Microscopia

Prof(a): Nyara Marques

MICROSCOPIA

Ciência que estuda os métodos e as aplicações em que se usa o Microscópio para observação de objectos, ou pormenores de objectos, com dimensões inferiores ao limite de resolução do olho humano (0,1 mm).

Classificação dos Microscópios em função do Classificação dos Microscópios em função do número de sistemas de lentes: número de sistemas de lentes:

Microscópio simples ou Lupa – apenas possui uma lente ou um sistema de lentes centradas;

Microscópio composto – possui dois sistemas de lentes centradas, ocular e objectiva, para produzir uma imagem ampliada

Classificação dos Microscópios compostosem função do princípio de iluminação que utiliza

Fotónico – em que o responsável pela transmissão de imagem é um feixe de fotons (luz visível, ultravioleta ou infra-vermelho).

Electrónico – emprega um feixe de electrons para produzir imagens ampliadas.

A História do Microscópio

Robert Hooke, estudioso inglês, foi o primeiro (em 1665) a observar células. Para tal valeu-se de um rudimentar microscópio, idealizado anos antes por um outro estudioso, Anthony Van Leeuwenhoeck.

Hooke observou cortes finos de cortiça, que se apresentavam ao microscópio com um aspecto similar a pequenos favos de mel empilhados. A cada um destes favos Hooke atribuiu a designação de cellulae (células).

A história do microscópio óptico

começa na antiguidade clássica,

com a lente de aumento simples, e

apresenta um “renascimento” no

séc. XVII.

Cerca de dez anos mais tarde o próprio Leeuwenhoeck observou pequenos seres vivos, que designou por “protozoários”, aos quais mais tarde foi dada a designação de bactérias.

Assim, à medida que se dava a evolução do microscópio óptico, também o conhecimento da constituição dos diferentes organismos ia evoluindo.

A ciência atravessava uma fase de grande desenvolvimento, que viria a culminar no séc. XIX.

Durante todo este período a preocupação dos homens da ciência centrava-se não só no aperfeiçoamento dos sistemas ópticos, mas também na evolução das técnicas inerentes à preparação do material para observação.

Em meados do nosso século, o aparecimento do microscópio electrónico e, mais recentemente, do microscópio confocal laser, associados a sistemas computadorizados de análise de imagem, contribuíram para o avanço da biologia celular e molecular, continuando assim o conhecimento iniciado por Hooke.

Adaptado de Gonçalves et al, 2002

MOC – Microscópio Óptico Composto

MET – Microscópio Electrónico de Transmissão

MOC

Microscópio Óptico Composto

Microscópio Óptico

O Microscópio Óptico e os seus constituintes:

Parte Mecânica;

Parte Óptica.

Microscópio Óptico

Parte MecânicaPé ou Base

Braço ou coluna

Platina

Tubo ou canhão

Revólver ou Porta-objectivas

Parafuso Macrométrico

Parafuso Micrométrico

Microscópio ÓpticoParte Óptica

Sistema de iluminação:Sistema de iluminação:

●Espelho ou lâmpada

●Condensador

●Diafragma

Sistema de ampliaçãoSistema de ampliação:

●Ocular

●Objectivas

●Objectivas de imersão

Oculares

Ampliam a imagem fornecida pelo sistema

de objectivas.

Canhão ou tubo

Serve de suporte ao

sistema ocular

Braço

Serve de suporte à

platina e ao revólver.

Revólver

Serve de suporte às objectivas e permite

a sua mudança.

Objectivas

Amplia a imagem do objecto que está a ser observado.

Platina

Serve de suporte à preparação a observar. Tem uma abertura na

pane central (janela da platina).

Condensador

Distribui regularmente no campo da preparação a

luz que atravessa o diafragma

Diafragma

Regula a intensidade da luz captada pelo espelho e que incide na preparação.

Fonte de Luz

Parafusos Macrométrico e Micrométrico

Permite movimentos (de maior ou menor amplitude)

de aproximação ou afastamento entre a

preparação e as objectivas.

Base ou péConstitui a base de suporte de

todos os elementos do microscópio.

Cuidados Gerais na Utilização do MOC:

Na mesa apenas deverá permanecer o material

estritamente necessário;

Antes de pegar na caixa do microscópio, verifica

sempre que está fechada;

Transporta sempre o microscópio com ambas as

mãos, apoiando uma sobre a base e com a outra a

segurar o braço;

Coloca o microscópio na mesa afastado do bordo;

Não mexer nas objectivas e ocular com os dedos;

Cuidados Gerais na Utilização do MOC:

As lentes devem ser limpas com pincel ou papel

apropriado ou com um pano de limpeza macio;

A objectiva de imersão, quando utilizada, deve ser

limpa com um pano embebido em xilol;

Evita molhar o microscópio;

Antes de arrumar, verifica que a objectiva de

menor ampliação está no prolongamento do tubo.

Microscópio Óptico

Microscópio ÓpticoManuseamento do MOC:

Iluminação:

Antes de iniciar qualquer observação é necessário

proceder à iluminação do campo microscópico;

Verifica se a objectiva de menor poder ampliador

está em posição de observação;

Verifica se o diafragma está completamente

aberto e se o condensador está completamente

subido;

Microscópio ÓpticoManuseamento do MOC:

Iluminação:

Se o microscópio tiver uma fonte de iluminação

própria liga-a. (se não utiliza o espelho – face

côncava para a luz artificial e face lisa para luz

natural. Orienta o espelho de modo a que o campo

do microscópico fique completamente iluminado.)

Ordem de utilização das objectivas:

A observação inicia-se com a objectiva de menor ampliação;

Vai-se aumentando gradualmente o poder de ampliação até à objectiva de maior ampliação;

Se for necessário utilizar a objectiva de 100 X, deverá colocar-se uma gota de óleo de imersão sobre a preparação.

Focagem:

Coloca a preparação a observar na platina e depois de a centrar, fixa-a com o auxílio das pinças;

Utiliza o parafuso macrométrico em movimentos lentos para deslocar o tubo ou a platina até que a objectiva fique muito próxima da preparação;

Observa pela ocular enquanto rodas o parafuso macrométrico lentamente até obteres uma imagem nítida;

Focagem:

Percorre lentamente a preparação em vários sentidos afim de encontrares a zona de maior interesse ;

Centra a zona de maior interesse;

Corrige a focagem com o auxílio do parafuso micrométrico, rodando-o em movimentos lentos.

Técnica de substituição de objectivas:

Para observar com ampliações maiores basta rodar o revólver no sentido da objectiva da ampliação pretendida;

Corrige-se a focagem utilizando apenas o parafuso micrométrico.

O O Microscópio Microscópio

ÓpticoÓptico