ARACNARIO DEL IBt UNAM“BEATRIZ BLANCO DE LOPEZ SILANES”

Extracción y resultados del estudio del veneno de distintas especies de tarántulas

Con pláticas sencillas y didácticas se enseña a los visitantes, niños y adolescentes en su mayoría, la biología básica de este grupo de animales, la estrategia para estudiar sus venenos y se hace énfasis en el papel ecológico fundamental que juegan estas especies en el ambiente en el que viven

PRIMER OBJETIVO es la divulgación

20 Ciencias Ambientales UAG, Cuernavaca Morelos6 de Diciembre del 2005Exposición de arácnidos y reptiles

15Centro de atención en Desarrollo Infantil (CEADE), Cuernavaca Morelos25 de Noviembre 2005Exposición de arácnidos y reptiles

20012a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 24-28 de Octubre 2005Exposición de arácnidos y reptiles

6UAEH Biotecnología 6to semestre23 de Septiembre 2005Plática y Exposición de arácnidos

15 Colegio London School8 de Julio 2005Plática y Exposición de arácnidos

37 Instituto Suizo Americano, Cuernavaca Morelos7 y 8 de Junio 2005Plática y Exposición de arácnidos

17Colegio Porter, Cuernavaca Morelos2 de Junio del 2005Plática y Exposición de arácnidos

15Tlalpán II del Sistema de Bachillerato del GDF25 de Mayo del 2005Plática y Exposición de arácnidos

20The Churchil School, DF. México20 de Abril del 2005Plática y Exposición de arácnidos

230Reunión Internacional de Expertos en Envenenamiento por Animales Ponzoñosos17-19 Marzo del 2005Exposición de arácnidos y reptiles

6011a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 29 de Octubre del 2004Plática y Exposición de arácnidos

10011a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 27 de Octubre del 2004Plática y Exposición de arácnidos

50Esc. Prim. Part. Inc. "Ocachicualli" Cuernavaca Morelos31 de Agosto del 2004Arácnidos

60 Colegio Waldorf de Morelos, Cuernavaca Morelos8 de Julio del 2004Plática y Exposición de arácnidos y reptiles

50Telesecundaria Niños Heroes Col.Yecapixteca, Yecapixtla Mor.25 de Junio del 2004Plática y Exposición de arácnidos y reptiles

40Departamento de Telesecundarias, Totolapán Mor.18 de Junio del 2004Arácnidos

150Escuela Secundaria Técnica No. 28 Jiutepec Mor.27 de Mayo del 2004Arácnidos

80Colegio Framboyán Cuernavaca, Morelos, 7 de Mayo de l 2004Arácnidos

300Esc. Sec. Jesus Conde Rodriguez Tepoztlán, Mor.29 de Abril del 2004Arácnidos

150Instituto de Biotecnología UNAM Cuernavaca, Morelos, 24 de Abril del 2004Alacranes y Bichos peligrosos en Morelos

100Framboyán Cuernavaca, Morelos, 27 de Abril del 2004Arácnidos

200Hellen Keller Cuernavaca, Morelos, 26 de Marzo del 2004Taller de "Animales ponzoñosos"

30Montessori Nautilus Cuernavaca, Morelos, 12 de Febrero del 2004Platica de arácnidos

15Konecalli Cuernavaca, Morelos, 29 de Enero del 2004Plática y Exposición de arácnidos y reptiles

25Colegio Porter Cuernavaca, Morelos, 23 de Enero del 2004Plática y Exposición de arácnidos y reptiles

No DE PERSONASLUGARFECHATIPO DE PLATICA

10Colegio Suizo Alemán, Cuernavaca Morelos30 de Octubre del 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

15013a Semana Nacional de Ciencia y Tecnología. SEP-CONACYT 23-27 de Octubre del 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

100Colegio Hellen Keller, Cuernavaca Morelos18 de Septiembre 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

12Instituto Nuevo Siglo, Cuernavaca Morelos30 de Junio 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

20Escuela Juan Kepler Jiutepec, Morelos7 de Abril 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

60Expociencia y Tecnología, Emiliano Zapata,, Morelos1 de Abril 20006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

50International G.S. of Mexico, Cuernavaca, Morelos26 de Marzo 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

