Debajo de las sustancias extracelulares, como son las cápsulas y cubiertas

mucilaginosas, y en la periferia de una delicada membrana que está en

inmediato contacto con el citoplasma, se encuentra la Pared Celular, que esta

formada a base de aminoácidos, azucares y grasas y ellas están entrelazadas

formando un polímero complejo. La pared celular brinda una estructura rígida

que da forma a la célula

y estas pueden destruirse

o romperse en condiciones

especiales. Entre los

constituyentes de la pared

Celular de las bacterias

Gram (+) y Gram negativas

Existen importantes

diferencias.

PARED CELULAR:

BACTERIA GRAM POSITIVA

Tiene una capa gruesa de Peptidoglicano (mureina) y dos clases de ácidos teicoicos: Ácido Lipoteicoico que está en la superficie, empotrado en la capa de peptidoglicano y unido a la membrana citoplásmica. Y Ácido teicoico de la Pared que está en la superficie y se une sólo a la capa de peptidoglicano.

El ácido

Teicoico es el

responsable

del

determinante

antigénico del

organismo.

BACTERIA GRAM NEGATIVA

Tiene una capa delgada de Peptidoglicano (mureina) unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido. En el lipopolisacárido, la porción de lípido está embebida en el fosfolípido y el antígeno O polisacárido está en la superficie. El lípido se llama Lípido A y es tóxico, pero el lipopolisacárido entero se llama Endotoxina. La pared de la célula tiene poros llamado Porines para el transporte de substancias de peso molecular bajo.

Entre la membrana

citoplásmica y la pared

celular hay un espacio

periplásmico con enzimas

hidrolíticas, enzimas

inactivadoras de

antibióticos y proteínas

de transporte.

MEMBRANA CITOPLÁSMICA (CITOPLASMÁTICA O PROTOPLASMÁTICA)

Inmediatamente debajo de la Pared

Celular, existe una membrana fina,

O envoltura, que se denomina

Membrana citoplásmica y está

Formada por una bicapa de

fosfolípido integral y proteínas

periféricas empotradas.

Se trata de una membrana semipermeable, selectiva, que controla el paso de

Los elementos nutritivos dentro de la célula y la salida de los productos de

desecho. Tiene enzimas respiratorias y durante la división celular el cromosoma

Se une a la membrana de la célula en el sitio llamado Mesosoma.

CITOPLASMA

El material celular contenido dentro de Ia membrana citoplásmica puede dividirse en Tres Partes, Región Citoplásmica, de apariencia granular, la cual es rica en RNA, Región Nuclear o Cromatínica, que es rica en DNA, y la parte líquida que mantiene disueltos los elementos nutritivos.

El RNA, combinado con

proteínas, forma partículas

o corpúsculos

macromoleculares, de

unos 200A de diámetro,

que forman una masa

densa y compacta en todo

el citoplasma. Estas

Partículas de RNA-proteína

se denominan Ribosomas.

CLASIFICACIÓN BACTERIANA

Dentro de las Eubacterias existen tres grupos de bacterias que pueden ser

diferenciados en relación a la Estructura de la Pared Celular. La forma más

sencilla de iniciar una identificación del microorganismo que se desea estudiar

es realizar una coloración o Tinción de Gram. La tinción de Gram es una Tinción

Diferencial porque no todas las células se tiñen de la misma manera y permite

discriminar entre dos grandes grupos de Eubacterias, las Eubacterias Gram

Positivas y Gram Negativas.

Staphylococcus aureus Escherichia coli

CLASIFICACIÓN SEGÚN TINCIÓN DE LA PARED CELULAR

Tinción de Gram

– Cristal violeta. Tinción Gram positivos.– Lugol.

– Alcohol-acetona.( Decoloración)

– Safranina. Tinción Gram negativos.

Resultado:

– Bacterias Gram positivas – Bacterias Gram negativas.

