Dalam penyusunan deskriptor pala digunakan pedoman yang direko-
mendasikan oleh IPGRI dengan beberapa penyesuaian. Untuk deskripsi tanah dan
karakteristiknya berpedoman pada FAO (1990), dan untuk tanaman mengacu pada
pedoman Royal Horticultural Society (1986).
Analisis Data
Kesamaan sifat morfologi antarlokasi sampling yang didasarkan pada ke-
samaan ragam atau varian diuji menggunakan uji Bartlett. Statistik Bartlett dihi-
tung dengan formula:
(Σνi) ln (ΣνiS2
,i/Σνi) - ln νi lnS2
,i B = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ 1 + {Σ (1/νi) – 1/Σνi}/{3(k-1)}
S2
,i = Σni ,j=1(Xij – X)2 / (ni –1); k adalah banyaknya sampel, dan νi = ni –1. Xij
adalah rataan pengamatan ke-i dan sifat morfologi ke-j. Indeks kesamaan antar
individu tanaman pala di enam lokasi dan di dua ekotipe digambarkan dalam
dendogram menggunakan prosedur klaster dari Minitab 13. Data produksi dan
sifat kuantitatif buah lainnya dianalisis menggunakan Anova SAS, dan uji nilai
tengah Dunnett. Uji Dunnett dihitung dengan formula sebagai berikut.
ỹi - ỹj ± |d| s √1/ni + 1/nj
Pada persamaan di atas, ỹi - ỹj adalah selisih antara rataan 1 dan 2, |d| adalah
batas atas titik ekuikoordinat pusat (r-1) ragam distribusi T Student, s adalah sim-
pangan baku, serta ni dan nj adalah banyaknya pengamatan 1 dan 2.
(b – a) Kadar pektin (%) = ⎯⎯⎯ x 100% W
29
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Karakteristik Umum Ekotipe
Daerah Maluku secara astronomis terletak pada 2,50 sampai 7,50 Lintang Se-
latan (LS) dan 126,50 sampai 132,50 Bujur Timur (BT). Luas wilayah sekitar
257.890 km2 dan 19.594 km2 diantaranya adalah daratan (BPS Maluku 2003).
Wilayah ekologi Maluku didominasi oleh fisiografi pegunungan, perbukitan tek-
tonik, vulkanik, dan karst dengan kelerengan 16 sampai 40%. Wilayah Ambon
yang terletak pada 3o32'37,9'' LS dan 128012'48,0" BT, dan Banda yang terletak
pada 4o27'11,8" LS dan 129054'39,4" BT (Tabel 5) sebagian besar tersusun dari
tanah yang berbahan induk vulkanik, sementara Luhu berbahan induk sedimen.
Iklim Maluku secara umum bertipe IIIC kecuali kepulauan Banda yang ber-
tipe IIB (deskripsi tipe iklim terdapat pada Lampiran 4). Selama 2005 wilayah
Maluku menerima rata-rata curah hujan 2.029 hingga 2.951 mm dengan suhu 22,1
sampai 31,0 0C; kelembaban 82,1 sampai 85,5%; dan penyinaran 57 hingga 59%.
Wilayah tersebut memiliki dua pola hujan yaitu fluaktutif (multiple wave) dan
ganda (double wave).
Tabel 4 Letak astronomi lokasi sampling di Maluku dan Maluku Utara
Maluku Posisi Lintang dan Bujur
LS/LU BT 1. Ambon 3o32'37,9'' LS 128012'48,0" 2. Banda 4o27'11,8" LS 129054'39,4" 3. Luhu 3o23'01,6" LS 127058'17,4" Maluku Utara 4. Ternate 02023'04,6" LU 126033'23,5" 5. Tidore 02016'04,6" LU 126034'23,5" 6. Bacan 0030'21,4" LU 129003'01,2"
Semnetara itu, Maluku Utara yang terletak pada 30 LU dan 30 LS dan 124
sampai 1290 BT merupakan wilayah atau ekotipe yang dicirikan oleh tanah yang
tersusun dari bahan induk sedimen dan plutonik. Wilayah tersebut didominasi
oleh fisiografi perbukitan/pegunungan vulkan, tektonik, dan karst dengan kemi-
ringan 10 hingga 45%. Iklim Maluku Utara tergolong tipe IIIC (Tidore dan Ba-
30
Iklim Banda, tahun 2005(Elevasi 0-50 m dpl)
0
5
10
15
20
25
30
35
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Bulan
Suhu
( 0C
)
72
74
76
78
80
82
84
86
RH
(%)
Suhu min.
Suhu maks.
RH
Iklim Ambon, Tahun 2005(Elevasi 0-50 m dpl)
0.05.0
10.015.020.025.030.035.0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12Bulan
Suhu
(0C
)
65.0
70.0
75.0
80.0
85.0
90.0
RH
(%)
Suhu maks.
Suhu min.
RH
Iklim Luhu, Tahun 2005(Elevasi 0-50 m dpl)
05
1015
2025
3035
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12Bulan
Suhu
(0C
)
7980818283848586878889
RH
(%)
Suhu maks.
Suhu min.
RH
can) dan IVB (Ternate) dengan dua pola hujan, ganda dan fluktuatif. Sebagian
besar wilayah Maluku dan Maluku Utara berdrainase baik dengan sistem perta-
nian yang didominasi hutan produksi.
Gambaran kondisi iklim selama penelitian tampak pada Gambar 4 dan Tabel
6. Ekotipe Banda memiliki rata-rata jumlah curah hujan dan hari hujan per tahun
masing-masing 2.541 mm dan 197 hari. Suhu udara berkisar antara 31,1 dan 23,0 0C dengan rata-rata 28,2 0C, dan kelembaban udara sekitar 81% dengan tingkat
penyinaran matahari 57,6%. Karakteristik iklim ekotipe Ambon diwarnai dengan
jumlah curah hujan dan hari hujan masing-masing sebesar 2.951 mm dan 218 hari
per tahun. Suhu udara antara 30,1 dan 23,6 0C dengan rata-rata 26,3 0C.
Sementara ekotipe Luhu memiliki iklim dengan jumlah dan hari hujan per tahun
lebih sedikit daripada Banda dan Ambon, yaitu masing-masing 2.029 mm dan 165
hari.
Gambar 4 Kondisi suhu dan kelembaban di Banda, Ambon, dan Luhu tahun 2005.
31
Tabel 5 Kondisi iklim lokasi penelitian di Maluku tahun 2005
Ekotipe C. Hujan (mm) H. Hujan (hari) Suhu (0C) Penyinaran (%)Banda 1. Januari 255,4 20,0 27,8 55,02. Februari 167,8 18,0 28,0 48,73. Maret 238,8 16,3 27,7 60,34. April 225,2 21,0 27,4 53,05. Mei 472,6 21,0 27,6 57,06. Juni 421,2 25,3 26,6 48,57. Juli 126,6 16,3 26,1 60,38. Agustus 28,5 7,5 26,1 70,39. September 68,6 12,3 27,0 64,5
10. Oktober 57,9 8,0 28,1 68,611. Nopember 194,2 10,0 28,4 60,312. Desember 285,3 21,5 28,2 45,0
Jumlah 2541,8 197,2 Rataan 211,8 16,4 27,4 57,6
Ambon 1. Januari 143,7 16,4 28,0 55,42. Februari 113,6 15,9 27,3 61,93. Maret 156,1 18,7 26,9 63,44. April 233,1 20,3 26,5 61,45. Mei 395,0 23,7 26,0 49,66. Juni 487,2 23,9 25,5 41,87. Juli 561,4 25,0 24,9 33,08. Agustus 373,4 22,0 24,8 47,89. September 138,1 12,6 25,4 58,8
10. Oktober 114,8 13,3 26,2 68,711. Nopember 89,3 8,8 26,8 77,212. Desember 145,2 17,4 27,3 62,6
Jumlah 2951,0 218,0 Rataan 245,9 18,2 26,3 56,8
Luhu 1. Januari 148,6 15,0 31,8 63,12. Februari 109,5 14,6 32,0 60,53. Maret 133,7 15,9 31,7 66,54. April 151,5 15,2 31,5 60,05. Mei 233,8 18,6 31,0 57,86. Juni 300,0 21,3 30,1 40,27. Juli 233,1 17,0 29,7 48,58. Agustus 208,0 14,9 29,5 56,59. September 131,2 12,7 30,0 61,6
10. Oktober 141,7 11,7 31,0 64,511. Nopember 99,6 12,3 31,6 67,912. Desember 138,7 15,8 31,8 60,3
Jumlah 2029,4 185,0 Rataan 169,1 15,4 31,0 59,0
32
Iklim Ternate, Tahun 2005(Elevasi 0-50 m dpl)
0.05.0
10.015.020.025.030.035.0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12Bulan
Suhu
(0C
)
84.085.086.087.088.089.090.091.0
RH
(%)
Suhu maks.
Suhu min.
RH
Tabel 6 Kondisi iklim lokasi penelitian di Maluku Utara tahun 2005
Ekotipe C. Hujan (mm) H. Hujan (hari) Suhu (0C) Penyinaran (%)Maluku Utara 1. Januari 272,0 21,0 26,5 56,52. Februari 220,6 17,4 26,5 43,03. Maret 216,4 21,6 26,8 45,54. April 187,2 19,0 27,1 55,55. Mei 275,8 18,4 26,7 61,06. Juni 192,0 18,4 26,6 68,57. Juli 109,2 11,2 26,4 58,58. Agustus 76,0 11,0 26,1 68,59. September 65,6 11,0 26,2 55,0
10. Oktober 210,8 14,4 26,4 71,011. Nopember 213,8 20,4 27,3 61,512. Desember 327,8 20,0 26,7 48,5
Jumlah 2.367,2 203,8 Rataan 197,3 17,0 26,6 57,8
Kondisi iklim Maluku Utara yang diwakili oleh Ternate (Tabel 6 dan Gam-
bar 5) dicirikan oleh hujan tahunan sebesar 2.367 mm dengan lama hujan sekitar
204 hari. Suhu udara berkisar 22,4 sampai 30,4 0C dengan rata-rata 26,6 0C. Wi-
layah Maluku Utara dalam setahun menerima penyinaran matahari 57,6% dan ke-
lembaban udara 88,3%. Data iklim daerah Tidore dan Bacan diwakili pengamatan
pada stasiun klimatologi Ternate, Maluku Utara.
Gambar 5 Pola suhu dan kelembaban di Ternate, Maluku Utara.
Kondisi tanah/kesuburan Maluku dan Maluku Utara dicirikan oleh karakte-
ristik fisik dan kimia seperti pada Tabel 7. Tanah di daerah Maluku tergolong
lempung berpasir dan lempung berdebu dengan pH berkisar 6,53 dan 7,60.
33
Kandungan bahan organik 1,42 hingga 2,74%; N-total 0,14 sampai 0,22%; dan
kadar P antara 5,3 sampai 9,8 ppm. Tanah memiliki sifat kimia kapasitas tukar
kation (KTK) antara 33,77 dan 17,80 me/100 g; dan kejenuhan basa (KB) 74,2
sampai 100%. Karakteristik tanah Maluku lainnya adalah memiliki daya hantar
listrik (DHL) 141,6 hingga 302,0 μS/cm dengan kandungan kation Al yang tidak
terdeteksi.
Sementara itu, tanah di daerah Maluku Utara memperlihatkan sifat fisik
lempung berpasir dengan pH 7,02 sampai 7,76. Kandungan bahan organik
berkisar 0,93 sampai 1,34%; N total berkisar 0,10 sampai 0,13%; dan kadar P
sekitar 4,4 sampai 5,6 ppm. Selain itu, tanah Maluku Utara mempunyai KTK 6,78
sampai 15,89 me/100 g, dan KB 100%. Kandungan kation Al tanah tidak terde-
teksi.
Pengamatan lapangan selanjutnya menunjukkan bahwa areal pertanaman
pala di Maluku hampir seluruhnya dikelola oleh masyarakat dalam bentuk perke-
bunan rakyat/tradisional. Pertanaman Pala di Kepulauan Banda dikelola secara
bersama antara petani dan Pemda setempat melalui sistem bagi hasil. Pemda
merupakan pihak pemilik lahan dan tanaman, sementara petani sebagai pengelola
dan buruh petik. Tidak seperti di Maluku, pertanaman pala di Maluku Utara
sepenuhnya dimiliki dan dikelola oleh petani dalam bentuk perkebunan rakyat
dengan tingkat pengelolaan tradisional. Pengamatan lapangan lainnya menun-
jukkan bahwa pertanaman pala di Maluku terletak diantara pohon pelindung
dengan proporsi 10 sampai 15% dari populasi pala. Pada ekotipe Banda, pohon
pelindung tanaman pala terutama adalah pohon kenari dan sedikit pohon kelapa,
dan durian. Sementara di Ambon dan Luhu pohon pelindung umumnya adalah
pohon kelapa dan durian. Tanaman pelindung bertajuk lebar lainnya seperti
mangga dan pohon kayu-kayuan juga dijumpai dalam proporsi yang kecil. Di Ma-
luku Utara, tanaman pala umumnya terdapat di antara naungan pohon kelapa, dan
sebagian kecil pertanaman pala menggunakan pohon pelindung tanaman buah-
buahan yang bertajuk lebar seperti pohon durian.
Pertanaman pala di Maluku dan Maluku Utara terdapat pada lanskap perbu-
kitan hingga pegunungan dengan kemiringan lereng 10 sampai 45% dan dari ke-
tinggian 5 hingga 500 m dpl. Areal pala di Banda, Ambon, dan Luhu sebagian
34
Tabel 7 Sifat fisik dan kimia tanah lokasi penelitian
Lokasi/Ekotipe pH 1:1
C-Org. N-Total P DHL Ca Mg K Na KTK KB Al H
Tekstur Kelas Tekstur H2O KCl
Pasir Debu Liat (%)† (%)‡ (ppm)* (uS/cm) (me/100 g) (%) (me/100 g) (%)
Maluku
1. Ambon 7,28 6,41 1,42 0,14 5,3 156,4 11,12 1,60 0,19 0,30 17,80 74,21 tr 0,04 62,27 22,38 15,35 Lempung Berpasir
2. Banda 6,53 5,45 2,22 0,20 9,8 141,6 14,00 4,46 1,38 0,95 13,77 100 tr 0,04 46,84 36,10 17,06 Lempung Berdebu
3. Luhu 7,60 6,83 2,74 0,22 5,9 302,0 31,54 5,81 0,76 0,50 15,89 100 tr 0,04 60,96 21,43 17,61 Lempung Berpasir
Maluku Utara
4. Ternate 7,40 6,57 0,93 0,10 4,4 143,5 6,02 1,63 0,13 0,21 6,78 100 tr 0,04 53,29 34,41 12,30 Lempung Berpasir
5. Tidore 7,76 6,83 1,10 0,10 5,6 285,0 24,44 1,42 0,76 0,30 15,89 100 tr 0,04 65,22 15,58 19,20 Lempung Berpasir
6. Bacan 7,02 6,30 1,34 0,13 5,3 137,3 9,61 1,71 0,38 0,43 8,26 100 tr 0,04 64,48 25,13 10,39 Lempung Berpasir
† Walkley dan Black; ‡ Kjeldhal * Bray I. tr tidak terdeteksi.
35
besar terletak di lereng-lereng gunung yang menghadap ke laut dan berjarak 10
sampai 400 m dari tepi pantai. Sementara areal pala di Ternate, Tidore, dan Ba-
can terdapat di lanskap pegunungan yang jaraknya sekitar beberapa kilometer dari
tepi pantai. Pertanaman pala di Maluku Utara terletak mulai dari ketinggian 20 m
hingga 500 m dpl. Maluku dan Maluku Utara adalah daerah pegunungan yang
langsung menghadap ke laut sehingga pengaruh angin laut memberi kontribusi
tersendiri terhadap pertumbuhan dan perkembangan tanaman pala.
Sistem pertanian perkebunan rakyat merupakan pola budidaya pala yang
hampir seluruhnya dipraktekkan oleh petani baik di Maluku maupun di Maluku
Utara. Di Maluku, pala ditanam di antara pohon pelindung dengan jarak tanam
yang bervariasi dan relatif tidak teratur. Jarak antar baris beragam dari 5 sampai 7
m dan dalam baris antara 5 sampai 8 m.
Pengelolaan perkebunan pala di Maluku dan Maluku Utara sangat minimal
dan bersifat tradisional, tanpa input pupuk kimia dan tindakan pengendalian
hama/penyakit. Praktek budidaya yang diterapkan sebatas pada pembersihan
kebun dari gulma dan pemangkasan cabang pohon-pohon pelindung. Kegiatan
panen dan pasca panen juga dilaksanakan menurut cara-cara tradisional petani
yang telah dipraktekkan turun-temurun.
Panen dilakukan dua hingga tiga kali setahun setelah buah mencapai umur 6
sampai 9 bulan setelah berbunga, tetapi tidak jelas batas antara musim panen
pertama dan kedua sebab pohon pala berbunga dan berbuah sepanjang tahun.
Kegiatan pasca panen mencakup pengeringan biji pala berbatok dan fuli segar di
bawah sinar matahari atau pengasapan menggunakan tungku. Pengasapan terbatas
untuk hasil biji pala. Biji pala tanpa batok dan fuli kering dengan kadar air sekitar
10-15% dicapai setelah penjemuran sinar matahari selama 1 sampai 2 minggu.
Sebagian petani di Banda mengeringkan biji pala di atas tungku pengasapan.
Pengeringan dengan pengasapan diselesaikan dalam waktu 3 sampai 5 hari. Biji
pala yang dikeringkan dengan pengasapan menghasilkan pala dengan daya simpan
lebih lama jika dibandingkan dengan pengeringan matahari, tetapi cara demikian
memerlukan tambahan biaya untuk pembuatan tungku dan bahan bakar. Sebagian
perkebunan di pulau Banda yang dikelola swasta memanfaatkan sistem penge-
ringan pala dengan pengasapan.
36
Karakteristik Morfologi Pala
Sebanyak 21 sifat morfologi yang terdiri atas 18 variabel ordinal dan 4
variabel pengukuran diamati dan diskor/diukur pada 10 pengamatan pada 6 lokasi
di Maluku dan Maluku Utara (Tabel 8).
Tabel 8 Sifat morfologi tanaman pala dan skor pengukurannya
Lokasi/Ekotipe Sifat Morfologi Skor/Pengukuran Maluku: Banda
Ukuran daun (indeks) 2,49 2,53 2,53 2,56 2,81 2,63 2,61 2,15 2,37 2,50Bentuk ujung daun 3 3 2 2 2 2 3 2 2 2Warna daun tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Tekstur daun 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 Sudut petiola 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Tepi daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Sudut cabang primer 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Bentuk pohon 2 2 1 3 2 2 2 2 2 2 Panjang tangkai bunga (cm) 1,2 0,8 1,9 1,5 1,8 1,6 1,8 1,7 1,4 1,8Diameter bunga (cm) 0,43 0,41 0,39 0,46 0,51 0,42 0,46 0,5 0,44 0,48Jumlah bunga per rangkai 1 1 1 3 1 2 2 2 2 3 Bentuk buah (ID) 1,17 1,10 1,22 1,21 1,06 1,21 1,18 1,11 1,14 1,21Warna buah tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Bentuk ujung buah 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Bentuk pangkal buah 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Diameter tangkai buah (cm) 0,25 0,24 0,25 0,25 0,3 0,2 0,25 0,2 0,15 0,11Panjang tangkai buah (cm) 2,2 2,3 1 2 2,5 2,3 2,7 2,7 2,2 2,3Warna diskolorisasi buah 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1Bentuk biji (ID) 1,25 1,30 1,29 1,13 1,14 1,23 1,25 1,63 1,35 1,05Warna biji tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Warna fuli 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Ambon
Ukuran daun (indeks) 2,35 2,89 1,82 2,13 1,93 2,33 3,16 2,28 3,06 2,54Bentuk ujung daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1Warna daun tua 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 Tekstur daun 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 Sudut petiola 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Tepi daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Sudut cabang primer 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Bentuk pohon 2 2 2 2 3 3 3 2 1 2 Panjang tangkai bunga (cm) 1,3 1,8 1,6 1,6 1,5 1,1 1,9 1,8 1,9 1,7Diameter bunga (cm) 0,41 0,47 0,46 0,45 0,45 0,51 0,48 0,51 0,49 0,49Jumlah bunga per rangkai 2 1 1 1 3 2 1 2 2 1 Bentuk buah (ID) 1,02 1,03 1,27 1,24 1,27 1,26 1,29 1,24 1,27 1,26Warna buah tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
37
Lokasi/Ekotipe Sifat Morfologi Skor/Pengukuran Bentuk ujung buah 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Bentuk pangkal buah 3 3 3 3 3 4 3 3 3 4Diameter tangkai buah (cm) 0,22 0,2 0,21 0,2 1,6 0,2 0,24 0,2 0,15 0,15Panjang tangkai buah (cm) 1,7 2,4 1,9 2,3 1,8 2 2,1 2,1 2,1 2 Warna diskolorisasi buah 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Bentuk biji (ID) 1,09 1,10 1,14 1,14 1,14 1,30 1,35 1,09 1,19 1,32Warna biji tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1Warna fuli 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Luhu
Ukuran daun (indeks) 2,13 2,15 2,21 2,46 2,39 2,28 2,43 2,44 2,35 2,30Bentuk ujung daun 1 1 2 1 2 2 2 2 1 1Warna daun tua 1 1 1 1 2 1 2 1 1 1 Tekstur daun 5 5 5 5 5 7 5 5 5 5Sudut petiola 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Tepi daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Sudut cabang primer 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Bentuk pohon 2 2 1 2 2 2 3 3 1 3 Panjang tangkai bunga (cm) 0,8 0,9 0,7 1,2 1,2 0,9 1,7 1,4 1 1,8Diameter bunga (cm) 0,42 0,42 0,46 0,43 0,51 0,5 0,4 0,4 0,46 0,45Jumlah bunga per rangkai 2 1 1 2 1 2 2 1 2 2 Bentuk buah (ID) 1,20 1,20 1,20 1,21 1,21 1,18 0,91 1,16 1,21 1,16Warna buah tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Bentuk ujung buah 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Bentuk pangkal buah 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Diameter tangkai buah (cm) 0,21 0,21 0,22 0,2 0,15 0,15 0,23 0,21 0,15 0,2Panjang tangkai buah (cm) 1,9 2 1,9 1,5 1,8 1,6 2 1,7 1,8 2,1Warna diskolorisasi buah 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Bentuk biji (ID) 1,14 1,16 1,17 1,10 1,18 1,15 1,14 1,18 1,14 1,18Warna biji tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1Warna fuli 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Maluku Utara: Ternate
Ukuran daun (indeks) 2,86 2,89 2,80 2,84 3,03 2,78 3,14 2,70 3,04 2,70Bentuk ujung daun 1 1 2 1 1 2 1 1 1 1 Warna daun tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 Tekstur daun 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5Sudut petiola 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Tepi daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Sudut cabang primer 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Bentuk pohon 1 1 2 2 3 3 1 1 3 3 Panjang tangkai bunga (cm) 1,6 1,8 1,7 1,9 2 1,8 2,3 2,3 1,9 1,5Diameter bunga (cm) 0,41 0,5 0,51 0,5 0,42 0,4 0,4 0,46 0,52 0,48Jumlah bunga per rangkai 2 1 2 1 1 1 2 3 1 2 Bentuk buah (ID) 1,20 1,14 1,17 1,08 1,18 1,23 1,25 1,25 1,20 1,25Warna buah tua 1 1 3 1 1 1 1 3 1 1
38
Lokasi/Ekotipe Sifat Morfologi Skor/Pengukuran Bentuk ujung buah 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Bentuk pangkal buah 3 4 4 4 3 4 4 4 4 4Diameter tangkai buah (cm) 0,21 0,21 0,2 0,24 0,2 0,31 0,28 0,21 0,2 0,16Panjang tangkai buah (cm) 2,2 2,3 2,5 2,3 2,7 2,2 2,5 2,5 2,3 1,7Warna diskolorisasi buah 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Bentuk biji (ID) 1,42 1,28 1,43 1,39 1,41 1,39 1,37 1,38 0,89 0,90Warna biji tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1Warna fuli 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Tidore
Ukuran daun (indeks) 3,12 2,96 2,63 2,88 3,18 3,02 2,93 2,81 2,84 2,74Bentuk ujung daun 2 2 2 1 1 2 1 1 1 1Warna daun tua 2 1 1 1 2 1 1 1 1 1 Tekstur daun 5 5 7 7 5 5 5 5 5 7Sudut petiola 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Tepi daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Sudut cabang primer 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Bentuk pohon 2 2 2 2 3 2 2 2 3 2 Panjang tangkai bunga (cm) 0,8 1,2 1,3 0,8 1,1 1,6 1,8 1,8 1,4 1,5Diameter bunga (cm) 0,46 0,49 0,47 0,46 0,45 0,5 0,46 0,46 0,44 0,41Jumlah bunga per rangkai 1 2 2 1 2 1 2 1 2 1 Bentuk buah (ID) 1,08 1,18 1,23 1,25 1,25 1,20 1,24 1,25 1,25 1,25Warna buah tua 1 1 1 2 1 1 1 2 1 1 Bentuk ujung buah 2 2 2 2 2 2 2 1 2 2 Bentuk pangkal buah 3 3 4 4 3 4 3 3 3 4Diameter tangkai buah (cm) 0,3 0,32 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,21 0,15 0,24Panjang tangkai buah (cm) 1,6 2,9 2,7 2,7 2,4 2,4 2 2,3 1,8 2,1Warna diskolorisasi buah 1 1 1 1 1 1 1 2 1 1 Bentuk biji (ID) 1,43 1,39 1,41 1,39 1,37 1,40 1,31 1,50 1,30 1,52Warna biji tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1Warna fuli 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Bacan
Ukuran daun (indeks) 2,17 2,08 2,04 2,13 2,16 1,95 1,98 2,24 2,21 1,89Bentuk ujung daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Warna daun tua 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 Tekstur daun 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5Sudut petiola 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Tepi daun 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Sudut cabang primer 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3Bentuk pohon 2 2 2 3 3 3 3 2 3 2 Panjang tangkai bunga (cm) 0,8 0,7 0,6 1,5 1,5 1,6 1,7 2,1 2 2 Diameter bunga (cm) 0,44 0,46 0,48 0,4 0,41 0,4 0,5 0,45 0,46 0,46Jumlah bunga per rangkai 2 2 1 2 1 2 1 2 1 1 Bentuk buah (ID) 1,16 1,23 1,24 1,29 1,31 1,12 1,09 1,19 1,09 1,15Warna buah tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
39
Lokasi/Ekotipe Sifat Morfologi Skor/Pengukuran Bentuk ujung buah 2 2 2 2 2 2 2 3 2 2 Bentuk pangkal buah 3 3 3 4 3 3 4 4 3 3Diameter tangkai buah (cm) 0,2 0,2 0,15 0,14 0,18 0,2 0,24 0,23 0,21 0,21Panjang tangkai buah (cm) 1,4 1,4 1,4 2,2 1,7 2,1 2,3 2,5 2,2 2,4Warna diskolorisasi buah 1 1 1 1 2 1 1 2 1 1 Bentuk biji (ID) 1,25 1,25 1,22 1,24 1,23 1,24 1,19 1,20 1,19 1,20Warna biji tua 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1Warna fuli 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Berdasarkan uji ragam Bartlett skor/pengukuran sifat morfologi diketahui
bahwa keragaman pala ekotipe Banda secara statistik tidak berbeda nyata dengan
pala ekotipe lainnya, kecuali indeks ukuran daun, warna buah tua, bentuk pangkal
buah, dan panjang tangkai buah (Tabel 9).
Tabel 9 Uji ragam Bartlett karakter morfologi pala Banda
Sifat Morfologi Keragaman (S2) Bartlett's
Test Maluku Maluku Utara Banda Ambon Luhu Ternate Tidore Bacan
Indeks ukuran daun 0,030 0,211 0,015 0,022 0,028 0,014 * Bentuk ujung daun 0,100 0,178 0,233 0,100 0,000 0,178 tn Warna daun tua 0,100 0,178 0,233 0,100 0,000 0,178 tn Tekstur daun 0,000 0,000 0,400 0,000 0,933 0,000 tn Sudut petiola 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 tn Tepi daun 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 tn Sudut cabang primer 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 tn Bentuk pohon 0,222 0,400 0,544 0,889 0,178 0,278 tn Panjang tangkai bunga 0,116 0,068 0,140 0,071 0,131 0,314 tn Diameter bunga 0,002 0,001 0,001 0,002 0,001 0,001 tn Jum. bunga per rangkai 0,622 0,489 0,267 0,489 0,278 0,278 tn Bentuk buah 0,003 0,010 0,008 0,003 0,003 0,006 tn Warna buah tua 0,000 0,000 0,000 0,711 0,178 0,000 * Bentuk ujung buah 0,000 0,000 0,000 0,000 0,100 0,100 tn Bentuk pangkal buah 0,000 0,178 0,000 0,178 0,267 0,233 * Diameter tangkai buah 0,003 0,198 0,001 0,002 0,003 0,001 tn Panjang tangkai buah 0,233 0,045 0,036 0,073 0,174 0,194 * Warna diskol. buah 0,000 0,000 0,000 0,000 0,100 0,178 tn Bentuk biji 0,025 0,010 0,001 0,044 0,005 0,001 tn Warna biji tua 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 tn Warna fuli 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 tn
Ket: * berbeda nyata pada α = 0,05; tn tidak berbeda nyata.
40
Warna biji dan fuli secara statistik tidak berubah secara nyata di semua
ekotipe. Beberapa karakter seperti bentuk ujung dan pangkal buah, dan bentuk
pohon cenderung bervariasi antar ekotipe.
Berdasarkan analisis klaster 21 karakter morfologi pada 60 tanaman sampel
diperoleh tiga varian pala Banda masing-masing dengan 54, 4, dan 2 anggota
tanaman. Ketiga klaster berikut jarak sentroid masing-masing klaster tampak
pada Tabel 10. Varian pertama ditemukan di enam ekotipe (90%), varian kedua di
ekotipe Tidore dan Luhu (7%), dan varian ketiga di ekotipe Ternate (3%).
Tabel 10 Klaster dan jarak sentroid karakter morfologi tanaman pala
Klaster Banyaknya pengamatan
Jarak rata-rata dari sentroid
Jarak maksimun dari sentroid
Klaster 1 54 1,384 2,277 Klaster 2 4 1,097 1,345 Klaster 3 2 0,919 0,919
Dendogram ketiga klaster atau kelompok populasi pala menurut karakter
morfologinya tampak pada Gambar 6. Jarak rata-rata klaster 1, 2, dan 3 terhadap
sentroid adalah masing-masing 1,384; 1,097; dan 0,919.
50444326 5855565754525121241118475322601413124930529311959351732342046361042896744016392737452821234125348153833
44
63
81
100
Indeks Kesamaan
Nomor pengamatan (pohon)
Gambar 6 Dendogram sifat morfologi tanaman pala Banda.
41
Pengamatan terhadap tinggi pohon, jumlah cabang, dan lingkar batang pala
menunjukkan adanya korelasi. Pada Tabel 11 tampak tinggi pohon berkorelasi
negatif dengan jumlah cabang, tetapi hubungan tersebut tidak signifikan. Korelasi
serupa terjadi antara lingkar batang dan jumlah cabang. Terhadap tinggi pohon
dan lingkar batang, terdapat korelasi yang signifikan pada pengamatan di Banda
dan Ambon, tetapi tidak di Luhu.
Pala Maluku Utara menunjukkan adanya korelasi negatif antara lingkar
batang dan jumlah cabang (Ternate dan Bacan). Yang terakhir disebut korelasinya
signifikan. Korelasi yang signifikan terjadi pada pengamatan di Bacan antara
tinggi pohon dan jumlah cabang, dan antara lingkar batang dan jumlah cabang
(keduanya korelasi negatif), serta antara tinggi pohon dan lingkar batang (korelasi
positif).
Tabel 11 Koefisien korelasi tinggi pohon, jumlah cabang, dan lingkar batang pohon pala Banda Maluku
Banda Ambon Luhu X1 X2 X1 X2 X1 X2 X2 -0,78 tn
(0,830) - X2 -0,04 tn
(0,919) - X2 -0,44 tn
(0,209) -
X3 0,83** (0,003)
-0,24 tn (0,506)
X3 0,98** (<1%)
-0,11 tn (0,754)
X3 0,89 tn (0,001)
-0,63 tn (0,051)
Ket.: X1 = tinggi pohon, X2 = jumlah cabang, X3 = lingkar batang. Angka dalam kurung adalah nilai peluang nyata.
Tabel 12 Koefisien korelasi tinggi pohon, jumlah cabang, dan lingkar batang pohon pala Banda Maluku Utara Ternate Tidore Bacan X1 X2 X1 X2 X1 X2 X2 0,22 tn
(0,541) - X2 0,49 tn
(0,153)- X2 -0,78**
(0,007) -
X3 0,22 tn (0,546)
-0,18 tn (0,624)
X3 0,29 tn (0,406)
0,29 tn (0,417)
X3 0,64* (0,048)
-0,64* (0,047)
Ket.: X1 = tinggi pohon, X2 = jumlah cabang, X3 = lingkar batang. Angka dalam kurung adalah nilai peluang nyata.
Pengamatan lainnya menunjukkan bahwa terdapat hubungan yang signifikan
(nilai P < 0,05) antara produksi buah dengan tinggi pohon, jumlah cabang, dan
lingkar batang, kecuali pengamatan di ekotipe Ternate. Bentuk hubungan yang
42
dinyatakan dalam persamaan regresi tampak pada Tabel 13. Persamaan regresi
secara umum mengindikasikan bahwa tinggi pohon dan jumlah cabang ber-
kontribusi secara nyata dan positif terhadap produksi buah; sedangkan produksi
dan lingkar batang korelasinya tidak tegas (positif atau negatif). Variasi model
yang ditunjukkan oleh koefisien determinasi R2 yang nyata yang berkisar antara
71,8 dan 95,6%.
Untuk pala Maluku, tinggi pohon dan lingkar batang secara signifikan tidak
menentukan variasi produksi pala, tetapi jumlah cabang nyata berpengaruh.
Untuk Maluku Utara, terjadi korelasi dengan pola serupa, kecuali di ekotipe Ba-
can yang produksi palanya dipengaruhi secara nyata oleh tinggi pohon. Ber-
dasarkan analisis korelasi juga diketahui bahwa jumlah cabang nyata menentukan
variasi produksi pala pada enam ekotipe.
Tabel 13 Regresi produksi buah (Y) terhadap tinggi pohon (X1), jumlah cabang (X2), dan lingkar batang (X3) pala
Maluku Persamaan regresi P R2 (%)
Banda Ybanda = 1759 - 34,3 X1 + 14,4 X2 + 2,41 X3 0,01 74,4*
Ambon Yambon = 2138 + 55,4 X1 + 5,68 X2 - 19,5 X3 0,004 81,6*
Luhu Yluhu = - 598 - 8,0 X1 + 29,3 X2 + 2,17 X3 0,002 85,9*
Maluku Utara Ternate Yternate = 811 + 25,4 X1 + 9,84 X2 - 1,01 X3 0,014 71,8*
Tidore Ytidore = 565 + 9 X1 + 12,1 X2 + 2,73 X3 0,002 84,2*
Bacan Ybacan = - 263 + 17,4 X1 + 23,3 X2 - 0,83 X3 < 1% 95,6*
Ket: * signifikan pada α = 0,05.
Produksi Pala
Pengamatan produksi pala mencakup jumlah buah, bobot buah, dan bobot
fuli di dua elevasi, 0 sampai 50 m dpl (elevasi 1) dan 250 sampai 300 m dpl (ele-
vasi 2). Tabel 14 menunjukkan jumlah dan bobot buah pada kedua elevasi tidak
berbeda nyata. Pada dua elevasi, produksi buah pala ekotipe Banda berbeda dari
ekotipe lainnya, kecuali ekotipe Luhu pada elevasi 2.
Pada produksi biji terdapat perbedaan terutama bobot kering antara elevasi 1
dan 2 di semua ekotipe kecuali Bacan (Tabel 15). Dalam bobot biji segar kedua
43
Tabel 14 Rata-rata produksi buah pala Banda menurut ekotipe di dua elevasi
Lokasi Ekotipe Jumlah (buah/pohon) Bobot (kg/pohon) elev.1 elev.2 elev.1 elev.2
Maluku
Banda
2.648a
,2.336
a , 167,16
a , 147,67
a ,
Ambon 2.145a
,* 1.820a
,* 100,65a
,* 85,24a
,*
Luhu 2.109a
,* 2.111a
,tn 120,21a
,* 118,43a
,*
Maluku Utara
Ternate 1.720a
,* 1.631a
,* 73,35a
,* 69,50a
,*
Tidore 1.764a
,* 1.795a
,* 70,68a
,* 71,95a
,*
Bacan 1.814a
,* 1.794a
,* 89,17a
,* 88,11a
,* Dunnett 335,04 357,34 28,24 26,37
Ket.: Angka pada elev. 1 dan elev. 2 dengan huruf sama tidak berbeda nyata dengan uji T0,05. * berbeda nyata dengan uji Dunnett 0,05 (angka-angka sekolom dibandingkan dengan
Banda); tn tidak berbeda nyata.
elevasi sama, ke ekotipe Ambon. Pada tabel juga tampak bobot segar pala ekotipe
Banda sama dengan ekotipe lainnya kecuali ekotipe Ambon pada elevasi 2. Da-
lam bobot kering, secara statistik tidak ada perbedaan antara pala ekotipe Banda
dengan ekotipe lainnya kecuali Bacan.
Tabel 15 Rata-rata produksi biji pala menurut ekotipe di dua elevasi
Lokasi Ekotipe Bobot segar (kg/pohon) Bobot kering kg/pohon)elev.1 elev.2 elev.1 elev.2
Maluku
Banda 23,58a
, 20,75a
, 13,99a
, 12,27b
,
Ambon 16,19a
,* 13,80b
,* 9,60a
,* 8,18b
,*
Luhu 15,44a
,* 15,56a
,* 9,16a
,* 9,22b
,*
Maluku Utara
Ternate 10,68a
,* 10,12a
,* 6,33a
,* 6,00b
,*
Tidore 10,59a
,* 10,66a
,* 6,28a
,* 6,34b
,*
Bacan 12,62a
,* 12,52
a ,* 7,48
a ,* 7,43
a ,*
Dunnett 3,67 3,68 2,18 2,18 Ket.: Angka pada elev. 1 dan elev. 2 dengan huruf sama tidak berbeda nyata dengan uji T0,05. * berbeda nyata dengan uji Dunnett 0,05 (angka-angka sekolom dibandingkan dengan Banda);
tn tidak berbeda nyata.
44
Produksi fuli antara elevasi 1 dan 2 secara statistik tidak berbeda di semua
ekotipe kecuali Bacan. Di ekotipe Bacan produksi fuli (bobot kering) pada elevasi
0 sampai 50 m dpl lebih tinggi daripada elevasi 250 sampai 300 m dpl (Tabel 16).
Selain ekotipe Luhu semua ekotipe lainnya memperlihatkan perbedaan dalam
produksi fuli dengan ekotipe Banda.
Tabel 16 Rata-rata produksi fuli pala menurut ekotipe
Lokasi Ekotipe Bobot basah (kg/pohon) Bobot kering (kg/pohon)elev.1 elev.2 elev.1 elev.2
Maluku
Banda 4,60a
, 4,17a
, 2,51a
, 2,28a
,
Ambon 2,94a
,* 2,53
a ,*
1,61a
,* 1,39
a ,*
Luhu 3,83a
,tn 3,78
a ,tn
2,10a
,tn 2,07
a ,tn
Maluku Utara
Ternate 1,32a
,* 1,26
a ,*
0,72a
,* 0,69
a ,*
Tidore 1,25a
,* 1,27
a ,*
0,69a
,* 0,70
a ,*
Bacan 2,10a
,* 2,07
a ,*
1,15a
,* 1,13
b ,*
Dunnett 1,39 1,287 0,63 0,64 Ket.: Angka pada elev. 1 dan elev. 2 dengan huruf sama tidak berbeda nyata dengan uji T0,05. * berbeda nyata dengan uji Dunnett 0,05 (angka-angka sekolom dibandingkan dengan Banda);
tn tidak berbeda nyata.