80 Colegio de Educación Integral, D.F., Cuernavaca Morelos24 de Marzo 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

200 Instituto Highland, Cuernavaca Morelos15 de Marzo 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

18 Universidad de las Americas Puebla, Puebla9 Marzo del 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

8 Montesori de Tepoztlán, Cuernavaca Morelos25 de Enero del 2006Plática y Exposición de arácnidos y serpientes

TOTAL= 2,693 PERSONAS

Dr. Juan Ramón de la Fuente 9 Marzo del 2005Rick West 14Marzo del 2005Dra. Anita Hoffmann 27 Abril del 2006

Personas importantes

No de pláticas 2004-2006= 36

SEGUNDO OBJETIVO

Producción de veneno para su estudio bioquímico, inmunológico y fisiológico Producción de veneno para su estudio bioquímico, inmunológico y fisiológico

EXTRACCION DE VENENO

Propiedades del veneno de Brachypelma vagans1.- Líquido transparente, se vuelve turbio con el almacenamiento1.- Líquido transparente, se vuelve turbio con el almacenamiento

2.- pH = 5.5 a 5.72.- pH = 5.5 a 5.7

3.- Componentes sólidos = 16 %; (agua) = 84 %3.- Componentes sólidos = 16 %; (agua) = 84 %

4.- Tóxico: insectos, ratones y reptiles4.- Tóxico: insectos, ratones y reptiles

5.- Se obtienen de 6 a 10 µl / tarántula5.- Se obtienen de 6 a 10 µl / tarántula

6.- No presenta proteasas ni fosfolipasa6.- No presenta proteasas ni fosfolipasa

Filtración en gel de una columna de Sephadex G-50 (1.6 x162 cm) Filtración en gel de una columna de Sephadex G-50 (1.6 x162 cm) Se aplicarón 30.6 mg del veneno de Se aplicarón 30.6 mg del veneno de B. vagansB. vagans, se utilizó 20 mM acetato deamonio , se utilizó 20 mM acetato deamonio

pH 4.7. El Flujo fué de 40 ml/min. Las fracciones estan indicadas con barras pH 4.7. El Flujo fué de 40 ml/min. Las fracciones estan indicadas con barras horizontales.horizontales.

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

0 50 100 150 200 250 300 350 400

Ab

sorb

ance

or

mM

HO

mL

B.D.RNAse NaCl

I II III IV VIV

A260nm

A280nm

mMHO

66.4

26.6

42.7

36.5

20.0

14.3

97.2

116

55.6

M I II III IV V VI VC

SDS-PAGE de cada una de las fracciones obtenidas de la filtración en gel..M son los marcadores de peso molecular; las fracciones están indicadas con números

romanos; VC es el veneno completo de Brachypelma vagans.

VENENO

Brachypelma vagansBrachypelma vagans

ReinoReino Animalia Animalia PhylumPhylum Arthropoda Arthropoda Subphylum ChelicerataSubphylum Chelicerata ClaseClase Arachnida Arachnida OrdenOrden AraneaeAraneae SubordenSuborden Opisthothelae Opisthothelae InfraordenInfraorden Megalomorphae Megalomorphae

FamiliaFamilia Theraphosidae Theraphosidae SubfamiliaSubfamilia Theraphosinae Theraphosinae Género Género BrachypelmaBrachypelma EspecieEspecie B. vagansB. vagans

C H 2 O H

C H 2 O H

C O O -

C O O -

N H C O C H 3

N H C O C H 3

1

3

1 4

1

3

N - a c e t i l g l u c o s a m i n a

Á c i d o D - g l u c u r ó n i c o

D I S A C A R I D O R E P E T I D O

1

HIALURONIDASA (Meyer, 1940)HIALURONIDASA (Meyer, 1940)

Hidrólisis de ácido hialurónicoHidrólisis de ácido hialurónicoRompe enlaces glucosídicos ß- 1-4Rompe enlaces glucosídicos ß- 1-4

Endo-N-acetil-D-hexosaminidasa (EC. No 3.2.1.35)Endo-N-acetil-D-hexosaminidasa (EC. No 3.2.1.35)

““Factor de dispersión” (Duran Reynals, 1931)Factor de dispersión” (Duran Reynals, 1931)

células epiteliales

lámina basal

macrófago

fibroblasto

glucosaminoglucanos,proteoglicanos y glicoproteínas

fibras decolágeno

capilar

fibras elásticas

células cebadas

50 µm

SDS-PAGESDS-PAGE de actividad de hialuronidasa del de actividad de hialuronidasa del veneno completo de veneno completo de Brachypelma vagansBrachypelma vagans. .