CLASIFICACIÓN SEGÚN AGRUPACIÓN

• Agrupación en cadena: – Ej Streptocococcus

• Agrupación en racimos:– Ej Staphylococcus

• Agrupación en empalizada:– Ej Difteroides

CLASIFICACIÓN SEGÚN FORMA Y TINCIÓN

I.- COCOS GRAM POSITIVOS

– Género: Staphylococcus• Staphylococcus aureus.• Staphylococcus coagulasa negativa.

– Género: Streptococcus• Streptococcus grupo A, B, C, G, D,• Enterococcus• Streptococcus pneumoniae

II.-COCOS GRAM NEGATIVOS

– Género: Neisserias• Neisseria meningitidis• Neisseria gonorrhoeae

– Género: Moraxella

III.-BACILOS GRAM POSITIVOS

– Género: Listeria (L. monocytogenes)– Género: Corynebacterium (C. diphteriae)– Género : Bacillus (B. anthrasis)

IV.-BACILOS GRAM NEGATIVOS (BGN)

Enterobacterias

Género: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Yersinia Proteus

Género: Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas.

Bacilos no fermentadores

– Géneros: Pseudomonas, Acinetobacter, etc.

BGN nutricionalmente exigentes:

• Género Haemophilus (H. influenzae)• Género Bordetella (B. pertussis)• Género Brucella ( B. melitensis)• Género Legionella (L. neumophila)• Género Bartonella (B. henselae)

V.-BACTERIAS FUNCIONALMENTE DEFICITARIAS

Género Chlamydea – C. trachomatis– C .psittaci– C. pneumoniae

Género Mycoplasma– M. pneumoniae– M. urogenitales

• M. hominis.• Ureaplasma urealitycum.

Género Rickettsia (R.ricketsii)

VI.-ESPIROQUETAS

Género Treponema• T. pallidum

Género Borrelia• B. bugdogferi

Género Leptospira• L. interrogans

VII.-ACTINOMICETALES

-Bacterias forman ramificaciones.-Mayoría son Gram positivas.-Algunas son ácido-alcohol

resistentes.

• Género Mycobacterium• Género Actinomyces• Género Nocardia

VIII.-BACTERIAS ANAEROBIAS

-Crecen en ausencia de oxígeno.

No esporulados

– Gram positivos

• Cocaceas : Peptostreptococcus• Bacilos: Propinobacterium- Actinomyces- Bifidobacterium

Eubacterium- Mobiluncus

– Gram negativos

• Cocaceas: Veillonella• Bacilos : Bacteroides: grupo fragilis B. Fragilis grupo pigmentado Porfiromonas Prevotella Fusobacterium : F. Necrophorum F. Mortipherum F. nucleatum

Esporulados: Clostridium: perfringens – tetani- botulinum - difficile

Los microorganismos Gram positivos, como el Staphylococcus aureus,

adquieren un color violeta después de la coloración de Gram debido a

que contienen una pared celular estructuralmente muy diferente a la de

los microorganismos Gram negativos, como la Escherichia coli, que

adquieren un color rosado. El tercer grupo de Eubacterias es el de

los Bacilos Acido-Alcohol Resistentes (BAAR) que pueden ser

diferenciados utilizando la coloración de Ziehl-Neelsen. La diferencia

en la coloración no se debe a reacciones químicas con ciertos

componentes de la pared sino a la estructura física de la misma.

Las Eubacterias Gram positivas son células que contienen una membrana

citoplasmática con fosfolípidos y proteínas. Por fuera de la membrana

citoplasmática se encuentra la Pared Celular que está compuesta por una

ancha capa de Peptidoglicano. Este Peptidoglicano es una macromolécula

gigante formada por cadenas de un dímero compuesto por:

N-acetilglucosamina y N-acetilmurámico. A su vez, estas cadenas se

encuentran unidas entre sí mediante Péptidos. Estos puentes peptídicos son

característicos de las distintas bacterias y presentan mayor rigidez cuanto

más completo sea el entrecruzamiento. El Peptidoglicano es una

Malla Porosa que otorga forma y rigidez a la célula, y evita que la célula

estalle en medios hipotónicos. Al ser porosa permite el paso de nutrientes

desde el exterior y el movimiento de enzimas catalíticas y productos de

secreción hacia el exterior de la célula.