Berdasarkan kriteria pada Lampiran 1, IDbuah dan IDbiji pala Banda tidak
menunjukkan variasi yang berarti, yaitu semuanya berbentuk oval (Tabel 17). ID,
yaitu nisbah antara diameter panjang terbesar dengan diameter lebar terbesar
buah/biji stabil di enam ekotipe.
Tabel 17 Indeks ukuran buah dan biji pala (ID)
Ekotipe Maluku: IDbuah IDbiji 1. Banda 1,18 1,16 2. Ambon 1,25 1,22
3. Luhu 1,16 1,16 Ekotipe Maluku Utara:
4. Ternate 1,25 1,19 5. Tidore 1,25 1,22 6. Bacan 1,15 1,19
Proksimat Buah
45
Tabel 18 memperlihatkan bahwa kadar air buah pala ekotipe Banda berbeda
nyata dengan ekotipe lainnya kecuali Ambon. Kadar air buah pala tertinggi di-
jumpai pada pala Tidore, yaitu hampir 88%. Pada ekotipe Maluku, pala ekotipe
Luhu mengandung air lebih tinggi dari Banda.
Tabel 18 Kadar air buah pala menurut ekotipe
Maluku Kadar air (%) Rataan 1. Banda 76,28 82,15 80,11 79,512. Ambon 83,55 80,46 84,15 82,72tn
3. Luhu 86,45 85,65 86,24 86,11*
Maluku Utara 4. Ternate 86,45 85,26 85,41 85,71*
5. Tidore 88,12 87,91 86,88 87,64*6. Bacan 87,53 86,54 87,12 87,06*
Dunnett 3,63 Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett 0,05; tn tidak berbeda nyata.
Dalam hal kandungan protein, tidak ditemukan adanya perbedaan yang
nyata. Seperti tampak pada Tabel 19, kandungan protein buah pala ekotipe Banda
sama dengan yang lainnya yang berkisar 0,24 hingga 0,40%. Variasi kadar protein
dalam buah pala sangat kecil, baik dalam maupun antar ekotipe.
Tabel 19 Kadar protein buah pala menurut ekotipe
Maluku Kadar protein (%) Rataan 1. Banda 0,37 0,32 0,34 0,34 2. Ambon 0,54 0,33 0,32 0,40tn
3. Luhu 0,30 0,24 0,4 0,31tn Maluku Utara
4. Ternate 0,32 0,31 0,40 0,34tn 5. Tidore 0,33 0,35 0,33 0,34tn 6. Bacan 0,25 0,22 0,26 0,24tn
Dunnett 0,16 Ket: tn tidak berbeda nyata dengan uji Dunnett 0,05.
Seperti hal kadar protein, pala ekotipe Banda juga memperlihatkan kadar
lemak yang sama dengan pala ekotipe lainnya yang berkisar 0,18 sampai 0,28%.
Variasi kandungan lemak pala kedua ekotipe juga kecil (Tabel 20).
46
Pada Tabel 21 dapat dilihat bahwa kadar pektin pala ekotipe Ambon dan
Luhu secara statistik sama, tetapi tidak dengan pala dari Maluku Utara. Pala
Maluku Utara mengandung pektin lebih tinggi daripada ekotipe Banda. Pada
Tabel 20 Kadar lemak buah pala menurut ekotipe
Maluku Kadar lemak (%) Rataan 1. Banda 0,21 0,22 0,25 0,23 2. Ambon 0,24 0,25 0,26 0,25tn
3. Luhu 0,25 0,25 0,33 0,28tn Maluku Utara
4. Ternate 0,19 0,18 0,17 0,18tn 5. Tidore 0,21 0,25 0,31 0,26tn 6. Bacan 0,20 0,19 0,19 0,19tn
Dunnett 0,07 Ket: tn tidak berbeda nyata dengan uji Dunnett 0,05.
Tabel 21 juga menunjukkan bahwa pala ekotipe Tidore mengandung pektin
8,36% yang melebihi yang lainnya. Kadar pektin pala Banda berkisar 6,17 sampai
8,36%.
Tabel 21 Kadar pektin buah pala Banda menurut ekotipe
Maluku Kadar pektin (%) Rataan 1. Banda 6,89 5,98 6,66 6,51 2. Ambon 6,64 7,12 6,84 6,87tn
3. Luhu 6,15 6,11 6,25 6,17tn
Maluku Utara 4. Ternate 7,56 7,77 7,54 7,62*
5. Tidore 8,49 8,25 8,33 8,36*
6. Bacan 8,13 8,22 7,98 8,11*
Dunnett 0,56 Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett 0,05; tn tidak berbeda nyata.
Edible portion (EP) yang merupakan proporsi bobot daging buah terhadap
bobot total, memperlihatkan variasi yang kecil. Tabel 22 memperlihatkan adanya
Tabel 22 Edible portion buah pala Banda menurut ekotipe
Maluku Edible portion (%) Rataan 1. Banda 81,75 82,89 82,54 82,39 2. Ambon 83,25 83,34 84,10 83,56 tn3. Luhu 82,24 81,96 82,26 82,15 tn
Maluku Utara
47
4. Ternate 82,45 81,48 83,25 82,39 tn 5. Tidore 84,75 83,38 82,55 83,56 tn 6. Bacan 84,12 84,46 84,11 84,23 *
Dunnett 1,57 kesamaan dalam sifat EP pala ekotipe Banda dengan ekotipe lainnya kecuali
ekotipe Bacan. Ekotipe Bacan memiliki pala dengan EP lebih besar bila
dibandingkan dengan ekotipe Banda.
Analisis Komponen Utama
Analisis komponen utama (KU) terhadap faktor iklim dan tanah memperli-
hatkan bahwa iklim dan tanah adalah faktor yang mencirikan kondisi ekotipe pala
di Maluku dan Maluku Utara dengan menyusun tiga komponen utama (KU1,
KU2, dan KU3) dengan keragaman kumulatif sekitar 88,6% (Tabel 23). Dua KU
lainnya (KU4 dan KU5) tidak diperhitungkan karena tiga KU pertama sudah cu-
kup menjelaskan keragaman. Unsur-unsur iklim dan tanah yang menjadi kompo-
nen penyusun KU terdapat pada Lampiran 5. Ketiga KU faktor iklim dan tanah
masing-masing memberikan kontribusi keragaman atau penciri ekotipe sebesar
8,3; 5,0; dan 3,5% (Tabel 23). Bila dilihat dari KU1, tiga faktor lingkungan, yaitu
kandungan C-organik, Mg, dan N-total tanah merupakan penciri utama ekotipe
menyusul KU2 yang dicirikan secara dominan oleh pH, DHL (daya hantar listrik),
dan tektur tanah, yaitu kandungan fraksi debu (Tabel 24). KU3 dengan kontribusi
keragaman sekitar 18% dicirikan oleh kejenuhan basa, curah hujan, dan KTK.
Tabel 23 Eigenvalues matriks korelasi KU variabel iklim dan tanah
KU Eigenvalue Selisih Proporsi Kumulatif
KU1 8,30838 3,28845 0,437283 0,43728
KU2 5,01993 1,52206 0,264207 0,70149
KU3 3,49787 1,94502 0,184098 0,88559
KU4 1,55285 0,93188 0,081729 0,96732
KU5 0,62098 0,62098 0,032683 1,00000
Analisis selanjutnya menunjukkan bahwa C-organik, Mg, dan N-total tanah
adalah faktor dominan yang dapat dipakai sebagai atribut keragaman ekotipe
dengan kontribusi masing-masing 2,76% (hasil perkalian antara nilai eigenvektor
dan eigenvalue); 2,76%; dan 2,70%, disusul faktor pH dan DHL. Faktor pH dan
48
DHL sebagai penciri dominan kedua setelah C-organik, Mg, dan N-total mem-
berikan kontribusi keragaman pada ekotipe masing-masing sebesar 2,09% dan
1,96%. Curah hujan, kejenuhan basa, dan KTK juga dapat dipertimbangkan
sebagai penciri ekotipe berikutnya, tetapi kontribusinya relatif kecil (<1,5%).
Tabel 24 Eigenvektor empat KU variabel iklim dan tanah
Variabel KU1 KU2 KU3 KU4 Keterangan
X1 -0,12888 -0,210890 0,422526 0,095185 C. hujan (mm/bln) X2 -0,26394 -0,096560 0,321636 0,088128 H. hujan X3 0,277604 0,175655 -0,107461 -0,324130 Suhu udara (0C) X4 -0,24840 0,106055 -0,322124 0,201158 Penyinaran (%) X5 0,256804 -0,070114 0,307387 -0,243325 Kelembapan (%) X6 -0,075678 0,415672 0,008992 -0,046879 pH X7 0,332629 0,001863 0,013513 -0,203952 C-org X8 0,325427 -0,063293 0,036385 -0,223708 N-total X9 0,241649 -0,255464 0,021463 0,339657 P X10 0,152289 0,391322 -0,016358 0,132930 DHL X11 0,235369 0,321772 0,001449 0,111332 Ca X12 0,332424 -0,003043 -0,079983 -0,193431 Mg X13 0,274562 -0,100967 -0,067324 0,439447 K X14 0,259843 -0,255578 -0,040831 0,199263 Na X15 0,170065 0,156761 0,409220 0,180170 KTK X16 0,082416 0,034345 -0,499554 0,203493 Kejenuhan basa (%) X17 -0,123210 0,342738 0,115527 -0,044844 Fraksi pasir (%) X18 0,022700 -0,387945 -0,179725 -0,136108 Fraksi debu (%) X19 0,211969 0,176662 0,175060 0,417763 Fraksi liat (%)
Berdasarkan analisis KU mengenai kontribusi masing-masing faktor iklim
dan tanah dalam mencirikan ekotipe diketahui bahwa ekotipe pala terdiri atas em-
pat ekotipe. Empat ekotipe tersebut adalah ekotipe 1 (Ambon, Bacan, dan Ter-
nate), ekotipe 2 (Banda), ekotipe 3 (Luhu), dan ekotipe 4 (Tidore). Pada Gambar
7 tampak bahwa ekotipe Ambon, Bacan, dan Ternate berdasarkan KU1 dan KU2
merupakan ekotipe yang sekelompok dengan faktor penciri dominan (dengan uru-
tan kontribusi terbesar ke terkecil) adalah C-organik, Mg, N-total, pH, dan DHL.
Lima penciri utama ekotipe 1 didominasi oleh faktor tanah. Faktor iklim, yaitu
curah hujan tergolong penciri dominan ketiga. Analisis KU selanjutnya yang me-
49
libatkan gabungan 19 faktor iklim dan tanah serta 29 karakteristik tanaman pala
juga menghasilkan empat ekotipe tetapi dengan komposisi yang berbeda (Gambar
8).
Ambon Bacan Banda Luhu Ternate Tidore
43210-1-2-3
3
2
1
0
-1
-2
-3
-4
KU1
KU
2D
L
A
A
CT
B
BC
LTD
Gambar 7 Plot KU1 dan KU2 variabel iklim dan tanah.
Keempat ekotipe baru tersebut adalah Ambon dan Banda (selanjutnya dis-
ebut ekotipe Banda), ekotipe Luhu, ekotipe Bacan dan Ternate (selanjutnya dis-
ebut ekotipe Ternate), dan ekotipe Tidore.
Tabel 25 Eigenvalues matriks korelasi KU gabungan variabel iklim, tanah, dan karakteristik pala
KU Eigenvalue Selisih Proporsi Kumulatif
KU1 19,9315 9,78393 0,415240 0,41524
KU2 10,1476 2,18117 0,211408 0,62665
KU3 7,9664 2,08381 0,165967 0,79262
KU4 5,8826 1,81076 0,122554 0,91517
KU5 4,0719 4,07186 0,084830 1,00000
Pengelompokkan enam ekotipe ke dalam empat ekotipe baru didasarkan
pada kontribusi faktor iklim dan tanah, terutama N-total (kontribusi 4,15%), ke-
lembaban udara (kontribusi 4,08%), dan penyinaran matahari (kontribusi 4,06%);
50
dan faktor karakteristik tanaman pala, terutama indeks kesamaan DNA (kontribusi
4,28%), produksi fuli (4,26%), dan kandungan senyawa aromatik (kontribusi
4,00%). Faktor iklim, tanah, dan karakteristik pala secara bersama-sama membe-
rikan kontribusi sekitar 42% (KU1) sebagai penciri ekotipe pala di Maluku dan
Maluku Utara.
Gambar 8 Plot KU1 dan KU2 gabungan variabel iklim, tanah, dan karakteristik pala.
Setelah N-total, kelembaban udara, penyinaran matahari, indeks kesamaan
DNA, produksi fuli, dan kandungan senyawa aromatik, ekotipe juga dapat
dibedakan menurut DHL, kadar Ca, tektur tanah, miristisin, safrol, dan KA buah.
Keenam faktor yang disebut terakhir menyusun KU2 dengan kontribusi (bersama
faktor lainnya) sebesar 21%.
Deskriptor Pala Menurut Ekotipe
Berdasarkan data morfologi dan agro-ekologi, tipikal karakteristik tanaman
pala Banda secara umum dapat digambarkan dalam sebuah deskriptor. Deskriptor
merupakan pedoman pendeskripsian yang berguna dalam menggambarkan karak-
teristik umum dan khusus tanaman (IPGRI 1995). Selain itu, deskriptor juga san-
gat berguna untuk identifikasi plasmanutfah pala.
Ambon Bacan Banda Luhu Ternate Tidore
543210-1-2-3-4-5
5
4
3
2
1
0
-1
-2
-3
-4
KU1
KU2
L
A
B
D
C
T
ACBLTD
51
Tabel 26 Eigenvektor empat KU gabungan variabel iklim, tanah, dan
karakteristik tanaman pala
Variabel KU1 KU2 KU3 KU4 Keterangan X1 0,000844 -0,162033 0,246951 -0,204985 Curah hujan bulanan (mm) X2 -0,102683 -0,103831 0,222659 -0,220209 Hari hujan bulanan X3 0,138316 0,137791 -0,190783 0,068109 Suhu (0C) X4 -0,204439 0,055159 -0,048939 0,090701 Penyinaran matahari (%) X5 0,204895 -0,032536 0,028835 -0,092990 Kelembaban udara (%) X6 -0,080980 0,249944 0,039875 0,003052 pH (H2O) X7 0,203712 0,044401 -0,133988 0,029248 C-0organik (%) X8 0,208398 -0,001869 -0,128052 0,013323 N-Total (%) X9 0,164410 -0,104987 0,041858 0,145975 P (ppm) X10 0,053337 0,291862 0,006225 0,090924 DHL (uS/cm) X11 0,113112 0,262497 -0,024318 0,079096 Ca (me/100 g) X12 0,187720 0,035609 -0,153526 0,114698 Mg (me/100 g) X13 0,157357 0,012680 0,020347 0,212351 K (me/100 g) X14 0,169782 -0,105430 -0,043701 0,118283 Na (me/100 g) X15 0,145769 0,138323 0,198437 -0,099924 KTK (me/1oo g) X16 -0,028925 0,059635 -0,191506 0,303329 Kejenuhan Basa (%) X17 -0,075947 0,228629 0,004292 -0,243214 Fraksi pasir (%) X18 0,015316 -0,278995 -0,081512 0,159489 Fraksi debu (%) X19 0,127536 0,165527 0,183063 0,147859 Fraksi liat (%) X20 -0,143582 0,219577 -0,109305 -0,024242 Kadar air buah (%) X21 -0,081149 0,004732 0,207893 0,268912 Indeks ukuran daun X22 -0,162400 0,015102 0,074679 0,237177 Indeks warna buah X23 -0,164115 -0,152241 -0,075411 0,028517 Bentuk pangkal buah X24 -0,098317 -0,094079 0,202608 0,255455 Panjang tangkai buah X25 0,198140 -0,120838 -0,031281 0,063370 Produksi buah (kg/phn) X26 0,190050 -0,149659 0,030791 0,024644 Produksi biji (kg kering /phn) X27 0,213973 -0,079343 -0,051352 -0,010276 Produksi fuli (kg kering/phn) X28 -0,103516 0,046019 0,062864 -0,267330 Edible portion (%) X29 0,048838 -0,049677 0,286572 0,000345 Kadar protein buah (%) X30 0,148106 0,208470 0,107419 -0,027663 Kadar lemak buah (%) X31 -0,193790 0,063390 0,054876 0,005520 Kadar pektin buah (%) X32 0,175607 -0,051854 0,188069 -0,111493 Kadar minyak biji tua (%) X33 -0,088450 0,040590 -0,222353 -0,264065 Kadar air biji tua (%) X34 -0,089476 0,039274 -0,221008 -0,264407 Kadar air fuli (%) X35 0,013859 -0,119866 -0,312375 0,107768 Bobot jenis minyak pala (g/ml) X36 0,115063 0,109076 0,241240 -0,107595 Indeks bias minyak pala X37 -0,117894 0,143451 0,164375 0,174933 Putaran optik minyak pala X38 -0,169106 0,108822 -0,130513 0,04963 Sisa penguapan (%) X39 -0,104030 -0,149999 0,195882 0,203758 Kadar minyak fuli (%) X40 0,111957 0,214422 0,005237 0,041132 Hidrokarbon monoterpen (%) X41 0,146263 -0,029569 -0,003569 -0,019729 Monoterpen teroksigenasi (%) X42 -0,201433 -0,093088 -0,092657 0,070466 Senyawa aromatik (%) X43 0,005060 -0,294576 0,065657 -0,111142 Miristisin (%) X44 -0,192754 -0,021152 -0,169068 0,062458 Elemisin (%) X45 -0,117328 -0,266707 0,012855 -0,005640 Safrol (%) X46 -0,089534 0,196075 0,166586 0,139258 Eugenol (%) X47 0,205297 0,009019 -0,120211 0,016464 SI DNA OPE-10 (%) X48 0,215069 -0,047571 -0,030979 -0,073224 SI DNA OPE-11 (%)
52
Komponen utama sebuah deskriptor pala adalah dekripsi tentang lingkungan
dan lokasi ekologis, deskripsi tanaman pala itu sendiri, dan deskripsi evaluasi ta-
naman. Deskripsi tanaman mempunyai komponen atau unsur yang berfungsi
menjelaskan karakteristik tertentu tanaman. Dalam penyusunan suatu deskriptor
diperlukan data lapangan dan laboratorium. Penelitian sederhana kadang-kadang
diperlukan untuk menghasilkan deskriptor yang lebih lengkap.
Tabel 27 adalah deskriptor pala Banda tipikal empat ekotipe di Maluku dan
Maluku Utara. Deskriptor disusun untuk tanaman pala spesies Myristica fragrans
Houtt.
Pembahasan
Maluku dan Maluku Utara adalah wilayah dengan fisiografi pegunungan
dengan kemiringan lahan rata-rata 40%. Berdasarkan Pusat Penelitian Tanah dan
Agroklimat Bogor, agroekologi Maluku tergolong ke dalam zona Iax, IIIax, dan
IVax (Anonim 2003). Zona Iax, IIIax, dan IVax menurut Trojer (1976) adalah
kawasan dengan ketinggian < 750 m dpl, rejim suhu panas (isohipertermik) dan
beriklim lembab. Seperti halnya Maluku, Maluku Utara memiliki karakteristik
agroekologi dengan tiga zona: Iax, IIax, dan IIIax. Secara umum, karakteristik
agroekologi Maluku Utara tidak jauh berbeda dari Maluku. Pala, cengkeh, dan
kelapa adalah tanaman perkebunan yang dominan di kedua daerah (Kaya et al.
2002).
Kondisi iklim ekotipe Banda yang dicirikan oleh hujan tahunan lebih dari
2.500 per tahun dan kisaran suhu 23 - 31 0C serta kelembaban udara sekitar 80%
sangat mendukung pertumbuhan dan perkembangan tanaman pala. De Guzman
dan Siemonsma (1999) menyatakan bahwa hujan tahunan sebesar 2.000 sampai
3.500 mm tanpa periode kering yang berarti sesuai bagi perkembangan pala.
Untuk menjaga pertumbuhan dan produksi, pala memerlukan naungan atau
intensitas cahaya yang rendah sampai sedang (sekitar 50 sampai 70%). Naungan
banyak diperlukan pada awal pertumbuhan namun semakin berkurang setelah ta-
naman mencapai umur produktif. Kondisi iklim Maluku Utara dengan intensitas
penyinaran matahari kurang dari 60% ideal dan menguntungkan bagi pala yang
memerlukan intensitas penyinaran matahari yang rendah hingga sedang.
53
Tabel 27 Deskriptor pala Banda (M. fragrans Houtt) empat ekotipe di Maluku dan Maluku Utara
Deskripsilingkungan dan lokasi Ekotipe Banda Luhu Ternate Tidore
A. Karakterisasi/evaluasi lokasi 1. Lokasi
1.1. Letak lintang 4032'39,7" LS 3023'01,6"LS 02023'04,6" LU 02016'04,6" LU 1.2. Letak bujur 129054'39,4" BT 127058'17,4" BT 126033'23,5" BT 126034'23,5" 1.3. Elevasi [m dpl] 20 - 250 30 - 300 25 - 300 25 - 350 1.4. Nama tempat atau lokasi Pulau Banda dan
Ambon Luhu Ternate dan Bacan Tidore
2. Nama dan alamat evaluator Ilyas Marzuki, Am-bon
Ilyas Marzuki, Am-bon
Ilyas Marzuki, Am-bon
Ilyas Marzuki, Am-bon
3. Waktu tanam [tahun] Antara 1950-1980 Antara 1953-1983 Antara 1960-1980 Antara 1970-1985 4. Waktu panen [bulan] Maret, Juli, No-
vember Maret dan Juli Maret dan Juli Maret dan Juli
5. Lingkungan evaluasi Lingkungan karakterisasi/evaluasi dilakukan
Lapang Lapang Lapang Lapang
6. Daya kecambah benih [%] Batas waktu perkecambahan 6 minggu
85 82 81 83
7. Pertumbuhan di lapangan [%] Bibit yang tumbuh dan berkembang normal
82 80 78 79
8. Jarak tanam 8.1. Jarak antarbaris [m] 6-8 5-8 6-8 6-8 8.2. Jarak dalam baris [m] 8 8 8 8
9. Pemupukan Sebutkan jenis, dosis, frekuensi dan cara pem-berian
Tidak ada pemupu-kan
Tidak ada pemupu-kan
Tidak ada pemupu-kan
Tidak ada pemupu-kan
10. Perlindungan tanaman Cara pengendalian organisme pengganggu yang diterapkan, pestisida yang digunakan, do-sis, frekuensi dan pemberian
Tidak ada tindakan pengendalian
hama/penyakit yang berarti
Tidak ada tindakan pengendalian
hama/penyakit yang berarti
Tidak ada tindakan pengendalian
hama/penyakit yang berarti
Tidak ada tindakan pengendalian
hama/penyakit yang berarti
B. Data karakteristik lokasi
54
Deskripsilingkungan dan lokasi Ekotipe Banda Luhu Ternate Tidore
1. Karakteristik lokasi 1.1. Topografi Berbukit Bergunung Bergunung, >30% Bergunung 1.2. Bentuk lahan dataran tinggi (sifat
fisiografi umum) Pegunungan Pegunungan Pegunungan Pegunungan
2. Kemiringan [derajat] Perkiraan tingkat kemiringan lahan lokasi
10-400 15-330 25-400 15-400
3. Bentuk kemiringan Bentuk kemiringan adalah bentuk umum kemi-ringan pada arah vertikal dan horizontal
Tak beraturan Tak beraturan Tak beraturan Tak beraturan
4. Vegetasi dominan di lokasi dan sekelilingnya Kemiri dan Kelapa Pohon buah (durian, mangga)
Pohon buah (durian) Pohon buah (durian)
5. Kekerasan tanah Mudah diolah Mudah diolah Mudah diolah Mudah diolah 6. Drainase tanah Baik Baik Baik Baik 7. Salinitas tanah (μS/cm) 141-156 302 137-144 285 8. Kualitas air tanah Segar Segar Segar Segar 9. Kedalaman tanah sampai permukaan air tanah
(cm) > 150 > 150 > 150 > 150
10. Kelengasan tanah Lembab Lembab Lembab Lembab 11. Kemasahan/pH Tanah
Nilai pH tanah yang diukur pada kedalaman sekitar perakaran tanaman.
6,5 - 7,3 7,6 7,0 - 7,4 7,8
12. Tingkat erosi tanah Rendah Rendah Rendah Rendah 13. Warna matriks tanah
Warna tanah di daerah perakaran dicatat pada kondisi tanah lembab memakai bagan warna Munsell Soil Color Charts
Coklat kemerahan Lempung berpasir
Coklat kemerahan Lempung berpasir
Coklat kemerahan sampai hitam
Lempung berpasir
Coklat kemerahan Lempung berpasir
14. Kelas tekstur tanah Gunakan metode segitiga tekstur-tanah
Pasir:Debu:Liat (62,3:22,4:15,4)
Pasir:Debu:Liat (60,9:21,4:17,6)
Pasir:Debu:Liat (64,5:25,1:10,4)
Pasir:Debu:Liat (65,2:15,6:19,2)
55
Deskripsilingkungan dan lokasi Ekotipe Banda Luhu Ternate Tidore
14.1.1. Kelas ukuran partikel tanah Klasifikasi taksonomi tanah (USDA, 1998) Diperoleh dari peta tinjau tanah
Dystrudepts, Eu-trudeptss, Haplu-dalfs, Hapludults, Hapludands, Hap-
ludoxs
Dystrudepts, Eu-trudeptss, Haplu-dands, Hapludoxs
Dystrudepts, Eu-trudeptss, Haplu-dands, Hapludoxs
Dystrudepts, Eu-trudeptss, Haplu-dands, Hapludoxs
15. Sumber/ketersediaan air Tadah hujan Tadah hujan Tadah hujan Tadah hujan 16. Kesuburan tanah
Dapat diperkirakan berdasarkan kondisi vegetasi setempat atau gunakan tanaman indikator, misalnya jagung.
Sedang Sedang Sedang Sedang
17. Iklim lokasi 17.1. Suhu rata-rata [0C] 26,5 31,0 26,6 26,6 17.2. Curah hujan [mm/tahun] 2500-2900 2000 2400 2400 17.3. Kecepatan angin [m/detik] 3,0 3,1 2,8 2,7 17.4. Kelembahan relatif (%)
Nyatakan dalam kisaran per bulan 82 - 84 82 - 88 86 - 90 86 - 90
17.5. Penyinaran matahari (%) 56 - 57 40 - 68 43 - 68 43 - 68 Deskripsi Tanaman C. Deskriptor tanaman 1. Pohon
1.1. Umur pohon [thn] 20 - 50 20 - 40 25 - 50 25 - 50 1.2. Jenis bibit Generatif (dari biji) Generatif (dari biji) Generatif (dari biji) Generatif (dari biji) 1.3. Vigor 1.4. Lebar kanopi (m)
Kekar -Sedang 3,5 - 4,5
Sedang 3,0 - 4,1
Kekar - Sedang 3,6 - 4,6
Sedang 3,5 - 4,0
1.5. Tinggi pohon (m) 6 - 12 7 - 10 6 - 12 6 - 12 1.6. Bentuk pohon Agak piramidal Agak piramidal Agak piramidal Agak piramidal 1.7. Permukaan batang Sedang Sedang Sedang Sedang 1.8. Lingkar batang [cm] 30 - 50 30 - 50 30 - 50 30 - 50
56
Deskripsilingkungan dan lokasi Ekotipe Banda Luhu Ternate Tidore
Diukur 50 cm di atas permukaan tanah. 1.9. Pola percabangan Ekstensif Ekstensif Ekstensif Ekstensif 1.10. Pola penyebaran percabangan Agak horizontal Agak horizontal Agak horizontal Agak horizontal 1.11. Sudut cabang utama (0) Sedang (45-900) Sedang (45-900) Sedang (45-900) Sedang (45-900) 1.12. Warna ranting muda
(Termasuk daun muda di ujung rant-ing)
Hijau Hijau Hijau Hijau
1.13. Permukaan ranting muda Licin (glabrous) Licin (glabrous) Licin (glabrous) Licin (glabrous) 1.14. Bentuk daun
Dicatat setelah daun mekar sempurna Obovat Obovat Obovat Obovat
1.15. Bentuk pangkal daun Runcing Runcing Runcing Runcing 1.16. Panjang helai daun [cm]
Rataan dari 10 daun tua dari 10 pohon 12,5 12,8 13,5 12,7
1.17. Indeks ukuran daun 2,45 - 2,52 2,31 2,09 - 2,88 2,91 1.18. Warna daun tua Hijau Hijau Hijau Hijau 1.19. Alur pada tangkai daun Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada 1.20. Sudut tangkai daun Sedang (45-900) Sedang (45-900) Sedang (45-900) Sedang (45-900) 1.21. Tepi daun Rata Rata Rata Rata 1.22. Jumlah tulang daun primer 14 - 20 12 - 18 14 - 18 14 - 22 1.23. Relief pertulangan daun permukaan
atas Datar Datar Datar Datar
1.24. Bentuk ujung daun Runcing Runcing Runcing Runcing 1.25. Tekstur daun Agak keras Agak keras Agak keras Agak keras 1.26. Aroma daun (Daun harus diremas-
remas) Sedang Sedang Kuat Sedang
2. Bunga 2.1. Lama waktu mulai berbunga sejak ta-
nam [thn] 5 - 7 5 - 7 5 - 7 5 - 7
2.2. Musim berbunga utama Desember, April Desember, April Desember, April Desember, April 2.3. Pola pembungaan Sepanjang tahun Sepanjang tahun Sepanjang tahun Sepanjang tahun
57
Deskripsilingkungan dan lokasi Ekotipe Banda Luhu Ternate Tidore
2.4. Sifat meranggas daun Dicatat saat musim berbunga
Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada
2.5. Posisi bunga Subterminal - Ak-silar
Subterminal Aksilar Subterminal
2.6. Diameter bunga 2.7. Warna bunga Kuning gading Kuning gading Kuning gading-
kuning kehijauan Kuning gading
2.8. Tipe bunga Sebagian besar diosius
Sebagian besar dio-sius
Sebagian besar dio-sius
Sebagian besar dio-sius
2.9. Jumlah bunga per rangkaian Betina: 2-3; Jantan: 3-7
Betina: 1-3; Jantan: 4-8
Betina: 1-3; Jantan: 3-5
Betina: 1-3; Jantan: 3-5
2.10. Panjang tangkai bunga [mm] 12 - 17 10 - 15 10 - 14 11 - 16 2.11. Bentuk stilus bunga sangat pendek (<2
mm) sangat pendek (<2
mm) sangat pendek (<2
mm) sangat pendek (<2
mm) 2.12. Ada/tidaknya polen Ada Ada Ada Ada 2.13. Ada/tidaknya nektar bunga Ada Ada Ada Ada 2.14. Ada/tidaknya perhiasan bunga
(periantium)
3. Buah
Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada
3.1. Lama waktu buah pertama terbentuk se-telah tanam [thn]
5 5 5 5
3.2. Lama waktu dari pembungaan hingga buah masak [bulan]
6-7 6-7 6-7 6-7
3.3. Musim berbuah 3.3.1. Mulai berbuah [bulan] Februari dan Juni Februari dan Juni Februari dan Juni Februari dan Juni 3.3.2. Akhir berbuah [bulan] Tidak jelas batas-
nya Tidak jelas batas-
nya Tidak jelas batas-
nya Tidak jelas batas-
nya 3.4. Sifat perbuahan Secara terus-
menerus Secara terus menerus Secara terus
58
Deskripsilingkungan dan lokasi Ekotipe Banda Luhu Ternate Tidore
3.5. Bentuk buah (IDbuah) 1,18 - 1,25 1,16 1,15 - 1,25 1,25 3.6. Permukaan kulit buah Halus Halus Halus Halus 3.7. Keseragaman ukuran buah Tinggi Tinggi Tinggi Tinggi 3.8. Bobot buah [g]
Rata-rata hasil dari 50 buah 46,98 - 63,26 56,00 42,65 - 49,19 40,07
3.9. Bentuk pangkal buah Menonjol Menonjol Menonjol Menonjol 3.10. Bentuk ujung buah Bulat Bulat Bulat Bulat 3.11. Glosi kulit buah Sedang Sedang Sedang Sedang 3.12. Panjang tangkai buah [cm] 2,04 - 2,22 1,83 0,22 - 1,96 2,29 3.13. Diameter tangkai buah [mm]
Dicatat pada bagian tengah 2,2 - 3,4 1,9 2,0 - 2,2 2,2
3.14. Warna tangkai buah Dicatat pada buah matang yang ter-naungi dari cahaya matahari
Coklat Coklat Coklat Coklat
3.15. Warna kulit buah matang Kuning gading Kuning gading Kuning gading Kuning gading 3.16. Tingkat diskolorisasi buah setelah 1
jam Tinggi Tinggi Tinggi Tinggi
3.17. Warna diskolorisasi Coklat kemerahan Coklat kemerahan Coklat kemerahan Coklat kemerahan
4. Biji 4.1. Bentuk biji (IDbiji) 1,19 - 1,26 1,15 1,22 - 1,29 1,40 4.2. Bobot kering biji dengan batok [g] 6,38 - 7,13 5,25 5,58 - 6,11 5,46 4.3. Bobot kering biji tanpa batok [g] 2,28 - 4,48 3,35 3,68 - 4,21 3,56 4.4. Warna biji tua Hitam kecoklatan Hitam kecoklatan Hitam kecoklatan Hitam kecoklatan 4.5. Permukaan kulit biji tua Glosi Glosi Glosi Glosi
5. Arilus atau fuli 5.1. Warna fuli Merah darah Merah darah Merah darah Merah darah 5.2. Bobot basah fuli [g] 2,94 - 4,78 1,25 1,32 - 2,10 1,25
Deskripsi Evaluasi
59
Deskripsilingkungan dan lokasi Ekotipe Banda Luhu Ternate Tidore
1. Produksi 1.1. Hasil per pohon [kg per tahun]
1.1.1. Hasil buah 100,65 - 167,16 120,21 73,35 - 89,17 70,68 1.1.2. Hasil biji kering 9,60 - 13,98 9,16 6,33 - 7,48 6,28 1.1.3. Hasil fuli kering 1,61 - 2,51 2,10 0,72 - 1,15 0,69
1.2. Karakteristik produksi Terus- menerus Terus-menerus Terus- menerus Terus-menerus 1.3. Produktivitas [kg/tahun/ha]
1.3.1. Hasil biji kering 711 - 1398 1025 1148 - 1313 1110 1.3.2. Hasil fuli kering 234 - 296 291 131 - 196 127
1.4. Lama buah bertahan di pohon hingga mencapai panen [bulan]
7 - 9 7 - 9 7 - 9 7 - 9
1.5. Kadar minyak [%] 1.5.1. Biji pala tua 11,69 - 11,92 9,99 7,95 - 8,64 9,61 1.5.2. Biji pala muda 12,82 - 13,07 11,27 11,99 - 13,32 11,99 1.5.3. Fuli 20,42 - 21,00 18,69 19,53 - 21,98 21,01
1.6. Kadar komponen atsiri utama (%) 1.6.1. Miristisin 13,54 - 13,76 5,57 11,30 - 11,42 5,97 1.6.2. Elemisin 0,67 - 0,94 2,05 6,71 - 7,21 3,56 1.6.3. Safrol 2,44 - 2,46 0,97 2,57 - 3,37 1,49 1.6.4. Eugenol 0,55 - 0,90 0,70 1,77 - 1,80 9,82
60
Penyinaran matahari bagi tanaman penting dalam pembentukan fotosintat
dan akumulasi biomassa. Kondisi penyinaran rendah yang menguntungkan terse-
but menjadi bertambah baik oleh curah hujan yang merata sepanjang tahun de-
ngan rata-rata tidak kurang dari 150 mm per bulan. Buckmire (1992) menyatakan
bahwa pala tumbuh baik di daerah yang beriklim lembab dengan curah hujan ta-
hunan lebih dari 1.500 mm. Data curah hujan pada Tabel 6 menunjukkan bahwa
kondisi kering (curah hujan < 75 mm/bulan) hanya berlangsung satu bulan.
Selain kondisi iklim lokal, perkembangan pala juga berhubungan dengan
kondisi tanah. Ekotipe Maluku dan Maluku Utara yang sebagian merupakan dae-
rah vulkanik sangat menguntungkan bagi pala. Gunung Api di Pulau Banda yang
dalam jangka waktu tertentu menyemburkan abu vulkan dan material lainnya san-
gat membantu dalam menggantikan hara mineral yang sekian lama digunakan
oleh tanaman pala untuk pertumbuhannya. Perlu dijelaskan bahwa sebagian besar
pertanaman pala di Maluku dan Maluku Utara terletak di lereng-lereng gunung
yang membentuk tegakan hutan pala. Kondisi serupa terjadi di ekotipe Maluku
Utara yang memiliki Gunung Gamalama yang terletak di Ternate, serta gunung
vulkanik lainnya di Pulau Tidore dan Bacan sangat berperan dalam mendukung
produktivitas pala.
Analisis tanah menunjukkan bahwa kadar C-organik ekotipe Maluku lebih
dari 2%. Kadar tersebut cukup untuk mendukung kebutuhan karbon organik ta-
naman pala. Kandungan bahan organik 2% bagi tanaman tahunan cukup mema-
dai meskipun untuk pertumbuhan dan perkembangan yang optimal diperlukan ba-
han organik lebih dari 2%. Tidak seperti halnya di ekotipe Maluku, kadar C-
organik ekotipe Maluku Utara lebih rendah, yaitu sekitar 1%. Sifat fisik lainnya
yang mencirikan kedua ekotipe adalah tektur tanah lempung. Tanah bertekstur
lempung umumnya baik dalam penyediaan air dan aerasi tanah bagi tanaman.
Kedua daerah juga dicirikan oleh kadar P dan N yang sangat rendah. Kadar
P< 10 ppm dan N< 1% tergolong sangat rendah untuk tanah jenis buah-buahan
(Jones et al. 1991), dan oleh karena itu agar tanaman pala dapat tumbuh optimal,
hara P dan N perlu diberikan. Faktor pendukung lainnya yang dimiliki kedua eko-
tipe adalah kejenuhan basa yang tinggi, pH sekitar normal, dan tidak terdapat lo-
gam berpotensi toksik, seperti Al.
61
Terhadap karakteristik morfologi, tanaman pala mengelompok ke dalam tiga
klaster. Berdasarkan 21 karakter morfologi pala yang dipelajari, 54 pengamatan
(90%) tergolong ke dalam satu klaster yang hampir seluruhnya mencirikan pala
ekotipe Banda, Dua klaster lainnya yang masing-masing diwakili oleh 4 dan 2
pengamatan (Tabel 11) membentuk karakteristik yang berbeda. Pengamatan
nomor 26 pala ekotipe Luhu dan nomor 43, 44, dan 50 pala ekotipe Tidore
membentuk klaster 2; dan nomor 33 dan 38 pala ekotipe ternate menyusun klaster
3 (Tabel 10). Penyimpangan karakter morfologi, yaitu indeks ukuran daun, warna
buah, bentuk pangkal buah, dan pangkal buah dari tipikal pala Banda, meskipun
kecil, dapat menjadi atribut bagi suatu ekotipe. Secara umum dapat dikatakan
bahwa karakteristik morfologi pala ekotipe Banda stabil di lingkungan ekotipe
lainnya. Kestabilan karakter morfologi tersebut selain ditentukan oleh kemiripan
faktor ekologis di antara lokasi, juga kemungkinan oleh faktor perilaku reproduksi
pala yang kondisi populasi yang hampir seluruhnya adalah spesies M. fragrans
Houtt. Penyerbukan silang sebagai bentuk utama persilangan seksual pala Banda
hampir tidak mengubah secara berarti karakteristik morfologi. Dalam wilayah
agroekolgi Maluku dan Maluku Utara, pala Banda tidak mengalami perubahan
morfologi yang berarti sekalipun tumbuh di ekotipe berbeda di Maluku dan
Maluku Utara.
