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Tema 5. bio-reactoresDefinicin. Clasificacin de los bio-reactores. Reactores discontinuos y de flujo continuo. Reactores de tanque agitado y flujo continuo (TAFC). Reactores de lecho empaquetado, fluidificado y fibra hueca. Parmetros para evaluar el rendimiento de bio-reactores. Problemas en el funcionamiento ideal: prdida de estabilidad, regeneracin, mantenimiento de productividad constante, problemas fsicos (abrasin, empaquetamiento y compresin.

Definicin de bio-reactor.

BIO-REACTOR Recipiente en el que tiene lugar una reaccin catalizada por enzimas libres o inmovilizadas y el que existen sistemas para la toma de muestras y el control de la reaccin Considerar: Control del pH y t Suministro y eliminacin de compuestos gaseosos Presencia de partculas slidas Estabilidades qumicas y biolgicas de sustratos y productos Recambio del catalizador Existencia de inhibicin por sustrato o productos Tamao de la operacin y uso del producto Funcin: retener el complejo inmovilizado y asegurar un contacto eficiente y controlado entre catalizador y sustrato Finalidad: mxima formacin de producto en poco tiempo y con coste mnimo Caractersticas: trabajan a temperatura y presin bajas, consumen poca energa Fermentador: Funcionamiento a temperaturas y presiones moderadas Autocataltico: Crecimiento microbiano Reactor enzimtico: Funcionamiento a temperaturas y presiones moderadas No autocatalticos Reactor qumico: Funcionamiento a altas temperaturas Funcionamiento a altas presiones

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Clasificacin de los bio-reactores

a.- Contenido: Homogneo (una fase) Heterogneo (ms de una fase): reactores enzima inmovilizada b.- Grado de mezcla: Mezcla perfecta: constante estado de agitacin Composicin reactivos vara con el tiempo, no con la posicin Efectividad vara con el tiempo (disminucin sustrato con el tiempo) Flujo pistn: movimiento fluido a lo largo del reactor: no mezcla anterior y posterior Composicin vara con la posicin, no dependiente del tiempo Efectividad alta a la entrada, baja a la salida (disminucin sustrato) c.- Modo de operacin: Discontinuo (por cargas) Continuos

XS - K m ln(1 - X) =

kEt V

S

S1

XS - K m ln(1 - X) =qsX: proporcin de substrato convertido KE: actividad total de la enzima S y S1: concentracin inicial y final de substrato q: velocidad de flujo dentro del reactor T: tiempo de operacin Km: cte Michaelis-Menten V: volumen de trabajo del reactor

kE kE = q Vqs1

Discontinuo Continuo Mezcla total Flujo pistn

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Reactores discontinuos

A.- Reactores discontinuos: Grandes tanques de agitacin Final de la reaccin: Vaciado y separacin producto y enzima Usos: Enzimas solubles baratos Sustrato de consistencia slida o coloidal (no apropiados para enzimas inmovilizados) No ideales para procesos integrados

Reactores de flujo continuo

B.- Reactores flujo continuo: Biocatalizador permanece en reactor Adicin de sustrato / recogida producto Apropiados para la integracin Catalizador: Mantenimiento en reactor:

Tipos de bio-reactores: B.1.- Reactor tanque agitado y flujo continuo (TAFC) B.2.- Reactor lecho empaquetado B.3.- Reactores lecho fluidificado B.4.- Reactores fibra hueca

inmovilizacin forma soluble + unidad de ultrafiltracin en la salida

Productividad y % conversin: Ajuste de concentracin de sustrato Velocidad de flujo Actividad del catalizador

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Reactores de tanque agitado y flujo continuo (TAFC)

B.1.- Reactor tanque agitado y flujo continuo (TAFC) Catalizador + corriente de sustrato + retencin del catalizador: filtracin sedimentacin fuerzas magnticas fijacin a palas de agitacin Caractersticas: Fcil construccin y control Fcil sustitucin catalizador gastado Buen mezclado (reduccin limitaciones difusin) Permiten uso de sustrato slido o coloidal

de

Inconvenientes: No en catalizador inmovilizado mecnicamente frgil Elevado volumen vaco (98% vs 2%): Necesidad gran tamao Productividad global baja % conversin sustrato-producto Bajo Posibilidad de INHIBICIN POR PRODUCTO

Reactores de lecho empaquetado

B.2.- Reactor lecho empaquetado Caractersticas: Pequeo tamao Elevada productividad (incluso en inhibicin por producto) Pequeo volumen vaco Facilidad de automatizacin Inconvenientes: Difcil sustitucin catalizador agotado Dificil control condiciones ambientales (pH) Costes de fabricacin altos No apto para lquidos con partculas o muy viscosos: bloqueo flujo, canalizaciones Presentaciones: Lmina flexible espiral Madejas de fibras Variables: velocidad de flujo Mezclado sustrato-enzima (problemas de difusin limitada) Aumento velocidad de flujo: Descenso productividad y tasa de conversin Aumento longitud reactor Reciclaje flujo Posibilidad de INHIBICIN POR SUBSTRATO

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Reactores de lecho fluidificado

B.3.- Reactores lecho fluidificado Caractersticas: Chorro de solucin de sustrato en base del reactor (alta presin): mezclado No formacin de canales Posibilidad de empleo para sustratos coloidales o slidos Inconvenientes: Alto gasto energtico Dificultad de prediccin prestaciones a gran escala

Reactores de fibra hueca

B.4.- Reactores fibra hueca Caractersticas: A partir de unidades de ultrafiltracin Enzima separado del sustrato por membrana semipermeable Posibilidad de empleo con enzimas solubles Posibilidad de empleo con coenzimas Costo aceptable

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Parmetros para evaluar el rendimiento de bio-reactores