Cantidades decrecientes de veneno (µg/pozo). Cantidades decrecientes de veneno (µg/pozo). Gel al 10 % en condiciones no reductorasGel al 10 % en condiciones no reductoras

22 11 0 .5

0.5

0.25

0.25

0.12

50.

125

0.06

20.

062

0.03

10.

031

0.01

60.

016

MM

2525

47.547.5

32.532.5

16.516.5

8383175175

6.56.5

2 , 3 2 22 , 0 2 7

5 6 4

4 , 3 6 16 , 5 5 79 , 4 1 6

2 3 , 1 3 0

s

Xho

1-H

indI

II

Eco

Rl

Pla

mid

o s/

dige

rir

Modelo de Plegamiento de la Hialuronidasa de B. vagans (basado en 3D de Hialuronidasa de A. Mellifera;Structure, Vol. 8, 1025–1035, 2000)

•Incrementan la permeabilidad de la membrana de los tejidos

Las hialuronidasas han sido empleadas terapéuticamente por muchos años

OrtopediaOftalmologíaMedicina internaOncología DermatologíaGinecología

Grammostola rosea

min0 10 20 30 40 50

Norm.

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

1800

ABS

OR

BAN

CIA

230

nm

TIEMPO (min)

YCQ

KW

MW

TCD

SKR

KC

CED

MVC

QLW

C

ECG

KFM

WK

CK

NSN

DC

CK

DLV

CSS

GC

LEFW

WK

CN

DD

KC

C

MW

369

7

MW

399

7

MW

409

6

Membrana celularGlucolípido

• Proteínas de membrana que tienen permeabilidad selectiva Proteínas de membrana que tienen permeabilidad selectiva por ciertos iones. por ciertos iones.

• Son multiméricas con varios dominios trans-membranalesSon multiméricas con varios dominios trans-membranales

• Estan compuestos por:Estan compuestos por:

– PoroPoro– Compuerta Compuerta – Filtro de selectividadFiltro de selectividad

CLASIFICACIÓN DE LOS CANALES.

 De potasio.

Dependientes de voltajeDependientes de voltajeDependientes de calcioDe rectificación internaOperados por ligandoSensibles al ATP

 De sodio

Dependientes de voltajeEpiteliales (ENaC)

 Catiónicos inespecíficos

Operados por ligandoDe rectificación interna (canales h y f)

 De calcio

Dependientes de voltaje (L, T, N, P, Q y R)Operados por ligando (receptores para el ATP)Sensibles al estiramiento

 De cloruro

Dependientes de voltaje (ClC-1)Operados por ligandos (receptores para GABA ó glicina)Controlado por AMPc (CFTR)

CANAL DE POTASIO HERGCANAL DE POTASIO HERG(H(Human uman EEter-a-go go-ter-a-go go-RRelated elated GGenen))

REPRESENTACION ESQUEMATICA DE UN POTENCIAL DE ACCION CARDIACOREPRESENTACION ESQUEMATICA DE UN POTENCIAL DE ACCION CARDIACO

Mutación del gen HERG (LQT2) en el cromosoma 7q35-36Mutación del gen HERG (LQT2) en el cromosoma 7q35-36

ARRITMIASARRITMIAS

Son alteraciones del ritmo o de la conducción del impulso cardíaco.

Taquicardia ventricularTaquicardia ventricular

Síndrome de QT Largo (SQTL) es ocasionado por una disfunción de los canales iónicos presentes a nivel de la membrana celular

“torsade de pointes” (torcedura de las puntas)

Es proporcionar material biológico, respaldado con datos de colecta, a los estudiosos de la taxonomía, la biología y la distribución de los arácnidos.

TERCER OBJETIVO

AGRADECIMIENTOS

Instituto Bioclón y Laboratorio Silanes

Dr. George Vanderbilt Odell Dr. Alejandro Alagón CanoDra. Rosana Sánchez lópezM. En C. Alejandro Olvera Rodríguez