Mengacu pada kategori produktivitas pala pada Lampiran 1, pengamatan
agronomi menunjukkan umumnya produksi pala per pohon di Maluku dan Malu-
ku Utara tergolong sedang (1500 - 2500 buah/pohon). Produksi hingga 5.000
buah per pohon per tahun umum pada pertanaman pala yang berumur lebih dari
15 tahun yang mendapatkan input standar (pemupukan dua kali setahun, pengen-
dalian hama/penyakit, dan pemangkasan pohon pelindung). Tingkat produksi
demiki-an lazim dijumpai pada perkebunan-perkebunan pala Banda di Grenda
(GCNA 2001). Pada daerah tersebut, pohon pala umur delapan tahun dapat
menghasilkan 1000 buah bila diberikan pengelolaan yang standar (Rema dan
Madan 2001). Pala ekotipe Banda hingga elevasi 300 m dpl menghasilkan buah
sekitar 2500 per pohon yang setara dengan kira-kira 13 kg biji pala kering. Bila
pertanaman pala dengan jarak tanam 8 m x 8 m diterapkan pada ekotipe Banda
dengan kondisi iklim dan tanah seperti sekarang maka akan dicapai produktivitas
62
sekitar 2 ton pala kering per pohon per tahun. Produktivitas tersebut kalau
dibandingkan dengan ekotipe lainnya masih lebih tinggi. Tingkat produksi pala
yang demikian masih dapat ditingkatkan melalui perbaikan manajemen budi-daya
tanaman.
Secara umum tidak tampak variasi produksi (buah, biji, dan fuli) yang ber-
arti pada elevasi 0 - 250 m dpl dan 250 - 300 m dpl, kecuali dalam bobot kering
biji (Tabel 16). Bobot kering biji pala di elevasi 250 - 300 m dpl lebih rendah
daripada elevasi 0 - 250 m dpl, kecuali di ekotipe Bacan. Perbedaan tersebut
kemungkinan berkaitan dengan perubahan respon tanaman dengan perubahan
elevasi. De Guzman dan Siemonsma (1999) berpendapat bahwa elevasi 0 - 700 m
dpl sangat sesuai bagi pala.
Produksi fuli pala ekotipe Banda lebih tinggi daripada ekotipe lainnya. Po-
hon pala ekotipe Banda menghasilkan sekitar 2,4 kg fuli kering dalam setahun
atau setara 375 kg/ha. Tingkat produksi yang demikian masih memungkinkan un-
tuk ditingkatkan dengan memberikan input teknologi pertanian. Produksi pala pa-
da tingkat tersebut terkait dengan sistem budidaya alami yang diterapkan oleh pe-
tani. Pertanaman pala di Maluku sejak ditanam hingga tanaman berproduksi tidak
mendapatkan pemupukan dan tidak diberi tindakan pengendalian hama dan pe-
nyakit yang berarti. Hama penggerek batang adalah hama utama pala, tetapi se-
rangannya sangat rendah kurang dari 1%.
Berdasarkan hasil analisis korelasi dan regresi terhadap produksi, tinggi po-
hon, jumlah cabang, dan diamater batang, dapat dinyatakan bahwa pala ekotipe
Banda, Ambon, dan Bacan memperlihatkan korelasi positif antara tinggi dan ling-
kar batang. Analisis juga menunjukkan bahwa produksi buah lebih banyak diten-
tukan oleh jumlah cabang (Tabel 14). Hubungan yang demikian lazim karena per-
tambahan jumlah cabang hampir selalu diikuti dengan pertambahan jumlah buah,
tetapi tidak halnya dengan tinggi pohon dan diameter batang meskipun tidak sela-
lu demikian.
Karakteristik pala lainnya yang memperlihatkan stabilitas tinggi adalah ben-
tuk buah dan biji yang dinyatakan dalam indeks (ID). Buah dan biji pala ekotipe
Banda meskipun telah berkembang dan dipengaruhi oleh kondisi agroekologi ber-
beda, bentuknya tetap stabil, yaitu oval. Bentuk buah/biji sebagai salah satu ka-
63
rakter kualitatif tanaman biasanya lebih stabil daripada karakter kuantitatif dari
pengaruh perubahan lingkungan. Karakter kualitatif tanaman umumnya dikenda-
likan sederhana atau monogenik, sedangkan karakter kuantitatif seperti hasil pro-
duksi, pengendaliannya multigenik (Van Dam-Mieras et al. 1991). Isozim dan
DNA pala Banda memperlihatkan pola ekspresi yang secara umum stabil, dan di
ekotipe Ternate pala Banda memperlihatkan variasi tetapi sangat kecil.
Berdasarkan data karakteristik morfologi dan agronomi tanaman kemudian
disusun sebuah deskriptor yang berfungsi sebagai pedoman pendeskripsian pala
Banda. Deskriptor pala Banda tipikal ekotipe Maluku dan Maluku Utara telah
dihasilkan. Deskriptor dimaksud dapat digunakan secara nasional maupun interna-
sional.
Berdasarkan analisis proksimat, daging buah pala mengandung air cukup
tinggi, yaitu sekitar 88%. Air adalah komponen yang paling banyak terdapat da-
lam buah yang mencapai sekitar 80% bobot segar (Fouri 1996). Pala ekotipe Ban-
da kadar airnya sama dengan ekotipe Ambon, tetapi lebih rendah daripada ekotipe
Luhu, Ternate, Tidore, dan Bacan (Tabel 19). Kadar air buah sangat pen-ting ka-
rena berhubungan dengan akseptibilitas produk. Selain kadar air, pala Banda juga
memperlihatkan proporsi daging buah (EP) yang sama dengan ekotipe lainnya,
kecuali Bacan (Tabel 23). Pala Bacan memiliki daging buah lebih banyak sehing-
ga untuk tujuan industri manisan sangat baik. EP bersama-sama dengan KA
penting bagi industri manisan pala.
Rendahnya kadar air pala ekotipe Banda Maluku dibanding ekotipe lainnya
di Maluku Utara kemungkinan terkait dengan kondisi ekologis tanah dan faktor
genetik tanaman. Pengamatan lapangan menunjukkan bahwa solum tanah ekotipe
Banda banyak mengandung bongkahan batuan berdiameter 25 - 50 cm. Batuan
tersebut diduga merupakan material muntahan gunung api yang telah tertimbun
dan menjadi bagian dari ekosistem Banda. Selain itu, di ekotipe Banda tidak
ditemukan sumber air atau sungai yang menggambarkan adanya simpanan atau
cadangan air lebih dalam tanah. Dengan demikian, ketersediaan cadangan air bagi
tanaman pala menjadi terbatas. Karena absorbsi air oleh akar terbatas
mengakibatkan penyerapan air tanah oleh tanaman juga terbatas. Dengan
demikian pengaruh kondisi ekologis lahan terhadap terhadap kadar air buah tidak
64
bisa diabaikan kontribusinya. Selain itu, intensitas penyinaran matahari yang
rendah (58%) dan suhu udara sedang (27 0C) juga dapat digunakan sebagai
penjelasan atas karakteristik buah pala pala di ekotipe tersebut.
Kadar protein dan lemak buah pala tidak berbeda di semua ekotipe. Lemak
dalam buah biasanya terdapat dalam jumlah kecil. Lemak buah merupakan lemak
nabati yang mengandung fitosterol dan lebih banyak mengandung asam lemak tak
jenuh sehingga umumnya berbentuk cair. Secara umum, kadar lemak dalam buah
< 1% dan bervariasi menurut jenis buah (Fouri 1996). Sejalan dengan keterangan
Fourie (1996), kadar lemak pala Banda juga ditemukan rendah bahkan kurang dari
0,5%. Kesamaan kadar protein dan lemak pala Banda kemungkinan terkait
dengan proses fisiologis dan faktor genetik. Seperti penjelasan sebelumnya, pala
Banda memiliki identitas genetik yang sangat mirip di enam ekotipe. Pektin
sebagai salah satu polisakarida banyak terkandung dalam buah karena merupakan
bagian dari dinding sel primer tanaman (Fouri 1996).
Hasil penelitian menunjukkan kadar pektin pala ekotipe Banda sama dengan
ekotipe Ambon dan Luhu, tetapi lebih rendah daripada pala ekotipe Maluku Utara.
Pektin merupakan produk dari proses metabolisme yang kompleks yang terjadi
dalam tanaman. Perbedaan kadar pektin antara pala ekotipe Banda dan Maluku
Utara dapat disebabkan oleh faktor genetik. Berdasarkan analisis DNA pala
ekotipe Maluku Utara memperlihatkan adanya jarak genetik 0,22 dengan pala
yang terdapat di ekotipe Banda. Jarak tersebut dapat dijadikan alasan bahwa
faktor genetik tidak dapat diabaikan sebagai faktor yang berperan dalam perbe-
daan kadar pektin buah pala.
Ekotipe pala yang semula ada enam, berdasarkan penciri utama faktor iklim,
tanah, dan karakteristik pala, mengelompok ke dalam empat tipe. Ekotipe Ternate
terletak satu ekotipe dengan Bacan dengan penciri bersama dominan adalah faktor
tanah/iklim, yaitu kadar N-total, kelembaban udara, dan penyinaran matahari
(faktor iklim), kemudian faktor tanaman terutama sifat DNA dan kandungan se-
nyawa aromatik. Nitrogen, kelembaban udara, dan penyinaran matahari
merupakan faktor penciri dominan ekotipe yang jelas pengaruhnya pada hampir
seluruh tahapan pertumbuhan dan perkembangan tanaman pala. Ketiga faktor
tersebut berkontribusi langsung terhadap proses metabolisme tanaman. Nitrogen
65
meskipun bukan unsur yang secara langsung berhubungan dengan pembentukan
minyak dan komponen atsiri pala, tetapi penting bagi pertumbuhan vegetatif dan
produksi buah.
Serupa dengan nitrogen, kelembaban dan penyinaran matahari juga faktor
lingkungan yang menentukan pertumbuhan tanaman. Dalam analisis komponen
utama, kedua faktor tersebut, yaitu kelembaban dan penyinaran matahari
memperlihatkan kontribusi yang kontras satu sama lain. Eigenvektor KU1 untuk
kelembaban dan penyinaran matahari masing-masing 0,25680 dan -0,24840. Nilai
komponen utama negatif pada penyinaran matahari berarti memiliki efek
berlawanan dengan kelembaban.
Empat ekotipe pala yang terbentuk dapat digunakan sebagai tipe ekologis
pala di Maluku dan Maluku Utara. Kemiripan dalam beberapa karakteristik iklim,
tanah, dan karakteristik pala antar ekotipe menjadi dasar justifikasi pengelompok-
kan.
67
KESIMPULAN
1. Pala Banda memperlihatkan stabilitas yang cukup tinggi pada agroekologi
Maluku dan Maluku Utara yang memiliki fisiografi bergunung, tanah vulkanik
dan tektonik, kemiringan lereng 16-45% dan tipe iklim IIB, IIIC, dan IVB.
Selain itu memiliki suhu udara antara 22,1-31,0 0C, curah hujan 2.000-2.950
mm/tahun, kelembaban udara 82-86%, dan penyinaran matahari 57-59%.
2. Pala Banda memperlihatkan stabilitas 90% dalam karakter morfologi di enam
ekotipe. Selain itu, kestabilan juga tampak dalam karakteristik buah yang
meliputi kadar protein, lemak, dan EP, namun tidak pada kadar air dan kadar
pektin. Secara umum produksi pala pada ketinggian 0-250 m dpl tidak
berbeda dari produksi pada ketinggian 250-300 m dpl.
3. Berdasarkan karakteristik iklim, tanah, dan tanaman pala, agroekologi pala di
Maluku dan Maluku Utara dapat dikelompokkan ke dalam empat ekotipe,
yaitu ekotipe Banda yang mencakup Banda dan Ambon, ekotipe Luhu, ekotipe
Ternate yang meliputi Ternate dan Bacan, dan ekotipe Tidore.
4. Telah dibuat deskriptor pala Banda untuk ekotipe di Maluku dan Maluku
Utara. Deskriptor penting dan diperlukan sebagai pedoman pendeskripsian
karakteristik pala.
KARAKTERISASI KOMPONEN ATSIRI MINYAK PALA BANDA (Myristica fragrans Houtt)
Abstrak
Minyak pala Banda dikarakterisasi untuk mempelajari kandungan minyak dan komponen atsiri penyusunnya. Tiga lokasi di Maluku: Banda, Ambon, dan Luhu; dan tiga lainnya di Maluku Utara: Ternate, Tidore, dan Bacan dipilih seba-gai lokasi sampling. Sampel biji pala muda (umur panen 3-5 bulan; dan biji tua (umur panen >7 bulan) dan fuli digunakan sebagai bahan untuk ektraksi minyak. Ekstraksi menggunakan metode hidro-distilasi. Minyak pala hasil distilasi diiden-tifikasi sifat fisiko-kimianya yang mencakup bobot jenis, indeks bias, putaran op-tik, dan sisa penguapan. Komponen atsiri minyak pala selanjutnya dianalisis menggunakan teknik Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS).
Hasil penelitian menunjukkan pala yang berasal dari ekotipe Banda, Ambon, dan Luhu (Maluku) dan dari ekotipe Ternate dan Bacan (Maluku Utara) mengha-silkan minyak berwarna bening; sedangkan pala dari ekotipe Tidore (Maluku Utara) berwarna kuning pucat. Kadar minyak pala biji tua ekotipe Banda, Am-bon, dan Luhu masing-masing adalah 11,69; 11,92; dan 9,99%; sementara ekotipe Ternate, Tidore, dan Bacan berturut-turut adalah 7,9; 59,61; dan 8,64%. Kadar minyak pala biji muda ekotipe Banda, Ambon, dan Luhu adalah lebih tinggi dari pala Maluku Utara, masing-masing 13,07; 12,82; dan 11,27%; sementara kadar minyak biji muda ekotipe Ternate, Tidore, dan Bacan masing-masing adalah 13,32; 11,99; dan 11,03%. Minyak pala dari Maluku memiliki bobot jenis 0,897 sampai 0,909 g/ml; indeks bias 1,489 sampai 1,491; putaran optik +11,40 hingga +16,30; dan sisa penguapan 0,7 sampai 0,9%. Pala Maluku Utara memiliki bobot jenis 0,884 sampai 0,910 g/ml; indeks bias 1,486 sampai 1,491; putaran optik +18,2 hingga +40,0; dan sisa penguapan 0,9 sampai 1,0%. Analisis GC-MS me-nunjukkan pala Maluku tersusun dari 28-31 komponen atsiri, dan Maluku Utara 29-31 komponen. Pala ekotipe Banda mengandung 52,8% hidrokarbon monoter-pen (HM); 21,11% monoterpen teroksigenasi (MT), dan 18,04% senyawa aroma-tik (SA); pala ekotipe Ambon 45,12% HM; 24,51% MT; dan 16,97% SA; dan pa-la Luhu 56,06% HM, 27,34% MT, dan 13,62% SA. Analisis yang sama menunjukkan pala Maluku Utara terdiri atas 29-31 komponen. Komponen atsiri pala dari ekotipe Ternate tediri atas 37,22% HM, 20,12% MT; dan 2,80% SA; pala dari Tidore 57,99% HM, 13,50% MT; dan 24,27% SA; dan pala ekotipe Bacan 50,45% HM, 11,64% MT, dan 34,15% SA. Ada empat komponen penting dalam senyawa aromatik minyak atsiri, yaitu miristisin, elemisin, safrol, dan eugenol. Pala Maluku mengandung miristisin 5,57-13,76%; Maluku Utara 5,97-11,42%. Kadar safrol pala Maluku adalah 0,97-2,46% dan Maluku Utara 1,49-3,37%. Disimpulkan bahwa pala Banda di Maluku dan Maluku Utara stabil dalam sifat fisiko-kimia kecuali sifat putaran optik. Ekotipe Banda memiliki pala dengan kandungan senyawa aromatik miristisin tertinggi (13,76%).
Kata kunci: Pala Banda, ekotipe, minyak atsiri.
68
CHARACTERIZATION OF THE ESSENTIAL OIL COMPONENTS IN BANDA NUTMEG (Myristica fragrans Houtt)
Abstract
Essential oil of Banda nutmeg was characterized in order to study the oil con-tent and its volatile components. Banda, Ambon, and Luhu were chosen as represent-ative samples for Moluccas, and Ternate, Tidore, and Bacan for North Moluccas. Nutmegs harvested at two maturity levels, immature (3 to 5 months of ripe) and ma-ture (>7 months of ripe), and mace were used as materials for oil extraction using hy-drodistillation method. Nutmeg oils resulted were then subjected to physico-chemical and Gas Chromatography - Mass Spectrometry (GC-MC) analyses. Physico-chemical analysis was conducted for specific gravity, refraction index, optical rotation, evapo-ration residue. Volatile components of the oils were then analyzed by GC-MS.
Results indicated that nutmeg from Banda, Ambon, and Luhu ecotypes (Moluc-cas) produced uncolored nutmeg oils, whereas that from Tidore ecotype (North Mo-luccas) was pale yellow. Oil contents in the mature nut of Banda, Ambon, and Luhu were 11.69, 11.92, and 9.99%, respectively; meanwhile those in Ternate, Tidore, and Bacan were 7.90, 59.61, and 8,64%, respectively. Furthermore, oil content in the immature was higher. Oil contents of Banda, Ambon, and Luhu were respectively 13.32, 11.99, and 11.03%; whilst those of Ternate, Tidore, and Bacan were 13.32, 11.99, and 11.03%, respectively. Furthermore, nutmeg oil of Moluccas has specific gravity ranged from 0.897 to 0.909 g/ml; refraction index, 1.489 to 1.491; optical ro-tation, +11.40 to +16,30; and evaporation residue, 0.7 to 0.9%. For North Moluccas, the specific gravity was 0.884 to 0.910 g/ml, the refraction index, 1.486 to 1,491, the optical rotation, +18.2 to +40.0, and the evaporation residue, 0.9 to 1.0%. GC-MS analysis suggested that nutmegs from Moluccas composed of 28 to 31 components of essential oils, and North Moluccas 29 to 31 components. The analysis also showed that nutmeg from Banda comprised 52.8% monoterpene hydrocarbon (MH), 21.11% oxygenated monoterpene (OM), and 18,04% aromatic compound (AC); Ambon’s 45.12% MH, 24.51% OM, and 16.97% AC; and Luhu’s 56.06% MH, 27.34% OM, and 13,62% AC. The same analysis revealed that North Moluccas nutmegs contained 29 to 31 essential oil components. Ternate’s 37.22% MH, 20.12% OM, and 2.80% AC; Tidore’s 57.99% MH, 13.50% OM, and 24.27% AC; and Bacan’s 50.45% MH, 11.64% OMT, and 34.15% AC. In further analysis indicated that there were four im-portant volatile oils fractions in nutmegs i.e miristicin, elemicin, safrole, and eugenol. In Moluccas nutmeg was 5.57 to 13.76% miristicin; whereas in North Moluccas 5.97 to 11.42%. In addition, safrole content ranged from 0.97 to 2.46% in Moluccas, and 1.49 to 3.37% in North Moluccas. In conclusion, nutmeg oil shows a high stability in all physico-chemical properties across the six ecotypes except in optical rotation fea-ture. Nutmeg from Banda ecotype contains the highest content in miristicin (13,76%).
Keywords: Banda nutmeg, ecotype, essential oil.
69
PENDAHULUAN
Pala Banda (M. fragrans Houtt) merupakan tanaman rempah tahunan yang
berasal dari kepulauan Banda, Maluku. Daerah Maluku juga dikenal sebagai
'spice islands'. Tanaman pala memproduksi buah yang di dalamnya terdapat biji
dan fuli yang menyelimuti biji. Fuli sebagian besar berwarna merah darah, tetapi
ada juga yang berwarna kuning gading yang dihasilkan dari jenis pala 'Holland'.
Biji dan fuli merupakan bagian buah yang mengandung kadar minyak dalam
kuantitas yang lebih banyak.
Minyak pala biasanya diperoleh melalui proses distilasi uap, distilasi air atau
kombinasi keduanya. Secara umum kandungan minyak dalam biji pala berkisar
antara 5 sampai 15% (Peter 2001). Minyak pala berwarna bening, kuning pucat
atau hijau pucat dengan aroma pala yang khas. Minyak pala peka terhadap cahaya
dan suhu, larut dalam alkohol namun tidak larut dalam air. Selain minyak, dalam
pala terdapat lemak minyak (fixed oil) yang juga dikenal sebagai oleoresin atau
mentega pala. Oleoresin terutama tersusun dari asam trimiristin (Guenther 1952).
Produk pala (biji, fuli, dan minyak atsiri) secara umum digolongkan ke dalam
dua kategori, East Indian nutmeg dan West Indian nutmeg. Pala yang berasal
dari Indonesia tergolong ke dalam tipe yang pertama, sedangkan pala dari Grena-
da masuk kelompok kedua. Kedua tipe tersebut berbeda dalam beberapa karakte-
ristik dan aroma. Pala tipe East Indian lebih unggul daripada West Indian karena
memiliki aroma yang lebih baik dan kandungan eter fenil propanoid yang lebih
tinggi (Masada 1976) dan juga kadar terpen (Lewis 1984). Minyak pala East
Indian dilaporkan mengandung miristisin yang tinggi hingga 13,5%, sedangkan
minyak pala West Indian kadar miristisinnya kurang dari 1%.
Sifat fisiko-kimia minyak biji pala secara umum berbeda antara tipe East
Indian dan West Indian seperti dilaporkan oleh Guenther (1952) dalam Tabel 28.
Pala tipe East Indian dan West Indian memiliki sifat bobot jenis, indeks bias yang
hampir sama, tetapi cukup berbeda dalam sifat putaran optik, bilangan ester, dan
kelarutan dalam alkohol 90%. Kisaran putaran optik pala East Indian lebih lebar
daripada West Indian begitu pula halnya dalam bilangan ester.
Minyak pala juga dapat diperoleh dengan mengekstrak fuli dan daun. Fuli
dapat menghasilkan 4 sampai 17% minyak, sedangkan daun hanya menghasilkan
70
Tabel 28 Sifat fisiko-kimia minyak pala East Indian dan West Indian
Sifat Fisiko-kimia Tipe East Indian Tipe West Indian
Bobot jenis, 27 0C 0,865 - 0,925 0,859 - 0,865 Indeks bias, 27 0C/27 0C 1,479 - 1,488 1,469 - 1,472 Putaran optik (+80) - (+300) (+25045’) - (+38032’) Bilangan ester 2 - 9 6,8 - 7,3 Kelarutan dalam alkohol 90% 0,5:3 2:3 Sisa penguapan 1 - 1,5% 0,2 - 0,3%
Sumber: Guenther (1952).
minyak dalam kadar yang sangat rendah sekitar 1,7% (Sutedja 1980). Peter
(2001) melaporkan bahwa kadar minyak dalam daun kurang dari 1%, dan oleh ka-
rena itu distilasi minyak pala dari daun adalah tidak ekonomis. Minyak pala yang
dihasilkan dari daun meskipun secara kimia sama dengan yang dari biji dan fuli,
mutu rasa dan aromanya lebih rendah (Peter 2001). Standar mutu minyak pala di-
atur oleh Badan Standardisasi Nasional (BSN) yang menetapkan Standar Nasional
Indonesia SNI dengan dengan nomor SNI 06-2388-19998 (BSN 1999). SNI me-
rupakan pedoman persyaratan mutu yang dipakai guna menjamin kualitas minyak
pala komersial.
Tabel 29 Syarat mutu minyak pala Indonesia menurut SNI
Komponen mutu Satuan Persyaratan
Bobot jenis, 20 oC g/ml 0,876 - 0,919 Indeks bias, 20 0C/20 0C - 1,488 - 1,495 Putaran optik, 20 oC derajat (+8) - (+26) Kelarutan dalam etanol 90% % 1:3 jernih, seterusnya jernih Sisa penguapan (contoh 4,8 - 5,2 g) % Maksimum 3% Lemak - negatif Alkohol tambahan - negatif Minyak pelikan - negatif Minyak terpentin - negatif Sumber: BSN (1999).
Ekstraksi minyak pala dapat dilakukan dengan metode distilasi uap, distila-
si air, atau ekstraksi dengan karbon dioksida. Ekstraksi dengan menggunakan
CO2 lebih unggul dalam kualitas dan aroma minyak pala yang dihasilkan diban-
dingkan dengan cara distilasi (Naik et al. 1988).
71
Minyak pala hasil distilasi atau ekstraksi tidak berwarna (bening) atau
kuning pucat dengan aroma dan rasa khas pala. Minyak pala tidak larut air namun
larut alkohol dan memiliki bobot jenis pada suhu 25 °C sekitar 0,859 sampai
0,924, indeks bias 1.470 sampai 1.488 dan putaran optik +10° sampai +45° pada
suhu 20 °C (Peter 2001).
Di dalam minyak pala terkandung beberapa komponen atsiri, sebagian be-
sar adalah senyawa bernilai industri cukup tinggi. Komponen-komponen atsiri
minyak pala memiliki sifat-sifat farmakologi. Oleh karena potensi farmakologi
yang dimilikinya, minyak pala dimanfaatkan lebih luas sebagai bahan antibakteri
(Wendakoon dan Sakaguchi 1995; Ejechi et al. 1998; Stecchini et al. 1993; Huang
et al. 1997), dan untuk uji aktivitas dan metabolisme insulin (Broadhurst et al.
2000).
Berdasarkan kandungan komponen atsiri, minyak pala dapat dikelompok-
kan ke dalam tiga kelas: monoterpen hidrokarbon, monoterpen teroksigenasi, dan
eter aromatik. Monoterpen meskipun proporsinya dalam minyak pala lebih tinggi
tetapi secara ekonomi lebih rendah nilainya dibandingkan dengan eter aromatik.
Senyawa eter aromatik minyak atsiri pala terutama tersusun dari miristisin, ele-
misin, safrol, dan eugenol. Senyawa-senyawa tersebut adalah komponen atsiri
utama yang bertanggung jawab atas aroma dan rasa khas pala (Purseglove et al.
1981). Selain itu, fraksi miristisin bersama-sama dengan elemisin dilaporkan ber-
sifat halusinogenik (bersifat seperti narkotik).
Komponen utama monoterpen hidrokarbon dalam minyak pala adalah pi-
nen dan sabinen, sementara miristisin adalah penyusun terbesar komponen eter
aromatik. Miristisin, elemisin, dan safrol adalah penyusun utama komponen aro-
matik yang secara bersama-sama menentukan sifat aroma dan farmakologi pala
(Peter 2001). Identitas komponen-komponen atsiri pala dapat diketahui biasanya
dengan analisis GC (gas chromatography) atau GC-MS (gas chromatography-
mass spectrometry). Dalam penerapan GC-MS, sampel haruslah berupa senyawa
organik yang dipersiapkan dalam bentuk cair yang diinjeksi ke dalam kolom kro-
matografi gas. Pelarut yang digunakan harus bersifat volatil (misalnya, heksana
atau diklorometana). Secara umum GC-MS dimanfaatkan dalam analisis senyawa
kimia untuk:
72
• Identifikasi dan kuantifikasi komponen volatil dan semi volatil suatu campu-
ran senyawa;
• Penentuan bobot molekul dan (kadang-kadang) komposisi unsur penyusun su-
atu senyawa organik;
• Penentuan struktur suatu senyawa organik suatu campuran zat baik melalui
persesuaian spektrum dengan referensi atau dengan interpretasi spektrum data
sebelumnya.
GC adalah instrumen analisis yang efektif dalam separasi atau pemisahan
senyawa ke dalam komponen-komponen penyusunnya namun tidak dapat meng-
identifikasi secara spesifik identitas senyawa (Douglas 1990). Oleh karena itu,
untuk identifikasi suatu senyawa secara spesifik diperlukan instrumen tambahan,
yaitu MS. Dengan demikian untuk mendapatkan pemisahan senyawa berikut iden-
titas komponen-komponen penyusunnya diperlukan gabungan antara GC dan MS
yang disebut GC-MS.
Analisis GC-MS dipandang sebagai instrumen yang secara lengkap dapat
mengidentifikasi senyawa dan komponennya secara kualitatif. Analisis GC-MS
untuk identifikasi komponen atau senyawa telah banyak dilakukan (Zuas 2004).
Selain untuk analisis komponen atsiri minyak, GC-MS juga banyak diaplikasikan
dalam pengujian obat, kendali mutu hasil industri, dan uji mutu lingkungan.
Identitas suatu komponen senyawa atsiri dapat diketahui dari puncak
(peak) kromatogram komponen tersebut setelah dicocokkan identitasnya dengan
pustaka senyawa kimia (library). Dengan software Class 5k yang dijalankan seca-
ra otomatis oleh alat GC-MC QP5000, identitas senyawa yang mencakup bobot
molekul dan nama senyawa dapat diketahui.
Studi bertujuan mengeksplorasi lebih jauh mengenai minyak hasil ekstraksi
pala Banda dan mengkarakterisasi komponen atsiri penyusunnya pada beberapa
ekotipe di Maluku dan Maluku Utara.
BAHAN DAN METODE
Ekstraksi minyak pala
73
Ektraksi minyak pala dilakukan di unit penyulingan minyak atsiri Balai
Penelitian Tanaman Rempah dan Obat (BALITTRO), Bogor. Biji dan fuli pala
yang telah dikeringkan selama dua minggu dibawah sinar matahari digunakan se-
bagai bahan dalam ekstraksi minyak. Ekstraksi minyak pala menggunakan biji
yang diperoleh dari dua tingkat umur panen, 3 sampai 5 bulan dan lebih dari 7 bu-
lan.
Sampel biji dan fuli pala diambil dari dua daerah berbeda, Maluku dan
Maluku Utara. Sampel biji dan fuli dari Maluku diambil secara acak di tiga
lokasi, yaitu Ambon, Banda, dan Luhu. Untuk Maluku Utara juga diambil sampel
pada tiga lokasi masing-masing di Ternate, Tidore, dan Bacan.
Prosedur distilasi
Distilasi minyak pala menggunakan metode distilasi air dengan labu pe-
manas berkapasitas 500 ml. Prosedur yang digunakan dalam distilasi minyak pala
seperti yang dijelaskan oleh Ketaren (1985) dengan cara sebagai berikut.
a. Sebelum masuk ke labu distilasi, biji dan fuli pala dikeringkan selama dua
minggu untuk menurunkan kandungan air bahan sampai sekitar 10 sampai
15%.
b. Sebanyak 300 g biji pala kering dirajang dengan mesin perajang hingga men-
jadi potongan-potongan kecil yang lolos saringan berukuran sekitar 0,5 cm2.
Hal yang sama berlaku bagi fuli.
c. Sebanyak 50 g sampel biji/fuli diambil untuk penentuan kadar air sebelum dis-
tilasi.
d. Bahan pala yang telah dirajang dimasukkan ke dalam labu distilasi kemudian
ditambahkan air hingga volume 1 liter.
e. Labu dididihkan pada suhu sekitar 100 0C hingga seluruh minyak dalam bahan
terekstrak. Dibutuhkan waktu sekitar 10 hingga 12 jam untuk menyelesaikan
satu proses distilasi.
f. Minyak pala yang terekstrak dipisahkan dari air ikutan distilasi dengan cara
memindahkan ke botol baru yang berwarna gelap. Minyak hasil ekstraksi ke-
mudian dilabel dan disimpan pada suhu kamar untuk analisis selanjutnya.
Analisis sifat fisiko-kimia minyak pala
74
Minyak pala hasil distilasi selanjutnya dipakai sebagai bahan dalam anali-
sis sifat fisiko-kimia. Analisis sifat fisiko-kimia dilakukan di Laboratorium
BALITTRO, Bogor. Sifat-sifat fisiko-kimia minyak pala ditetapkan berdasarkan
metode dan prosedur Badan Standardisasi Nasional Indonesia (BSN 1999).
Prosedur analisis
Prosedur standar dalam analisis sifat fisiko-kimia minyak pala mencakup
bobot jenis, indeks bias, putaran optik, kelarutan dalam etanol 90%, dan sisa pen-
guapan.
1. Pengukuran bobot jenis
Bobot jenis (BJ) dihitung sebagai perbandingan antara bobot minyak de-
ngan bobot air pada volume dan suhu yang sama. Dalam penentuan BJ diperlukan
neraca analitik, penangas air, dan piknometer berkapasitas 50, 25, dan 10 ml yang
dilengkapi dengan termometer. Prosedur pengukuran BJ adalah:
a. Piknometer dibersihkan lalu dibasuh etanol kemudian dietil eter;
b. Bagian dalam piknometer dikeringkan dengan arus udara kering kemudian dan
tutupnya disisipkan;
c. Piknometer dibiarkan dalam kotak timbangan selama 30 menit lalu ditimbang
(m);
d. Piknometer diisi air suling yang telah dihangatkan pada suhu 20 0C. Gelem-
bung udara harus dihindari;
e. Piknometer dicelup ke dalam penangas air bersuhu 20 ± 0,2 0C selama 30
menit lalu penutupnya disisipkan kemudian piknometer dikeringkan;
f. Piknometer dibiarkan dalam kotak timbangan selama 30 menit kemudian di-
timbang dengan isinya (m1);
g. Piknometer dikosongkan lalu dicuci etanol dan dietil eter kemudian dikering-
kan dengan arus udara kering;
h. Piknometer diisi sampel minyak pala dan hindari terbentuknya gelembung
udara;
i. Piknometer dicelup kembali ke dalam penangas air bersuhu 20 ± 0,2 0C sela-
ma 30 menit kemudian tutupnya disisipkan;
75
j. Piknometer dibiarkan dalam kotak timbangan selama 30 menit lalu ditimbang
kembali (m2). Bobotnya dinyatakan dalam gram;
k. Bobot jenis kemudian dihitung menggunakan formula:
2. Pengukuran indeks bias
Indeks bias ditetapkan melalui pengukuran secara langsung sudut bias mi-
nyak pala yang dicatat oleh alat refraktometer. Pengukuran indeks bias minyak
pala dilakukan pada suhu kamar menggunakan refraktometer yang diperlengkapi
lampu natrium, termometer, dan penangas air. Angka pembacaan alat selanjutnya
dikalibrasi pada suhu standar 20 0C. Prosedur pengukuran indeks bias minyak pala
menggunakan refraktometer adalah sebagai berikut.
a. Air dialirkan melalui refraktometer agar alat berada pada suhu pembacaan;
b. Variasi suhu dijaga tidak lebih dari ± 2 °C dari suhu referensi dan harus diper-
tahankan dengan toleransi ± 0,2 °C;
c. Sebelum sampel minyak pala diukur indeks biasnya, suhunya harus disamakan
dengan suhu pengukuran (t1);
d. Pembacaan indeks dilakukan bila suhu sudah stabil.
e. Indeks bias dihitung dengan formula:
3. Pengukuran putaran optik
Putaran optik, yang menggambarkan polarisasi sinar oleh lapisan minyak
pala setebal 10 cm, diukur pada suhu kamar yang selanjutnya dikalibrasi pada su-
hu standar 20 0C. Pengukuran tersebut menggunakan alat polarimeter yang di-
tempatkan dalam ruang gelap. Polarimeter diperlengkapi dengan lampu uap nat-
rium yang menghasilkan cahaya monokromatik pada panjang gelombang 589,3
mm, dan tabung polarimeter dengan panjang 200 mm. Pada alat tersebut juga ter-
dapat termometer pencatat suhu sampel yang diamati. Langkah-langkah
pengukuran putaran optik minyak pala adalah sebagai berikut.
20 0C m2 - m BJ = ⎯⎯⎯⎯ 20 0C m1 - m
t t1 n = n + 0,0004 (t1 – t) D D
76
a. Sumber cahaya dinyalakan selanjutnya ditunggu sampai diperoleh kilauan
penuh;
b. Tabung polarimeter diisi sampel minyak pala yang sebelumnya telah ditetap-
kan pada suhu tertentu. Usahakan agar gelembung udara tidak terbentuk dalam
tabung sampel;
c. Tabung yang berisi sampel diletakkan dalam tabung polarimeter lalu baca
putaran optik (+) atau (-) pada skala alat;
d. Bersamaan dengan pembacaan alat, suhu sampel yang terekam termometer
polarimeter juga dicatat;
e. Hasil pembacaan alat dicatat dalam derajat. Prosedur a sampai d diulang sedi-
kitnya tiga kali untuk setiap sampel.
4. Pengukuran kelarutan dalam alkohol
Tingkat kelarutan minyak pala dalam alkohol (misalnya etanol) diperlihat-
kan oleh perubahan warna dari jernih hingga keruh. Kejernihan minyak pala da-
lam alkohol menunjukkan derajat kelarutannya, dan sebaliknya kekeruhan menun-
jukkan ketidaklarutan seluruh atau sebagian. Pengukuran sifat kelarutan dalam al-
kohol menggunakan etanol 90%, larutan pembanding kekeruhan perak nitrat 0,1
N dan tabung reaksi. Prosedur pengukuran kelarutan minyak pala dalam alkohol
adalah sebagai berikut.
a. Sebanyak 1 ml sampel minyak pala dimasukkan ke dalam tabung reaksi 10
ml;
b. Ke dalam sampel ditambahkan etanol 90% tetes demi tetes sebanyak 1 ml.
Campuran dikocok setiap penambahan etanol;
c. Setelah semua etanol diberikan, dilakukan pengamatan kekeruhan pada cam-
puran. Jika campuran tampak bening, penambahan etanol dihentikan;
d. Setelah sampel minyak pala larut, etanol berlebih perlu ditambahkan karena
beberapa minyak pala tertentu mengendap pada penambahan etanol lebih lan-
jut;
e. Kelarutan dalam etanol 90% dinyatakan sebagai perbandingan antara volume
minyak pala terhadap volume etanol yang menyebabkan warna campuran te-
tap jernih.
77
5. Pengukuran sisa penguapan
Sisa penguapan menggambarkan keberadaan zat asing yang tidak dikehen-
daki dalam minyak pala. Dalam penentuan sisa penguapan diperlukan perlengka-
pan, yaitu bejana penguapan, penangas air, desikator, dan neraca. Prosedur pen-
gukuran sisa penguapan minyak pala adalah sebagai berikut.
a. Bejana penguapan kosong dipanaskan di atas penangas air selama 60 menit
kemudian didinginkan dalam desikator selama 20 menit lalu ditimbang;
b. Sebanyak 5 g sampel minyak pala dimasukkan ke dalam bejana kosong (W1)
kemudian sampel panaskan di atas penangas air selama 5 jam. Sampel kemu-
dian didinginkan dalam desikator selama 20 menit selanjutnya ditimbang bo-
bot akhirnya (W2). Sisa penguapan dihitung dengan rumus:
W2 Sisa penguapan = ⎯⎯ x 100%
W1
Identifikasi komponen atsiri minyak pala
Bahan dan kondisi GC-MS
Identifikasi dan karakterisasi komponen-komponen atsiri dalam minyak
pala menggunakan GC-MS QP500 17A Shimadzu. Sebanyak 1 μl sampel minyak
hasil distilasi air pala diinjeksikan ke dalam kolom GC dan dibawa oleh gas heli-
um. Kolom terbuat dari metil xilaksan 5% dengan diameter 0,25 μ dan panjang
30 m. Sampel bergerak dalam kolom yang dibawa oleh gas helium dengan laju
aliran 1 m per menit dan tekanan 100 kPa. Analisis GC-MS dilakukan pada suhu
225 0C dengan suhu awal 50 0C. .