PARMETROS PARA EVALUAR RENDIMIENTO DE LOS BIOREACTORES

Actividad

Actividad Estabilidad SelectividadGramos de producto formado/litro de volumen de reactor/hora de operacin (actividad volumtrica) productividad tiempo dimensin del reactor Necesidad actividad alta: Sustrato o producto inestable Formacin de compuestos secundarios (no deseables) Factores que afectan actividad: Concentracin del enzima Actividad del enzima: Actividad del enzima nativo Cantidad de enzima en el soporte Actividad del enzima tras la inmovilizacin

Parmetros para evaluar el rendimiento de bio-reactores

PARMETROS PARA EVALUAR RENDIMIENTO DE LOS BIOREACTORES

Estabilidad

Actividad Estabilidad Selectividad

Tiempo en el que la actividad del reactor decae a la mitad del valor inicial (vida media) estabilidad Renovacin enzima (inmovilizado/no inmovilizado) poco frecuente

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Parmetros para evaluar el rendimiento de bio-reactores

PARMETROS PARA EVALUAR RENDIMIENTO DE LOS BIOREACTORES

Selectividad

Actividad Estabilidad Selectividad

Proporcin en que el producto deseado se encuentra frente al total de productos formados selectividad Uso eficiente del sustrato Altos rendimientos Simplificacin procesos aislamiento/purificacin producto

Problemas en el rendimiento de bio-reactores

PROBLEMAS EN EL RENDIMIENTO DE BIOREACTORES

PRDIDA DE ESTABILIDAD REACTORES BIOQUMICOS Causas: Inhibicin irreversible: sustancias presentes en el sustrato desnaturalizacin por pH, t, fuerza inica rozamientos mecnicos ataque microbiano liberacin del soporte autodigestin Vida media = 0.693/ ln2/ln(No/N)

Prdida de estabilidad:

Regeneracin de la actividad del biocatalizador Mantenimiento de la productividad constante Abrasin Compresin-empaquetamiento

Problemas fsicos

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Problemas en el rendimiento de bio-reactores

PROBLEMAS EN EL RENDIMIENTO DE BIOREACTORES Prdida de estabilidad: Regeneracin de la actividad del biocatalizador Mantenimiento de la productividad constante Problemas fsicos Abrasin Compresin-empaquetamiento

REGENERACIN ACTIVIDAD DEL BIOCATALIZADOR No posible (excepcin enzimas con desnaturalizacin reversible) Actuacin: Desorcin enzima inactivo e inmovilizacin enzima fresco (inmovilizacin por adsorcin) Eliminacin biocatalizador inmovilizado y sustitucin por nuevo

Problemas en el rendimiento de bio-reactores

PROBLEMAS EN EL RENDIMIENTO DE BIOREACTORES Prdida de estabilidad: Regeneracin de la actividad del biocatalizador Mantenimiento de la productividad constante Problemas fsicos Abrasin Compresin-empaquetamiento

MANTENIMIENTO PRODUCTIVIDAD CONSTANTE Adecuacin salida de productos del bioreactor/actividad de equipos de purificacin/aislamiento de productos Mtodos para mantener una productividad constante: Adicin de catalizador fresco Reduccin flujo Aumento temperatura Empleo bateras de bio-reactores de distintas edades

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Problemas en el rendimiento de bio-reactores

PROBLEMAS EN EL RENDIMIENTO DE BIOREACTORES Prdida de estabilidad: Regeneracin de la actividad del biocatalizador Mantenimiento de la productividad constante Problemas fsicos Abrasin Compresin-empaquetamiento

PROBLEMAS FSICOS Reactores agitados: ABRASIN Causas: Aumento con agitacin Aumento con velocidad de flujo Aumento con porcin de volumen ocupado por partculas de biocatalizador

Solucin: Disminucin viscosidad del fluido Aumento rigidez del soporte

Problemas en el rendimiento de bio-reactores

PROBLEMAS EN EL RENDIMIENTO DE BIOREACTORES Prdida de estabilidad: Regeneracin de la actividad del biocatalizador Mantenimiento de la productividad constante Problemas fsicos Abrasin Compresin-empaquetamiento

PROBLEMAS FSICOS Columnas empaquetadas: COMPRESIN Y EMPAQUETAMIENTO Compresin: cada de presin en columna: friccin fluido/partculas de soporte Bloqueo parcial por materiales particulados (partculas pequeas en columnas largas y durante tiempo prolongado) Ruptura partculas por presin

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Parmetros para evaluar el rendimiento de bio-reactores

PROBLEMAS EN EL RENDIMIENTO DE BIOREACTORES Prdida de estabilidad: Regeneracin de la actividad del biocatalizador Mantenimiento de la productividad constante Problemas fsicos Abrasin Compresin-empaquetamiento

PROBLEMAS FSICOS Efectos de los fenmenos de compresin y empaquetamiento Prdida actividad biocatalizador (disposicin sobre o alrededor soporte) Taponamiento filtros (reactores agitados) Taponamiento espacios vacos y poros (lecho empaquetado) Grado de taponamiento: Presencia Cantidad Tamao Naturaleza fsica y qumica

Parmetros para evaluar el rendimiento de bio-reactores

PROBLEMAS EN EL RENDIMIENTO DE BIOREACTORES Prdida de estabilidad: Regeneracin de la actividad del biocatalizador Mantenimiento de la productividad constante Problemas fsicos Abrasin Compresin-empaquetamiento

PROBLEMAS FSICOS Mtodos para evitar/disminuir compresin y empaquetamiento Partculas de soporte grande No compresibles Pared lisa Esfricas Homogeneamente empaquetadas Fluidizando lecho empaquetado regularmente Disminucin relacin altura/dimetro Solucin: Clarificacin solucin del sustrato: filtracin o centrifugacin

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