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Título: Elución con gradiente
Estudiante: Tidiam K. Santamaría
Profesor: Víctor López Profesor: Víctor López
Febrero, 2015Febrero, 2015
COLUMBUS UNIVERSITYCOLUMBUS UNIVERSITYFACULTAD DE CIENCIAS DE LA EDUCACIÓNFACULTAD DE CIENCIAS DE LA EDUCACIÓN
POSTGRADO EN DOCENCIA SUPERIORPOSTGRADO EN DOCENCIA SUPERIORMÓDULO: COMUNICACIÓN Y TECNOLOGÍAMÓDULO: COMUNICACIÓN Y TECNOLOGÍA
Elución en Gradiente
Ventajas de la Elución en Ventajas de la Elución en GradienteGradiente
Es una de las formas más efectivas para separar varios analitos que tienen tiempos relativos de retención similares.
Muestras que contienen interferencias que eluyen retrasadas.
Elución en Gradiente
Desventajas de la Elución en Gradiente Reequilibrado de la columna Línea base Solventes Combinaciones de FM no recomendables Incompatibilidad con detectores Más rutinas de análisis
Aplicaciones de la Elución en Aplicaciones de la Elución en GradienteGradiente
Analitos muy retenidosO
OOH OH
RR
R = OH, Me, COOH, CHO, CH2OH
Elución en Gradiente
Maximización de la detección
Rango de retención
0.5 < k < 20
Aplicaciones de la Elución en GradienteAplicaciones de la Elución en Gradiente
OR
OR
O
O
R = (1-9 Carbonos)
PASOS PARA EL PASOS PARA EL MÉTODO DE ELUCIÓN MÉTODO DE ELUCIÓN CON GRADIENTECON GRADIENTE
La separación inicial será optimizada por k*
Selección de condiciones iniciales
Columna
Composición de la fase móvil
Flujo
Temperatura
Ajuste de rango de gradiente
Ajuste de selectividad (α)
Condiciones de la columna
Protocolo de re-equilibración
Elución en Gradiente
Utiliza dos o más solventes de polaridad distinta cuya Utiliza dos o más solventes de polaridad distinta cuya relación cambia a lo largo de la elución relación cambia a lo largo de la elución cromatográfica.cromatográfica.
Elución en Gradiente
DESARROLLO DE LA SEPARACIÓN CON GRADIENTEDESARROLLO DE LA SEPARACIÓN CON GRADIENTE
Referencias…
1.Lloyd R. Snyder, Joseph J. Kirkland, Joseph L. Glajch. Practical HPLC Method Development. 2nd ed.1997. pp 350-399
2.Gary D. Christian. Química Analítica. 6º Edición. McGraw-Hill, México (2009). pp. 555-618
3.D.A. Skoog, J.J. Leary, “Análisis Instrumental”, McGraw-Hill, Madrid (1996)
Elución en Gradiente