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MSc. Monica Gomes Lima
Doutoranda em Neurociências e Biologia Celular
Maio - 2011
Introdução
• NO: • Gás, alto poder de difusão e reatividade → neurônios, glia e vasos
sangüíneos;
• Diferentes regiões do SNC → envolvido em muitos aspectos do SNC;
• NOSn ou NOS-1: sintetiza conforme a demanda.
• NO no Sistema visual: • Retina (Wang et al., 2003);
• NGL (Núcleo Parabraqueal) (Cudeiro et al., 1994);
• V1 (fibras colinérgicas do prosencéfalo basal) (Bredt et al., 1990).
NADPH
L-arginine
Oxygen
L-citrulineNAPD+
N O
N O
N O
N O
N O
(1)
GMPc (2)
Bind the Redox-
Sensitive Site
(3)
Atividade NMDA independente de GMPC:
Altera o estado de condutância
pela liberação de glicina
• NO e o Sistema Visual: • Mecanismo de ação:
Introdução
dLGN V1Retina
↑GMPc
Introdução
• Objetivo:
Investigar a excitabilidade de célular corticais da área 17, mediada
por compostos que influenciam na atuação do NO.
Materiais e Métodos
• n = 19;
• Anestesia: halotano (0,1 - 5%) em óxido nitroso (70%) e
oxigênio (30%);
• Paralisados: galamina (40mg – dose inicial: 10mg kg-1h-1).
• Eletrofisiologia:
• Registros unitários simples: V1
• Pipetas preenchidas com uma combinação de:
• NaCl (3M),
• L-NOArg (10mM),
• L-Arg (10mM),
• NMDA (0,1M),
• AMPA (15mM),
• ACh (0,5M),
• DEA-NO(10mM),
• 8-bromo-cGMP(10mM)
• e Pontamine Sky Blue (PBS 2%).
Materiais e Métodos
• Eletrofisiologia:
Testado monocularmente;
Olho dilatado (2mm): atropina e fenilefrina;
Lente de contato;
Estímulo:
Direcionamento de barras;
Orientação ótima;
57cm do monitor.
http://newvaluestreams.com/wordpress/?p=1041
Modificado de:
http://quetenso.wordpress.com/page/2/
Animais mortos ao fim do experimento – marcação com Nissl para ver PBS.
Materiais e Métodos
Resultados e Discussão
25 em 29
Camadas II e III
Resultados e Discussão
14 em 25
Camada V
Resultados e DiscussãoCamada IV
62%, p < 0,001
L-NOArg
56%, p < 0,001
L-NOArg + L-Arg
Resultados e DiscussãoCamada VI
4 em 11
Resultados e Discussão3 em 10
Efeito não
específico
6 em 15
Resultados e Discussão
5 em 10 *
Resultados e Discussão
4 em 29
43%
2 em 5
Resultados e Discussão
Afetada
Atv. reduzida
Atv. aumentada
http://www.slideshare.net/monica_lima/cudeiro-et-al-1997