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III. MATERIALES Y METODOS
3.1. Ubicación
3.1.1. Ubicación política
El trabajo se desarrolló en el laboratorio de Microbiología General, de la
Universidad Nacional Agraria de la Selva, políticamente ubicado en la ciudad de
Tingo María, Distrito de Rupa Rupa, Provincia de Leoncio Prado, Región
Huánuco.
III.2. Materiales
- 160 lombrices (“lombriccus terrestre”).
- fosfato de potasio monobásico
- 4 kg suelos
- 4 recipientes
- cámara fotográfica.
III.3. Unidades Experimentales
Lombriz de tierra: Las lombrices de tierra necesitan vivir en suelo húmedo
que contenga materia orgánica. Suelen vivir en las capas superiores, pero
en invierno se entierran más para escapar de las heladas. Cuando el clima
es muy caluroso, hacen lo mismo para evitar la deshidratación. Las
lombrices de tierra rehúyen la luz del día, pero con frecuencia salen a la
superficie durante la noche para alimentarse y expulsar sus detritus.
Durante el día sólo salen a la superficie en circunstancias excepcionales,
como cuando se inundan sus galerías en caso de lluvias torrenciales.
3.2. Variable Dependiente
Dosis Aplicada.
3.3. Variable Independiente
fosfato de potasio monobásico
3.4. Diseño Experimental
El diseño utilizado en la investigación es de tipo experimental en el que la
variable independiente es el fosfato de potasio monobásico y la variable
dependiente es la concentración de dosis aplicada para cada tratamiento.
Así mismo la unidad Experimental viene hacer las lombrices de tierra
(“Lombriccus Terrestre”).
3.5. Metodología
- Según la metodología explicada en clase se procedió a la captura de la
especie a utilizar para el proceso de intoxicación. en nuestro caso se
recolectó dichos microorganismos (“lombriccus terrestre”). En un
recipiente para luego trasladarlos al laboratorio.
Lombriz de tierra Concentración dosis Fosfato de potasio. monobásico
- Definimos el agente toxico (fosfato de potasio monobásico) a utilizar,
partimos de su DL 50 4.664 mg / kg de suelo posteriormente diluimos
en 200ml de agua donde obtuvimos la primera concentración 23.32
mg /l y posteriormente duplicamos la concentración para cada
tratamiento.
- Una vez realizado esto se separaron por tratamientos. a cada tratamiento
se agregaron 40 lombrices de un tamaño de 30 cm. Una vez colocada las
lombrices en recipientes, se procedió con la aplicación de la dosis. para
cada tratamiento respectivamente.
C1
C2
C3
C4
23.2 mg/L
46.4 mg/L
92.8 mg/L
185.6 mg/L
- Se esperó por un tiempo determinado de 24 horas para observar los
efectos tóxicos sobre estos organismos y se apuntaron los datos en el
cuadro siguiente.
C1 C2 C3 C4
T1 (24h)
T2 (48)
- Finalmente Se realizó el conteo de las lombrices muertas de cada
tratamiento con sus respectivas dosis aplicadas y así poder concluir cual es
la dosis letal y la dosis letal media.