Data GC-MS dianalisis memakai program Class 5k. Setiap puncak kroma-
togram yang ditampilkan merupakan representasi satu senyawa atsiri yang identi-
tasnya dapat diketahui dengan cara membandingkannya dengan pustaka senyawa
atsiri (library) yang tersedia. Setiap senyawa kemudian dicocokkan identitas ki-
mianya dengan dua pembanding pustaka standar senyawa kimia, library #1:
NISST62.LIB-20 dan #2: NIST12.LIB-20. Setelah dicocokkan dengan pustaka
senyawa kimia, komponen-komponen minyak atsiri yang diperiksa akan ditam-
78
pilkan identitasnya yang meliputi indeks kesamaan, bobot molekul, dan nama se-
nyawa.
Proporsi setiap komponen atsiri dalam minyak pala yang dianalisis dinya-
takan dalam persentase terhadap total luas daerah puncak kromatogram. Parame-
ter kromatogram hasil analisis GC-MS mencakup nomor puncak (PKNO), waktu
retensi (R.Time), waktu awal (I.Time), waktu akhir (F.Time), luas kurva (Area),
tinggi kurva (Height), kurva (A/H), dan luas setiap kurva (%T). Luas setiap kurva
menunjukkan persentase kadungan komponen atsiri dalam minyak pala.
Analisis statistik
Data kuantitatif sifat fisiko-kimia dan komponen atsiri pala dianalisis seca-
ra statistik dengan prosedur ANOVA dan uji signifikansi nilai tengah Dunnett
menggunakan program statistik SAS (SAS 1996). Dalam uji Dunnett, semua nilai
tengah dibandingkan ke Banda sebagai standar.
79
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Kadar Minyak Pala
Minyak pala yang diperoleh dari proses hidrodistilasi biji pala memperli-
hatkan karakteristik warna fisik yang normal. Hasil memperlihatkan bahwa mi-
nyak pala dari Tidore (Maluku Utara) berwarna kuning pucat, sedangkan lainnya
berwarna bening (Gambar 9).
Gambar 9 Karakteristik warna minyak pala Maluku dan Maluku Utara.
Kandungan minyak biji pala tua beragam dari 7,95 sampai 11,92%.
Minyak pala diperoleh melalui distilasi biji pala yang dipetik setelah berumur
tujuh bulan. Tabel 30 memperlihatkan kadar minyak tertinggi diperoleh dari pala
ekotipe Ambon, yaitu 11,92%. Kadar tersebut tidak berbeda nyata dengan yang
dihasilkan dari ekotipe Banda, yaitu 11,69%. Kandungan minyak pala tua yang
berasal dari Luhu (Maluku) dan Ternate, Tidore, dan Bacan (Maluku Utara) seca-
ra statistik lebih rendah dibandingkan dengan yang berasal dari ekotipe Banda.
Kadar minyak terendah dihasilkan pala dari ekotipe Ternate, yaitu 7,95%. Secara
umum, rata-rata kadar minyak pala tua dari Maluku adalah lebih tinggi, yaitu
11,20% daripada yang berasal dari Maluku Utara, yaitu 8,73%.
Biji pala yang lebih muda, umur panen 3 sampai 5 bulan, menghasilkan le-
bih banyak minyak dibandingkan dengan biji tua (panen lebih dari 7 bulan).
80
Tabel 30 Kadar minyak biji tua pala Maluku dan Maluku Utara
Maluku Kadar minyak biji pala tua (%) Rataan 1. Banda 11,54 11,98 11,55 11,69 2. Ambon 11,86 11,75 12,16 11,92tn 3. Luhu 9,89 10,25 9,84 9,99*
Maluku Utara 4. Ternate 7,85 7,87 8,12 7,95* 5. Tidore 9,55 9,68 9,60 9,61* 6. Bacan 8,87 8,61 8,44 8,64*
Dunnett 0,46
Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05; tn tidak berbeda nyata.
Kadar minyak tertinggi dihasilkan dari pala yang berasal dari Ternate (Ma-
luku Utara), yaitu 13,32%. Kadar minyak pala Banda, pala Ambon secara statis-
tik tidak berbeda, tetapi berbeda dari pala yang berasal dari Luhu (Maluku) dan
Ternate, Tidore, dan Bacan (Maluku Utara). Rata-rata kadar minyak pala Maluku
lebih tinggi (12,39%) daripada pala Maluku Utara (12,11%).
Tabel 31 Kadar minyak biji muda pala Maluku dan Maluku Utara
Maluku Kadar minyak biji pala muda (%) Rataan 1. Banda 13,22 13,11 12,88 13,07 2. Ambon 12,56 12,44 13,45 12,82 tn 3. Luhu 11,54 11,56 10,72 11,27 *
Maluku Utara 4. Ternate 13,33 13,76 12,86 13,32 * 5. Tidore 12,11 11,65 12,22 11,99 * 6. Bacan 10,25 10,42 12,42 11,03 *
Dunnett 1,70
Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05; tn tidak berbeda nyata.
Dibandingkan dengan biji, fuli mengandung kadar minyak yang nyata lebih
tinggi. Kadar minyak fuli pala ekotipe Banda secara statistik tidak berbeda nyata
dengan yang terkandung dalam fuli pala ekotipe Ambon, Ternate, Tidore, dan Ba-
can, tetapi lebih besar daripada Bacan (Tabel 32).
Secara umum, fuli pala Maluku mengandung minyak lebih rendah (20,04%)
daripada Maluku Utara (20,84%). Kadar minyak dalam fuli pala tertinggi diper-
oleh pada pala Tidore, dan terendah pala Luhu.
81
Tabel 32 Kadar minyak fuli pala Maluku dan Maluku Utara
Maluku Kadar minyak fuli (%) Rataan
1. Banda 21,44 21,23 20,34 21,00 tn
2. Ambon 19,87 20,24 21,16 20,42 tn
3. Luhu 18,97 19,85 17,25 18,69 *
Maluku Utara
4. Ternate 22,35 21,42 22,16 21,98 tn
5. Tidore 21,35 20,42 21,25 21,01 tn
6. Bacan 20,15 19,87 18,56 19,53 tn
Dunnett 1,87
Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05; tn tidak berbeda nyata.
Kadar Air Pala
Kadar air biji tua pala dari Banda secara statistik tidak berbeda dengan kadar
air pala dari Ambon, Ternate, dan Tidore, tetapi berbeda dari pala Luhu dan Ba-
can (Tabel 33). Pala ekotipe Banda memiliki kandungan air yang paling rendah,
yaitu 8,23%; sementara biji pala ekotipe Bacan yang tertinggi kadar airnya,
9,71%. Pala Maluku mengandung rata-rata kadar air 8,67%, namun kadarnya le-
bih tinggi, yaitu 9,0% untuk pala Maluku Utara.
Tabel 33 Kadar air biji tua pala Maluku dan Maluku Utara
Maluku Kadar air biji tua (%) Rataan
1. Banda 8,11 8,13 8,45 8,23 2. Ambon 8,20 9,21 9,11 8,84 tn 3. Luhu 8,92 8,77 9,12 8,94*
Maluku Utara 4. Ternate 8,72 8,88 8,645 8,75 tn 5. Tidore 8,70 8,71 8,22 8,54 tn 6. Bacan 9,91 9,45 9,78 9,71*
Dunnett 0,70
Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05; tn tidak berbeda nyata.
Kadar air pala muda ekotipe Banda secara statistik tidak berbeda dengan
yang berasal dari Ambon, Luhu, ternate, Ternate dan Tidore; tetapi lebih rendah
82
daripada Bacan. Kandungan air biji pala muda berkisar dari 7,13 sampai 8,61%.
Biji pala muda Maluku memiliki kandungan air yang lebih sedikit daripada pala
Maluku Utara.
Tabel 33 menunjukkan kadar air fuli mengikuti pola yang sama dengan ka-
dar biji muda. Fuli pala Banda kandungan airnya secara statistik sama dengan pala
Ambon, Luhu, Ternate, dan Tidore.
Tabel 34 Kadar air biji muda pala Maluku dan Maluku Utara
Maluku Kadar air biji muda (%) Rataan 1. Banda 6,81 7,23 7,35 7,13 2. Ambon 6,90 8,31 8,01 7,74tn 3. Luhu 7,62 7,87 8,02 7,84tn
Maluku Utara 4. Ternate 7,42 7,98 7,55 7,65tn 5. Tidore 7,40 7,81 7,12 7,44tn 6. Bacan 8,61 8,55 8,68 8,61*
Dunnett 0,91 Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05; tn tidak berbeda nyata.
Pada Tabel 33 juga tampak fuli pala Bacan mengandung kadar air yang le-
bih tinggi (9,28%) dibandingkan pala lainnya. Secara rata-rata, fuli pala Maluku
mengandung kadar air 8,24%, sedangkan Maluku Utara 8,57%. Secara umum,
kadar air pala antar lokasi dan ekotipe tampaknya hanya sedikit bervariasi seba-
gaimana tampak pada Tabel 33 sampai 35.
Tabel 35 Kadar air fuli pala Maluku dan Maluku Utara
Maluku Kadar air fuli (%) Rataan 1. Banda 7,91 7,63 7,85 7,80 2. Ambon 8,00 8,71 8,51 8,41 tn 3. Luhu 8,72 8,27 8,52 8,50 tn
Maluku Utara 4. Ternate 8,52 8,38 8,045 8,32 tn 5. Tidore 8,50 8,21 7,62 8,11 tn 6. Bacan 9,71 8,95 9,18 9,28 *
Dunnett 0,76
Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05; tn tidak berbeda nyata.
83
Sifat Fisiko-kimia Minyak Pala
Sifat fisiko-kimia minyak pala yang umum dideskripsikan adalah bobot je-
nis, indeks bias, putaran optik, dan sisa penguapan. Pada Tabel 36 tampak pala
Maluku secara statistik bobot jenisnya sama dengan pala Maluku Utara. Sifat bo-
bot jenis minyak pala tidak mengalami perubahan yang berarti di enam lokasi
yang diteliti. Bobot jenis minyak pala berkisar antara 0,884 dan 0,909 g/ml. Nilai
tersebut ada dalam kisaran Standar Nasional Indonesia untuk minyak pala.
Minyak pala Maluku memiliki bobot jenis rata-rata 0,904 g/ml, sementara Maluku
Utara 0,901 g/ml. Tampak juga bahwa variasi nilai bobot jenis antar dan antara
ekotipe sangat kecil.
Tabel 36 Bobot jenis minyak distilasi pala dari Maluku dan Maluku Utara
Maluku Bobot jenis (g/ml) Rataan 1. Banda 0,907 0,899 0,911 0,906 2. Ambon 0,908 0,878 0,906 0,897 tn 3. Luhu 0,908 0,909 0,910 0,909 tn
Maluku Utara 4. Ternate 0,910 0,921 0,900 0,910 tn 5. Tidore 0,899 0,876 0,877 0,884 tn 6. Bacan 0,891 0,918 0,919 0,909 tn
Dunnett = 0,03 Ket: tn tidak berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05.
Indeks bias minyak pala Maluku dan Maluku Utara memperlihatkan variasi
yang kecil. Secara statistik, indeks bias minyak pala ekotipe Banda sama dengan
indeks bias pala lainnya (Tabel 37). Minyak pala Maluku memiliki indeks bias
antara 1,489 dan 1,491 dengan rata-rata 1,490, sementara Maluku Utara berkisar
antara 1,486 dan 1,491 dengan rata-rata 1,488. Variasi nilai indeks bias antar dan
antara kedua daerah sangat kecil, hal tersebut sangat baik bagi kestabilan mutu
minyak pala.
Tidak seperti indeks bias, putaran optik minyak pala ekotipe Banda (16,30)
secara statistik memperlihatkan perbedaan yang nyata dengan putaran optik
minyak pala ekotipe lainnya. Minyak pala Maluku memiliki putaran optik antara
13,00 hingga 16,30; sementara minyak pala dari Maluku Utara, putaran optiknya
berkisar 18,20 sampai 40,00.
84
Tabel 37 Indeks bias minyak distilasi pala dari Maluku dan Maluku Utara
Maluku Indeks bias Rataan
1. Banda 1,487 1,488 1,494 1,490 2. Ambon 1,494 1,490 1,488 1,491 tn 3. Luhu 1,488 1,489 1,490 1,489 tn
Maluku Utara 4. Ternate 1,486 1,481 1,491 1,486 tn 5. Tidore 1,492 1,490 1,490 1,491 tn 6. Bacan 1,487 1,489 1,487 1,488 tn
Dunnett 0,01 Ket: tn tidak berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05.
Tabel 38 juga memperlihatkan bahwa minyak pala Maluku Utara memiliki
nilai putaran optik yang lebih besar daripada Maluku. Rata-rata putaran optik
minyak pala Maluku dan Maluku Utara berturut-turut 13,30 dan 26,60. Tanda
positif berarti putaran optik memutar ke arah kanan.
Tabel 38 Putaran optik minyak pala distilasi dari Maluku dan Maluku Utara
Maluku Putara optik (derajat) Rataan 1. Banda 15,9 16,7 16,4 +16,3 2. Ambon 12,8 13,1 13,0 + 13,0* 3. Luhu 11,0 11,2 12,1 + 11,4*
Maluku Utara 4. Ternate 20,8 21,3 22,4 + 21,5* 5. Tidore 39,7 41,0 39,4 + 40,0* 6. Bacan 17,8 18,5 18,2 + 18,2*
Dunnett = 1,38 Ket: * berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05.
Sisa penguapan, sifat fisiko-kimia penting lainnya, secara statistik
menunjukkan persentase yang tidak berbeda antara minyak pala ekotipe
Banda (0,7%) dan ekotipe lainnya. Minyak pala Maluku setelah diuapkan
meninggalkan sisa penguapan antara 0,7 dan 0,9%; sementara minyak
pala Maluku Utara berkisar 0,9 sampai 1,0%.
Pada pala Maluku, sisa penguapan minyak pala rata-rata 1,1% dan dalam
Maluku rata-rata 0,9%. Tabel 39 memperlihakan bahwa sisa penguapan minyak
85
pala di kedua daerah relatif kecil, hal tersebut baik bagi kualitas minyak pala itu
sendiri.
Tabel 39 Sisa penguapan minyak pala dari Maluku dan Maluku Utara
Maluku Sisa penguapan (%) Rataan 1. Banda 0,4 0,6 1,1 0,7 2. Ambon 0,8 0,9 0,8 0,8 tn 3. Luhu 0,9 0,5 1,3 0,9 tn Maluku Utara 4. Ternate 0,9 1,1 1,0 1,0 tn 5. Tidore 1,2 0,8 0,7 0,9 tn 6. Bacan 1,0 1,0 0,8 0,9 tn Dunnett 0,60
Ket: tn tidak berbeda nyata dengan uji Dunnett pada α=0,05.
Komponen Minyak Atsiri: Pala Maluku
Analisis GC-MS pala Maluku menunjukkan bahwa minyak pala Banda ter-
susun dari 28 komponen atsiri. Komponen-komponen tersebut terdiri atas 52,8%
hidrokarbon monoterpen, 21,11% monoterpen teroksigenasi, 18,04% fraksi aro-
matik, dan 7,27% lainnya. Komponen atsiri terbanyak dijumpai dalam minyak
pala ekotipe Banda adalah miristisin, yaitu 13,76% (Tabel 40, nomor puncak 26).
Kromatogram hasil analisis GC-MS minyak pala ekotipe Banda pada Gam-
bar 10 memperlihatkan 28 puncak dan setiap puncak mewakili satu komponen
atsiri. Nisbah luas terhadap tinggi puncak proporsional dengan kandungan tiap
komponen atsiri dalam minyak pala. Beberapa puncak tidak teridentifikasi (tidak
bernomor). Puncak-puncak tak teridentifikasi tersebut merupakan pengotor, yaitu
bahan ikutan yang bukan komponen atsiri.
Analisis juga menunjukkan bahwa pinen (15,30%) merupakan senyawa
utama penyusun fraksi hidrokarbon monoterpen menyusul osimen (10,22%) dan
mirsen (3,42%). Komponen monoterpen teroksigenasi yang identitasnya terdetek-
si adalah terpinolen (1,54%) dan eukaliptol (1,76%). Miristisin adalah komponen
penyusun senyawa aromatik dengan kandungan tertinggi (13,76%) menyusul sa-
frol (2,44%). Pada pala ekotipe Banda dijumpai asam miristat dalam konsentrasi
6,55%.
86
Tabel 40 Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Banda
No. Pk Rumus Kimia Nama/Komponen Kons. (%)
1 C10H16 α-felandren 3,06 2 C10H16 Osimen 9,53 3 C10H16 β-pinen 9,55 4 C10H16 pinen 5,75 5 C10H16 β-mirsen 4,21 6 C10H16 mirsen 3,24 7 C10H16 felandren 0,64 8 C10H16 β-osimen 0,69 9 C10H16 α-terpinen 2,73
10 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 0,83 11 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 2,40 12 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 3,87 13 C10H16 γ-terpinen 4,71 14 C10H18O Hidrokarbon monoterpen 1,89 15 C10H16 Terpinolen 1,54 16 C10H18O Eukaliptol 1,76 17 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,74 18 C10H16O2 Monoterpen teroksigenasi 1,11 19 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,78 20 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 13,35 21 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 1,48 22 C10H1002 Safrol 2,44 23 C10H1802 Fraksi aromatik 0,72 24 C11H1402 Fraksi aromatik 0,83 25 C10H1202 Eugenol 0,90 26 C11H1203 Miristisin 13,76 27 C12H1603 Elemisin 0,94 28 C14H28O2 Asam miristat 6,55
Kromatogram hasil analisis GC-MS minyak pala ekotipe Banda pada Gam-
bar 8 memperlihatkan 28 puncak dan setiap puncak mewakili satu komponen
atsiri. Nisbah luas terhadap tinggi puncak proporsional dengan kandungan tiap
komponen atsiri dalam minyak pala. Beberapa puncak tidak teridentifikasi (tidak
bernomor). Puncak-puncak tak teridentifikasi tersebut merupakan pengotor, yaitu
bahan lain yang bukan komponen atsiri.
87
Indeks Kromatogram
Gambar 10 Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Banda.
Seperti minyak atsiri pala ekotipe Banda, ekotipe Ambon mengandung
komponen atsiri yang hampir sama namun jumlahnya ada 31 senyawa. Analisis
GC-MS menunjukkan bahwa pala ekotipe Ambon tersusun atas 45,12% hidrokar-
bon monoterpen, 24,51% monoterpen teroksigenasi, 16,97% fraksi aromatik, dan
11,75 senyawa asam lainnya (Tabel 41). Komponen terbanyak dalam minyak
atsiri ekotipe Ambon yang teridentifikasi adalah pinen (14,70%) menyusul miris-
tisin (13,54%). Komponen hidrokarbon monoterpen dalam pala ekotipe Ambon
terutama tersusun dari pinen (17,08%), osimen (7,8%), dan terpenin (4,6%). Se-
mentara fraksi aromatik umumnya adalah miristisin. Pala ekotipe Ambon juga
kaya asam miristat (yaitu komponen penyusun asam lemak oleoresin yang penting
bagi pembentukan mentega pala (fixed oil).
Gambar 11 memperlihatkan hasil analisis GC-MS minyak atsiri pala ekoti-
pe Ambon dengan 31 puncak kromatogram. Tampak puncak nomor 2, 3, dan 11
berhimpitan masing-masing dengan puncak di dekatnya. Puncak nomor 5 yang
merupakan senyawa pinen adalah yang paling dominan sebagai komponen atsiri
dalam minyak pala ekotipe Ambon.
Minyak atsiri pala ekotipe Luhu mengandung 56,06% hidrokarbon mono-
terpen, 27,34% monoterpen teroksigenasi, 13,62% senyawa aromatik, dan sisanya
11,70% senyawa asam (Tabel 42). Diantara senyawa hidrokarbon, β-pinen
88
Tabel 41 Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ambon
No. Pk Rumus Kimia Nama Komponen Kons. (%)
1 C10H16 α-felandren 2,28 2 C10H16 Osimen 7,18 3 C10H16 β-osimen 1,03 4 C10H16 Kamfen 0,34 5 C10H16 β-pinen 14,70 6 C10H16 β-mirsen 2,94 7 C10H16 felandren 0,63 8 C10H16 β-osimen 0,62 9 C10H16 Terpinolen 3,53
10 C10H16 Pinen 2,38 11 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 3,29 12 C10H16 γ-terpinen 4,60 13 C10H16 Monoterpen teroksigenasi 1,74 14 C10H16 Terpinolen 1,60 15 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 1,71 16 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,78 17 C10H16O2 Monoterpen teroksigenasi 1,20 18 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,85 19 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 13,70 20 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 1,67 21 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,40 22 C10H10O2 Safrol 2,46 23 C11H16O Monoterpen teroksigenasi 0,93 24 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,80 25 C11H14O2 Monoterpen teroksigenasi 0,55 26 C10H12O2 Isoeugenol 1,28 27 C11H1203 Miristisin 13,54 28 C12H1603 Elemisin 0,67 29 C11H22O2 Monoterpen teroksigenasi 0,84 30 C14H28O2 Asam miristat 11,32 31 C16H32O2 Asam heksadekanoat 0,43
89
Indeks Kromatogram
Gambar 11 Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ambon.
adalah yang paling dominan (17,43%). Sementara dalam kelompok senyawa mo-
noterpen teroksigenasi, C10H18O adalah yang paling tinggi kandungannya. Da-
lam kelompok senyawa aromatik, miristisin (5,57%) adalah komponen atsiri pal-
ing tinggi ditemukan dalam minyak pala ekotipe Luhu.
Seperti ditunjukkan pada Gambar 12, minyak atsiri pala ekotipe Luhu terdi-
ri atas 30 komponen. Puncak nomor 9 dan 23 masing-masing berhimpitan dengan
puncak di dekatnnya. Juga dalam gambar tampak bahwa meskipun puncak nomor
15 adalah yang tertinggi, tetapi bukan yang menggambarkan komponen terba-
nyak. Pada kromatogram diketahui komponen atsiri tertinggi diperlihatkan oleh
puncak nomor 3, yaitu β-pinen (17,43%).
Indeks Kromatogram
Gambar 12 Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Luhu.
90
Tabel 42 Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Luhu
No. Pk Rumus Kimia Nama Komponen Kons. (%)
1 C10H16 α-felandren 2,27
2 C10H16 Osimen 5,71
3 C10H16 β-pinen 17,43
4 C10H16 β-mirsen 2,91
5 C10H16 α-tujen 0,90
6 C10H16 β-osimen 0,69
7 C10H16 Terpinolen 4,02
8 C10H16 β-pinen 3,07
9 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 3,42
10 C10H16 γ-terpinen 6,28
11 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 1,89
12 C10H18O β-linalol 0,27
13 C9H14O2 Monoterpen teroksigenasi 0,85
14 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,62
15 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 15,23
16 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 1,32
17 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,32
18 C10H10O2 Safrol 0,97
19 C15H24 Farnesen 1,28
20 C11H14O2 Isoeugenol 3,91
21 C15H24 Hidrokarbon monoterpen 0,70
22 C15H24 Hidrokarbon monoterpen 1,15
23 C11H14O2 Fraksi aromatik 4,33
24 C11H12O3 Miristisin 5,57
25 C15H24 Hidrokarbon monoterpen 0,32
26 C12H16O3 Elemisin 2,05
27 C11H22O2 Monoterpen teroksigenasi 0,40
28 C15H26O Guaiol 0,32
39 C14H28O2 Asam miristat 11,39
30 C16H32O2 Asam palmitat 0,31
91
Komponen minyak atsiri: Pala Maluku Utara
Minyak pala ekotipe Ternate tersusun dari 37,22% senyawa hidro-
karbon monoterpen, 20,12% monoterpen teroksigenasi, 39,81% senyawa
aromatik, dan 2,80% asam pentadekanoat. Diantara kelompok hidrokar-
bon monoterpen, pinen adalah yang dominan (12,59%; puncak nomor 4
dan 10) menyusul osimen (7,83%; puncak nomor 2 dan 8). Dalam anali-
sis yang sama, tampak bahwa pala ekotipe Ternate cukup tinggi dalam
senyawa aromatik, seperti miristisin (17,02%) dan safrol (3,37%).
Indeks Kromatogram
Gambar 13 Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ternate, Maluku Utara.
Gambar 13 memperlihatkan ada 31 komponen atsiri penyusun mi-
nyak pala ekotipe Ternate. Puncak nomor 27 yang merupakan senyawa
aromatik miristisin adalah yang paling luas, meskipun yang puncak ter-
tinggi adalah nomor 17 (monoterpen teroksigenasi, C10H18O).
Analisis GC-MS menunjukkan bahwa minyak atsiri pala ekotipe
Tidore mengandung 30 komponen. Komponen-komponen atsiri tersebut
terdiri atas 57,99% hidrokarbon monoterpen, 13,50% monoterpen terok-
sigenasi, 24,27% senyawa aromatik, dan 0,91% asam miristat (Tabel 44).
Pinen adalah komponen terbanyak (23,36%) penyusun hidrokarbon mo-
noterpen; sedangkan isoeugenol merupakan kelompok aromatik yang pal-
ing tinggi kadarnya (9,82%).
92
Tabel 43 Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Ternate
No. Pk Rumus Kimia Nama Komponen Kons. (%)
1 C10H16 α-felandren 2,42 2 C10H16 β-tans-osimen 6,14 3 C10H16 Kamfen 0,31 4 C10H16 pinen 11,62 5 C10H16 β-mirsen 1,90 6 C10H16 mirsen 2,51 7 C10H16 felandren 0,83 8 C10H16 Osimen 1,69 9 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 3,2
10 C10H16 β-pinen 0,97 11 C10H16 3-karen 5,29 12 C10H18O Terpinolen 1,97 13 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,95 14 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,54 15 C9H14O2 Monoterpen teroksigenasi 1,18 16 C9H14O2 Monoterpen teroksigenasi 0,85 17 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 12,79 18 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 1,41 19 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,43 20 C10H10O2 Safrol 3,37 21 C12H14O3 Fraksi aromatik 0,96 22 C15H24 α-farnesen 0,34 23 C11H14O2 Fraksi aromatik 5,33 24 C10H12O2 Isoeugenol 1,8 25 C11H14O2 Fraksi aromatik 0,41 26 C11H14O2 Fraksi aromatik 0,32 27 C11H12O3 Miristisin 11,42 28 C11H12O3 Fraksi aromatik 3,05 29 C12H16O3 Fraksi aromatik 7,21 30 C11H14O3 Fraksi aromatik 0,34 31 C15H30O2 Asam pentadekanoat 2,80
93
Tabel 44 Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Tidore
No. Pk Rumus Kimia Nama Komponen Kons. (%)
1 C10H16 α-felandren 2,49 2 C10H16 β-tans-osimen 7,71 3 C10H16 β-pinen 5,72 4 C10H16 Pinen 11,27 5 C10H16 Pinen 0,96 6 C10H16 Pinen 2,65 7 C10H16 Pinen 2,76 8 C10H16 β-mirsen 4,07 9 C10H16 Felandren 1,08
10 C10H16 Osimen 1,18 11 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 1,90 12 C10H14 Hidrokarbon monoterpen 0,57 13 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 2,86 14 C10H16 β-felandren 2,73 15 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 5,83 16 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 3,32 17 C10H16 Terpinolen 2,28 18 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 1,55 19 C10H16O2 Monoterpen teroksigenasi 1,95 20 C10H16O2 Monoterpen teroksigenasi 0,86 21 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 8,16 22 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0,98 23 C10H10O2 Safrol 1,49 24 C15H24 Hidrokarbon monoterpen 1,93 25 C11H14O2 Isoeugenol 9,82 26 C11H14O2 Fraksi aromatik 1,82 27 C11H14O2 Fraksi aromatik 1,61 28 C11H12O3 Miristisin 5,97 29 C12H16O3 Elemisin 3,56 30 C15H30O2 Asam miristat 0,91
Gambar 14 memperlihatkan sebaran 30 puncak kromatogram kom-
ponen atsiri minyak pala Tidore. Puncak nomor 4 dan 7 sangat berdeka-
tan satu sama lain, begitu pula nomor 2 dan 27 masing-masing puncak-
nya berhimpitan dengan puncak di dekatnya. Puncak nomor 4 (pinen)
adalah yang terluas.
Kromatogram GC-MS juga memperlihatkan beberapa puncak-
puncak kecil yang tidak teridentifikasi. Puncak demikian merupakan
komponen pengotor yang terkandung dalam sampel minyak pala yang te-
rikut ke dalam analisis.
94
In-
deks
Kromatogram
Gambar 14 Komatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Tidore, Maluku Utara.
Minyak pala ekotipe Bacan memiliki 29 komponen atsiri. Komponen-
komponen terdiri atas 50,45% hidrokarbon monoterpen, 11,64% monoterpen ter-
oksigenasi, 34,15% senyawa aromatik, dan 3,79% asam miristat. Pinen (22,38%)
adalah penyusun utama komponen atsiri kelompok hidrokarbon monoterpen;
sedangkan penyusun utama kelompok monoterpen teroksigenasi adalah C10H18O
(7,97%). Seperti komponen aromatik minyak pala pada ekotipe lainnya,
miristisin masih tetap merupakan penyusun utama dengan kandungan 11,30%
(Tabel 45). Kromatogram komponen atsiri minyak pala ekotipe Bacan tampak
pada Gambar 15.
Indeks Kromatogram
Gambar 15 Kromatogram GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Bacan, Maluku Utara.
95
Tabel 45 Analisis GC-MS minyak atsiri pala ekotipe Bacan
No. Pk Rumus Kimia Nama Komponen Kons. (%)
1 C10H16 α-felandren 1.74 2 C10H16 β-tans-osimen 6.75 3 C10H16 β-pinen 7.38 4 C10H16 Pinen 6.33 5 C10H16 Pinen 3.23 6 C10H16 Pinen 0.87 7 C10H16 β-mirsen 2.28 8 C10H16 Mirsen 3.31 9 C10H16 Felandren 0.85
10 C10H16 Osimen 0.53 11 C10H16 Hidrokarbon monoterpen 1.61 12 C10H16 Pinen 4.57 13 C10H16 Limonen 4.19 14 C10H16 γ-terpinen 2.78 15 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 1.55 16 C10H16 Terpinolen 1.00 17 C10H18O Eukaliptol 1.38 18 C12H16O4 Monoterpen teroksigenasi 0.74 19 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 7.17 20 C10H18O Monoterpen teroksigenasi 0.80 21 C10H10O2 Safrol 2.57 22 C15H24 Hidrokarbon monoterpen 1.60 23 C11H14O2 Fraksi aromatik 11.80 24 C15H24 β-farnesen 0.57 25 C15H24 Hidrokarbon monoterpen 0.86 26 C11H14O2 Isoeugenol 1.77 27 C11H12O3 Miristisin 11.30 28 C12H16O3 Elemisin 6.71 29 C14H28O2 Asam miristat 3.75
Komponen utama atsiri: Senyawa aromatik
Analisis GC-MS mengungkapkan minyak pala Maluku mengandung 4 sam-
pai 6 senyawa aromatik; sementara Maluku Utara 5 sampai 10. Diantara kompo-
96
nen aromatik pala Banda, ada empat yang paling utama, yaitu miristisin, elemisin,
safrol, dan eugenol (Gambar 16).
OH2C
OOCH3
H3CO
H3COOCH3
Miristisin Elemisin
OH2C
O HO
H3CO
Safrol Eugenol
Gambar 16 Struktur kimia eter aromatik utama minyak atsiri pala Banda.
Pala ekotipe Banda mengandung miristisin lebih tinggi dari ekotipe lainnya.
Kandungan miristisin secara umum dalam minyak pala Maluku berkisar 5,57
sampai 13,76%; dan Maluku Utara, berkisar dari 5,97 sampai 11,42%. Elemisin,
fraksi aromatik lainnya, kandungannya dalam minyak atsiri pala Maluku adalah
0,67 sampai 2,05%; dan pada Maluku Utara antara 3,56 sampai 7,21%. Pada
Tabel 46 tampak kandungan elemisin minyak atsiri pala Maluku lebih rendah
daripada Maluku Utara.
Seperti halnya elemisin, safrol pala Maluku juga kandungannya dalam
minyak atsiri lebih rendah daripada Maluku Utara. Pala dari ekotipe Ternate me-
ngandung safrol yang paling tinggi (3,37%), sementara terendah terdapat pada
pala ekotipe Luhu (0,97%).
Tabel 46 Komponen atsiri utama pala Banda Maluku dan Maluku Utara
Maluku Komponen utama minyak atsiri (%) Miristisin Elemisin Safrol (Iso)eugenol
1. Banda 13,76 0,94 2,44 0,90 2. Ambon 13,54 0,67 2,46 0,55 3. Luhu 5,57 2,05 0,97 0,70
Maluku Utara 4. Ternate 11,42 7,21 3,37 1,80 5. Tidore 5,97 3,56 1,49 9,82 6. Bacan 11,30 6,71 2,57 1,77
97
Perbedaan yang paling nyata dalam kandungan senyawa aromatik keenam
ekotipe adalah kadar eugenolnya. Minyak pala ekotipe Tidore mengandung 9,82%
(iso)eugenol, sedangkan ekotipe lainnya hanya berkisar 0,55 dan 1,8% (Tabel 46).
Fraksi aromatik yang terkandung dalam minyak atsiri baik pada pala Malu-
ku maupun Maluku Utara merupakan komponen kedua terbanyak setelah hidro-
karbon monoterpen dan monoterpen teroksigenasi. Fraksi aromatik, terutama eter
aromatik, adalah komponen yang bertanggung jawab atas aroma khas minyak pa-
la.
Pembahasan
Pala menghasilkan dua tipe minyak, minyak lemak (fixed oil) yang memben-
tuk mentega pala, dan minyak atsiri (Forrest dan Heacock 1972). Minyak lemak
merupakan massa yang menyerupai mentega, berwana oranye diperoleh dengan
cara mengepres pala dengan tekanan dan suhu tinggi. Minyak atsiri pala meru-
pakan cairan tak berwarna atau kuning pucat memiliki karakteristik aroma rempah
diperoleh melalui hidrodistilasi atau distilasi uap biji pala/fuli. Umumnya minyak
pala distilasi bening tidak berwarna, tetapi biji pala tertentu dapat menghasilkan
minyak berwarna kuning pucat, seperti hasil distilasi pala Tidore. Warna pada
minyak pala terjadi oleh dua kemungkinan. Pertama, karena terjadi degradasi satu
atau beberapa komponen dari minyak atsiri akibat pemanasan yang cukup tinggi
yang berlangsung selama proses distilasi (Ketaren 1985). Suhu tinggi dapat me-
nyebabkan oleoresin terurai menjadi bagian-bagian antara lain lemak dan asam
miristat (Purseglove et al. 1981). Kedua, perubahan warna minyak pala menjadi
kuning pucat dapat disebabkan oleh kandungan hidrokarbon monoterpen yang
tinggi. Minyak atsiri pala Tidore mengandung lebih dari 57% hidrokarbon mono-
terpen. Senyawa tersebut lebih mudah mengalami oksidasi dan resinifikasi diba-
wah pengaruh cahaya dan udara, atau kondisi penyimpanan yang kurang baik, se-
hingga dapat mengubah warna/mutu minyak pala (Ketaren 1985). Penyimpanan
jangka panjang juga dapat merusak mutu minyak pala yang ditandai oleh peruba-
han warna (Sanford dan Heinz 1971).
Kandungan minyak pala ekotipe Banda secara statistik tidak berbeda dengan
ekotipe Ambon, tetapi lebih tinggi dibanding ekotipe lainnya. Kadar minyak pala
Maluku yang berkisar 9,99 sampai 11,92% tergolong lebih tinggi dibandingkan
98
kadar minyak Maluku Utara (7,95 sampai 9,61%). Kisaran kadar minyak pala ke-
dua daerah tidak jauh berbeda dengan kadar minyak pala produksi Grenada, yaitu
6,9 sampai 12,1% (Purseglove et al. 1981). Meskipun demikian, kualitas minyak
pala Banda dari Indonesia (East Indian) hingga saat ini dipandang masih yang ter-
baik (Masada 1976; Lewis 1984). Kandungan minyak pala secara umum ditentu-
kan oleh spesies pala (faktor genetik), umur tanaman, kondisi ekologis (iklim dan
kesuburan tanah), proses ekstraksi yang dipakai, dan tindakan budidaya yang di-
berikan. Kondisi ekologis termasuk faktor penentu utama produksi tanaman, ter-
masuk produksi minyak atsiri. Flamini et al. (2002) dalam penelitian pada tana-
man Rosmarinus officinalis L. pada dua ekotipe menemukan bahwa karaktersitik
minyak atsiri yang dihasilkan berbeda menurut lokasi geografi atau ekotipe tana-
man. Kesimpulan serupa juga diperoleh Coward et al. (1971) dan Dann et al.
(1977). Riddle et al. (1996) melaporkan bahwa kadar minyak redberry lebih ting-
gi pada musim panas dan semi daripada musim dingin dan gugur. Selain faktor
ekologi atau lokasi geografi, produksi minyak pala juga bergantung pada tindakan
budidaya yang diberikan pada tanaman. Pertanaman pala di Maluku dan Maluku
Utara praktis tidak pernah diberi pemupukan. Oleh karena itu, pe-ningkatan kadar
minyak pala Banda melalui pemberian pupuk kimia sangat memungkinkan.
Selain itu, faktor-faktor ekologis lainnya seperti kesuburan tanah juga dapat
menyebabkan terjadi perbedaan kandungan dan kualitas minyak atsiri yang diha-
silkan. Seperti tampak pada Tabel 8 bahwa Banda, Ambon, dan Luhu yang terle-
tak di wilayah yang dicirikan oleh tanah dengan tingkat kesuburan tanah yang re-
latif lebih baik (lebih tinggi dalam C-organik, N total, dan P) daripada Maluku
Utara.
Perbedaan bobot biji adalah faktor lainnya yang dapat menyebabkan perbe-
daan dalam kandungan minyak. Secara fisik biji pala ekotipe Banda 0,8 kali lebih
besar daripada pala Maluku Utara.
Dalam hal karakteristik fisiko-kimia, minyak pala Maluku memenuhi krite-
ria atau syarat utama mutu minyak pala berdasarkan standar SNI seperti pada Ta-
bel 27. Pala ekotipe Banda memperlihatkan stabilitas yang tinggi dalam sifat bo-
bot jenis, indeks bias, namun tidak dengan sifat putaran optik. Minyak pala Ma-
luku Utara putaran optiknya lebih tinggi daripada Maluku. Putaran optik yang
99
menggambarkan kemampuan memutar bidang polarisasi cahaya, pala Maluku
Utara yang memiliki putaran optik lebih tinggi, terutama ekotipe Tidore, kemung-
kinan berkaitan dengan kadar safrol yang tinggi.
Variasi komposisi atau komponen minyak atsiri ditentukan oleh beberapa
faktor, misalnya seperti kondisi ekologis dan spesies pala. Kan et al. (2006) dalam
penelitiannya menyimpulkan bahwa komposisi kimia minyak atsiri bergantung
pada kondisi iklim, musim, faktor geografis dan tanah, waktu panen, dan teknik
distilasi yang digunakan. Minyak atsiri umumnya terdiri atas berbagai campuran
senyawa kimia yang terbentuk dari unsur karbon, hidrogen, oksigen, dan unsur
lainnya seperti nitrogen dan belerang (Copalakrishnan 1992). Secara umum, ada
tiga kelompok yang penyusun komponen atsiri pada minyak pala, yaitu hidro-
karbon, hidrokarbon teroksigenasi, dan aromatik. Senyawa hidrokarbon sebagian
besar merupakan senyawa terpen; hidrokarbon teroksigenasi tersusun terutama
dari senyawa yang mengandung alkohol, keton, atau ester; sedangkan senyawa
aromatik, yang merupakan komponen yang bertanggung jawab atas aroma khas
pala terdiri atas senyawa eter aromatik.