La pared celular Gram positiva también contienen Ácidos Teicoicos y

Ácidos Lipoteicoicos. Los ácidos teicoicos son cadenas de ribitol o

glicerol unidas por fosfodiésteres, y están unidos covalentemente al

peptidoglicano por medio de grupos fosfodiéster en el oxihidrilo del

C6 del N-acetilmurámico. Los ácidos lipoteicoicos son polímeros de

glicerofosfato se encuentran anclados en la membrana citoplasmática

y no están unidos al peptidoglicano. La función de estos compuestos

sería estructural, pero existen evidencias que indican que también

participarían en la regulación de las enzimas hidrolíticas que renuevan

la pared celular (autolisisnas).

Esquema de las Envolturas de una Eubacteria Gram Positiva

Bacterias Gram (+)

PEPTIDOGLICANO

Esquema de la estructura del peptidoglicano del Staphylococcus aureus

Síntesis del

Peptidoglicano

de una Eubacteria

Tinción GRAM: Bacterias

Gram-Positivas

Las Eubacterias Gram negativas son células rodeadas por una membrana

citoplasmática formada por una bicapa fosfolipídica y proteínas. Por encima

de esta membrana se encuentra una fina capa de peptidoglicano que se

halla unida covalentemente a unas Lipoproteínas de Anclaje que fijan la

Membrana Externa por medio de porciones lipofílicas. Entre la membrana

citoplasmática y la membrana externa queda delimitado el Espacio

Periplásmico. Este espacio es ocupado por el Periplasma que es una

matriz isotónica respecto al citoplasma, isotonicidad que es mantenida

mediante los oligosacáridos derivados de membrana (MDO), y en la

que se hallan componentes catalíticos de suma importancia para la

viabilidad celular.

La membrana externa tiene una estructura de bicapa asimétrica en donde

la cara externa esta compuesta por el Lipopolisacarido (LPS) y la cara

interna por fosfolípidos.

Además, esta membrana es rica en proteínas, algunas de las cuales se

denominan Porinas. La membrana externa funciona como una barrera

de permeabilidad para ciertas sustancias como antimicrobianos y enlentece

el pasaje de otros que son inactivados en el periplasma. El LPS está

formado por tres regiones: el polisacárido O (Antígeno O), el polisacárido

del centro (KDO) y el lípido A (Endotoxina). La presencia del LPS en la

membrana externa le confiere a la célula una efectiva protección contra

enzimas digestivas y detergentes como las sales biliares, y dota a la

superficie bacteriana con una fuerte hidrofilicidad que le permite a la célula

evadir la fagocitosis, tener cierta resistencia al complemento, evitar la

respuesta inmune específica por alteración de la superficie antigénica y

adherirse a ciertas células del hospedador. Las porinas son poros o

canales proteicos no específicos que pueden ser atravesados por

pequeñas moléculas hidrofílicas. En la membrana externa se encuentran

otras proteínas que funcionan como canales de difusión específicos y

facilitan el paso de di, tri y oligosacáridos.

Esquema de las Envolturas de una Eubacteria Gram Negativa

Bacterias Gram (-)

Esquema de la estructura del peptidoglicano de la Escherichia coli

PEPTIDOGLICANO

TINCIÓN GRAM: BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS

Cocos Gram - Negativos

Cocobacilos: forma usual de Acinetobacter sp, que puede ser Gram (+) o Gram (-),y, a menudo, Gram variable

Cocobacilos

TINCIÓN DE ESPORAS

TINCIÓN DIFERENCIA:

Tinción de Ziehl-Neelsen (ácido-alcohol resistencia)

Es un tipo especial de tinción que permite la identificación de microorganismos de los grupos Mycobacterium y Nocardia de

gran relevancia clínica

TINCIÓN DE CÁPSULAS

Se trata de una tinción negativa usando tinta china que permite determinar la presencia de cápsulas polisacarídicas

TINCIÓN DE FLAGELOS

Permite teñir flagelos usando un mordiente para incrementar su grosor y hacerlos visibles al microscopio óptico.