“Instituto Superior del Profesorado Dr. Joaquín V. Gonzalez”

Departamento de QuímicaQuímica Orgánica I – 2014

TP N° 3 - CROMATOGRAFIA

Prof. Alejandra Salerno – JTP Prof. Claudia Elalle

Estudiantes: Tamara Meza

Tamara SanchezNoelia Torrez Prado

CROMATOGRAFIACROMATOGRAFIA

Técnica que permite la separación de los componentes de una mezcla por efectos contrapuestos:Retención: efecto producido sobre la mezcla por una fase estacionaria.Desplazamiento: efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase inmóvil.

OBJETIVOSOBJETIVOS

Comprender el fundamento y las aplicaciones de las diferentes técnicas cromatográficas.

Separar una mezcla de colorantes por cromatografía en columna.

Identificar cada uno de los colorantes por cromatografía analítica en placa delgada (TLC).

MATERIALESMATERIALES

REACTIVOSREACTIVOS

Metanol Dicloruro de metileno

Mezcla Silica gel Azul y rojo demetileno

Procedimiento – 1° Parte

1- Se preparan las cuatro cubas cromatográficas cada una con: Diclorometano, metanol,diclorometano: metanol 3:1 y diclorometano: metanol 30:1

2- Preparar los capilares para la siembra

3- Sembrar en 4 placas la mezcla a separar

4- Eluir una placa en cada cuba

5) Elegimos el diclorometano: metanol 3:1 ya que los dos componentes se corrieron y se separaron. En cambio las otras tres muestras solo un componente se logro separar.

Diclorometano:Metanol 30:1

Diclorometano MetanolDiclorometano:

Metanol 3:1

Procedimiento - 2° Parte“Separación de los componentes de la mezcla

por cromatografía en columna”

b) Preparar la columna y armar el equipo

c) Desarrollar la cromatografía

a) Se prepara 40 mlDe la fase móvil elegida (FM1)

Se coloca en el fondo de la columna una pequeña torunda.Luego la silica, otra torunda y diclorometano: metanol 3:1

Comienza el proceso de separación (cromatografía)

A medida que el diclorometano fluye se separan los componentes

Se coloca la mezcla a separar por encima de la silica

Es mas claro por estar mas diluido

Se recolecta el colorante

Comienza a separarse el último componente de la mezcla

Se aumenta la polaridad de la fase móvil para acelerar el proceso con una mezcla de diclorometano metanol: ácido acético 30:10:4

Se finalizo el proceso de cromatografía obteniendo los dos componentes por separados

Identificación de los colorantes separados con los testigos adecuados por TLC

Se utilizan placas cromatográficas y se siembran en él cada testigo correspondiente y los eluatos.Utilizando FM1 se desarrolla el cromatograma.Los testigos utilizados son: rojo de metilo y azul de metileno.Se observa que los componentes fueron separados correctamente ya que solo se arrastra un solo color.Se observa que los eluatos y los testigos recorren las misma distancia en el mismo intervalo de tiempo por lo cual se podría concluir que equivalen a la misma sustancia, considerando que no difieren en ninguna propiedad intensiva.