Pala Maluku mengandung 28 sampai 31 komponen minyak atsiri, sementara
Maluku Utara 29 sampai 31. Komponen minyak atsiri pala Maluku sebagian
besar tersusun dari hidrokarbon monoterpen (45,12-56,06%). Demikian pula
Maluku Utara, minyak atsirinya mengandung hidrokabon monoterpen cukup
tinggi (37,22-57,99%). Hasil analisis juga menunjukkan bahwa monoterpen ter-
oksigenasi pala Maluku cukup tinggi (21,11-27,34%) jika dibandingkan dengan
Maluku Utara (11,64-20,12%). Senywa monoterpen yang terkadung dalam pala
merupakan komponen atsiri dominan. Forrest dan Heacock (1972) melaporkan
bahwa minyak pala dapat mengandung komponen monoterpen hingga 80%.
Faktor eksternal lingkungan pertumbuhan kemungkinan berkontribusi pada varia-
si kandungan komponen atsiri minyak pala, namun demikian tidak diketahui
dengan pasti faktor penyebab perbedaan komposisi atsiri. Lokasi geografis
dilaporkan berkaitan dengan variasi komposisi komponen atsiri minyak pala
(Shulgin et al. 1967) dan karakteristik organoleptik (Dann et al. 1977). Temuan
Riddle et al. (1996) juga menunjukkan bahwa kadar komponen atsiri mirsen
meningkat dalam redberry pada musim semi dan panas.
100
Penelitian juga mendapatkan bahwa secara umum komponen aromatik mi-
ristisin pala Maluku lebih tinggi daripada Maluku Utara, tetapi sebaliknya kom-
ponen aromatik lainnya (elemisin, safrol, dan eugenol) lebih rendah (Tabel 46).
Komponen aromatik, biasanya dalam bentuk senyawa eter aromatik, adalah kom-
ponen yang paling penting baik dari segi ekonomi maupun nilai indus-
tri/biofarmaka. Komponen aromatik minyak atsiri pala adalah penting. Miristisin,
safrol dan elemisin memiliki sifat halusinogenik (De Guzman dan Siemonsma
1999). Karakteristik tersebut sangat berguna dalam industri farmasi. Senyawa
aromatik juga sangat penting karena merupakan faktor penentu aroma dan mutu
minyak atsiri. Pala Maluku Utara mengandung (iso)eugenol yang cukup rendah
sehingga memberikan komposisi yang menghasil aroma khas pala yang baik (ti-
dak terlalu tajam). Sebaliknya, pala Maluku Utara menghasikan minyak pala
dengan aroma yang lebih tajam. Karakteristik aroma tajam tersebut kemungkinan
berkaitan dengan kadar iso(eugenol) yang tinggi dalam minyak atsiri, terutama
pala ekotipe Tidore.
Komposisi dan kandungan komponen atsiri minyak pala menurut Maarse
dan Kepner (1970) bergantung pada tingkat kematangan pala, spesies, dan faktor
lokasi, namun keberadaan komponen atsiri tertentu biasanya konsisten. Selain itu,
kadar komponen atsiri juga ditentukan oleh proses ekstraksi minyak atsiri yang
digunakan. Pasaribu (1995) dalam penelitiannya menemukan bahwa kadar miris-
tisin yang dihasilkan dari minyak atsiri pala yang melalui proses deterpenasi lebih
tinggi dan memiliki mutu medisinal yang lebih baik.
Komponen lain minyak atsiri adalah asam miristat. Senyawa tersebut terma-
suk kelompok asam lemak. Dalam proses penyimpanan minyak atsiri, biasanya
terjadi penurunan pada komponen tertentu, namun ada komponen yang bertam-
bah. Pada umumnya, kandungan asam miristat meningkat dengan bertambahnya
waktu penyimpanan. Oleh karena itu, asam miristat dapat digunakan sebagai indi-
kator mutu minyak pala kaitannya dengan penyimpanan (Sanford dan Heinz
1971).
101
KESIMPULAN
1. Pala Maluku menghasilkan kadar minyak atsiri lebih tinggi daripada Ma-
luku utara. Minyak pala Maluku mengandung 9,99-11,92% dan Malu-ku
Utara 7,95-9,61%.
2. Sifat fisiko-kimia minyak pala Banda relatif stabil kecuali sifat putaran
optik.
3. Sifat fisiko-kimia (bobot jenis, indeks bias, putaran optik, dan sisa pengua-
pan) minyak pala Maluku dan Maluku Utara umumnya stabil dan meme-
nuhi standar mutu SNI pala nasional kecuali pala ekotipe Tidore yang
memiliki putaran optik yang tinggi (+40,0) menyimpang dari standar SNI.
4. Komponen atsiri monoterpen pala Maluku lebih tinggi daripada Maluku
Utara. Pinen merupakan senyawa hidrokarbon monoterpen yang paling
banyak dijumpai dalam minyak atsiri pala.
5. Komponen atsiri aromatik pala Maluku dan Maluku Utara adalah miris-
tisin, elemisin, safrol, dan iso(eugenol). Miristisin adalan komponen aro-
matik tertinggi yang dijumpai dalam pala ekotipe Banda (13,76%).
6. Pala ekotipe Ternate dicirikan oleh kadar safrol tinggi sementara pala eko-
tipe Tidore dengan eugenol tinggi.
IDENTIFIKASI ISOZIM DAN DNA PALA BANDA (Myristica fragrans Houtt)
Abstrak
Pala Banda adalah tanaman rempah tahunan dan merupakan tanaman asli kepulauan Banda, Maluku. Secara ekologi tanaman pala memperlihatkan bebera-pa variasi baik di Maluku maupun di Maluku Utara. Penelitian bertujuan untuk mengetahui eko-stabilitas pala Banda pada level isozim dan DNA. Sampel daun pala diambil dari enam ekotipe, tiga di Maluku (Banda, Ambon, dan Luhu), dan tiga di Maluku Utara (Ternate, Tidore, dan Bacan). Sampel daun beku dianalisis isozim dan DNA-nya. Dalam analisis isozim digunakan empat sistem enzim: pe-roksidase (PER), aspartat aminotransferase (AAT), esterase (EST), dan asam fos-fatase (ACP); serta RAPD untuk analisis DNA. Dalam analisis isozim digunakan bufer Tris-HCl dengan pH 7,5. Gel elektroforesis isozim menggunakan gel pati 10% dan diruning pada arus tetap 18 mA selama 5 jam. Gel diwarnai menurut sistem pewarna masing-masing isozim lalu difiksasi dalam larutan fiksatif. Untuk analisis RAPD, DNA daun pala digerus dalam larutan bufer Tris-HCl pH 9,0. PCR amplifikasi menggunakan primer dekamer OPE 10 (GACTCTCAGG) and OPE 11 (GAGTCTCAGG). PCR dilakukan 45 siklus pada suhu 93 oC selama 1 menit, 35 °C selama 1 menit, dan 72 °C selama 2 menit kemudian 93 °C selama 4 menit untuk pre-denaturasi, dan 72 °C selama 8 menit untuk pemanjangan fragmen DNA. Produk amplifikasi dipisahkan dalam 1,5% gel elektroforesis, selanjutnya gel diwarnai dengan etidium bromida. Pita DNA divi-sualisasi dan diskor biner, 1 untuk ada pita dan 0 untuk tidak ada pita.
Zimogram menunjukkan bahwa isozim AAT pala Maluku bersifat monomorfik, sedangkan Maluku Utara memperlihatkan tingkat polimorfik yang sangat rendah. Pada isozim EST, tampak bahwa pala dari Maluku dan Maluku Utara memiliki pola zimogram yang monomorfik. Pada analisis RAPD, pala dari Maluku menunjukkan pola pita DNA monomorfik, tetapi agak polimorfik pada pala Maluku Utara. Dalam analisis RAPD dengan primer OPE 11, pala Maluku memperlihatkan indeks kesamaan, SI, antara 0,83 hingga 1,00; dan pala Maluku Utara, antara 0,73 sampai 0,86. Dengan OPE 10, diperoleh SI 0,95 sampai 1,00 untuk Maluku; dan 0,78 sampai 0,83 untuk Maluku Utara. Dengan demikian dapat dinyatakan bahwa pala Banda memperlihatkan stabilitas yang cukup tinggi dalam pola isozim dan DNA di empat ekotipe.
Kata kunci: Pala Banda, ekotipe, isozim, RAPD.
103
ISOZYMES AND DNA IDENTIFICATIONS FOR BANDA NUTMEG (Myristica fragrans Houtt)
Abstract
Banda nutmeg is a perennial spice crop that is indigenous to Banda islands, Moluccas. Ecologically, the crop shows some variations both in Moluccas and North Moluccas. The objective is to characterize eco-variability of the Banda nutmeg in terms of isozymes and DNA. Leaves of selected nutmeg trees were taken from six ecotypes, three in Moluccas i.e. Banda, Ambon, and Luhu, and another three in North Moluccas i.e. Ternate,Tidore, and Bacan. Collected leaves were kept in frozen condition for further use. Peroxidase (PER), aspartate amino-transferase (AAT), esterase (EST), and acid phosphatase (ACP) were used for iso-zyme analysis, and RAPD for DNA identification. Isozyme pattern was identified using a horizontal 10% gel electrophoresis. Electrophoresis was run at a constant current of 18 mA for 5 h. Gel staining using corresponding isozymes systems. For RAPD analysis, two decamer primers i.e. OPE-10 (GACTCTCAGG) and OPE-11 (GAGTCTCAGG) were used. PCR aplification was run with 45 cyc-les using ASTEC Thermal PC 707 thermocycler. Amplification products were separated on 1.5% agarose gel and were stained wih Etbr. DNA bands were scored in binary, 1 for present band and 0 for absent.
Results reveal that AAT of Moluccas nutmeg shows monomorphic bands, whereas that of North Moluccas reveals a slightly polymorphic pattern. Low level of polymorphic in ACP nutmeg is also expressed in both Maoluccas’ and North Moluccas’. EST isozyme, however, shows monomorphic patterns. RAPD analysis for Moluccas nutmeg indicates monomorphic bands, whilst North Moluccas shows a low level in polymorphism. DNA amplificated with OPE-11 has simila-rity index (SI) 0.83 to 1.00 for Moluccas and 0.73 to 0.86 for North Moluccas. Morever, with OPE-10, SI ranges from 0.95 to 1.00 for Moluccas and 0.78 to 0.83 for North Moluccas. In summary, Banda nutmeg has relatively high stability in isozymes and DNA patterns across the four ecotypes.
Keywords: Banda nutmeg, ecotype, isozyme, RAPD.
104
PENDAHULUAN
Indonesia memiliki sumberdaya genetik pala yang cukup besar dengan pu-
sat asal terletak di Kepulauan Maluku. Keragaman genetik pala tersebar di Pulau
Banda, Siau, dan Papua (Hadad dan Hamid 1990). Sebagai pusat keragaman gene-
tik (center of diversity), Indonesia harus mengambil peran yang lebih besar dalam
pengelolaan, pengembangan, dan pemanfaatan tanaman pala.
Tanaman pala di habitat tumbuhnya memperlihatkan variasi yang jelas da-
lam beberapa karakteristik morfologi. Genus Myristica dilaporkan memiliki seki-
tar 100 spesies (De Guzman dan Siemonsma 1999). Beberapa laporan me-
nyebutkan bahwa spesies-spesies pala tersebar terutama di wilayah Indonesia dan
Papua Nugini.
Karakterisasi untuk memastikan identitas sesungguhnya pala Banda sangat
perlu dilakukan untuk mencegah klaim dari pihak luar atas pala Banda itu sendiri.
Untuk itu perlu penanda yang stabil bagi pala Banda yang dapat digunakan
sebagai penciri yang unik. Dua penanda yang sudah lazim dipakai untuk
identifikasi adalah isozim dan RAPD (DNA).
Isozim adalah marka biokimia yang memiliki bentuk polimorfik dalam
jaringan organisme atau spesies tanaman dan berperan mengkatalisis reaksi-reaksi
metabolisme yang sama namun memiliki sifat-sifat fisika dan kimia protein yang
berbeda. Isozim akan memperlihatkan beberapa bentuk atau isomer bila dipisah-
kan secara elektroforesis (Acquaah 1992). Isozim yang lazim digunakan sebagai
alat identifikasi molekuler adalah ACP (acid phosphatase), ENP (endopeptidase),
ADH (alcohol dehydrogenase), MDH (malate dehydrogenase), EST (esterase),
PER (peroxydase), dan AAT (aspartate aminotransferase).
Isozim sebagai penanda biokimia dapat digunakan sebagai identitas yang
relatif stabil bagi suatu kultivar atau jenis tanaman. Isozim cukup akurat sebagai
penanda biologi dalam membedakan satu individu dari individu lainnya dalam
suatu populasi. Perbedaan karakteristik individu pada level biokimia (protein)
ditunjukkan dalam polimorfisme isozim. Polimorfisme isozim pada tanaman
ditunjukkan oleh variasi dalam molekul-molekul protein yang fenotipenya dapat
tampak dalam bentuk pita elektroforesis setelah diwarnai dengan pewarna spesi-
fik. Isozim yang akan dielektroforesis dapat diekstrak dari berbagai jaringan
105
tanaman yang pada umumnya dari bagian tanaman yang aktivitas enzim dan
metabolismenya tinggi seperti daun muda, batang yang sukulen, ujung akar,
kecambah atau embrio biji. Kondisi fisiologi dan lingkungan tanaman yang
berbeda dapat mempengaruhi fenotipe isozim hasil elektroforesis.
Pemisahan protein isozim dengan teknik elektroforesis memerlukan media
pendukung seperti gel pati atau akrilamida. Sebagai media, gel pati lebih disukai
karena lebih sederhana penyiapannya, tidak toksik, lebih murah, dan peralatan
pendukungnya lebih sederhana. Selain itu, ekstrak enzim tidak perlu dimurnikan
dengan sentrifugasi, lempengan gel pati dapat disayat secara horizontal menjadi
dua bagian atau lebih sehingga lebih menghemat bahan dan waktu.
Sebagai penciri biokimia, isozim memiliki beberapa kelebihan sebagai
penanda sifat-sifat tanaman. Isozim umumnya memperlihatkan pola pewarisan
Mendelian (Adam 1983), bersifat kodominan, berpenetrasi penuh, dan tidak
menunjukkan pleiotropisme atau epistasis. Meskipun sifat kodominan ada pada
isozim, namun tidak selalu tampak (Wendel 1989).
Sebagai produk langsung dari ekspresi DNA (translasi), isozim dapat
mencerminkan kalau terjadi perubahan pada level DNA melalui perubahan
komposisi asam amino protein. Oleh karena itu, isozim banyak dimanfaatkan
dalam menjelaskan struktur genetik populasi (Hamrick dan Godt 1989).
Dengan sifat kodominan dan penetrasinya yang penuh maka isozim akan
mencerminkan secara langsung kalau terjadi perubahan dalam sekuen DNA
melalui perubahan komposisi asam aminonya. Suatu lokus isozim didefinisikan
sebagai gen struktural yang mengendalikan sintesis protein enzim yang memiliki
kemampuan mengkatalisisis suatu reaksi biokimia tertentu. Jika gen diekspresikan
maka aktivitas hasil pewarnaan merupakan pertanda langsung produk dari dua
alel.
Dengan sifat dan kemampuan isozim seperti dijelaskan di atas sehingga
isozim banyak digunakan dalam kegiatan analisis bidang biologi tumbuhan. Iso-
zim dapat digunakan untuk memeriksa bentuk persilangan suatu tanaman apakah
menyerbuk sendiri (autogami), menyerbuk terbuka (alogami), apomiksis, kombi-
nasi dari kedua sistem tersebut, atau ketiga sistem. Isozim juga bisa dipakai
dalam analisis keragaman genetik dalam dan antarpopulasi tanaman. Dalam suatu
106
populasi pohon pala yang secara morfologi tampak seragam dan berasal dari
lokasi yang sama, dengan isozim kemungkinan dapat memperlihatkan keragaman.
Dalam sistematika tumbuhan, isozim dimanfaat dalam membedakan
spesies tanaman yang secara klasifikasi taksonomi sukar dibedakan hanya dengan
berdasarkan pada morfologinya. Dalam bidang pemuliaan tanaman, isozim
berguna sebagai penanda hasil silangan atau sebagai salah satu penciri varietas
tanaman. Dalam pembuatan hibrida diperlukan penanda genetik untuk menjamin
benih atau bibit yang dihasilkan betul-betul hasil silangan dari dua tetua yang
diinginkan, dan oleh karena itu benih tersebut harus mempunyai kombinasi pola
pita isozim tertentu dari kedua tetuanya (kodominan).
Varietas tanaman sebaiknya mempunyai identitas atau penanda isozim
agar benih yang diperjualbelikan terjamin kemurniannya. Isozim juga penting
dalam perakitan sifat ketahanan terhadap suatu penyakit atau hama tertentu dari
suatu varietas. Pengujian sifat ketahanan seringkali menimbulkan masalah keragu-
raguan, oleh karena itu pelacakan kemungkinan keterpautan antara fenotipe sifat
ketahanan tersebut dengan fenotipe isozim akan membantu menghilangkan ke-
ragu-raguan dengan cara mempergunakan penanda isozim. Keterpautan fenotipe
isozim dengan karakter yang mempunyai nilai ekonomi pada tanaman tahunan
akan lebih cepat membantu dalam menyeleksi tanaman tersebut pada tingkat bibit
atau benih.
Pada tanaman yang diperbanyak secara vegetatif, misalnya okulasi dan
penyambungan, penanda isozim dapat digunakan sebagai identitas batang bawah
atau batang atas yang benar-benar diinginkan. Kultur jaringan membantu
memperbanyak benih secara vegetatif dan diharapkan bibit yang dihasilkan
seragam secara genetik. Untuk menjamin keseragaman atau kebenaran bibit vang
dihasilkan dari perbanyakan secara kultur jaringan, pemeriksaan isozim sebagai
penanda bisa dilakukan pada saat tanaman masih berupa bibit.
Selain isozim, RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA) juga lazim
digunakan sebagai penanda atau penciri individu pada tingkatan DNA. RAPD
dihasilkan dari amplifikasi PCR fragmen DNA genom menggunakan primer
dekamer (William et al. 1990). Analisis RAPD khas dalam kesederhanaannya dan
kemampuan membedakan. Dengan didukung oleh metode statistik yang tepat,
107
analisis RAPD akan sangat efektif dalam mendeteksi adanya keragaman populasi
dalam berbagai jenis organisme.
Dalam studi molekuler digunakan analisis isozim dan RAPD untuk
mempelajari karakteristik variasi pala tipe Banda di Maluku dan Maluku Utara.
Dengan penanda isozim dan RAPD diharapkan identitas pala Banda menjadi
tegas.
108
BAHAN DAN METODE
Analisis Isozim
Ekstraksi isozim dilakukan di Laboratorium Ilmu Hayati, IPB Bogor. Sis-
tem isozim yang dianalisis adalah PER, AAT, EST, dan ACP. Tahapan esktraksi
dan isolasi isozim adalah penyiapan bahan, pembuatan larutan bufer, gel pati, eks-
traksi enzim, elektroforesis, pewarnaan, dan fiksasi gel.
Penyiapan bahan
Pada enam lokasi (Banda, Ambon, Luhu, Ternate, Tidore, dan Bacan) di-
pilih enam pohon pala yang padanya diambil sampel daun untuk ektraksi isozim.
Daun berumur sedang pada cabang utama kedua dari bawah dipilih sebagai sam-
pel. Daun terpilih dibawa dari lokasi ke laboratorium dalam termos berisi es ker-
ing untuk menjaga kesegarannya.
Pembuatan larutan bufer
Ada tiga macam larutan bufer yang digunakan dalam ekstraksi isozim yai-
tu bufer pengekstrak, bufer gel, dan bufer elektroda. Bufer pengekstrak terdiri
atas larutan Tris-HCl bufer pH 7,5; 7,5 mM sukrosa (w/v), dan PVP-40 (w/v).
Bufer gel tersusun dari larutan 5 mM L-histidin yang diatur pH-nya dengan Tris-
HD hingga 6,0; sementara bufer elektroda terdiri atas asam sitrat monohidrat dan
150 mM Tris-HD bufer pH 7,5.
Ekstraksi enzim
Daun sekitar 1 g dipotong kecil-kecil kemudian dimasukkan ke dalam
mortar yang bagian luarnya didinginkan dengan es batu. Ke dalam sampel ditam-
bahkan 1,2 ml bufer pengekstrak. Sampel digerus sampai halus kemudian dima-
sukkan ke dalam tabung ependorf-1,5 ml, kemudian disentrifugasi pada 12.000
rpm selama 10 menit pada suhu 5 oC. Supernatan diambil dengan pipet mikro lalu
dimasukkan ke dalam tabung ependorf kemudian disimpan dalam freezer untuk
tahap berikutnya.
Pembuatan gel pati
Sebelum gel dibuat, cetakan gel diolesi dengan parafin cair untuk
mempermudah melepas gel dari cetakan. Pati 10% dan larutan bufer gel
dimasukkan ke labu kemudian dididihkan di atas penangas air sambil diaduk
109
merata sampai gel matang (waktunya sekitar 10 menit). Untuk membebaskan gel
dari udara terperangkap, cairan gel panas divakum segera selama 10 menit kemu-
dian dituang dalam cetakan lalu dibiarkan pada suhu kamar hingga mengeras
menjadi gel.
Elektroforesis sampel
Ujung kertas saring dengan lebar sesuai lebar sumur gel dicelupkan ke da-
lam ekstrak sampel kemudian diselipkan ke sumur gel hingga seluruh sampel
mengisi sumur. Sebagai kontrol mobilitas elektroforesis digunakan bromofenol
biru yang diisikan pada salah satu sisi ujung sumur gel. Gel ditutup dengan plas-
tik dan selanjunya dielektroforesis selama 5 jam dengan kuat arus konstan 18 mA.
Pewarnaan dan fiksasi
Kertas saring yang ada di sumur dibuang dan gel diiris secara horizontal
menjadi dua potongan untuk pewarnaan dua macam enzim. Gel elektroforesis
kemudian direndam dalam larutan pewarna. Lama waktu perendaman sekitar 1
sampai 2 jam. Larutan pewarna untuk isozim tertentu bersifat spesifik dan harus
dipersiapkan dalam kondisi segar. Metode pewarnaan mengikuti metode Wendel
(1989). Komposisi sistem pewarna enzim PER, AAT, EST, dan ACP tampak pa-
da Tabel 47.
Tabel 47 Komposisi bahan untuk pewarnaan isozim Sistem enzim Bahan Jumlah PER 3-amino-9 ethylcarbazole 50 mg 0,1 M CaCl2 2 ml 30% H2O2 0,2 ml 0,05 Natrium asetat (pH 5) 95 ml AAT Asam aspartat 250 mg Asam α – ketoglutarat 150 mg Fast Blue BB salt 150 mg ACP Fast Garnet GBC salt 100 mg Buffer Natrium asetat (pH 5) 100 ml 0,1 M CaCl2 2 ml 1% α – naphthyl acid phosphatse 2 ml EST Larutan fosfat (NaH2PO4) 250 mg Larutan fosfat (Na2HPO4) 250 mg Fast Blue RR salt 150 mg
1% α – naphthyl acetate 2 ml
110
Setelah pewarnaan, gel dicuci dengan air mengalir hingga bersih kemudian
difiksasi menggunakan larutan yang terdiri atas etanol, akuades, asam asetat, dan
gliserol dengan proporsi 5:4:2:1. Pita-pita isozim yang tampak pada gel difoto
untuk analisis kuantitatif selanjutnya.
Analisis RAPD
Bahan tanaman. Analisis RAPD dilakukan di Laboratorium PKBT (Pusat
Kajian Buah-Buahan Tropika) IPB, Bogor. Daun tanaman pala yang dikumpulkan
dari enam lokasi (Ambon, Banda, Luhu, Ternate, Tidore, dan Bacan) di dua
daerah (Maluku dan Maluku Utara) digunakan sebagai bahan untuk ektraksi
DNA. Dua tanaman dipilih per lokasi sampling.
Isolasi DNA. Total DNA pala diekstraksi menggunakan metode CTAB
(Doyle dan Doyle 1987) dan konsentrasinya diukur secara spektrofotometri pada
λ 260 nm. Amplifikasi DNA dilakukan mengikuti prosedur Williams et al. (1990)
memakai primer OPE-10 (GACTCTCAGG) dan OPE-11 (GAGTCTCAGG).
Pemurnian DNA. Pemurnian DNA menggunakan metode Sambrook et
al. (1989). Larutan DNA ditambah 1 μl RNAse dan dibiarkan pada suhu kamar
selama 2 jam, lalu ditambahkan fenol kloroform isoamilalkohol dingin sebanyak
100 μl dan disentrifus pada 12 000 rpm selama 15 menit. Supernatan dipipet ke
dalam tabung baru dan ditambahkan kloroform isoamilalkohol dengan volume
yang sama, selanjutnya disentrifus lagi pada 12.000 rpm selama 15 menit. Super-
natan dipipet ke dalam tabung evendorf baru kemudian ditambahkan natrium ase-
tat 3 M pH 5,2 sebanyak 1/10 volume dan isopropanol dingin sebanyak 2,5 volu-
me. Larutan dikocok hingga homogen kemudian dalam freezer selama 60 menit
atau semalam. Larutan disentrifus selama 15 menit pada 12.000 rpm, pelet yang
diperoleh ditambahi etanol 70% sebanyak 100 μl dan disentrifus selama 5 menit
pada 12.000 rpm. Cairan dibuang dan pelet dikeringkan dengan cara membalikkan
tabung. Pelet yang sudah kering angin diberi 100 μl air bebas ion kemudian diko-
cok hingga larut sempurna.
Uji kualitas DNA. Gel agarose 0,8% dibuat dengan mencampur 0,32 g
agarosa dan 40 ml larutan TAE 1x, kemudian dipanaskan sampai mendidih. Laru-
tan dibiarkan sampai hangat lalu dituang ke dalam cetakan gel yang telah disisipi
111
sisir untuk cetakan sumur gel. Gel dibiarkan selama 1 jam hingga memadat. Se-
banyak 5 μl DNA hasil ekstraksi dicampur dengan 1 μl larutan pewarna kemudian
dimasukkan ke dalam sumur gel. Elektroforesis dilakukan dengan alat elektrofo-
resis horizontal pada tegangan 100 volt selama 30 menit. Gel yang telah dieletro-
foresis direndam dalam larutan ethidium bromida 0,1% kemudian dibilas dengan
air. Pita DNA diamati di atas UV transiluminator.
Uji kuantitas DNA. Larutan DNA sebanyak 20 μl dimasukkan ke dalam
kuvet dan ditambahkan 1.900 μl akuades steril. Nilai absorbansi larutan diukur
pada panjang gelombang 260 nm dan 280 nm. Kerapatan optik (optical density,
OD) 260 menunjukkan penyerapan UV oleh nukleotida, sedangkan OD 280
menunjukkan penyerapan UV protein. Molekul DNA dikatakan murni jika ratio
OD 260 terhadap OD 280 berkisar antara 1,8 sampai 2,0 (Sambrook et al. 1989).
Konsentrasi DNA dihitung dengan formula:
[DNA] (μg/ml) = A260 x 50 x faktor pengenceran.
Amplifikasi PCR
PCR (Polymerase chain reactions) dilakukan menggunakan volume reaksi
25 μl yang berisi 10 mM Tris-HCl pH 9;0; 150 mM KCl; 1,8 mM MgCl2 dan 0,1
mM masing-masing untuk dATP, dTTP, dGTP dan dCTP; 0,3 μM primer, 50 ng
DNA genom dan 0,5 unit Taq polimerase. Amplifikasi menggunakan mesin PCR
ASTEC Thermal PC 707. Amplifikasi PCR dimulai dengan inisiasi denaturasi
DNA selama 1,5 menit. Amplifikasi selanjutnya dilakukan sebanyak 45 siklus,
dimulai pada suhu 94 0C 1 menit, 37 0C 1 menit, 72 °C 2 menit, dan tahap akhir
siklus pertama 72 0C 4 menit. Proses amplifikasi akan berulang hingga mencapai
45 siklus. Fragmen produk amplifikasi dipisahkan dalam gel agarosa 1,5% dan
diwarnai dengan etidium bromida (Etbr) 0,5 mg per ml. Elektroforesis dilakukan
pada voltase 5 v/cm selama 2,5 jam lalu gel difoto di atas UV transiluminator.
Produk amplifikasi yang berupa pita-pita DNA diskor secara visual dan
diberi nilai 1 untuk ada pita, dan 0 untuk tidak ada pita. Berdasarkan skor biner
kemudian dihitung kemiripan pola pita DNA di antara sampel pala.
112
Analisis Data
Pita-pita isozim dan DNA diberi skor biner, yaitu 1 untuk ada pita, dan 0
untuk tidak ada pita. Indeks kesamaan (SI) pola pita DNA dihitung menurut for-
mula:
SI= 2Nxy/(Nx+ Ny)
Nxy adalah banyaknya pita yang muncul pada individu x dan y bersamaan, Nx ada-
lah banyaknya pita yang muncul pada individu x dan Ny adalah banyaknya pita
pada individu y (Nei 1978). Matriks korelasi (kesamaan) selanjutnya diarahkan
pada analisis komponen utama untuk lebih memperjelas hubungan antara indivi-
du. Analisis statistik dilakukan menggunakan SAS (SAS 1996).
113
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Isozim AAT
Zimogram atau pola pita isozim AAT pala yang berasal dari daerah Malu-
ku tampak pada Gambar 17. Analisis isozim menunjukkan bahwa isozim AAT
pala ekotipe Ambon, Banda, dan Luhu bersifat monomorfik. Sifat monomorfik
dapat diartikan bahwa pala Banda Maluku tidak memperlihatkan keragaman atau
variasi ekspresi pada level protein isozim AAT.
Gambar 17 Zimogram isozim AAT pala Maluku. (pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
Tidak seperti halnya pala Maluku, zimogram AAT pala Maluku Utara
memperlihatkan sedikit polimorfisme. AAT pala ekotipe Tidore dan Bacan
menunjukkan sifat polimorfisme yang rendah namun pala ekotipe Ternate bersifat
monomorfik (Gambar 18). Dua dari enam sampel tanaman pala ekotipe Tidore
mengekspresikan pita protein dimer yaitu masing-masing dua pita, sementara pala
Bacan satu pita berbeda.
Gambar 18 Zimogram isozim AAT pala Maluku Utara.
(pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
114
Variasi pola pita AAT pala ekotipe Tidore dan Bacan secara kualitatif
sangat kecil sehingga tidak memadai untuk dipakai sebagai penciri tanaman pada
level molekuler.
Isozim ACP
Analisis isozim ACP menunjukkan bahwa terdapat sedikit variasi (satu pi-
ta) antara pala ekotipe Banda dengan ekotipe Ambon dan Luhu. Pala ekotipe Am-
bon dan Luhu memperlihatkan pola ACP yang monomorfik. Gambar 19 memper-
lihatkan pala sampel nomor 7 ekotipe Banda mengekspresikan protein dimer (dua
pita protein).
Gambar 19 Zimogram isozim ACP pala Maluku. (pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
Analisis isozim pala Maluku Utara memperlihatkan adanya variasi ACP
yang terjadi pada pala ekotipe Tidore dengan dua pita yang berbeda (Gambar 20).
Dua ekotipe lainnya, Ternate dan Bacan, memperlihatkan pola ACP yang mono-
morfik.
Gambar 20 Zimogram isozim ACP pala Maluku Utara. (pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
115
Isozim PER
Analisis isozim menunjukkan pala Maluku dan Maluku Utara tidak mem-
perlihatkan perbedaan PER yang berarti. Pola pita keduanya bersifat monomorfik
(Gambar 21 dan 22). Tidak ada yang dapat membedakan antara pala ekotipe Ban-
da dan ekotipe lainnya dalam karakteristik PER.
Gambar 21 Zimogram isozim PER pala Maluku. (pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
Gambar 22 Zimogram isozim PER pala Maluku Utara. (pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
Isozim EST
Seperti isozim EST, pala Maluku dan Maluku Utara juga memperlihatkan
karakteristik dengan pola pita monomorfik. Keenam ekotipe pala mengekspre-
sikan EST dengan pita protein tunggal (monomer).
116
Gambar 23 Zimogram isozim EST pala Maluku. (pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
Stabilitas karakteristik isozim EST pala Maluku dan Maluku Utara dapat
dilihat pada zimogram Gambar 23 dan 24.
Gambar 24 Zimogram isozim EST pala Maluku Utara. (pita-pita di bagian bawah gel adalah interpretasi)
Profil DNA
Pola pita DNA genom pala yang berasal dari Maluku dan Maluku Utara
tampak pada Gambar 25 dan 26. Pada kedua gambar tampak polimorfisme DNA
pala Banda yang diamplifikasi dengan primer OPE-10 dan OP-11.
Pola pita DNA yang diamplifikasi dengan primer OPE-11 tampak pada
Gambar 26. Pola pita DNA dengan primer OPE-11 memperlihatkan bahwa pala
ekotipe Banda sangat mirip dalam dua ekotipe lainnya di Maluku dengan SI
masing-masing 95% terhadap Ambon dan 100% terhadap Luhu. Untuk Maluku
Utara, SI pala ekotipe Banda menjadi lebih kecil, masing-masing 78, 78, dan 83%
masing-masing terhadap ekotipe Ternate, Tidore, dan Bacan (Tabel 44).
117
Gambar 25 Pola pita DNA M. fragrans Houtt, dengan primer OPE-10. (lin 1 dan 2 pala Ambon, 3 dan 4 pala Banda, 5 dan 6 pala Luhu; 7 dan 8 pala Ternate,
9 dan10 pala Tidore, 11 dan 12 pala Bacan).
Gambar 26 Pola pita DNA M. fragrans Houtt, dengan primer OPE-11. (lin 1 dan 2 pala Ambon, 3 dan 4 pala Banda, 5 dan 6 pala Luhu; 7 dan 8 pala Ternate,
9 dan10 pala Tidore, 11 dan 12 pala Bacan).
Dengan menggunakan primer OPE-10 menghasilkan SI 73 sampai 100%,
dengan OPE-11, SI pala Banda antara 78 dan 100% (Tabel 44). Untuk Maluku,
SI pala ekotipe Banda berbeda 83% dengan ekotipe Ambon dan 100% dengan
ekotipe Luhu. Untuk pala Maluku Utara, SI pala ekotipe Banda berbeda 73, 79,
dan 86% berturut-turut terhadap ekotipe Ternate, Tidore, dan Bacan (Tabel 44).
Berdasarkan indeks original Nei (Nei 1978) diketahui bahwa jarak genetik
enam ekotipe pala 0 sampai 0,271 unit; sementara identitas genetiknya 0,7626
sampai 1,0000 unit (Tabel 48). Jarak genetik terdekat (0,000 unit) terjadi antara
pala ekotipe Banda dan Luhu dan antara Bacan dan Tidore, sementara jarak gene-
118
tik terjauh terjadi antara pala ekotipe Ambon dan Ternate (0,2710 unit). Jarak
genetik 0,000 berarti tidak tidak ada perbedaan antara dua ekotipe yang
dibandingkan. Identitas genetik yang paling kecil terjadi antara pala ekotipe
Ambon dan Ternate dan sebaliknya yang paling besar adalah antara pala ekotipe
Banda dan Luhu dan antara Tidore dan Bacan.
Tabel 48 Indeks Kesamaan (SI) pola pita DNA tanaman pala Banda
Primer Lokasi/Ekotipe SI∗)
OPE 10
Maluku: Banda 100 Ambon 83 Luhu 100
Maluku Utara: Ternate 73 Tidore 79 Bacan 86
OPE 11
Maluku: Banda 100 Ambon 95 Luhu 100
Maluku Utara: Ternate 78 Tidore 78 Bacan 83
*) SI (dalam%) pala ekotipe Banda adalah referensi.
Pala yang berasal dari Maluku mengelompok dalam klaster yang sama, se-
mentara pala Maluku Utara yang memperlihatkan variasi dan cenderung masuk ke
dalam grup Maluku Utara. Pala ekotipe Ambon dan Luhu memiliki identitas
genetik yang sama begitu pula halnya pala ekotipe Ternate dan Bacan (Tabel 49).
Tabel 49 Identitas genetik dan jarak genetik pala Banda
Ekotipe Ambon Banda Luhu Ternate Tidore Bacan Ambon **** 0,9703 0,9703 0,7626 0,7785 0,7785 Banda 0,0302 **** 1,0000 0,7976 0,8122 0,8122 Luhu 0,0302 0,0000 **** 0,7976 0,8122 0,8122 Ternate 0,2710 0,2261 0,2261 **** 0,8858 0,8858 Tidore 0,2504 0,2080 0,2080 0,1213 **** 1,0000 Bacan 0,2504 0,2080 0,2080 0,1213 0,0000 ****
Ket.: Identitas genetik Nei (diagonal atas) dan jarak genetik (diagonal bawah).
119
Keenam ekotipe pala bila digambarkan menurut identitas genetik dan kede-
katan jarak genetik tampak seperti pada Gambar 27. Pada Gamber 27 tampak pa-
la Banda mengelompok ke dalam ekotipe asalnya masing-masing, yaitu Maluku
dan Maluku Utara. Dendogram mengindikasikan bahwa kedekatan geografis men-
jadi faktor yang melatarbelakangi pengelompokan pala.
Banda
Ambon Luhu
Ternate Tidore
Bacan
9,21 4,21 1,29 0,0 Indeks Jarak Genetik
Gambar 27 Dendogram enam ekotipe pala Banda menurut pola DNA.
Pembahasan
Isozim penting dalam karakterisasi tanaman. Tanskley dan Orton (1983)
menjelaskan bahwa isozim merupakan produk langsung dari gen, terdiri atas
berbagai molekul aktif yang mempunyai struktur kimia yang berbeda tetapi
mengkatalisis reaksi kimia yang sama. AAT merupakan salah satu isozim
tanaman yang mengkatalisis reaksi transaminasi balik antara L-aspartat dan 2-
oxoglutarat menghasilkan oxaloacetat dan L-glutamate (Wilkie et al. 1996). Pada
penelitian diketahui AAT pala Banda secara umum memperlihatkan ekspresi yang
stabil di enam ekotipe. Pola pita isozim AAT pala Banda yang sebagian besar
monomorfik dapat diinterpretasi sebagai gambaran stabilitas ekspresi protein
enzim AAT pada beragam ekotipe. Pola isozim sebagai karakteristik atau fenotipe
tanaman pada level molekuler merupakan hasil dari interaksi antara faktor genetik
dan lingkungan. Eskpresi isozim dipengaruhi oleh faktor lingkungan dan fase per-
tumbuhan tanaman. Penggunaan isozim sebagai penciri tanaman dalam beberapa
hal menguntungkan. Lebeda et al. (2003) mengemukakan bahwa keuntungan
120
penggunaan isozim di antaranya adalah bentuk/pola isozim yang konstan untuk
waktu yang lama selama siklus hidup tanaman, memberikan informasi struktur
monomerik atau oligomerik enzim dalam keadaan homozigot atau heterozigot dari
suatu gen pada suatu lokus, dan dapat diamati pada tahap pertumbuhan dini
tanaman sehingga mempercepat proses identifikasi.
Pada pala Maluku Utara, AAT memperlihatkan polimorfisme yang rendah.
Jarak geografis yang cukup jauh antara Maluku dan Maluku Utara menciptakan
kondisi berbeda yang dapat mempengaruhi secara eksternal proses pertumbuhan
dan perkembangan pala termasuk dalam hal ekspresi isozim. Kondisi lingkungan
yang berbeda pada Maluku Utara memberikan pengaruh yang berbeda dalam
ekspresi isozim AAT. Dua pita AAT ekotipe Tidore mengekspresikan protein
enzim dimer, dan satu dimer pada ekotipe Bacan. Tingkat kesamaan karakter
morfologi 90% pala Banda tampaknya proporsional dengan variasi yang kecil
yang ditunjukkan oleh AAT oleh pala ekotipe Tidore dan Bacan Maluku Utara.
