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Thème :
République Algérienne Démocratique et Populaire
Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique
Département des sciences de la nature et de la vie
Faculté des Sciences Exactes et Sciences de la Nature
et de la vie
Université de Tébessa
Effets du cadmium Cd sur l’activité enzymatique
chez un poisson téléostéen Gambusia affinis.
Sous la direction: Mme. Rouachdia .R
Par :
DJELLAB Imed
2012-2013
Matériel et méthodes
Résultats
Conclusion
introduction
Les activités humaines
anthropisé tous les milieux environnementauxet
notamment
l’évaluation de la qualité des milieux aquatiques
La présence des xénobiotique dans le milieu pourrait avoir des retombées sur des organismes non visé.
Objectif
l’évaluation de l’effet d’un métal lourd (cadmium) sur les
biomarqeurs biochimiques (protéines et lipides) et sur l’activité
enzymatique hépatique (Malondialdéhyde) chez un poecilidae
vivipare : Gambusia affinis
vivipare de petite taille variant de 2 à 6 cm. Utilisé
Figure 1: Morphologie générale de Gambusia affinis, male et femelle
Tache de
gravidité
(Ovaire)
Nageoire anale
Gonopode
1- Matériel biologiqueSelon Grassé (1985), sa position systématique est la suivante :
Embranchement
Classe
Sous classe
Super ordre
Ordre
Famille
Genre
Espèce
Vertébrés
Poisson
Téléostome
Téléostéen
Cyprinodontiformes
Poecillidae
Gambusia
affinis (baird et Girard., 1954)
Gambusia affinis (Baird et Girard, 1984), est un poisson d'eau douce de couleur gris argentée.
poids atomique est de 112.41 g/mol
48 éléments
métal trace non essentiel. À l’état pur
il est malléable
inodore
de couleur métal blanc-argent, légèrement bleuté.
2- Le Cadmium
fréquemment retrouvé à de fortes concentrations dans
l’environnement aquatique associe
agricole
industrielle
Traitement durant 21 jours
Lot non traité
témoinLots traités par le Cd
5 µg/L
Lots traités par le cd
2,5µg/L
Prélèvement contenu de l’hépatopancréas
3j, 7j, 15j, 21jours
Biométrie: RHS
Dosage des protéines et les lipides
Dosage des biomarqueurs: MDA.
3-Protocole expérimental
Acclimatation: 1 semaines
évaluer
Représente un moyen simple et rapide de mesure des interactions des
individus avec leur environnement .
4- Le rapport Hépatosomatique (RHS)
RHS = poids du foie X 100/ poids du corps
5 -Extraction et dosage des métabolites
(Proteines & lipides)
L’épatopancréas
1ml de TCA
Broyage
5000 trs/min pdt 10mnSurnageant I
Culot I
Surnageant II
Culot II
Lipides
Goldchworthy et al, 1972
Proteines
bradford, 1976
6-Dosage du Malondialdéhyde (MDA)
H.pancréas
males adultes
Broyage a
basse T°
Tris HCL
Centrifugation 10000tr/ 10mn
500 µlSurnageant I
2,5 ml TCA
Chauffer 100°c (15min)
Refroidissement(Glace)
Centrifugation 10000tr/ 10mn
2 mlSurnageant II
1 ml TBA
Chauffer 100°c (15min)
Refroidissement(Glace)
Ajouté 1,5 mlbutanol
Centrifugation 10000tr/ 10mn
532nm
(Draper & Hadley, 1990)
Différents tests statistiques sont réalisés
Minitab (Weisberg., 1985),
test ‘’t’’ de Student l’analyse de la variance à 2critères
*
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
3.00
3.50
4.00
3 jours 7 jours 15 jours 21 jours
Ra
pp
ort
Hep
ato
som
ati
qu
e
*
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
3.00
3.50
4.00
3 jours 7 jours 15 jours 21 jours
Ra
pp
ort
Hep
ato
som
ati
qu
e
Temps (jours)
Temoin
5µg/l
2,5µg/l
Figure 2 : Variation du rapport Hépatosomatique chez les males du G.affinis traité par le
cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L). (NS : Différence non significative, * : Différence significative
p<0,05 entre les séries témoins et traité).
**
***
*
**
***
**
*
0.00
20.00
40.00
60.00
80.00
100.00
120.00
140.00
160.00
180.00
3 jours 7 jours 15 jours 21 jours
con
ten
u e
n p
rote
ines
µg
/hép
ato
pa
ncr
éa
s
Temps (jours)
Temoin
5µg/L
2,5µg/L
Figure 3 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le taux de protéines totales (µg/hépatopancréas)
.chez les males du G.affinis. (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05
entre les séries témoins et traité, ** : Différence hautement significative p<0,01 entre les séries
témoins et traité, *** : Différence très hautement significative p<0,001 entre les séries témoins et
traité).
*
*
*
*
*
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
3 jours 7 jours 15 jours 21 jours
con
ten
u e
n l
ipid
es µ
g/h
épa
top
an
créa
s
Temps (jours)
Temoin
5µg/L
2,5µg/L
Figure 4 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le contenu en lipides totaux (µg/hépatopancréas)
.chez les males du G.affinis traité. (NS : Différence non significative, * : Différence significative
p<0,05 entre les séries témoins et traité).
*
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
3 jours 7 jours 15 jours 21 jours
Ta
ux d
u M
DA
(mM
/mg
de
pro
tein
e
Temps (jours)
Temoin
5µg/l
2,5µg/l
Figure 5 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le taux du Malonedialdéhyde (mM/mg de protéine) .chez les
males du G.affinis. (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05 entre les séries témoins et
traité).
Le travail réalisé à évalué l’étude de l’impact d’une agression chimique induite par le
cadmium chez un poisson d’eau douce « Gambusia affinis ».
Les résultats obtenus après exposition des Gambusies à ce métal aux différents temps
testés (3,7, 15 et 21 jours) montrent que
Les deux doses du cd
n’entrainent aucun effet
significatif sur le rapport
hépatosomatique, à
l’exception de la
diminution observée après
3jours de traitement à la
faible dose.
une augmentation
progressive de la
concentration des
protéines de 3 à 7
jours.
De plus, l'étude de la
composition biochimique
(protéines et lipides)
révèle une baisse de la
teneur en lipides
hépatopancréatiques à 3et
à 7 jours avec une
augmentation
significative après
15jours.
Les deux doses du cd n’entrainent aucune modification significative sur le taux du
MDA, à l’exception de la diminution significative observée après 15joursde traitement à
la faible dose.
Ce travail mériterait d'être approfondi par des
nouvelles voies d'approche (enzymologie, embryologie,
génétique…) qui pourrait peut être élucidé d’autres
problèmes.
