PROCESO DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIÓN

CFGS Anatomía Patológica y Citología 38

UNIDAD DIDÁCTICA 9

FIJACIÓN DE MUESTRAS. 1.- INTRODUCCIÓN.

2.- LA FIJACIÓN. 3.- FINALIDAD DE LA FIJACIÓN. 4.- REGLAS GENERALES DE LA FIJACIÓN.

PROCESO DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIÓN

CFGS Anatomía Patológica y Citología 39

1.- INTRODUCCIÓN. Un corte es una capa extraordinariamente delgada y transparente de una pequeña porción de tejido corporal que, fijada y procesada adecuadamente, permite reconocer todos los elementos que lo componen, sin alterar su morfología y manteniendo las relaciones que normalmente tienen entre si en el organismo vivo. Como la observación se realiza por medio del microscopio, en el que un haz de luz debe atravesar la preparación para poder visualizarla, es necesario que el corte que se estudia sea muy delgado, entre 5 y 10 micras, para que tenga transparencia; los cortes, por tanto, son tan importantes en muchos aspectos que, todo aquel que vaya a trabajar sobre ello, debe conocer como se preparan. El primer paso es la selección macroscópica de las zonas del tejido que se quieran estudiar. Para ello, del área elegida, se cortan pequeños fragmentos que son rápidamente sumergidos en un liquido fijador (el más empleado es el formaldehido al 10%) que endurece el tejido al coagular las proteínas y también sirve para. inactivar algunos enzimas celulares, que de lo contrario, empezarían a digerir las células, causando la degeneración postmorten. Con el fin de permitir una rápida penetración del líquido fijador, el fragmento obtenido no debe tener un espesor mayor de 5 mm. Además de coagular las proteínas, los fijadores, retienen diversos carbohidratos e incluso materiales grasos que, sin ello escaparían. 2.- LA FIJACIÓN. La fijación esta destinada pues a inmovilizar las estructuras celulares y titulares en un estado lo más próximo posible al estado vivo. Este tiempo, simple en apariencia, ya que consiste en sumergir la pieza en el líquido fijador escogido, es en realidad uno de los más importantes, si no el más importante, de la técnica microscópica. De su buena ejecución dependen no solamente el éxito futuro de las coloraciones, sino incluso el valor de la interpretación histológica y citológica. Un buen fijador debe tener una penetración rápida y homogénea no producir retracción de los tejidos, revelar las organizaciones intracelulares y las estructuras ocultas, evitar la desaparición de las formaciones solubles, tales como el glucógeno, cuidar la actividad de ciertas encimas y permitir, en principio, encontrar los elementos visibles con los colorantes vitales; en una palabra, no crear artefactos y asegurar a los tejidos y a las células una conservación y una imagen fiel.

PROCESO DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIÓN

CFGS Anatomía Patológica y Citología 40

3.- FINALIDAD DE LA FIJACIÓN. La fijación tiene por objeto asegurar una coagulación todo lo homogénea posible de los geles proteicos constituyentes de las células y las estructuras extracelulares. Esta coagulación inmoviliza las estructuras existentes mejorando los índices de refracción y ocasiona un endurecimiento de los tejidos; efectos todos favorables a la microtomitación y a la conservación microscópica. 4.- REGLAS GENERALES DE LA FIJACIÓN. La fijación debe obedecer a un cierto número de reglas que es imprudente transgredir. Será en efecto, inútil esperar coloraciones satisfactorias, y por tanto informes histológicos precisos, si la fijación ha sido descuidada o mal dirigida.

1. La fijación debe ser lo más precoz posible.

2. La fijación debe ser lo más rápida posible.

3. El líquido fijador debe ser abundante (30 o 40 veces aproximadamente el volumen de la pieza).

4. La duración de la fijación dependerá del grosor de la pieza y especialmente de la naturaleza del fijador escogido.

5. El lavado de las piezas asegura la detención de la fijación.