Hubungan karakter morfologi dengan ekspresi isozim tertentu tidak mudah
dipahami (Lebeda et al. 2003). Menurut Premoli et al. (2001) kisaran geografis
atau ekotipe yang luas merupakan prediktor yang baik mengenai tingkat variasi
ekspresi enzim pada tanaman. Jarak geografis yang cukup jauh antara ekotipe
Banda dengan ekotipe lainnya di Maluku Utara cukup mendukung pernyataan di
atas. Premoli et al. (2001) selanjutnya menyatakan bahwa spesies yang memiliki
penyebaran luas, memiliki populasi yang besar dan membentuk variasi yang
tinggi kurang dipengaruhi oleh efek genetic drift yang cenderung mengurangi
variasi genetik pada spesies dengan wilayah penyebaran geografisnya terbatas.
Pola ekspresi yang hampir sama dengan AAT terjadi pada isozim ACP.
Pala ekotipe Tidore mengekspresikan tingkat variasi isozim ACP yang rendah.
Variasi isozim ACP yang terjadi pada pala Maluku Utara dapat dipandang sebagai
respon adaptasi pala Banda di luar ekotipe aslinya, Pulau Banda. Variasi tersebut
penting karena merupakan unsur dasar adaptasi dan juga untuk menjaga stabilitas
tanaman dalam suatu ekosistem (Hamrick dan Godt 1989). Selain sebagai respon
adaptasi, ekspresi isozim tertentu bersifat konstitutif yang berarti diekspresikan
121
sebagai proses metabolisme normal tanaman yang tidak bergantung pada
perubahan kondisi lingkungan, seperti stres fisiologis. Isozim PER tergolong
jenis konstitutif. PER adalah enzim yang diperlukan setiap saat oleh tanaman un-
tuk menjaga agar metabolisme sel tidak terganggu oleh radikal bebas peroksida
yang berbahaya. PER berperan menetralkan peroksidase melalui proses oksidasi
sehingga menjadi aman bagi tumbuhan. Pada penelitian dengan isozim PER tidak
memperlihatkan variasi ekspresi. Manjunatha et al. (2003) menemukan hal yang
hampir sama pada tebu, yaitu PER memperlihatkan polimorfisme yang sangat
rendah. Pada penelitian dengan PER memperlihatkan fenotipe monomorfik pada
semua ekotipe. Pola ekspresi monomorfik PER juga sama dengan EST.
Karakteristik isozim yang monomorfik dan stabil (seperti PER dan EST)
bukan suatu yang tidak lazim. Penelitian dengan isozim katalase (CAT) pada
tanaman kenaf juga memperlihatkan pola isozim yang serupa dengan PER dan
EST (Indriani et al. 2002). Monomorfisme dalam isozim dapat dipergunakan
sebagai karakteristik molekuler pala Banda.
Ekspresi gen yang tergambar dalam pola pita DNA banyak digunakan
sebagai penciri atau karakteristik tanaman pada tingkat molekuler. Dalam
penelitian, karakteristik molekuler pala Banda dinyatakan dalam bentuk polimor-
fisme DNA atau RAPD. Pala Banda yang berasal dari Maluku memper-lihatkan
variasi yang sangat rendah (indeks kesamaan, 83-100%). Kemiripan pala Banda
di Maluku Utara menurun dengan indeks kesamaan 73-86%. Lokasi geo-grafis
atau ekotipe yang cukup jauh antara Maluku dan Maluku Utara kemungkinan
dapat menjelaskan variasi ekspresi DNA yang terjadi. Variasi dalam DNA pada
pala Banda, seperti yang diperlihatkan pala ekotipe Ternate danTidore, dapat
merupakan ekspresi atas perbedaan secara geografis/ekotipe pala Banda.
Pada penelitian tampak bahwa semakin jauh jarak geografis dari ekotipe
Banda, DNA cenderung bervariasi meskipun identitas genetik (0,7626 unit) dan
jarak genetik (0,2710 unit) tidak cukup banyak berubah. Di luar ekotipe aslinya,
pala Banda tidak cukup banyak mengalami variasi dalam level DNA. Stabilitas
genetik bagi pala Banda adalah sifat yang penting terutama bila dihubungkan
122
dengan karakteristik produksi buah dan komponen minyak atsiri. Meskipun belum
ada bukti yang menunjukkan perubahan karakteristik produksi dan komponen
minyak atsiri atas perubahan pada struktur genetik pala Banda, namun untuk
menjaga sifat khas pala Banda agar tetap dalam kondisi seperti ekotipe yang
sekarang adalah hal yang penting.
123
KESIMPULAN
1. Isozim AAT pala Banda secara umum relatif stabil dalam agroekologi Maluku
namun agak bervariasi dalam ekotipe Tidore dan Bacan (Makuku Utara). Hal
serupa terjadi pada isozim ACP pala ekotipe Tidore.
2. Pala Banda dari Maluku dan Maluku Utara secara umum tidak dapat dibeda-
kan berdasarkan isozim PER dan EST.
3. Terdapat 0,2710 unit jarak genetik antara pala Banda dari Maluku dan Maluku
Utara.
4. Terjadi penurunan identitas genetik 0,7626 unit pada pala Banda setelah ber-
kembang pada ekotipe Ternate, Maluku Utara.
PEMBAHASAN UMUM
Studi morfo-ekotipe pala menggambarkan karakteristik ekologi seperti
kondisi tanah, fisiografi lahan, tanah, iklim, dan karakteristik tanaman pala itu
sendiri khususnya morfologi, produksi dan buah.
Pertanaman pala di Maluku dan Maluku Utara terletak pada lanskap perbu-
kitan hingga pegunungan dengan kemiringan lereng 10 sampai 45% dan dari ke-
tinggian hingga 400 m dpl. Pertanaman pala di Banda, Ambon, dan Luhu terletak
mulai dari kaki gunung yang berjarak beberapa meter di atas permukaan laut (dpl)
hingga sekitar 500 m dpl. Sementara itu, areal pala di Ternate, Tidore, dan Bacan
terletak di lanskap pegunungan yang jaraknya sekitar beberapa kilometer dari tepi
pantai. Sebagian besar wilayah Maluku bertipe iklim IIIC kecuali kepulauan
Banda yang bertipe IIB. Dalam setahun wilayah Maluku menerima rata-rata cu-
rah hujan 2.029 hingga 2.951 mm dengan suhu 22,1 sampai 31,0 oC; kelembaban
82,1 sampai 85,5%; dan penyinaran 57 hingga 59%; serta memiliki dua pola hu-
jan: fluaktutif (multiple wave) dan ganda (double wave).
Pertanaman pala di Maluku Utara terdapat pada ketinggian dari 20 m hingga
500 m dpl. Intensitas penyinaran matahari yang sedang (50-60%) dan ketersediaan
air hujan yang cukup sepanjang tahun adalah kondisi ekotipe yang sangat baik ba-
gi perkembangan pala Banda. Selain itu, tanah vulkanik subur yang mendominasi
lahan pala di Maluku (Gunung Salahutu, Gunung Binaya, Gunung Api Banda)
dan Maluku Utara (Gunung Gamalama) menjadikan kondisi yang baik bagi pro-
duktivitas tanaman. Di luar habitat aslinya, pala Banda juga berkembang pada
daerah-daerah vulkanik. Vernon et al. dalam Purseglove et al. (1981) dalam sur-
vei tanah yang dilakukan di Grenada menunjukkan bahwa pulau-pulau tempat pa-
la berkembang tanahnya hampir seluruhnya berkarakteristik vulkanik, tersusun
dari batuan piroklastik dan lava masif. Kondisi ekologi yang demikian memben-
tuk, hingga tingkat tertentu, karakteristik khas pala Banda seperti sifat morfologi
dan agronomi.
Data ekologi, morfologi, dan agronomi penting dalam penyusunan suatu
desktipror pala. Deskriptor merupakan pedoman deskripsi karakteristik tanaman
atau varietas yang berguna untuk identifikasi spesies atau varietas (IPGRI 1980).
125
Berdasarkan uji Bartlett, karakteristik morfologi pala Banda memper-
lihatkan stabilitas yang tinggi (90%) di dua ekotipe, Maluku dan Maluku Utara.
Sifat stabilitas karakter menguntungkan tanaman baik dari segi agronomi maupun
ekologi. Secara agronomi, karakteristik morfologi yang stabil dapat digunakan se-
bagai identitas dalam identifikasi varietas (Guiard 1995). Pemanfaatkan karakter
morfologi sebagai deskriptor tanaman/varietas dapat diterima apabila sifat-sifat
tersebut memiliki nilai heritabilitas yang tinggi dan stabil (Cross 1990).
Berdasarkan analisis DNA pala ekotipe Maluku Utara memperlihatkan ja-
rak genetik 0,22 dari pala yang terdapat di luar ekotipe Banda. Tampaknya bahwa
semakin jauh jarak geografis dari Banda, DNA cenderung bervariasi dengan iden-
titas genetik (0,7626 unit) dan jarak genetik (0,2710 unit) yang tidak banyak beru-
bah. Di luar ekotipe aslinya, pala Banda tidak cukup banyak mengalami variasi
dalam level molekuler isozim maupun DNA.
Karakteristik pala Banda penting lainnya adalah produksi buah dan minyak
atsiri. Buah dengan edible portion tinggi seperti yang ditunjukkan oleh pala ekotipe
Bacan (EP = 84.23%) menguntungkan bagi pengembangan industri manisan pala.
Proporsi daging buah yang tinggi pala ekotipe Bacan memiliki nilai ekonomi yang
baik. Produktivitas per tahun pala Banda berkisar 1.700 sampai 2.600 buah/pohon.
Tingkat produksi tersebut setengah dari potensi produksi yang dapat dicapai. Pe-
mupukan tanaman dapat menghasilkan pala 5.000 buah/pohon/tahun. Produksi
tersebut setara dengan 26 kg biji kering. Produktivitas pala Banda juga dapat di-
perbaiki dengan pengaturan jarak tanam dan pemangkasan pohon pelindung seca-
ra teratur. Pohon pelindung bagi pala adalah hal yang pokok dan diperlukan se-
lama siklus pertumbuhan tanaman.
Minyak atsiri adalah komponen produksi penting lainnya dari pala Banda.
Penelitian menunjukkan bahwa biji dan fuli menghasilkan kadar minyak pala
yang berbeda. Fuli, yang merupakan arilus biji, mengandung minyak atsiri lebih
tinggi daripada biji. Kandungan minyak atsiri pala (biji tua) ekotipe Maluku seki-
tar 8,2 - 8,9% dan Maluku Utara 8,54 - 9,7%. Kadar minyak tersebut lebih tinggi
pada biji yang lebih muda (panen biji umur 3-5 bulan) dan fuli. Pala biji muda
ekotipe Maluku mengandung minyak 11,3-13,1% dan Maluku Utara 11,0-13,3%.
Kandungan minyak dalam fuli lebih tinggi lagi, yaitu 18,7 - 21,0% untuk Maluku,
126
dan 19,5 - 21,98% untuk Maluku Utara. Fuli merupakan arilus yang mempunyai
banyak sel-sel yang berperan meyimpan minyak atsiri dalam konsentrasi tinggi.
Kandungan minyak atsiri pala bergantung pada spesies tanaman, organ yang
diekstrak, umur panen, dan cara ekstraksi. Spesies M. fragrans Houtt hingga saat
ini adalah jenis pala yang memiliki produktivitas dan kualitas yang lebih tinggi
dari spesies lainnya, misalkan M. argentea Warb dan M. malabarica L. Spesies
M. argentea Warb yang merupakan pala Papua memiliki kandungan minyak atsiri
yang rendah dan beraroma tidak sedap (Purseglove et al. 1981). Demikian juga
halnya dengan M. malabarica L yang bahkan minyak atsiri yang dihasilkan tidak
memiliki aroma (Guenther 1952).
Kadar minyak juga bergantung pada organ tanaman pala. Biji dan fuli ada-
lah dua organ utama penghasil minyak atsiri dalam konsentrasi yang tinggi jika
dibandingkan dengan organ lainnya. Sutedja (1980) dalam penelitiannya menun-
jukkan bahwa daun pala yang diekstrak dengan cara distilasi hanya meng-hasilkan
1,7% minyak atsiri. Pada penelitian yang sama, biji dan fuli masing-masing
menghasilkan minyak atsiri 17,1% dan 21,8%. Biji pala muda mengandung mi-
nyak atsiri yang lebih tinggi dibandingkan organ pala lainnya. Biji pala muda pa-
la ekotipe Ternate mengandung minyak atsiri yang lebih tinggi, yaitu 13,32%.
Kandungan minyak atsiri yang tinggi pada biji pala muda disebabkan oleh kon-
sentrasi minyak yang terakumulasi dan belum mengalami degrarasi untuk peng-
gunaan proses metabolisme dan translokasi.
Minyak atsiri atau minyak pala diperoleh melalui beberapa metode ektraksi
dan distilasi (Daferera et al. 2002; Guo dan Yu 1985). Metode distilasi minyak
pala dilakukan dengan menggunakan air (hydro distillation) atau uap panas (steam
distillation). Minyak pala mudah menguap (sehingga disebut volatile oil), ber-
warna bening hingga kuning pucat dan memiliki bau dan rasa khas pala. Di udara
terbuka, minyak pala mengalamai oksidasi dan resinifikasi sehingga menghasilkan
minyak yang lebih kental (David et al. 2001).
Sifat minyak pala tampaknya bergantung pada karakteristik lokasi geografi
atau ekologi. Penelitian menunjukkan pala ekotipe Tidore menghasilkan minyak
pala berwarna kuning pucat, sedangkan ekotipe lainnya bening (Gambar 9). Ka-
rakteristik minyak pala lainnya adalah sifat fisiko-kimia. Sifat fisiko-kimia mi-
127
nyak pala yang utama adalah bobot jenis, indeks bias, putaran optik, dan kelarutan
dalam alkohol. Sifat-sifat tersebut menentukan mutu minyak pala. Menurut Tjip-
tadi dan Yasnita (1986) lama waktu distilasi mempengaruhi bobot jenis, indeks
bias, putaran optik, dan sisi penguapan. Sifat fisiko-kimia minyak pala ekotipe
Maluku umumnya stabil daripada Maluku Utara. Bobot jenis pala ekotipe Malu-
ku adalah 0,897 - 0,909 ml/g, sedangkan Maluku Utara 0,884 - 0,910 mm/g. Ki-
saran bobot jenis yang diperoleh sesuai dengan SNI pala nasional. Bobot jenis
minyak pala yang memenuhi standar menurut SNI adalah 1,488 - 1,495 (kiteria
lengkap terdapat pada Tabel 29). Stabilitas dalam bobot jenis pala Banda penting
karena menentukan kualitas komersialnya. Sifat fisiko-kimia lainnya adalah in-
deks bias. Penelitian menunjukkan kedua ekotipe memiliki pala dengan indeks bi-
as yang stabil, yaitu 1,489 - 1,491 untuk ekotipe Maluku, dan 1,486 - 1,149 untuk
Maluku Utara. Kriteria indeks bias yang ditetapkan oleh British Standard Institu-
tions for Nutmeg Oil bagi minyak pala East Indian adalah 1,4750 - 1,488, dan ba-
gi West Indian adalah 1,4720 - 1,4760 (Peter 2001).
Penelitian selanjutnya menunjukkan pala Maluku dan Maluku Utara me-
ngandung 28 sampai 31 komponen atsiri. Sebagian besar komponen penyusun
minyak atsiri pala Banda adalah senyawa terpenoid (hidrokarbon monoterpen dan
monoterpen teroksigenasi). Kandungan senyawa terpenoid yang tinggi adalah hal
umum yang dilaporkan oleh beberapa peneliti minyak atsiri (Buckmire 1992).
Penelitian menunjukkan bahwa pinen adalah komponen atsiri yang dominan ter-
dapat dalam minyak atsiri pala Banda. Komponen atsiri utama lainnya adalah se-
nyawa aromatik. Analisis GC-MS mendeteksi adanya empat senyawa aromatik
utama minyak atsiri pala Banda, yaitu miristisin, elemisin, safrol, dan eugenol.
Pala ekotipe Banda mengandung miristisin tertinggi 13,76%; sementara ekotipe
Ternate mengandung safrol cukup tinggi, yaitu 3,37%; dan pala ekotipe Tidore
kaya komponen euogenol (9,82%). Miristisin, elemisin, dan safrol adalah senya-
wa atsiri yang bersifat halusinogenik dan toksik. Oleh karena itu, pala dengan ka-
dar senyawa aromatik tinggi secara ekonomi menguntungkan untuk dikembang-
kan terutama untuk industri farmasi. Kandungan dan komposisi komponen atsiri
minyak pala cukup bervariasi antar ekotipe. Kan et al. ( 2006) dalam penelitian-
nya menyimpulkan bahwa komposisi kimia minyak atsiri bergantung pada kondisi
128
iklim, musim, faktor geografis dan tanah, waktu panen, dan teknik distilasi yang
digunakan. Minyak atsiri umumnya terdiri atas berbagai campuran se-nyawa ki-
mia yang terbentuk dari unsur karbon, hidrogen, oksigen, dan unsur lainnya seper-
ti nitrogen dan belerang (Copalakrishnan 1992).
Secara ekologi karakteristik pala Banda baik dalam aspek morfologi, agro-
nomi, dan DNA memperlihatkan variasi yang kecil. Pada level morfologi, pala
Banda di enam ekotipe menunjukkan variasi sekitar 10%. Pada level DNA, pala
Banda tidak cukup banyak berubah sebagaimana ditunjukkan oleh identitas gene-
tik yang hanya turun hingga sekitar 76,3%. Perubahan tersebut terjadi pada pala
Banda ekotipe Ternate. Homogenitas populasi pala Banda pada agroekosistem di
Maluku dan Maluku Utara sangat mendukung stabilitas karakter genetik. Penyer-
bukan silang yang merupakan tipe utama perkembangbiakan seksual pala Banda
tidak cukup tekanannya untuk mengubah performa genetik sebab ekotipe tersusun
oleh populasi pala Banda yang sangat homogen. Terhadap karakteristik isozim,
pala Banda memperlihatkan performa yang lebih homogen/stabil.
Terhadap karakteristik agronomi, seperti produksi dan sifat-sifat buah peru-
bahannya cukup beragam. Variasi karakter agronomi yang terjadi antar ekotipe
lebih banyak ditentukan oleh pengaruh faktor-faktor lingkungan tanaman. Pro-
duksi sebagai karakter kuantitatif biasanya sangat bergantung pada kondisi ling-
kungan. Faktor lingkungan seperti tingkat kesuburan tanah, penyinaran matahari,
suhu udara dan ketersediaan lengas tanah adalah faktor dominan yang secara lang-
sung berhubungan dengan produktivitas tanaman. Flamini et al. (2002) dalam
penelitiannya pada Rosmarinus officinalis L menyatakan bahwa karakteristik
agronomi dan produksi dicirikan oleh kondisi ekotipe tanaman. Lebih jauh
Copalakrishnan (1992) memperlihatkan bahwa komposisi minyak atsiri pala ber-
variasi menurut asal geografisnya. Tidak ada penelitian yang mendalam menge-
nai hubungan variasi produksi minyak atsiri dengan karakteristik ekologis begitu
juga dengan faktor genetik tanaman. Secara umum dapat dikatakan bahwa faktor
lingkungan ekologis bersama-sama dengan faktor genetik tanaman membentuk
fenotipe dengan karakteristik tertentu tanaman.
Dalam sistem budidaya, pengelolaan tanaman pala di Maluku dan Maluku
sepenuhnya tidak memasukkan input teknologi produksi, seperti misalnya pembe-
129
rian pupuk kimia dan pengendalian hama/penyakit dengan pestisida. Pengelolaan
tanpa input teknologi pertanian telah lama dipraktekkan oleh petani pala di Malu-
ku dan dilakukan secara turun-ternurun. Oleh karena itu, sistem budidaya pala di
Maluku dan Maluku Utara dapat dikategorikan sebagai sistem pertanian organik
penuh (fully organic farming system). Dari sisi produktivitas, sistem tanpa input
tidak dapat menghasilkan produksi maksimal, tetapi dari sisi ekologis sangat
menguntungkan. Pertanaman pala dengan sistem pertanian organik bebas dari ba-
han kirnia (pupuk, pestisida atau zat pengatur tumbuh) yang berpotensi meng-
ganggu ekosistem dan lingkungan.
Dalam penelitian diketahui dari informasi petani bahwa pemberian input
teknologi, misalnya pupuk kimia dapat dilakukan, tetapi urnumnya tidak dikehen-
daki oleh petani. Petani pala, khususnya di Maluku menghendaki tingkat produk-
tivitas seperti saat ini. Menurut pengalaman petani, produktivitas pala yang mele-
bihi tingkat saat ini dapat mempersingkat umur biologis tanaman. Meski belum
ada penelitian yang membuktikan pernyataan petani tersebut, tetapi kenyataan di
lapangan menunjukkan bahwa umumnya pohon-pohon pala dengan pengelolaan
sangat minimal masih memperlihatkan produktivitas yang relatif tinggi dan stabil
bahkan hingga berumur di atas 50 tahun.
Kandungan dan komposisi minyak atsiri pala berhubungan dengan karakte-
ristik ekotipe sebagaimana dilaporkan oleh Kan et al. ( 2006). Perubahan karakte-
ristik ekotipe, seperti perubahan tingkat kesuburan tanah akibat pemupukan ke-
mungkinan berpotensi mengubah karakteristik tanaman, termasuk kadar dan kom-
ponen dari minyak atsiri. Untuk pengembangan dan pelestarian plasmanutfah, pa-
la Banda perlu diarahkan pada program yang disebut perlindungan indikasi geo-
grafis. Program perlindungan indikasi geografis penting untuk menjaga ciri
khas dan karakteristik Banda. Selain itu, juga diperlukan upaya yang menga-
rah pada pelepasan pala Banda sebagai varietas.
KESIMPULAN DAN REKOMENDASI
Kesimpulan
1. Kondisi iklim, tanah, dan fisiografi daerah Maluku dan Maluku Utara telah
membentuk karakteristik tertentu pala Banda yang tumbuh, berkembang, dan
beradaptasi dengan baik. Fisiografi bergunung, curah hujan yang cukup dan
suhu serta kelembaban udara yang normal, dan intensitas penyinaran matahari
yang relatif rendah hingga sedang sangat mendukung perkembangan dan pro-
duktivitas pala Banda.
2. Berdasarkan 5 variabel iklim, 14 sifat tanah, dan 29 karakteristik tanaman pa-
la, agroekologi Maluku dan Maluku Utara dapat dikelompokkan ke dalam
empat morfo-ekotipe: morfo-ekotipe Banda (meliputi Pulau Banda dan Am-
bon), Luhu, Ternate (meliputi Pulau Ternate dan Bacan), dan Tidore.
3. Penciri utama yang mendasari pengelompokkan agroekologi menjadi empat
morfo-ekotipe adalah faktor tanah dan iklim yaitu N-total (kontribusi 4,15%),
kelembaban udara (4,08%), penyinaran matahari (4,06%); dan karakteristik
tanaman pala, yaitu indeks kesamaan DNA (4,28%), produksi fuli (4,26%),
dan kandungan senyawa aromatik (4,00%).
4. Karakter morfologi pala Banda membentuk tiga klaster dengan indeks
kesamaan 90%. Produksi buah pala berkorelasi positif dan nyata dengan
jumlah cabang. Produksi pala (jumlah dan bobot buah, biji, dan fuli) umum-
nya tidak bervariasi hingga elevasi 300 m dpl.
5. Karakteristik isozim peroxidase, aspartate aminotransferase, esterase, dan acid
phosphatase pala Banda umumnya monomorfik dan memperlihatkan stabilitas
dalam ekspresi baik pada pala asal Maluku maupun Maluku Utara.
6. Kesamaan DNA pala Banda adalah 83-100% untuk Maluku dan 73-86% un-
tuk Maluku Utara. Terdapat jarak genetik 0,2720 unit antara pala ekotipe
Banda dengan ekotipe lainnya.
7. Kadar protein dan lemak pala Banda adalah sifat proksimat buah yang stabil
menurut ekotipe, tetapi tidak halnya dengan kadar air dan pektin.
131
8. Empat deskriptor pala Banda yang masing-masing mewakili empat morfo-
ekotipe telah dibuat dan dapat digunakan sebagai pedoman pendeskripsian ta-
naman pala.
9. Pala Maluku dan Maluku Utara menghasilkan minyak atsiri yang secara
umum bersifat normal. Produksi minyak atsiri pala Maluku lebih tinggi
1,26% daripada Maluku Utara. Sebaliknya minyak atsiri fuli pala Maluku
Utara lebih tinggi 2,15% daripada Maluku.
10. Sifat fisiko-kimia minyak pala (bobot jenis, indeks bias, dan sisa penguapan)
pala Banda secara umum stabil di enam ekotipe dan memenuhi standar SNI
pala nasional dan internasional. Pala dari Tidore memiliki sifat putaran optik
yang menyimpang (+40o) dari standar mutu SNI.
11. Pala Banda di daerah Maluku mengandung 28 sampai 31 komponen atsiri.
Sekitar 51,3% merupakan hidrokarbon monoterpen; 24,3% monoterpen terok-
sigenasi; dan 16,2% senyawa aromatik. Pala Maluku Utara mengandung 29
sampai 31 komponen atsiri; 48,6% di antaranya hidrokarbon monoterpen;
15,1% monoterpen teroksigenasi; dan 32.7% senyawa aromatik.
12. Secara umum, pala asal Maluku mengandung senyawa aromatik miristisin
10,96% dan Maluku Utara 9,56%.
13. Kadar senyawa aromatik pala Maluku Utara sangat menguntungkan bagi pen-
gembangan pala Banda untuk tujuan agroindusri.
132
Rekomendasi
1. Karakteristik produksi dan kondisi ekologi pala Banda perlu dipertahankan
pada level seperti saat ini. Selain itu, upaya perlindungan plasmanutfah dan
pelepasan varietas pala Banda perlu dilakukan.
2. Pengembangan pala Banda di luar ekotipe aslinya Pulau Banda secara umum
tidak mengubah secara berarti karakteristik utamanya. Oleh sebab itu, peng-
gunaan pala Banda sebagai material tanam dan pohon induk sangat dianjur-
kan.
3. Pala dari Ternate yang memiliki kadar senyawa aromatik yang tinggi (39,8%)
yang secara ekonomi menguntungkan sehingga perlu dikembangkan pada
skala industri (minyak atsiri dan farmasi).
4. Kadar miristisin tinggi (hingga 13,76%) yang secara umum dimiliki pala dari
Banda perlu dieksploitasi pada skala industri.
5. Di Maluku dan Maluku Utara perlu dikembangkan agroindustri berbasis pala
untuk meningkatkan nilai jual pala Banda dan untuk perbaikan kesejahteraan
petani pala.
6. Untuk produksi minyak atsiri dari biji tua (umur panen > 7 bulan), pala asal
Banda adalah yang lebih sesuai, tetapi bila menggunakan pala muda (umur
panen 3-5 bulan), pala asal Ternate lebih menguntungkan. Untuk pala dari
Luhu dan Tidore, produksi lebih sesuai diarahkan untuk tujuan rempah.
7. Pala dari Banda dan Ambon sesuai untuk pengembangan industri senyawa
aromatik miristisin, sementara yang berasal dari Tidore lebih tepat untuk pro-
duksi senyawa aromatik eugenol.
8. Untuk industri manisan pala, pala dari Bacan, Tidore dan Ambon cocok kare-
na mempunyai proporsi daging buah yang lebih tinggi (83,56-84,23%).
9. Untuk tujuan pengembangan budidaya, pala dari Banda secara umum lebih se-
suai baik dari aspek performa agronomi maupun nilai ekonomi.
DAFTAR PUSTAKA
Acquaah G. 1992. Practical protein electrophoresis for genetic research. Diosco-rides Press. Portland, Oregon.
Adam WT. 1983. Application of isozymes in tree breeding. Di dalam SD Tanksley and TJ Orton (eds.). Isozymes in plant genetics and breeding. part A. Elsevier, Amsterdam. p. 381-400.
Anonim. 2001. WANARINEK Kementerian Negara Riset dan Teknologi. http://www.bi.go:id/sipuk/lmfind/pala/pemasaran.htm (dikunjungi 15 Agustus 2005).
Anonim 2003. Atlas zana agroekologi Indonesia: Sulawesi dan Maluku. Vol. I, Fdisi Agroklimat, Balitbangtan, Deptan. Bogor.
AOAC. 1995. Proximate analysis of the fruits using standard method. JAOCS 78 (9):56-59.
Archer AV. 1988. Determination of safrole and myristicin in nutmeg and mace by high performance liquid chromatography. Journal of Chromatograph 438(1): 117-21.
Armstrong JG, Drummond BA. 1980. Floral biology of Myristica fragrans Houtt. (Myristicacea). The nutmeg of commerce. Biotropica 18(1):3-8.
Baldry J, Dougan J, Matthews WS, Nabney J, Pickering GR, Robinson FV. 1976. Composition and flavour of nutmeg oils. Flavours 7:28-30.
[BPS Maluku Utara] Badan Pusat Statistik Maluku Utara. 2003. Maluku Utara dalam angka. BPS Provinsi Maluku Utara, Ternate.
[BPS Maluku] Badan Pusat Statistik Maluku. 2003. Maluku dalam angka. BPS Provinsi Maluku, Ambon.
[BSN] Badan Standardisasi Nasional. 1999. SNI Minyak pala, BSN. Jakarta.
Broadhurst CL, Polansky MM, Anderson RA. 2000. Insulin-like biological activ-ity of culinary and medicinal plant aqueous extracts in vitro. J. Agrie. Food Chem. 48:849-8552.
Buckmire KU. 1992. Nutmeg production in Grenada. Technical Bulletin 20, Ca-ribbean Agricultural Research and Development Institute, University of the West Indies, St. Augustine, Trinidad.
Copalakrishnan M. 1992. Chemical composition of nutmeg and mace. Journal of Spices and Aromatic Crops 1(1):49-54.
Corner FJH. 1976. The Seeds of Dicotyledons. Cambridge University Press, Cambridge. RONQUIST A. 1981. An Integrated System of Classification of Flowering Plants. Columbia. University Press, New York.
134
Coward IDG, Matthews WSA, Nabney J. 1971. Investigation of the production of essential oil using a transportable still unit. Proceeding of the Fifth Interna-tional Congress of Essential Oils, October 1971, Sao Paulo, Brazil. pp 126-132.
Cross RJ. 1990. Assessment of IPGRI morphological descriptor in determining pat-tern germplasm: Characterization, evaluation, and enhancement. IPGRI, Rome.
Cruickshank AM. 1973. Some aspects of the Nutmeg Investigation Programme in Grenada. Proceedings of a Conference on Spices, 10-14 April 1972, Trop. Products Inst.
Daferera DJ, Tarantilis PA, Polissiou MG. 2002. Characterization of essential oil from Lamiaceae by fourier transform raman spectroscopy. J. Agric. Food Chem. 50:5503-5507.
Dahlgren R. 1983. General aspects of angiosperm evolution and macro systema-tics. Nordic Journal Botany, 3:119-49.
Dann AE, Matthews WSA, Robinson FV. 1977. Studies on the yields and compo-sitions of nutmeg and mace oils from Grenada. Proceedings of the Seventh International Congress of Essential Oils, October 1977, Kyota, Japan. pp 123-124.
David RG, Jihong W, Natalia D, Kyoung HN, James E. S, Efraim L, Eran P. 2001. An Investigation of the Storage and Biosynthesis of Phenylpropenes in Sweet Basil. Plant Physiology: 539-565.
De Guzman CC, Siemonsma BS. 1999. Spices. Plant Resources of South-East Asia (Prosea No. 13). Prosea Foundation, Bogor.
Ditjen Perkebunan. 2000. Statistik Perkebunan Indonesia. Deptan, Jakarta.
Douglas F. 1990. GC/MS Analysis. http://sites.netscape.net/dougfrm (dikunjungi 12 Januari 2006).
Doyle, J.J. and J.S. Doyle. 1987. A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue. Phytochem. Bull. 19:11-15.
Ejechi BO, Souzey JA, Akpomedaye DE. 1998. Microbial stability of mango juice preserved application of mild heat and extract of two tropical spices. J. Food. Protec. 61(6):725 -272.
[FAO] Food and Agriculture Organization. 1990. Guideline for Soil Profile De-scription. 3rd Ed. Food and Agriculture Organization for the United Nations. International Soil Reference Information Centre, FAO. Rome.
Flach M. 1966. Nutmeg cultivation and its sex problems. Eng. Sum. Meded. Landh Hogesh. 66, Netherlands.
135
Flamini G, Cioni PL, Morelli I, Macchia M, Ceccarini L. 2002. Main agronom-ic-productive characteristics of two ecotypes of Rosmarinus officinalis L. and chemical composition of their essential oils. J. Agric. Food Chem. 50:3512-3517.
Forrest JE, Heacock RA. 1972. Identification of the major components of the es-sential oils of mace. J. Chromatography 69:11-13.
Fourie SE. 1996. Chemical components of some tropical fruit. JAOCS 18 (4):16-19.
[GCNA] Grenada Coorporation of Nutmeg Association. 2001. Grenada nutmeg. http //www.grenadanutmeg.com/produciion.html (dikunjungi 12 Oktober 2005).
Copalakrishnan M. 1992. Chemical composition of nutmeg and mace. J. Spices Aromatic Crops 1(1):49-54.
Groome JR. 1970. A Natural History of the Island of Grenada, W.I., Caribbean Printers Limited, Arima, Trinidad, W.I.
Guenther E. 1952. The essential oil. Vol. I. D Van Nostrand Company, New York.
Guiard J. 1995. Application of molecular technique to DUS testing. Technical seminar on variety for tropical and subtropical crops under UPOV conven-tion, Medan, Desember 1995. Indonesia.
Guo X, Yu B. 1985. Quality of nutmeg I. Separation and identification of the chemical constituents of nutmeg. Yaowu Fenxi Zazhi 55:258-262.
Hadad EA, Hamid A. 1990. Mengenal berbagai plasmanutfah pala di daerah Ma-luku Utara. Balai Peneiitian Tanaman Rempah dan Obat, Bogor.
Hadad EA. 1990. Mengenal berbagai plasmanutfah pala di daerah Maluku Utara. Balai Peneiitian Tanaman Rempah dan Obat, Bogor.
Hadad EA. 1992. Pala. Edisi khusus Littro 3 (2):26-37.
Hamrick JL, Godt MJW. 1989. Allozyme diversity in plant species. Di dalam Brown, A. H. D., Clegg, M. T., Kahler, A. L. and Weir, B. S. (eds) Plant Population Genetics, Breeding, and Genetic Resources, pp. 43-63. Sinauer Associates, Sunderland, MA.
Huang Y, Tan JMWL, Kini RM, Ho SH. 1997. Toxic and antifeedant action of nutmeg oil against Tribolium castaneum (Herrbst) and Sitophilus zeamais Motsch. J. Stored Prod. Res 33(4):289-298.
Indriani FC, Lita S, Sudjindro, Sugiharto AN. 2002. Keragaman genetik plasma nutfah kenaf (Hibiscus cannabinus L.) dan beberapa species yang sekerabat berdasarkan analisis isozim. BIOSAIN 2 (1): 29-39.
136
[IPGRI] International Plant Genetic Resources Institute. 1980. Tropical fruits de-scriptors. IPGRI. Southeast Asia Regional Committee, Italy.
[IPGRI] International Plant Genetic Resources Institute. 1995. Descriptor for Avocado. IPGRI. Italy.
Jones, Jr JB. 1991. Plant Analysis Handbook. Micro Macro Publishing, Inc. New York.
Joseph J. 1980. The nutmeg: Its botany, agronomy, production, composition and uses. J. Plantation Crops 8(2):61-72.
Kan Y, Ucan US, Kartal M, Altun ML, Aslan S. Sayar E, Eyhan T. 2006. GC-MS Analysis and Antibacterial Activity of Cultivated Satureja cuneifolia Ten. Essential Oil. Turk J Chem 30: 253-259.
Kaya M, Kammesheidt L, Weidelt HJ. 2002. The forest garden system of Saparua island, Central Maluku, Indonesia, and its role in maintaining tree species diversity. Agroforestry System 54:225-234.
Ketaren S. 1985. Pengantar Teknologi Minyak Atsiri. PN Balai Pustaka, Jakarta.
Kumar ST, Jansz E, Dharmadass HS. 1985. Some physiological and chemical characteristics of Sri Lankan nutmeg oil. Journal Science Food Agriculture 36: 93-100.
Lagouri V, Boskou D. 1995. Screening for antioxidant activity of essential oils obtained from spices. Di dalam Fond Flavors.- Generation, Analysis and process influenced (ed. Charalambous G.), Amsterdam, Elsevier, pp. 869-879.
Lawrence BM. 1981. Progress in essential oils. Perfirrn and Flavorist 22: 68-69.
Lebeda A, Ivana D, Martha D, Karel D. 2003. Morphological Variability and Iso-zyme Polymorphisms in Maca and Yacon. Jan F. Czech J. Genet. Plant Breed. 39(1):1-8.
Lewis YS. 1984. Spices and Herbs for the Food lndustry. Food Trade Press, Or-pington, England.
Maarse H, Kepner RE. 1970. Changes in composition of volatile terpenes in Douglas fir needles during maturation. J. Agr. Food Chem. l8:1095.
Madsen HL, Bertelsen NG. 1995. Spices as antioxidants. Trends Food Sci Tech-nol 6: 271-277.
Mallavarapu C.R. and Ramesh S. 1998. Composition of essential oils of nutmeg and mace. Journal of Medicinal and Aromatic Plant Sciences, 20: 746-748.
Manjunatha BR, Virupakshi S, Naik GR. 2003. Peroxidase isozyme polymor-phism in popular sugarcane cultivars. Current Science 85:1347-1349.
137
Marks S, Pomerov J. 1995. International trade in nutmeg and mace: issues and options for Indonesia. Bull. Indo Economic Studies 31 (3):103-118.
Masada Y. 1976. Application of gas-liquid chromatography mass spectropho-tometry to the identification of essential oils. Plenum Press, John Wiley and Sons, New York.
Muller G, Buckmire K, Reid R, Martin PJ. 1980. The Significance of Nutmeg Wilt and the Problem of Defective Nutmegs to the Grenada Nutmeg Indus-try. Report of a Joint Mission by the Caribbean Agricultural Research and Development Institute and the British Development Division of the Carrib-bean. Caribbean Agricultural Research and Development Institute, Grenada.
Naik SN, Maheshwari RC, Maheshwari ML. 1988. Extraction of essential oils in liquid and dense carbon dioxide. Indian Perfumer 32(1):74-85.
Nakamura N., Kiuchi P., Tislda Y. and Kondo K. 1988. Studies on crude drugs effective on visceral larva migrans. V. The larvicidal principle in mace (aril of Myristica fragrans). Chemical and Pharmaceutical Bulletin 36(7):2685-2688.
Nei M. 1978. Estimation of average heterozygosity and genetic distance from a small number of individuals. Genetics 89:583-590.
Ojechi BO, Souzey JA, Akpomedaye DE. 1998. Microbial stability of mango (Mangifera indica L.) juice preserved by combined application of mild heat and extracts of two tropical spices. J. Food Protection 61(6):725-727.
Pasaribu TL. 1995. Pengaruh proses deterpenasi terhadap mutu medisinal minyak biji pala. FMIPA, Unpak, Bogor.
Peter KV. 2001. Handbook of herbs and spices. CRC Press, New York.
Power FB, Salway HS. 1907. The constituents of nutmeg. Chemical Society Jour-nal 91:2037-58.
Power FB, Salway HS. 1908. The constituents of' the expressed oil of nutmeg. Journal of the Chemical Science 83:1653-1659.
Premoli AC, Souto CP, Allnutt TR, Newton AC. 2001. Effects of population dis-junction on isozyme variation in the widespread Pilgerodendron uviferum. Heredity 87:337-343.
Purseglove JW, Brown EG, Green CL, Robbin SRL. 1981. Spices, Vol. 1. Long-man, New York.
Rema KG, Madan BB. 2001. Quality Requirement of Spices for Export. Spices Board, India.
Riddle RR, Charles A. Taylor JR, Kothmann MM, Huston JE. 1996. Volatile oil contents of ashe and redberry juniper and its relationship to preference by Angora and Spanish goats. J. Range Manage. 49:35-41.
138
Royal Horticultural Society. 1986. R.H.S. Colour Chart. Royal Horticultural So-ciety, London
Sambrook J, Fritish EF, Maniatis T. 1989. Molecular cloning. Cold Spring Harbor Lab. Press. New York. pp. 586-600.
Sandford KJ, Heinz DE. 1971. Effects of storage on the volatile constituents of nutmeg. Phytochem.10:1245-1250.
[SAS] Statistical Analysis System. 1996. Statistical Analysis System. SAS institute Inc., Cary, NC, USA.
Shulgin AT. 1967. Composition of the myristicin fraction from oil of nutmeg. Na-ture 197:379.
Sinclair T. 1958. A revision of the Malaysian Myristicaceae. Singapore Gard. Bull, 16: 205-472.
Stecchini ML, Sarais I, Giavedoni P. 1993. Effect of essential oils on Aeromnas hydrophyla in a culture medium and in cooked pork. J.Tood Protection 56(5):406-409.
Sutedja AM. 1980. Studi perbandingan sifat-sifat minyak pala yang berasal dari biji, daun, dan fuli dari tanaman yang sama. Akademi Kimia Analis, Bogor.
Talbot WA. 1902. The Tree Shrubs and Woody Climbers of Bombay Presidency, 2nd Govt. Central Press, Bombay.
Tanksley SD, Orton TJ. 1983 Isozymes in Plant Genetic and Breeding. Part A.Elsevier Publ. Co.Inc. Netherlands.
Tjiptadi B, Yasnita. 1986. Perbaikan pengolahan minyak pala. Balai Besar Peneli-tian dan Pengembangan Industri Hasil Pertanian, Bogor.
Trojer LR. 1976. Agroclimate map of Sumatera, Kalimantan, Maluku, and Irian. Central Res. Inst. Agric.. Bogor No. 17:
Van Dam-Mieras MCE, De Jeu WH, De Vries J, Currell BR, James JW, Leach CK, Patmore RA. 1991. Biotechnological innovations in crop improvement. Butterworth-Heinemann, Ltd. UK.
Warming E. 1890. Bearing of wood anatomy on the relationships of the Myristi-caceae. Tropical Woods 36:20-40.
Wendakoon C, Sakaguchi M 1995. Inhibition of amino acid decarboxylase activi-ty of Enterobacter aerogenes by active components in spices. J. Food. Pro-tec. 58(3):280-283.
Wendel, LF. 1989. Visualization and interpretation of plant isozymes. Di dalam E. D. Soltis, P. S. Soltis (eds.) Isozymes in plant biology. Dioscorides Press, Portland, Oregon, 5-45.
139
Wilkie SE, Lambert R, Warren MJ, 1996. Chloroplastic aspartate aminotrans-ferase from Arabidopsis thaliana: an examination of therelationship between the structure of the geneand the spatial structure of the protein. Biochem J. 319:969–976.
Williams JGK, Kubelik AR, Livak KJ, Rafalski JA, Tingey S. 1990. DNA poly-morphisms amplified by arbitrary primers as useful as genetic markers. Nucl. Acids Res. 18:6531-6535.
Wilson TK, Maculans L. 1967. The morphology of Myristica: Flowers of My-ristica tioryrom, and M. mulabarica. American Journal Botany 54:214-2120.
Zuas O. 2004. Identifikasi Dan Karakterisasi Senyawa Nitrogen Mustards Secara Gas Chromatography-Mass Spectrometry. J. Ilmu Dasar 5(2): 91-96.
Lampiran 1 Standar karakteristik pala 1. Bentuk buah atau Biji (fruit or shelted nut shape)
Berdasarkan Indeks Diameter (ID), bentuk buah atau biji pala bertempurung dapat dikelompokkan ke dalam 5 kategori: Oblat, Bulat, Oval, Agak Lonjong, dan Lonjong. ID diperoleh dengan cara membagi diameter panjang terbesar (Dp maks.) dengan diameter lebar terbesar (Dl maks.) dari buah atau biji. Dp maks ID = ────── Dl maks
ID Kategori < 1,0 Oblat
1,0 - 1,15 Bulat 1,16 - 1,25 Oval 1,26 - 1,50 Agak Lonjong ≥ 1,51 Lonjong
2. Ukuran buah (fruit size)
Berdasarkan bobotnya, buah pala dapat digolongkan ke dalam 3 kategori: Besar, Sedang, dan Kecil. Besar-kecilnya buah ditentukan menurut bobot segarnya. No. Kategori Bobot buah 1. Besar > 80 g2. Sedang 40 g - 80 g 3. Kecil < 40
3. Ukuran biji (nut size)
Berdasarkan bobotnya, biji pala dapat dikelompokkan ke dalam 3 kategori: Besar, Sedang, dan Kecil. Ukuran besar biji ditetapkan berdasarkan berat biji tanpa tempurung pada kadar air 12%. No. Kategori Bobot biji 1. Besar > 8 g 2. Sedang 3 g - 8 g 3. Kecil < 3 g
4. Produktivitas tanaman
Berdasarkan produksi buah/pohon dalam setahun pohon pala berumur >15 tahun maka produktivitas dapat dikelompokkan ke dalam 3 kategori No. Kategori Produktivitas1. Tinggi > 5.000 2. Sedang 2.500 - 1.5003. Rendah < 1.500
141
5. Ukuran fuli Berdasarkan bobot segarnya, fuli dapat dikelompokkan ke dalam 3 kategori: Berat, Sedang, dan Ringan. No. Kategori Bobot fuli 1. Berat > 3 g 2. Sedang 1 g - 3 g 3. Ringan < 1 g
6. Kadar minyak pala
Berdasarkan kadar minyaknya, rendemen minyak pala dapat dikelompokkan ke dalam 4 kategori: Tinggi, Sedang, dan Rendah. Rendemen dinyatakan dalam persen volume per bobot bahan (% v/b). Minyak diekstrak dari biji pala tak bertempurung beserta fulinya dengan menggunakan metode distilasi. No. Kadar minyak Kategori 1. > 14% Sangat Tinggi 2. 12% - 14% Tinggi 3. 10% - 12% Sedang 4. < 10% Rendah
142
Lampiran 2 Deskriptor pala Banda (M. fragrans Houtt) versi Indonesia
A. Data karakteristik lokasi
1. Karakteristik lokasi 1.1. Topografi Karakteristik ini mengacu pada profil elevasi permukaan lahan dalam makna yang lebih luas dan mengacu pada FAO 1990.
1. Datar 0 - 0,5% 2. Agak datar 0,6 - 2,9% 3. Agak berombak 3 - 5,5% 4. Berombak 6 - 10,9% 5. Bergelombang 11 - 15,9% 6. Berbukit 16 - 30% 7. Bergunung > 30%
2. Bentuk lahan dataran tinggi (sifat fisiografi umum)
Bentuk lahan berarti bentuk permukaan lahan dimana lokasi berada 1. Dataran 2. Cekungan 3. Lembah 4. Dataran rendah 5. Dataran tinggi 6. Pebukitan 7. Pegunungan
3. Kemiringan [derajat] Perkiraan tingkat kemiringan lahan lokasi
4. Bentuk kemiringan Bentuk kemiringan adalah bentuk umum kemiringan pada arah vertikal dan horizontal 1. Datar 2. Cembung 3. Cekung 4. Bersengkedan 5. Tak beraturan
5. Vegetasi dominan di lokasi dan sekelilingnya 1. Forbland (banyak tanaman herba) 2. Hutan (terdapat lapisan pohon, mahkota pohon
tumpang-tindih, banyak jenis semak dan pohon di setiap lapisan)
3. Lahan agak berhutan (terdapat lapisan pohon, mahkota pohon tidak tumpang-tindih, lapisan bawah kemungkinan terdapat)
4. Lainnya (sebutkan dalam catatan deskriptor)
143
6. Kekerasan tanah 1. Mudah diluku 2. Sulit diluku 3. Keras 4. Berpadas
7. Drainase tanah 3. Buruk 5. Sedang 7. Baik
8. Salinitas tanah 1 < 160 ppm garam terlarut 2 160 - 240 ppm 3 241 - 480 ppm
9. Kualitas air tanah 1. Salin 2. Kehitaman 3. Segar 4. Tercemar 5. Tergenang
10. Kedalaman tanah sampai permukaan air tanah 1. 0 - 25 cm 2. 25,1 - 50 cm 3. 50,1 - 100 cm 4. 100,1 - 150 cm 5. > 150 cm
11. Kelengasan tanah 3 Kering 5 Lembab 7 Basah
12. Kemasahan/pH Tanah Nilai pH tanah yang diukur pada kedalaman sekitar perakaran tanaman.
13. Tingkat erosi tanah 3 Rendah 5 Sedang 7 Berat
14. Warna matriks tanah Warna tanah di daerah perakaran dicatat pada kondisi tanah lembab memakai bagan warna Munsell Soil Color Charts
15. Kadar bahan organik tanah 1 Rendah 3 Sedang 5 Tinggi 7 Bergambut
144
16. Kelas tekstur tanah
Gunakan metode segitiga tekstur-tanah 16.1.1. Kelas ukuran partikel tanah
17. Klasifikasi taksonomi tanah Dapat diperoleh dari peta tinjau tanah
18. Sumber/ketersediaan air 1. Tadah hujan 2. Irigasi 3. Genangan/banjir musiman 4. Sungai 5. Air payau/pantai 6. Lainnya (jelaskan dalam catatan deskriptor)
19. Kesuburan tanah Dapat diperkirakan berdasarkan kondisi vegetasi setempat atau gunakan tanaman indikator, misalnya jagung. 3 Rendah 5 Sedang 7 Tinggi
20. Iklim lokasi 20.1. Suhu [0C]
Nyatakan dalam nilai rata-rata, maksimum, dan minimum.
20.2. Curah hujan [mm] Nyatakan dalam rata-rata per tahun.
20.3. Kecepatan angin [km/detik] Nyatakan dalam rata-rata per tahun.
20.4. Kelembahan relatif Nyatakan dalam kisaran per bulan
20.5. Penyinaran matahari (%) 20.6. Lainnya (jelaskan dalam catatan)
B. Deskriptor tanaman
1. Pohon Untuk deskritor 1.1 sampai 1.6, sebutkan jumlah pohon yang dikarakterisasi.
1.1. Umur pohon [thn]
1.2. Jenis bibit 1 Bibit dari biji 2 Bibit dari sambungan (grafting) 3 Klonal
145
1.3. Vigor 1 Lemah 2 Sedang 3 Kekar
1.4. Lebar kanopi Diukur diameternya dari dua arah
1.5. Tinggi pohon Diukur dari permukaan tanah hingga ujung kanopi.
1.6. Bentuk pohon 1. Kolom 2. Piramida 3. Agak piramidal 4. Persegi 5. Bulat 6. Semi-oval 7. Tak beraturan 8. Lainnya (specify in descriptor’s notes)
1.7. Permukaan batang 3 Halus 7 Sedang 9 Kasar
1.8. Lingkar batang [cm] Diukur 50 cm di atas permukaan tanah.
1.9. Pola percabangan 1 Ekstensif (satu anak ranting baru bertunas dan tumbuh di bawah
ranting 2 Intensif (lebih dari dua anak ranting baru bertunas dan tumbuh
di bawah ranting 3 Keduanya (catat yang lebih menonjol)
1.10. Pola penyebaran percabangan 1. Asendan 2. Tak beraturan 3. Vertisilat 4. Aksial 5. Horizontal
1.11. Sudut cabang utama 1 Lancip (<450) 2 Sedang (450 - 900) 3 Tumpul (> 900)
1.12. Diamater ranting [cm] Diukur pada bagian tengah ranting setelah pertumbuhan berhenti. Pengukuran dilakukan pada 10 ranting yang dipilih secara acak.
146
1.13. Warna ranting muda (Termasuk daun muda di ujung ranting) 1. Kuning (kuning 14D) 2. Hijau (hijau 141A) 3. Merah (oranye keabuan 166A) 4. Lainnya (jelaskan dalam catatan deskriptor)
1.14. Permukaan ranting muda 1. Licin (Glabrous) 2. Berbulu (Pubescent)
1.15. Bentuk daun Dicatat setelah daun mekar sempurna 1. Ovat 2. Obovat 3. Oval 4. Bulat 5. Lanset 6. Oblong 7. Lainnya
1.16. Bentuk pangkal daun
1. Runcing 2. Tumpul 3. Terpotong (truncate)
1.17. Panjang helai daun [cm] Rata-rata dari 10 daun tua
1.18. Warna daun tua 1. Hijau muda (hijau 141D) 2. Hijau (hijau 141A) 3. Hijau tua (hijau 139A)
1.19. Alur pada tangkai daun 1. Ada 2. Tidak ada
Untuk item deskriptor berikut semua pengukuran diambil pada daun dewasa di bagian tengah ranting. 1.20. Sudut tangkai daun
1. Lancip (<450) 2 Sedang (450 - 900) 3 Tumpul (> 900)
1.21. Tepi daun 1. Rata 2. Bergerigi 3. Berombak
1.22. Jumlah tulang daun primer
147
1.23. Relief pertulangan daun permukaan atas 1 Tenggelam 3 Datar 5 Terangkat
1.24. Bentuk ujung daun 1 Sangat runcing 3 Runcing 5 Sedang 7 Obtus 9 Sangat obtus
1.25. Tekstur daun 3 Lunak 5 Agak keras 7 Keras 9 Sangat keras
1.26. Aroma daun (Daun harus diremas-remas) 3 Lemah 5 Sedang 7 Kuat
2. Bunga
2.1. Lama waktu mulaiberbunga sejak tanam [thn]
2.2. Musim berbunga dan lamanya Jika mungkin, nyatakan musim berbunga untuk kultivar yang dideskripsikan. 2.2.1. Tunas bunga pertama muncul [bulan, tahun] 2.2.2. Bunga terbuka atau mekar [bulan, tahun] 2.2.3. Akhir musim berbunga [bulan, tahun]
2.3. Pola pembungaan 3 Pada setiap musim/bulan tertentu 5 Sepanjang tahun 7 Tidak beraturan
2.4. Sifat meranggas daun Dicatat saat musim berbunga 3 Tidak ada 5 Sebagian 7 Penuh
2.5. Posisi bunga 1. Terminal 2. Subterminal 3. Aksilar 4. Lainnya
148
2.6. Warna bunga 1. Kuning (kelompok kuning 4D 2. Hijau (hijau-kuning 149C) 3. Coklat (oranye-keabuan 164B) 4. Lainnya
Untuk item 2.8-2.17, gunakan rata-rata dari lima pengamatan per tanaman 2.7. Tipe bunga
3 Monosius 5 Diosius 7 Hermaprodit
2.8. Jumlah bunga per malai
2.9. Panjang sumbu utama tangkai bunga [cm]
2.10. Panjang tangkai bunga [mm]
2.11. Panjang sepal [mm]
2.12. Bentuk stilus bunga 1. Lurus 2. Kinked 3. Lainnya
2.13. Ada/tidaknya polen 1. Ada 2. Tidak ada
2.14. Ada/tidaknya nektar bunga 1.Ada 2.Tidak
2.15. Ada/tidaknya perhiasan bunga (periantium) 1.Ada 2.Tidak
3. Buah
3.1. Lama waktu buah pertama terbentuk setelah tanam [thn]
3.2. Lama waktu dari pembungaan hingga buah masak [hari]
3.3. Musim berbuah Jika mungkin, nyatakan musim berbuah untuk kultivar yang dideskripsi
3.3.1. Mulai berbuah [bulan] 3.3.2. Akhir berbuah [bulan]
3.4. Sifat pembuahan 1. Musim/bulan tertentu [bulan] 2. Setiap waktu 3. Tak teratur
149
3.5. Bentuk buah Tentukan banyaknya buah yang diukur 1 Speroid 2 Oval 3 Obovat 4 Lonjong
3.6. Panjang buah [cm] Rata-rata dari hasil 10 pengamatan
3.7. Diameter buah [cm] Diukur pada bagian terlebar. Rata-rata dari hasil 10 pengamatan
3.8. Permukaan kulit buah 1. Halus 2. Sedang 3. Kasar
3.9. Keseragaman ukuran buah 3 Rendah 5 Sedang 7 Tinggi
3.10. Bobot buah [g] Rata-rata hasil dari 10 buah
3.11. Bentuk pangkal buah 1 Lekuk ke dalam 2 Rata 3 Cembung 4 Menonjol
3.12. Bentuk ujung buah 1 Rata 2 Bulat 3 Menonjol
3.13. Glosi kulit buah 3 Rendah 2 Sedang 3 Tinggi
Untuk item 3.14 sampai 3.16, diambil lima pengamatan per pohon
3.14. Panjang tangkai buah [cm]
3.15. Diameter tangkai buah [mm] Dicatat pada bagian tengah
150
3.16. Warna tangkai buah Dicatat pada buah matang yang ternaungi dari cahaya matahari 1 Kuning (grup kuning 8A) 2 Hijau (grup hijau-kuning 145A) 3 Oranye (grup merah-oranye 32A) 4 Coklat (grup oranye-kebuan 177B) 5 Lainnya
3.17. Warna kulit buah matang 1 Hijau muda (grup hijau 142A) 2 Gading (grup kuning 4D) 3 Kuning (grup hijau-kuning 154A) 4 Lainnya
Untuk item berikut, pengamatan diambil pada buah matang
3.18. Tingkat diskolorisasi buah terbuka setelah 1 jam 1. Rendah 2. Sedang 3. Tinggi
3.19. Warna diskolorisasi 1. Biru 2. Coklat 3. Coklat kemerahan 4. Hitam
4. Biji
Pengamatan pada biji tua 4.1. Bentuk biji
1 Speroid 2 Oval 3 Ovat
4.2. Bobot biji [g] Bogot biji basah.
4.3. Warna biji tua 1 Hitam 2 Coklat 3 Hitam kecoklatan
4.4. Permukaan kulit biji 3 Kusam 5 Sedang 7 Glosi
Untuk deskriptor berikut, gunakan 10 buah per pohon
4.5. Panjang biji [cm]
4.6. Diameter [cm]
151
5. Arilus atau fuli
5.1. Warna fuli 1 Merah 2 Merah muda 3 Gading
5.2. Bobot fuli [g] Bobot basah diukur dari biji yang tua
5.3. Catatan deskriptor Jika ada informasi tambahan, terutama pada kategori ‘lainnya’ di setiap item deskriptor, dapat dituliskan di sini.
Deskripsi Evaluasi
C. Deskriptor tanaman
1. Produksi 1.1. Hasil per pohon [kg per tahun]
Rata-rata dari 10 pohon yang berumur antara 25 sampai 50 tahun 1.1.1. Hasil buah 1.1.2. Hasil biji 1.1.3. Hasil fuli
1.2. Karakteristik hasil produksi Rata-rata dari 10 pohon yang berumur antara 25 sampai 50 tahun 1 Terus menerus produksi 2 Setiap musim tertentu yang bergantian 3 Tak menentu
1.3. Produktivitas [kg per ha] Rata-rata dari 10 pohon yang berumur antara 25 sampai 50 tahun
1.4. Lama buah bertahan di pohon hingga mencapai panen [hari]
1.5. Kadar minyak [%]
Minyak diesktrak secara distilasi uap dari daun dewasa, biji tua (> 7 bulan), biji muda (3-5 bulan), dan fuli tua 1.5.1. Daun 1.5.2. Biji tua 1.5.3. Biji muda 1.5.4. Fuli
1.6. Kadar komponen atsiri utama Persen miristisin, (iso)eugenol, safrol, dan elemisin yang dideteksi dengan metode GC/KT
1.7. Catatan Semua catatan tambahan yang perlu, ditulis di sini
152
Lampiran 3 Deskriptor pala Banda versi Inggris (internasional)
Descriptor for NUTMEG ENVIRONMENT AND SITE 1 Characterization and/or evaluation site descriptors 1.1. Site of characterization and/or evaluation
1.2. Site
1.2.1. Latitude Degrees and minutes followed by N (North) or S (South)
1.2.2. Longitude Degrees and minutes followed by E (Eorth) or W (West)
1.2.3. Elevation [m] 1.2.4. Name of farm or site
1.3. Evaluator’s name and address
1.4. Sowing date [MMYYYY]
1.5. Harvest date [MMYYYY]
1.6. Evaluation environment Environment in which characterization/evaluation was carried out. 1 Field 2 Greenhouse/Plastic house 3 Laboratorium 4 Other (specify in descriptor’s notes)
1.7. Seed germination [%] Specify number of days over which germination is measued.
1.8. Field establisment [%]
1.9. Number of days to 50.% field emergence Emergence for each plant.
1.10. Sowing/planting date site in field Give block, strip and/or row/plot numbers as applicable, plants/plot, replication
1.11. Field spacing
1.11.1. Distance between plants in a row [m] 1.11.2. Distance between rows [m]
1.12. Environmental characteristics of site
153
1.13. Fertilizer Specify types, doses, frequency of each, and method of application.
1.14. Plant protection Specify pesticdes used, doses, frequency of each, and method of application.
1.15. Notes Any other site-specific information.
2 Collecting And/Or Characterization/Evaluation Site Environment Descriptors
2.1 Site environment
2.1.1 Topography This refers to the profiles in elevation of the land surface on a broad scale. The reference is FAO (1990) 1 Flat 0 - 0.5% 2 Almost flat 0.6 - 2.9% 3 Gently undulating 3 - 5.9% 4 Undulating 6 - 10.9% 5 Rolling 11 - 15.9% 6 Hilly 16 - 30% 7 Steeply disected > 30%
2.1.2 Higher level landform (General physiographic features)
The landform refers to the shape of the land surface in the area in which the site is located (adapted from FAO 1990)
1 Plain 2 Basin 3 Valley 4 Plateau 5 Upland 6 Hill 7 Mountain
2.1.3 Slope [degree]
Estimated slope of the site
2.1.4 Slope form It refers to the general shape of the slope in both the vertical and horizontal direction (FAO 1990)
1 Strainght 2 Concave
154
3 Convex 4 Terraced 5 Complex (irregular)
2.1.5 Overal vegetation surrounding and at the site (From FAO 1990)
1 Forbland (Herbaceous plants predominat) 2 Forest (Continous tree layer, crown
overlaping, large number of tree and shrub species in distict layers)
3 Wood land (Continous tree layer, crown usuallly not touching, understorey may be present)
4 Other (Specify in appropriate section’s notes)
2.1.6 Stoniness/rockiness/harpan/cementation
1 Tillage unaffected 2 Tillage affected 3 Tillage dificult 4 Tillage imposible 5 Essentially paved
2.1.7 Soil drainage (Adapted from FAO 1990)
3 Poorly drained 5 Moderatly drained 7 Well drained
2.1.8 Soil salinity 1 <160 ppm dissolved salts 2 160 – 240 ppm 3 241 – 480 ppm 4 >480 ppm
2.1.9 Quality of ground water (From FAO 1990) 1 Saline 2 Blackish 3 Fresh 4 Polluted 5 Stagnating
2.1.10 Soil depth to groundwater table (Adapted from FAO 1990) 1 0 – 25 cm 2 25.1 –50 cm 3 50.1 – 100 cm 4 100.1 – 150 cm 5 >150 cm
155
2.1.11 Soil moisture (From FAO 1990) 3 Dry 5 Slightly moist 7 Moist 9 Wet
2.1.12 Soil pH Actual value of the soil pH within the following root depths around the plant
2.1.13 Soil erosion 3 Low 5 Intermediate 7 High
2.1.14 Soil matrix color (Adapted from FAO 1990). The color of the soil in the root zone is recorded in the moist condition using the Munsell Soil Color Charts]
2.1.15 Soil organic matter content
1 Low 3 Medium 5 High 7 Peaty
2.1.16 Soil texture calsses (Adapted from FAO 1990)
Use soil triangle method 2.1.16.1 Soil particle size classes
2.1.17 Soil taxonomic classification This may be taken from a soil survey map.
2.1.18 Water availability
1 Rainfed 2 Irrigated 3 Flooded 4 River banks 5 Ses coast 6 Other (specify in appropriate’s notes)
2.1.19 Soil fertility General assessment of the soil fertility based on exiting vegetation or use plant indicator.
3 Low 5 Moderate 7 High
156
2.1.20 Climate on the site 2.1.21 Temperature [0C]
Provide mean, maximum, minimum 2.1.22 Rainfall [mm]
Annual average 2.1.23 Wind [km/second]
Annual average 2.1.24 Relative humidity
Monthly range 2.1.25 Light 3 Shady 7 Sunny
2.1.30 Other Specify in appropriate section’s notes
CHARACTERIZATION
3 Plant descriptors
For all colour descriptors, colour codes are given in parentheses beside descriptor states.
3.1 Overall tree For descriptors 3.1.1 – 3.1.6, specify number of trees characterized per plant. 3.1.1 Tree age [y] 3.1.2 Tree type
1 Seedling 2 Grafted 3 Clonal
3.1.3 Tree vigour 1 Weak 2 Intermediate 3 Strong
3.1.4 Tree spread [m] Meaasured as the mean diameter using two directions
3.1.5 Tree height [m] From ground level to the top of the tree (if grafted, record also height of graft union and rootstock name). Evaluate only unpruned trees.
3.1.6 Tree shape 1 Columnar 2 Pyramidal 3 Obovate
157
4 Rectangular 5 Circular 6 Semielliptic 7 Irregular 8 Other
3.1.7 Trunk surface 3 Smooth 7 Rough 9 Very rough
3.1.8 Trunk circumference [cm] Recorded at 30 cm above ground level.
3.1.9 Branching pattern 1 Extensive (one branch arises below apex of twig with each flush of growth) 2 Intensive (several branches arise below apex of twig with each flush of growth) 3 Both patterns (record prominent one)
3.1.10 Distribution of branches 1 Ascendant 2 Irregular 3 Verticillate 4 Axial 5 Horizontal
3.1.11 Crotch angle of main branches 1 Acute (<45o) 2 Moderate (45o – 90o) 3 Abtuse (>90o)
3.1.12 Extension growth of twigs [cm] Measured after major growth flush following harvest. Mean of 10 randomly selected twigs.
3.1.13 Internode length of twigs [cm] Measured at the intermediate part of the twig, after current season’s growth has ceased. Mean of 10 randomly selected twigs.
3.1.14 Twig diameter [cm] Of current shoot at an internode of the intermediate part of the twig, measured after current season’s growth has ceased. Mean of 10 randomly selected twigs.
158
3.1.15 Colour of young twig (Includingg young leaves of the shoot tip) 1 Yellow (yellow group 14D) 2 Green (green group 141A) 3 Red (greyed-orange group 166A) 4 Other (specify in descriptor’s notes)
3.1.16 Surface of young twig 1 Glabrous 2 Pubescent
3.1.17 Leaf shape Record on flush leaf 1 Ovate 2 Narrowly obovate 3 Obovate 4 Oval 5 Roundish 6 Cordiform 7 Lanceolate 8 Oblong 9 Oblong-lanceolate 10 Other
3.1.18 Leaf base shape 1 Acute 2 Obtuse 3 Truncate
3.1.19 Leaf blade length [cm] Average of 10 mature leaves
3.1.20 Colour of mature leaves 1 Light green (green group 141D) 2 Green (green group 141A) 3 Dark green (green group 139A)
3.1.21 Groove on petiole 0 Absent 1 Present
For the following descriptors all records should be taken from midsprig flush leaf
3.1.22 Crotch angle of leaf petiole
1 Acute (<45o) 2 Moderate (45o – 90o) 3 Abtuse (>90o)
159
3.1.23 Leaf margin 1 Entire 2 Undulate
3.1.24 Number of primary veins 3.1.25 Relief of venation on upper surface
3 Sunken 5 Intermediate 1 Raised
3.1.26 Leaf apex shape 1 Very acute 3 Acute 5 Intermediate 7 Obtuse 9 Very obtuse
3.1.27 Leaf texture 3 Soft 5 Semihard 7 Hard 2 Very hard
3.1.28 Anise smell Leaf must be crushed 3 Weak 5 Intermediate 7 Strong
3.2 Flower 3.2.1 Number of years to flowering after planting [y] 3.2.2 Season of flowering and duration
If possible, indicate the flowering season of a known cultivar]
3.2.3 First sign of f!ower buds (MMYYYY) 3.2.4 First flowers open (MMYYYY) 3.2.5 End of flowering [MMYYYY)
3.2.3 Secondary flowering 0 Absent 1 Present
3.2.4 Leaf defoliation Recorded while flowering 3 No defoliation 5 Partial 7 Full
160
3.2.5 Inflorescence position 1 Terminal 2 Subteminal 3 Axillary 4 Other
3.2.6 Flower colour 1 Yellow (yellow group 4D) 2 Green (yellow-green group 149C) 3 Brown (greyed-orange group 164B) 4 Other
For descriptor 3.2.10-3.2.15 an average of five observations per plant should be made. 3.2.7 Number of flowers per inflorescence 3.2.8 Number of inflorescence ramifications 3.2.9 Length of inflorescence main axis [cm] 3.2.10 Pedicel length [mm] 3.2.11 Petal length [mm] 3.2.12 Sepal length [mm] 3.2.13 Flower style
1 Straight 2 Kinked 3 Other
3.2.14 Absence/presence of pollen 0 Absent 1 Present
3.2.15 Absence/presence of nectary stalks 0 Absent 1 Present
3.3 Fruit 3.3.1 Number of years to firt fruiting after planting [y] 3.3.2 Number of days from flowering to fruit maturity [d] 3.3.3 Season fruiting
If possible, indicate the fruiting sesons of a known cultivar] 3.3.3.1 Starting data (DDMMYYYY) 3.3.3.2 Ending date (DDMMYYYY)
161
3.3.4 Fruiting habit 3.3.5 Fruit shape
Specify number of fruits evaluated 1 Spheroid 2 High speroid 3 Ellipsoid 4 Narrowly obovate 5 Obovate 6 Other
3.3.6 Fruit length [cm]
Average of five fruits.
3.3.7 Fruit diameter [cm] Measured at the broadest part. Average of five fruits
3.3.8 Fruit size uniformity 3 Low 5 Intermediate 7 High
3.3.9 Fruit weight [g] Average of five fruits.
3.3.10 Fruit base shape 1 Depressed 2 Flattened 3 Inflated 4 Pointed
3.3.11 Fruit apex shape 1 Plattened 2 Rounded 3 Pointed
3.3.12 Gloss of fruit skin 3 Weak 5 Medium 7 Strong
For the following 3.3.18 – 3.3.21, five observations per plant should be taken. 3.3.13 Peduncle length [cm]
3.3.14 Peduncle diameter [mm]
Recorded at the middle part.
162
3.3.15 Pedicel lengt [cm] If it can be distinguished
3.3.16 Pedicel colour Recorded in mature fruits which grow in the shade
1. Yellow (yellow group 8A) 2. Green (yellow-green group 145A) 3. Orange (orange-red group 32A) 4. Brown (greyed-ornage group 177B) 5. Other
3.3.17 Absence/presence of perianth
0 Absent 1 Present
3.3.18 Fruit skin surface 3 Smooth 5 Intermediate 7 Rough
3.3.19 Fruit skin colour Ripe fruit 1 Light green (green group 142A) 2 Ivory (yellow group 4D) 3 Yellow (yellow-green group 154A) 4 Other
For descriptors 3.3.34 – 3.3.42 records should be taken using ripe fruits. 3.3.20 Degree of discolouration of open fruit after 4 h
3 Low 5 Intermediate 7 High
3.3.21 Colour of discolouration 1 Blue 2 Brown 3 Grey 4 Black
3.4 Seed 3.4.1 Seed shape
1 Spheroid 2 Ellipsoid 3 Ovate
163
3.4.2 Seed weight [g] 3.4.3 Cotyledon surface
3 Smooth 5 Intermediate 7 Rough
3.4.4 Attachment of cotyledons 0 Not attached 1 Attached
3.4.5 Cotyledon colour 1 Red 2 Brown 3 Other
For descriptors 3.4.6 – 3.4.8, average of five fruits per plant. 3.4.6 Length of seed [cm] 3.4.7 Diameter of seed [cm] 3.4.8 Shape of seed cross section
1 Circular 2 Elliptical
3.5 Arillus (Mace) 3.5.1 Arillus colour
1 Light Red 2 Red
3.5.2 Arillus weight (g) Arillus taken from mature seeds.
3.5.3 Notes Any additional information, especially in the category of ‘other’ under various descriptors above, may be specified here.
EVALUATION 4 Plant descriptors 4.1 Fruit/seed
4.1.1 Yield per tree [kg y-1] Average of ten trees per plant.
164
4.1.2 Yield behaviour Average of ten trees per plant 1 Continuous 2 Alternate 3 Erratic
4.1.3 Productivity ([kg m-2] Average of ten trees per plant. Yield relative to tree canopy size calculated from length and width.
4.1.4 Number of days fruit is held on tree after reaching maturity [d]
4.1.5 Seed oil [%]
Taken from seed plus mace of the mature fruits. Indicate method of estimation.
4.1.6 Oil composition. 4.2 Notes Specify here any additional information.
165
Lampiran 4 Kelas iklim di Indonesia dan karakteristiknya
Kelas Iklim C. hujan (mm/tahun) Pola hujan Kondisi Iklim
Lama waktu (bulan) C.h ≤100 (mm/bln)
C.h 100-150 (mm/bln)
C.h 150-200 (mm/bln)
C.h >200 (mm/bln)
IA < 1000
Tunggal
Kering
7-10 ≤ 4 ≤ 4 ≤ 2 IB Fluktuatif 8-12 ≤ 3 0 0 IC Ganda 8-9 ≤ 2 ≤ 2 ≤ 2 IIA
1000 - 2000 Tunggal 5-8 ≤ 3 ≤ 2 ≤ 4
IIB Fluktuatif ≤ 4 ≤ 5 ≤ 5 ≤ 4 IIC Ganda ≤ 5 ≤ 5 ≤ 6 ≤ 5 IIIA
2000 - 3000 Tunggal
Basah
≤ 6 ≤ 4 ≤ 5 ≤ 6 IIIB Fluktuatif ≤ 4 ≤ 4 ≤ 5 5-6 IIIC Ganda ≤ 4 ≤ 4 ≤ 5 6-8 IVA
3000 - 4000
Tunggal ≤ 2 ≤ 3 ≤ 4 7-9 IVB Fluktuatif ≤ 4 ≤ 3 ≤ 3 8-11 IVC Ganda ≤ 3 ≤ 4 ≤ 4 7-9 IVD Tunggal ≤ 1 ≤ 3 ≤ 5 7-9VA
4000 - 5000
Tunggal ≤ 2 ≤ 2 ≤ 1 7-9 VB Fluktuatif 0 0 ≤ 2 9-12 VC Ganda ≤ 2 ≤ 3 ≤ 2 8-12 VD Tunggal 0 0 ≤ 1 10-12 VIA
> 5000
Tunggal 0 0 ≤ 2 10-12 VIB Fluktuatif 0 0 0 12 VIC Ganda ≤ 1 1 ≤ 2 9 VID Tunggal 0 0 0 12
Sumber: Pusat Penelitian Tanah dan Agroklimat, Bogor Tahun 2003.
166
Lampiran 5 Matriks korelasi gabungan variabel iklim, tanah, dan karakteristik tanaman pala analisis komponen utama Variabel X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9 X10 Keterangan X1 1,0000 0,8729 ‐0,6894 ‐0,2936 0,2186 ‐0,3487 ‐0,3701 ‐0,2626 0,0925 ‐0,5805 curah hujan bulanan (mm) X2 0,8729 1,0000 ‐0,8600 0,1600 ‐0,2182 ‐0,0381 ‐0,7403 ‐0,6697 ‐0,3337 ‐0,5261 hari hujan bulanan X3 ‐0,6894 ‐0,8600 1,0000 ‐0,4621 0,5399 0,2225 0,8619 0,7889 0,1502 0,6392 suhu (0C) X4 ‐0,2936 0,1600 ‐0,4621 1,0000 ‐0,9947 0,3324 ‐0,7556 ‐0,8067 ‐0,5471 ‐0,0532 penyinaran matahari (%) X5 0,2186 ‐0,2182 0,5399 ‐0,9947 1,0000 ‐0,2603 0,7919 0,8309 0,4946 0,1265 kelembapan udara (%) X6 ‐0,3487 ‐0,0381 0,2225 0,3324 ‐0,2603 1,0000 ‐0,2255 ‐0,3572 ‐0,7320 0,7394 pH (H2O) X7 ‐0,3701 ‐0,7403 0,8619 ‐0,7556 0,7919 ‐0,2255 1,0000 0,9879 0,5689 0,3691 C‐0organik (%) X8 ‐0,2626 ‐0,6697 0,7889 ‐0,8067 0,8309 ‐0,3572 0,9879 1,0000 0,6300 0,2257 N‐0total (%) X9 0,0925 ‐0,3337 0,1502 ‐0,5471 0,4946 ‐0,7320 0,5689 0,6300 1,0000 ‐0,1353 P (ppm) X10 ‐0,5805 ‐0,5261 0,6392 ‐0,0532 0,1265 0,7394 0,3691 0,2257 ‐0,1353 1,0000 DHL (uS/cm) X11 ‐0,5745 ‐0,6547 0,7690 ‐0,2794 0,3465 0,5077 0,6216 0,4992 0,1209 0,9501 Ca (me/100 g) X12 ‐0,4990 ‐0,8448 0,8928 ‐0,6606 0,7000 ‐0,1933 0,9716 0,9519 0,5603 0,3830 Mg (me/100 g) X13 ‐0,2228 ‐0,5670 0,3454 ‐0,4014 0,3771 ‐0,4409 0,6257 0,6241 0,9141 0,2353 K (me/100 g) X14 ‐0,0415 ‐0,4600 0,2815 ‐0,5492 0,5105 ‐0,7721 0,6767 0,7371 0,9683 ‐0,1509 Na (me/100 g) X15 0,2836 0,0358 0,2864 ‐0,6733 0,6805 0,2237 0,4321 0,3977 0,2651 0,5382 KTK (me/1oo g) X16 ‐0,8331 ‐0,7311 0,3050 0,4761 ‐0,4517 ‐0,0166 0,1426 0,0804 0,1929 0,2402 Kejenuhan Basa (%) X17 ‐0,0736 0,2384 ‐0,0202 0,3271 ‐0,2764 0,6614 ‐0,2574 ‐0,3474 ‐0,6629 0,4526 fraksi pasir (%) X18 0,1051 ‐0,0894 ‐0,1424 ‐0,1158 0,0653 ‐0,7300 0,0547 0,1673 0,4326 ‐0,7195 fraksi debu (%) X19 ‐0,0893 ‐0,3030 0,3795 ‐0,4318 0,4418 0,2969 0,4257 0,3539 0,4081 0,7221 fraksi liat (%) X20 ‐0,5501 ‐0,1005 0,0790 0,7286 ‐0,6600 0,7699 ‐0,3691 ‐0,4892 ‐0,7776 0,4853 kadar air buah (%) X21 0,0682 0,1767 ‐0,3216 0,3134 ‐0,3354 0,3622 ‐0,4812 ‐0,5119 ‐0,1148 0,1363 indeks ukuran daun X22 ‐0,1740 0,1369 ‐0,3425 0,6862 ‐0,6850 0,4751 ‐0,6699 ‐0,7164 ‐0,4622 0,0565 indeks warna buah X23 0,0549 0,3191 ‐0,4002 0,5177 ‐0,5229 0,0543 ‐0,6203 ‐0,5778 ‐0,5696 ‐0,5408 bentuk pangkal buah X24 0,2455 0,3301 ‐0,6350 0,4266 ‐0,4887 ‐0,0494 ‐0,6195 ‐0,5975 0,1023 ‐0,2505 panjang tangkai buah X25 0,0686 ‐0,4128 0,3860 ‐0,7780 0,7472 ‐0,7270 0,7808 0,8521 0,9113 ‐0,1486 produksi buah (kg/phn) X26 0,2849 ‐0,2055 0,2104 ‐0,8036 0,7562 ‐0,7724 0,6614 0,7522 0,9072 ‐0,2618 produksi biji (kg /phn) X27 0,0465 ‐0,4314 0,5384 ‐0,8902 0,8803 ‐0,5839 0,8830 0,9396 0,7799 ‐0,0232 produksi fuli (kg /phn) X28 0,3818 0,6297 ‐0,6082 0,4270 ‐0,4497 0,0350 ‐0,5515 ‐0,5448 ‐0,3404 ‐0,2105 Edible portion (%) X29 0,6336 0,4523 ‐0,1979 ‐0,4753 0,4426 0,1328 ‐0,0937 ‐0,0615 0,0693 0,0096 kadar protein buah (%)
Sambungan Lampiran 5: X30 ‐0,0993 ‐0,2988 0,5780 ‐0,5852 0,6249 0,3985 0,5869 0,5077 0,2023 0,7930 kadar lemak buah (%) X31 0,0040 0,4266 ‐0,6692 0,9198 ‐0,9359 0,2873 ‐0,8459 ‐0,8840 ‐0,4816 ‐0,0873 kadar pektin buah (%) X32 0,5940 0,1741 0,0625 ‐0,8626 0,8211 ‐0,3838 0,4658 0,5269 0,6235 ‐0,0269 kadar minyak biji tua (%) X33 ‐0,1837 0,0883 ‐0,0053 0,3689 ‐0,3283 0,0983 ‐0,1595 ‐0,1699 ‐0,5641 ‐0,1525 kadar air biji tua (%)
167
X34 ‐0,1784 0,0946 ‐0,0133 0,3726 ‐0,3327 0,0954 ‐0,1660 ‐0,1757 ‐0,5642 ‐0,1582 kadar air fuli (%) X35 ‐0,5488 ‐0,5968 0,4112 0,0378 ‐0,0134 ‐0,3913 0,3590 0,3905 0,1301 ‐0,2863 bobot jenis minyak pala (g/ml) X36 0,4337 0,2213 ‐0,0354 ‐0,4835 0,4590 0,0292 0,2203 0,2064 0,3815 0,3497 indeks bias minyak pala X37 ‐0,1173 0,1604 ‐0,4179 0,6803 ‐0,6930 0,4468 ‐0,5833 ‐0,6642 ‐0,1761 0,3416 putaran optik minyak pala X38 ‐0,5078 ‐0,0705 0,0360 0,7227 ‐0,6605 0,6969 ‐0,4620 ‐0,5468 ‐0,8541 0,2318 sisa penguapan (%) X39 0,3827 0,4533 ‐0,6869 0,3519 ‐0,4178 ‐0,1099 ‐0,6586 ‐0,6091 0,0235 ‐0,4227 kadar minyak fuli (%) X40 ‐0,3777 ‐0,4910 0,4445 ‐0,1793 0,2039 0,1188 0,5164 0,4318 0,4152 0,6858 hidrokarbon monoterpen (%) X41 0,0502 ‐0,2604 0,6067 ‐0,8181 0,8482 0,0413 0,6330 0,6489 0,1490 0,1870 monoterpen teroksigenasi (%) X42 ‐0,1158 0,2559 ‐0,5414 0,8623 ‐0,8751 0,0251 ‐0,7540 ‐0,7388 ‐0,4966 ‐0,4698 senyawa aromatik (%) X43 0,7502 0,5621 ‐0,5783 ‐0,2418 0,1601 ‐0,7880 ‐0,2090 ‐0,0547 0,3069 ‐0,9422 kadar miristisin (%) X44 ‐0,3749 0,0370 ‐0,3005 0,8899 ‐0,8733 0,1741 ‐0,6055 ‐0,6262 ‐0,5819 ‐0,2538 kadar elemisin (%) X45 0,4675 0,5505 ‐0,7024 0,3082 ‐0,3703 ‐0,4605 ‐0,6079 ‐0,4934 ‐0,1229 ‐0,9087 kadar safrol (%) X46 ‐0,1561 0,0969 ‐0,2819 0,5727 ‐0,5728 0,5373 ‐0,4526 ‐0,5522 ‐0,1718 0,5096 kadar eugenol (%) X47 ‐0,2629 ‐0,6611 0,7000 ‐0,7219 0,7353 ‐0,4435 0,9545 0,9659 0,7316 0,2122 SI DNA OPE‐10 (%) X48 0,1062 ‐0,3521 0,5858 ‐0,9630 0,9658 ‐0,4194 0,8810 0,9266 0,6244 0,0689 SI DNA OPE‐11 (%) X11 X12 X13 X14 X15 X16 X17 X18 X19 X20 X1 ‐0,5745 ‐0,4990 ‐0,2228 ‐0,0415 0,2836 ‐0,8331 ‐0,0736 0,1051 ‐0,0893 ‐0,5501 curah hujan bulanan (mm) X2 ‐0,6547 ‐0,8448 ‐0,5670 ‐0,4600 0,0358 ‐0,7311 0,2384 ‐0,0894 ‐0,3030 ‐0,1005 hari hujan bulanan X3 0,7690 0,8928 0,3454 0,2815 0,2864 0,3050 ‐0,0202 ‐0,1424 0,3795 0,0790 suhu (0C) X4 ‐0,2794 ‐0,6606 ‐0,4014 ‐0,5492 ‐0,6733 0,4761 0,3271 ‐0,1158 ‐0,4318 0,7286 penyinaran matahari (%) X5 0,3465 0,7000 0,3771 0,5105 0,6805 ‐0,4517 ‐0,2764 0,0653 0,4418 ‐0,6600 kelembapan udara (%) X6 0,5077 ‐0,1933 ‐0,4409 ‐0,7721 0,2237 ‐0,0166 0,6614 ‐0,7300 0,2969 0,7699 pH (H2O) X7 0,6216 0,9716 0,6257 0,6767 0,4321 0,1426 ‐0,2574 0,0547 0,4257 ‐0,3691 C‐0organik (%) X8 0,4992 0,9519 0,6241 0,7371 0,3977 0,0804 ‐0,3474 0,1673 0,3539 ‐0,4892 N‐0total (%) X9 0,1209 0,5603 0,9141 0,9683 0,2651 0,1929 ‐0,6629 0,4326 0,4081 ‐0,7776 P (ppm)
Sambungan Lampiran 5: X10 0,9501 0,3830 0,2353 ‐0,1509 0,5382 0,2402 0,4526 ‐0,7195 0,7221 0,4853 DHL (uS/cm) X11 1,0000 0,6103 0,4517 0,1352 0,6186 0,2499 0,3185 ‐0,6151 0,7648 0,2733 Ca (me/100 g) X12 0,6103 1,0000 0,6437 0,6655 0,2992 0,3050 ‐0,3822 0,1713 0,4194 ‐0,3357 Mg (me/100 g) X13 0,4517 0,6437 1,0000 0,8851 0,3340 0,4288 ‐0,4727 0,1720 0,6129 ‐0,4869 K (me/100 g) X14 0,1352 0,6655 0,8851 1,0000 0,1606 0,2725 ‐0,6350 0,4647 0,2719 ‐0,7157 Na (me/100 g) X15 0,6186 0,2992 0,3340 0,1606 1,0000 ‐0,5149 0,2420 ‐0,5644 0,8100 ‐0,2641 KTK (me/1oo g) X16 0,2499 0,3050 0,4288 0,2725 ‐0,5149 1,0000 ‐0,2312 0,2131 ‐0,0046 0,3275 Kejenuhan Basa (%) X17 0,3185 ‐0,3822 ‐0,4727 ‐0,6350 0,2420 ‐0,2312 1,0000 ‐0,9058 ‐0,0181 0,7549 fraksi pasir (%) X18 ‐0,6151 0,1713 0,1720 0,4647 ‐0,5644 0,2131 ‐0,9058 1,0000 ‐0,4073 ‐0,6154 fraksi debu (%) X19 0,7648 0,4194 0,6129 0,2719 0,8100 ‐0,0046 ‐0,0181 ‐0,4073 1,0000 ‐0,1750 fraksi liat (%) X20 0,2733 ‐0,3357 ‐0,4869 ‐0,7157 ‐0,2641 0,3275 0,7549 ‐0,6154 ‐0,1750 1,0000 kadar air buah (%)
168
X21 ‐0,0650 ‐0,3307 ‐0,0371 ‐0,3107 ‐0,0273 0,1063 ‐0,2691 0,0960 0,3535 0,0343 indeks ukuran daun X22 ‐0,2097 ‐0,4899 ‐0,3502 ‐0,5709 ‐0,4411 0,3071 ‐0,0810 0,0984 ‐0,0577 0,4103 indeks warna buah X23 ‐0,7201 ‐0,4985 ‐0,7159 ‐0,5420 ‐0,7845 0,0261 ‐0,1821 0,4793 ‐0,7383 0,2067 bentuk pangkal buah X24 ‐0,3980 ‐0,4887 0,0710 ‐0,0871 ‐0,2557 0,1739 ‐0,4214 0,3401 0,1059 ‐0,1439 panjang tangkai buah X25 0,1477 0,7514 0,7746 0,9451 0,3000 0,0391 ‐0,6563 0,4719 0,3011 ‐0,8248 produksi buah (kg/phn) X26 0,0220 0,6074 0,7118 0,9044 0,3560 ‐0,1343 ‐0,6527 0,4739 0,2885 ‐0,9148 produksi biji (kg /phn) X27 0,2733 0,8216 0,6611 0,8401 0,4308 ‐0,0965 ‐0,4915 0,3113 0,3248 ‐0,7445 produksi fuli (kg /phn) X28 ‐0,2839 ‐0,7063 ‐0,3705 ‐0,3479 ‐0,0353 ‐0,2966 0,6932 ‐0,4836 ‐0,3529 0,3628 Edible portion (%) X29 ‐0,0435 ‐0,1123 ‐0,0604 ‐0,1235 0,5770 ‐0,6711 ‐0,2220 ‐0,0021 0,4834 ‐0,4819 kadar protein buah (%) X30 0,8659 0,5017 0,3968 0,1477 0,9248 ‐0,2262 0,2899 ‐0,6321 0,8667 ‐0,0434 kadar lemak buah (%) X31 ‐0,3043 ‐0,8260 ‐0,3739 ‐0,5385 ‐0,4335 0,2219 0,4692 ‐0,2923 ‐0,3215 0,6323 kadar pektin buah (%) X32 0,1658 0,3252 0,4627 0,5328 0,7947 ‐0,5995 ‐0,2156 ‐0,0293 0,5340 ‐0,7679 kadar minyak biji tua (%) X33 ‐0,1810 ‐0,2439 ‐0,5639 ‐0,3783 ‐0,4115 ‐0,0049 0,6106 ‐0,2535 ‐0,7178 0,5696 kadar air biji tua (%) X34 ‐0,1875 ‐0,2506 ‐0,5658 ‐0,3794 ‐0,4143 ‐0,0066 0,6099 ‐0,2515 ‐0,7211 0,5683 kadar air fuli (%) X35 ‐0,1729 0,4729 0,0787 0,3271 ‐0,6783 0,5652 ‐0,4695 0,6512 ‐0,5247 ‐0,0477 bobot jenis minyak pala (g/ml) X36 0,4343 0,0618 0,4202 0,2480 0,9032 ‐0,4628 0,2644 ‐0,5468 0,7204 ‐0,2910 indeks bias minyak pala X37 0,1434 ‐0,5206 0,0615 ‐0,3280 ‐0,0184 0,3325 0,2944 ‐0,4033 0,3170 0,4770 putaran optik minyak pala X38 ‐0,0169 ‐0,3443 ‐0,6697 ‐0,7940 ‐0,5343 0,3162 0,4008 ‐0,2069 ‐0,3755 0,8468 sisa penguapan (%) X39 ‐0,5721 ‐0,5346 ‐0,0972 ‐0,1541 ‐0,3152 0,0076 ‐0,4816 0,4611 ‐0,0499 ‐0,2334 kadar minyak fuli (%) X40 0,8076 0,4445 0,6851 0,4188 0,5583 0,3070 0,3114 ‐0,5658 0,6637 0,1288 hidrokarbon monoterpen (%)
Sambungan Lampiran 5: X41 0,2914 0,6326 0,0652 0,1663 0,4640 ‐0,3850 ‐0,3223 0,1525 0,3349 ‐0,4526 monoterpen teroksigenasi (%) X42 ‐0,6563 ‐0,6370 ‐0,5339 ‐0,4656 ‐0,9113 0,3524 ‐0,0089 0,3243 ‐0,7458 0,4371 senyawa aromatik (%) X43 ‐0,8448 ‐0,2581 ‐0,0971 0,2827 ‐0,2405 ‐0,4428 ‐0,5210 0,6827 ‐0,4880 ‐0,7160 kadar miristisin (%) X44 ‐0,4334 ‐0,4891 ‐0,5249 ‐0,4970 ‐0,9002 0,4897 0,1528 0,1659 ‐0,7208 0,6405 kadar elemisin (%) X45 ‐0,9769 ‐0,5482 ‐0,4305 ‐0,1423 ‐0,6868 ‐0,1396 ‐0,4365 0,7082 ‐0,7301 ‐0,2672 kadar safrol (%) X46 0,3308 ‐0,4214 0,1102 ‐0,3166 0,1629 0,2790 0,4242 ‐0,5782 0,4499 0,5165 kadar eugenol (%) X47 0,5044 0,9007 0,7462 0,8339 0,3889 0,1694 ‐0,3009 0,1196 0,3664 ‐0,4722 SI DNA OPE‐10 (%) X48 0,3383 0,7937 0,5106 0,6800 0,5647 ‐0,2787 ‐0,3424 0,1585 0,3638 ‐0,6797 SI DNA OPE‐11 (%) X21 X22 X23 X24 X25 X26 X27 X28 X29 X30 X1 0,0682 ‐0,1740 0,0549 0,2455 0,0686 0,2849 0,0465 0,3818 0,6336 ‐0,0993 curah hujan bulanan (mm) X2 0,1767 0,1369 0,3191 0,3301 ‐0,4128 ‐0,2055 ‐0,4314 0,6297 0,4523 ‐0,2988 hari hujan bulanan X3 ‐0,3216 ‐0,3425 ‐0,4002 ‐0,6350 0,3860 0,2104 0,5384 ‐0,6082 ‐0,1979 0,5780 suhu (0C) X4 0,3134 0,6862 0,5177 0,4266 ‐0,7780 ‐0,8036 ‐0,8902 0,4270 ‐0,4753 ‐0,5852 penyinaran matahari (%) X5 ‐0,3354 ‐0,6850 ‐0,5229 ‐0,4887 0,7472 0,7562 0,8803 ‐0,4497 0,4426 0,6249 kelembapan udara (%) X6 0,3622 0,4751 0,0543 ‐0,0494 ‐0,7270 ‐0,7724 ‐0,5839 0,0350 0,1328 0,3985 pH (H2O) X7 ‐0,4812 ‐0,6699 ‐0,6203 ‐0,6195 0,7808 0,6614 0,8830 ‐0,5515 ‐0,0937 0,5869 C‐0organik (%)
169
X8 ‐0,5119 ‐0,7164 ‐0,5778 ‐0,5975 0,8521 0,7522 0,9396 ‐0,5448 ‐0,0615 0,5077 N‐0total (%) X9 ‐0,1148 ‐0,4622 ‐0,5696 0,1023 0,9113 0,9072 0,7799 ‐0,3404 0,0693 0,2023 P (ppm) X10 0,1363 0,0565 ‐0,5408 ‐0,2505 ‐0,1486 ‐0,2618 ‐0,0232 ‐0,2105 0,0096 0,7930 DHL (uS/cm) X11 ‐0,0650 ‐0,2097 ‐0,7201 ‐0,3980 0,1477 0,0220 0,2733 ‐0,2839 ‐0,0435 0,8659 Ca (me/100 g) X12 ‐0,3307 ‐0,4899 ‐0,4985 ‐0,4887 0,7514 0,6074 0,8216 ‐0,7063 ‐0,1123 0,5017 Mg (me/100 g) X13 ‐0,0371 ‐0,3502 ‐0,7159 0,0710 0,7746 0,7118 0,6611 ‐0,3705 ‐0,0604 0,3968 K (me/100 g) X14 ‐0,3107 ‐0,5709 ‐0,5420 ‐0,0871 0,9451 0,9044 0,8401 ‐0,3479 ‐0,1235 0,1477 Na (me/100 g) X15 ‐0,0273 ‐0,4411 ‐0,7845 ‐0,2557 0,3000 0,3560 0,4308 ‐0,0353 0,5770 0,9248 KTK (me/1oo g) X16 0,1063 0,3071 0,0261 0,1739 0,0391 ‐0,1343 ‐0,0965 ‐0,2966 ‐0,6711 ‐0,2262 Kejenuhan Basa (%) X17 ‐0,2691 ‐0,0810 ‐0,1821 ‐0,4214 ‐0,6563 ‐0,6527 ‐0,4915 0,6932 ‐0,2220 0,2899 fraksi pasir (%) X18 0,0960 0,0984 0,4793 0,3401 0,4719 0,4739 0,3113 ‐0,4836 ‐0,0021 ‐0,6321 fraksi debu (%) X19 0,3535 ‐0,0577 ‐0,7383 0,1059 0,3011 0,2885 0,3248 ‐0,3529 0,4834 0,8667 fraksi liat (%) X20 0,0343 0,4103 0,2067 ‐0,1439 ‐0,8248 ‐0,9148 ‐0,7445 0,3628 ‐0,4819 ‐0,0434 kadar air buah (%)
Sambungan Lampiran 5: X21 1,0000 0,8600 0,3109 0,8686 ‐0,3390 ‐0,2888 ‐0,4650 ‐0,3250 0,5581 ‐0,0453 indeks ukuran daun X22 0,8600 1,0000 0,6340 0,7555 ‐0,6506 ‐0,6489 ‐0,7633 ‐0,1674 0,1678 ‐0,3726 indeks warna buah X23 0,3109 0,6340 1,0000 0,3538 ‐0,5141 ‐0,4909 ‐0,5668 ‐0,0511 ‐0,0347 ‐0,8085 bentuk pangkal buah X24 0,8686 0,7555 0,3538 1,0000 ‐0,2123 ‐0,1262 ‐0,4383 ‐0,0958 0,3723 ‐0,3704 panjang tangkai buah X25 ‐0,3390 ‐0,6506 ‐0,5141 ‐0,2123 1,0000 0,9753 0,9599 ‐0,4716 0,0807 0,2612 produksi buah (kg/phn) X26 ‐0,2888 ‐0,6489 ‐0,4909 ‐0,1262 0,9753 1,0000 0,9259 ‐0,3711 0,2241 0,2343 produksi biji (kg /phn) X27 ‐0,4650 ‐0,7633 ‐0,5668 ‐0,4383 0,9599 0,9259 1,0000 ‐0,4635 0,1080 0,4145 produksi fuli (kg /phn) X28 ‐0,3250 ‐0,1674 ‐0,0511 ‐0,0958 ‐0,4716 ‐0,3711 ‐0,4635 1,0000 ‐0,2734 ‐0,2000 Edible portion (%) X29 0,5581 0,1678 ‐0,0347 0,3723 0,0807 0,2241 0,1080 ‐0,2734 1,0000 0,3675 kadar protein buah (%) X30 ‐0,0453 ‐0,3726 ‐0,8085 ‐0,3704 0,2612 0,2343 0,4145 ‐0,2000 0,3675 1,0000 kadar lemak buah (%) X31 0,2803 0,5431 0,3218 0,4512 ‐0,7706 ‐0,7279 ‐0,8813 0,6899 ‐0,3210 ‐0,4607 kadar pektin buah (%) X32 ‐0,1691 ‐0,6375 ‐0,6498 ‐0,1540 0,6796 0,7854 0,7230 ‐0,0855 0,5968 0,5788 kadar minyak biji tua (%) X33 ‐0,6889 ‐0,2556 0,2515 ‐0,6087 ‐0,4124 ‐0,4584 ‐0,2963 0,5907 ‐0,6945 ‐0,3468 kadar air biji tua (%) X34 ‐0,6868 ‐0,2533 0,2545 ‐0,6035 ‐0,4146 ‐0,4592 ‐0,2999 0,5955 ‐0,6936 ‐0,3520 kadar air fuli (%) X35 ‐0,3535 ‐0,0774 0,3745 ‐0,2605 0,3064 0,1595 0,2739 ‐0,4489 ‐0,6032 ‐0,4866 bobot jenis minyak pala (g/ml) X36 ‐0,0425 ‐0,4523 ‐0,8299 ‐0,0784 0,2767 0,3728 0,3234 0,2654 0,4564 0,7483 indeks bias minyak pala X37 0,6381 0,6382 ‐0,0508 0,6503 ‐0,5501 ‐0,5284 ‐0,6809 0,3104 0,0083 0,0127 putaran optik minyak pala X38 0,2667 0,6799 0,6403 0,0589 ‐0,8280 ‐0,9122 ‐0,7760 0,0327 ‐0,3085 ‐0,3251 sisa penguapan (%) X39 0,8323 0,7388 0,5214 0,9631 ‐0,2149 ‐0,1046 ‐0,4188 ‐0,1214 0,4627 ‐0,4775 kadar minyak fuli (%) X40 ‐0,2614 ‐0,4316 ‐0,9143 ‐0,3113 0,2951 0,2125 0,3232 0,0997 ‐0,2604 0,6986 hidrokarbon monoterpen (%) X41 ‐0,0394 ‐0,2745 ‐0,1176 ‐0,3548 0,4614 0,4421 0,6172 ‐0,7059 0,5410 0,4888 monoterpen teroksigenasi (%) X42 0,2555 0,6574 0,8383 0,4461 ‐0,6173 ‐0,6187 ‐0,7471 0,2573 ‐0,4001 ‐0,8944 senyawa aromatik (%) X43 ‐0,1237 ‐0,2115 0,3344 0,2191 0,3447 0,4888 0,2434 0,1208 0,2460 ‐0,5513 kadar miristisin (%) X44 0,1090 0,5869 0,7477 0,2242 ‐0,6572 ‐0,7171 ‐0,7368 0,2415 ‐0,5970 ‐0,7790 kadar elemisin (%) X45 0,2044 0,3536 0,8074 0,4929 ‐0,1509 ‐0,0468 ‐0,2927 0,1060 0,0746 ‐0,8910 kadar safrol (%)
170
X46 0,5438 0,5078 ‐0,2297 0,4940 ‐0,5176 ‐0,5067 ‐0,6014 0,3304 0,0174 0,2164 kadar eugenol (%) X47 ‐0,5694 ‐0,7757 ‐0,6973 ‐0,5634 0,8759 0,7789 0,9255 ‐0,3902 ‐0,1867 0,4868 SI DNA OPE‐10 (%) X48 ‐0,4776 ‐0,7848 ‐0,5705 ‐0,5463 0,8635 0,8430 0,9671 ‐0,4369 0,2284 0,5397 SI DNA OPE‐11 (%)
Sambungan Lampiran 5: X31 X32 X33 X34 X35 X36 X37 X38 X39 X40 X1 0,0040 0,5940 ‐0,1837 ‐0,1784 ‐0,5488 0,4337 ‐0,1173 ‐0,5078 0,3827 ‐0,3777 curah hujan bulanan (mm) X2 0,4266 0,1741 0,0883 0,0946 ‐0,5968 0,2213 0,1604 ‐0,0705 0,4533 ‐0,4910 hari hujan bulanan X3 ‐0,6692 0,0625 ‐0,0053 ‐0,0133 0,4112 ‐0,0354 ‐0,4179 0,0360 ‐0,6869 0,4445 suhu (0C) X4 0,9198 ‐0,8626 0,3689 0,3726 0,0378 ‐0,4835 0,6803 0,7227 0,3519 ‐0,1793 penyinaran matahari (%) X5 ‐0,9359 0,8211 ‐0,3283 ‐0,3327 ‐0,0134 0,4590 ‐0,6930 ‐0,6605 ‐0,4178 0,2039 kelembapan udara (%) X6 0,2873 ‐0,3838 0,0983 0,0954 ‐0,3913 0,0292 0,4468 0,6969 ‐0,1099 0,1188 pH (H2O) X7 ‐0,8459 0,4658 ‐0,1595 ‐0,1660 0,3590 0,2203 ‐0,5833 ‐0,4620 ‐0,6586 0,5164 C‐0organik (%) X8 ‐0,8840 0,5269 ‐0,1699 ‐0,1757 0,3905 0,2064 ‐0,6642 ‐0,5468 ‐0,6091 0,4318 N‐0total (%) X9 ‐0,4816 0,6235 ‐0,5641 ‐0,5642 0,1301 0,3815 ‐0,1761 ‐0,8541 0,0235 0,4152 P (ppm) X10 ‐0,0873 ‐0,0269 ‐0,1525 ‐0,1582 ‐0,2863 0,3497 0,3416 0,2318 ‐0,4227 0,6858 DHL (uS/cm) X11 ‐0,3043 0,1658 ‐0,1810 ‐0,1875 ‐0,1729 0,4343 0,1434 ‐0,0169 ‐0,5721 0,8076 Ca (me/100 g) X12 ‐0,8260 0,3252 ‐0,2439 ‐0,2506 0,4729 0,0618 ‐0,5206 ‐0,3443 ‐0,5346 0,4445 Mg (me/100 g) X13 ‐0,3739 0,4627 ‐0,5639 ‐0,5658 0,0787 0,4202 0,0615 ‐0,6697 ‐0,0972 0,6851 K (me/100 g) X14 ‐0,5385 0,5328 ‐0,3783 ‐0,3794 0,3271 0,2480 ‐0,3280 ‐0,7940 ‐0,1541 0,4188 Na (me/100 g) X15 ‐0,4335 0,7947 ‐0,4115 ‐0,4143 ‐0,6783 0,9032 ‐0,0184 ‐0,5343 ‐0,3152 0,5583 KTK (me/1oo g) X16 0,2219 ‐0,5995 ‐0,0049 ‐0,0066 0,5652 ‐0,4628 0,3325 0,3162 0,0076 0,3070 Kejenuhan Basa (%) X17 0,4692 ‐0,2156 0,6106 0,6099 ‐0,4695 0,2644 0,2944 0,4008 ‐0,4816 0,3114 fraksi pasir (%) X18 ‐0,2923 ‐0,0293 ‐0,2535 ‐0,2515 0,6512 ‐0,5468 ‐0,4033 ‐0,2069 0,4611 ‐0,5658 fraksi debu (%) X19 ‐0,3215 0,5340 ‐0,7178 ‐0,7211 ‐0,5247 0,7204 0,3170 ‐0,3755 ‐0,0499 0,6637 fraksi liat (%) X20 0,6323 ‐0,7679 0,5696 0,5683 ‐0,0477 ‐0,2910 0,4770 0,8468 ‐0,2334 0,1288 kadar air buah (%) X21 0,2803 ‐0,1691 ‐0,6889 ‐0,6868 ‐0,3535 ‐0,0425 0,6381 0,2667 0,8323 ‐0,2614 indeks ukuran daun X22 0,5431 ‐0,6375 ‐0,2556 ‐0,2533 ‐0,0774 ‐0,4523 0,6382 0,6799 0,7388 ‐0,4316 indeks indeks warna buah X23 0,3218 ‐0,6498 0,2515 0,2545 0,3745 ‐0,8299 ‐0,0508 0,6403 0,5214 ‐0,9143 bentuk pangkal buah X24 0,4512 ‐0,1540 ‐0,6087 ‐0,6035 ‐0,2605 ‐0,0784 0,6503 0,0589 0,9631 ‐0,3113 panjang tangkai buah X25 ‐0,7706 0,6796 ‐0,4124 ‐0,4146 0,3064 0,2767 ‐0,5501 ‐0,8280 ‐0,2149 0,2951 produksi buah (kg/phn) X26 ‐0,7279 0,7854 ‐0,4584 ‐0,4592 0,1595 0,3728 ‐0,5284 ‐0,9122 ‐0,1046 0,2125 produksi biji (kg /phn) X27 ‐0,8813 0,7230 ‐0,2963 ‐0,2999 0,2739 0,3234 ‐0,6809 ‐0,7760 ‐0,4188 0,3232 produksi fuli (kg /phn) X28 0,6899 ‐0,0855 0,5907 0,5955 ‐0,4489 0,2654 0,3104 0,0327 ‐0,1214 0,0997 Edible portion (%) X29 ‐0,3210 0,5968 ‐0,6945 ‐0,6936 ‐0,6032 0,4564 0,0083 ‐0,3085 0,4627 ‐0,2604 kadar protein buah (%)
171
Sambungan Lampiran 5: X30 ‐0,4607 0,5788 ‐0,3468 ‐0,3520 ‐0,4866 0,7483 0,0127 ‐0,3251 ‐0,4775 0,6986 kadar lemak buah (%) X31 1,0000 ‐0,6087 0,3279 0,3331 ‐0,2933 ‐0,1474 0,7741 0,4952 0,3639 ‐0,0650 kadar pektin buah (%) X32 ‐0,6087 1,0000 ‐0,4823 ‐0,4827 ‐0,4310 0,7936 ‐0,3372 ‐0,8998 ‐0,1297 0,2894 kadar minyak biji tua (%) X33 0,3279 ‐0,4823 1,0000 1,0000 0,3017 ‐0,3740 ‐0,2434 0,4361 ‐0,5538 ‐0,1024 kadar air biji tua (%) X34 0,3331 ‐0,4827 1,0000 1,0000 0,2992 ‐0,3739 ‐0,2402 0,4351 ‐0,5482 ‐0,1057 kadar air fuli (%) X35 ‐0,2933 ‐0,4310 0,3017 0,2992 1,0000 ‐0,7893 ‐0,5288 0,2046 ‐0,1992 ‐0,2527 bobot jenis minyak pala (g/ml) X36 ‐0,1474 0,7936 ‐0,3740 ‐0,3739 ‐0,7893 1,0000 0,1933 ‐0,6652 ‐0,1797 0,6294 indeks bias minyak pala X37 0,7741 ‐0,3372 ‐0,2434 ‐0,2402 ‐0,5288 0,1933 1,0000 0,2982 0,4654 0,2785 putaran optik minyak pala X38 0,4952 ‐0,8998 0,4361 0,4351 0,2046 ‐0,6652 0,2982 1,0000 0,0720 ‐0,3430 sisa penguapan (%) X39 0,3639 ‐0,1297 ‐0,5538 ‐0,5482 ‐0,1992 ‐0,1797 0,4654 0,0720 1,0000 ‐0,5418 kadar minyak fuli (%) X40 ‐0,0650 0,2894 ‐0,1024 ‐0,1057 ‐0,2527 0,6294 0,2785 ‐0,3430 ‐0,5418 1,0000 hidrokarbon monoterpen (%) X41 ‐0,9100 0,4929 ‐0,3475 ‐0,3528 0,1242 0,0914 ‐0,6703 ‐0,2280 ‐0,2290 ‐0,1350 monoterpen teroksigenasi (%) X42 0,7127 ‐0,8368 0,3830 0,3875 0,3276 ‐0,7658 0,3151 0,6628 0,4933 ‐0,5993 senyawa aromatik (%) X43 ‐0,1368 0,3501 ‐0,0572 ‐0,0521 0,1184 ‐0,0863 ‐0,4314 ‐0,4867 0,3986 ‐0,5967 kadar miristisin (%) X44 0,6872 ‐0,9541 0,5435 0,5460 0,4283 ‐0,8110 0,2875 0,7943 0,2378 ‐0,4339 kadar elemisin (%) X45 0,2664 ‐0,2501 0,0757 0,0816 0,2597 ‐0,5499 ‐0,1180 0,1051 0,6663 ‐0,8680 kadar safrol (%) X46 0,6957 ‐0,2392 ‐0,2211 ‐0,2191 ‐0,6127 0,3418 0,9742 0,2503 0,2876 0,4448 kadar eugenol (%) X47 ‐0,7502 0,5345 ‐0,1394 ‐0,1443 0,3412 0,2989 ‐0,5387 ‐0,6345 ‐0,6233 0,5844 SI DNA OPE‐10 (%) X48 ‐0,9317 0,7723 ‐0,2494 ‐0,2538 0,1566 0,3909 ‐0,7340 ‐0,7162 ‐0,4998 0,2914 SI DNA OPE‐11 (%) X41 X42 X43 X44 X45 X46 X47 X48 X1 0,0502 ‐0,1158 0,7502 ‐0,3749 0,4675 ‐0,1561 ‐0,2629 0,1062 curah hujan bulanan (mm) X2 ‐0,2604 0,2559 0,5621 0,0370 0,5505 0,0969 ‐0,6611 ‐0,3521 hari hujan bulanan X3 0,6067 ‐0,5414 ‐0,5783 ‐0,3005 ‐0,7024 ‐0,2819 0,7000 0,5858 suhu (0C) X4 ‐0,8181 0,8623 ‐0,2418 0,8899 0,3082 0,5727 ‐0,7219 ‐0,9630 penyinaran matahari (%) X5 0,8482 ‐0,8751 0,1601 ‐0,8733 ‐0,3703 ‐0,5728 0,7353 0,9658 kelembapan udara (%) X6 0,0413 0,0251 ‐0,7880 0,1741 ‐0,4605 0,5373 ‐0,4435 ‐0,4194 pH (H2O) X7 0,6330 ‐0,7540 ‐0,2090 ‐0,6055 ‐0,6079 ‐0,4526 0,9545 0,8810 C‐0organik (%) X8 0,6489 ‐0,7388 ‐0,0547 ‐0,6262 ‐0,4934 ‐0,5522 0,9659 0,9266 N‐0total (%) X9 0,1490 ‐0,4966 0,3069 ‐0,5819 ‐0,1229 ‐0,1718 0,7316 0,6244 P (ppm)
Sambungan Lampiran 5: X10 0,1870 ‐0,4698 ‐0,9422 ‐0,2538 ‐0,9087 0,5096 0,2122 0,0689 DHL (uS/cm) X11 0,2914 ‐0,6563 ‐0,8448 ‐0,4334 ‐0,9769 0,3308 0,5044 0,3383 Ca (me/100 g) X12 0,6326 ‐0,6370 ‐0,2581 ‐0,4891 ‐0,5482 ‐0,4214 0,9007 0,7937 Mg (me/100 g) X13 0,0652 ‐0,5339 ‐0,0971 ‐0,5249 ‐0,4305 0,1102 0,7462 0,5106 K (me/100 g)
172
X14 0,1663 ‐0,4656 0,2827 ‐0,4970 ‐0,1423 ‐0,3166 0,8339 0,6800 Na (me/100 g) X15 0,4640 ‐0,9113 ‐0,2405 ‐0,9002 ‐0,6868 0,1629 0,3889 0,5647 KTK (me/1oo g) X16 ‐0,3850 0,3524 ‐0,4428 0,4897 ‐0,1396 0,2790 0,1694 ‐0,2787 Kejenuhan Basa (%) X17 ‐0,3223 ‐0,0089 ‐0,5210 0,1528 ‐0,4365 0,4242 ‐0,3009 ‐0,3424 fraksi pasir (%) X18 0,1525 0,3243 0,6827 0,1659 0,7082 ‐0,5782 0,1196 0,1585 fraksi debu (%) X19 0,3349 ‐0,7458 ‐0,4880 ‐0,7208 ‐0,7301 0,4499 0,3664 0,3638 fraksi liat (%) X20 ‐0,4526 0,4371 ‐0,7160 0,6405 ‐0,2672 0,5165 ‐0,4722 ‐0,6797 kadar air buah (%) X21 ‐0,0394 0,2555 ‐0,1237 0,1090 0,2044 0,5438 ‐0,5694 ‐0,4776 indeks ukuran daun X22 ‐0,2745 0,6574 ‐0,2115 0,5869 0,3536 0,5078 ‐0,7757 ‐0,7848 indeks indeks indeks warna buah X23 ‐0,1176 0,8383 0,3344 0,7477 0,8074 ‐0,2297 ‐0,6973 ‐0,5705 bentuk pangkal buah X24 ‐0,3548 0,4461 0,2191 0,2242 0,4929 0,4940 ‐0,5634 ‐0,5463 panjang tangkai buah X25 0,4614 ‐0,6173 0,3447 ‐0,6572 ‐0,1509 ‐0,5176 0,8759 0,8635 produksi buah (kg/phn) X26 0,4421 ‐0,6187 0,4888 ‐0,7171 ‐0,0468 ‐0,5067 0,7789 0,8430 produksi biji (kg /phn) X27 0,6172 ‐0,7471 0,2434 ‐0,7368 ‐0,2927 ‐0,6014 0,9255 0,9671 produksi fuli (kg /phn) X28 ‐0,7059 0,2573 0,1208 0,2415 0,1060 0,3304 ‐0,3902 ‐0,4369 Edible portion (%) X29 0,5410 ‐0,4001 0,2460 ‐0,5970 0,0746 0,0174 ‐0,1867 0,2284 kadar protein buah (%) X30 0,4888 ‐0,8944 ‐0,5513 ‐0,7790 ‐0,8910 0,2164 0,4868 0,5397 kadar lemak buah (%) X31 ‐0,9100 0,7127 ‐0,1368 0,6872 0,2664 0,6957 ‐0,7502 ‐0,9317 kadar pektin buah (%) X32 0,4929 ‐0,8368 0,3501 ‐0,9541 ‐0,2501 ‐0,2392 0,5345 0,7723 kadar minyak biji tua (%) X33 ‐0,3475 0,3830 ‐0,0572 0,5435 0,0757 ‐0,2211 ‐0,1394 ‐0,2494 kadar air biji tua (%) X34 ‐0,3528 0,3875 ‐0,0521 0,5460 0,0816 ‐0,2191 ‐0,1443 ‐0,2538 kadar air fuli (%) X35 0,1242 0,3276 0,1184 0,4283 0,2597 ‐0,6127 0,3412 0,1566 bobot jenis minyak pala (g/ml) X36 0,0914 ‐0,7658 ‐0,0863 ‐0,8110 ‐0,5499 0,3418 0,2989 0,3909 indeks bias minyak pala X37 ‐0,6703 0,3151 ‐0,4314 0,2875 ‐0,1180 0,9742 ‐0,5387 ‐0,7340 putaran optik minyak pala X38 ‐0,2280 0,6628 ‐0,4867 0,7943 0,1051 0,2503 ‐0,6345 ‐0,7162 sisa penguapan (%) X39 ‐0,2290 0,4933 0,3986 0,2378 0,6663 0,2876 ‐0,6233 ‐0,4998 kadar minyak fuli (%) X40 ‐0,1350 ‐0,5993 ‐0,5967 ‐0,4339 ‐0,8680 0,4448 0,5844 0,2914 hidrokarbon monoterpen (%)
Sambungan Lampiran 5: X41 1,0000 ‐0,6216 0,0323 ‐0,6070 ‐0,2258 ‐0,5950 0,4429 0,7452 monoterpen teroksigenasi (%) X42 ‐0,6216 1,0000 0,1717 0,9495 0,7075 0,1347 ‐0,7216 ‐0,8356 senyawa aromatik (%) X43 0,0323 0,1717 1,0000 ‐0,0783 0,7906 ‐0,5620 ‐0,0574 0,1818 kadar miristisin (%) X44 ‐0,6070 0,9495 ‐0,0783 1,0000 0,4855 0,1508 ‐0,6093 ‐0,8095 kadar elemisin (%) X45 ‐0,2258 0,7075 0,7906 0,4855 1,0000 ‐0,3251 ‐0,5272 ‐0,3689 kadar safrol (%) X46 ‐0,5950 0,1347 ‐0,5620 0,1508 ‐0,3251 1,0000 ‐0,4246 ‐0,6223 kadar eugenol (%) X47 0,4429 ‐0,7216 ‐0,0574 ‐0,6093 ‐0,5272 ‐0,4246 1,0000 0,8723 SI DNA OPE‐10 (%) X48 0,7452 ‐0,8356 0,1818 ‐0,8095 ‐0,3689 ‐0,6223 0,8723 1,0000 SI DNA OPE‐11 (%)