Hieäu quaû thuùc ñaåy söï Taêng

tröôûng cuûa

Colostrum Basic Protein (CBP)

8F Wooyung Venture Bldg, 1330-13, Seocho_Dong, Seocho-Gu, Seoul, 8F Wooyung Venture Bldg, 1330-13, Seocho_Dong, Seocho-Gu, Seoul, KoreaKorea

Telephone: +82-2-587-0019 Fax: +82-2-587-0021Telephone: +82-2-587-0019 Fax: +82-2-587-0021

RexGene Biotech Co., Ltd.

Colostrum là gì?Colostrum là gì?

S a meï c ti t ra sau khi sinh n trong ữ đượ ế ởvoøng 3 ngaøy.

Chöùa caùc chaát raén nhieàu gaáp 2 laàn, chöùa Löôïng protein gaáp 5 laàn, nhöng chöùa haøm löôïng chaát beùo chæ baèng 2/3 söõa meï thoâng thöôøng.

Haøm chöùa nhieàu yeáu toá gia taêng söï mieãn dòch, yeáu toá kieåm soaùt sinh lyù/kieåm soaùt kinh nguyeät, yeáu toá hoaït hoùa söï phaân chia teá baøo ....

Chöùa yeáu toá taêng tröôûng nhö laø IGF-1, TFG- gaáp 10~500 laàn hôn söõa thoâng βthöôøng.

CBP laø gì ?CBP laø gì ?

CBP (Colostrum Basic Protein )CBP (Colostrum Basic Protein )

: Hieäu quaû cuûa söï taêng tröôûng khi : Hieäu quaû cuûa söï taêng tröôûng khi phaân laäp töø phaân laäp töø colostrum wheycolostrum whey

▶ Taêng hormone taêng tröôûng& IGF-1 trong

maùu

▶ Taêng troïng löôïng & söï taêng tröôûng

▶ Taêng söï phaùt trieån cuûa xöông & maät

ñoä xöông

▶ Taêng teá baøo xöông

▶ Taêng teá baøo xöông giuùp cho vieäc hình

thaønh xöông

Preparation of CBPPreparation of CBP

Colostrum

⇓ → Kem

S a g yữ ầ

⇓ → Casein

Whey protein toaøn phaàn

⇓ → -lactoalbumin,α

-lactoglobulin β

Söï sieâu loïc

⇓

Maøng 30kDa UF

⇓ → Taùch phaân ñoaïn > 30 KD

Maøng 1kDa UF

⇓ → Taùch phaân ñoaïn < 1 KD

Phaân ñoaïn 1kDa ~ 30kDa

⇓

Ñoâng khoâ

⇓

CBP

SAÉC KYÙCBP SDS-

Daûi 1 : ColostrumDaûi 2 : IGFDaûi 3 : 1-50kDaDaûi 4 : 1-30kDa (CBP)Daûi M : LMW Maãu : chaám 30ug

1 2 3 4 M

97.066.0

14.4

45.0

30.0

20.1

CBP SDS-PAGE

haøm löôïng Protein (BCA) Colostrum : 724ug/mg Synercol : 709ug/mg 50kDa : 660ug/mg 30kDa : 660ug/mg

S sinh saûn t baøo ự ếxöông

◆ Doøng teá baøo : teá baøo xöông nhö MC3T3-E1 4 doøng teá baøo voâ tính (ATCC CRL-2593)

◆ Söï sinh saûn kieåm tra bôûi söï ñònh löôïngMTT (nuoâi caáy48 giôø)

◆ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05, ** p<0.01)

%so

vôùi

nh

oùm

ch

öùn

g

(ug/ml)100.0

105.0

110.0

115.0

120.0

125.0

1 10 100

***

**

▶ Doøng teá baøo: teá baøo xöông nhö MC3T3-E1 4 doøng teá baøo voâ

tính (ATCC CRL-2593)

▶ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05, **

p<0.01)

Hoaït tính cuûa ALP & phoùng thích NO

34.0

35.0

36.0

37.0

38.0

Con

. 1 10 100

100 0 0

30

60

90

120

150

180

Con

. 1 10 100

100 0

***

***

**

(ug/ml)

Hoaït

tín

h A

LP

(u

M/m

l) NO

(nM

/ml)

Thöû nghieäm treân ñoäng Thöû nghieäm treân ñoäng vaätvaät

1. Ñoäng vaät : Chuoät ñöïc Sparague-Dawley (3 tuaàn, troïng

löôïng 50 ~ 60g)

2. Nhoùm kieåm nghieäm (AIN93G diet – Casein)

★ Nhoùm ñoái chöùng : Casein 20%

★ Nhoùm 1 : Casein 15.00% + CBP 5.00%

★ Nhoùm 2 : Casein 19.50% + CBP 0.50%

★ Nhoùm 3 : Casein 19.95% + CBP 0.05%

3. Duy trì : Nhieät ñoä 23 ± 1oC, ñoä aåm 40 ~ 60 %, saùng/toái

12 giôø

4. Thôøi gianï thích nghi : thöùc aên vaø nöôùc thoâng thöôøng

trong 1 tuaàn

5. Chuaån bò cung caáp thöùc aên: trong 6 tuaàn (Thôøi gian

thöû nghieäm)

Söï thay ñoåi troïng löôïng Söï thay ñoåi troïng löôïng cô theåcô theå

260

290

320

350

380

Con

.

0.05

0.50

5.00

0

1 00

2 00

3 00

4 00

1 3 5 7 9

Control

0,05

0,5

5

Tro

ïng

löôïn

g cô

th

eå (

g)

Taên

g tr

oïn

g lö

ôïn

g cô

th

eå (

g) *

▶ Troïng löôïng taêng = troïng löôïng ngaøy cuoái – troïng löôïng ngaøy ñaàu

▶ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05)

0 2 4 6

Söï thay ñoåi ñoä daøi Söï thay ñoåi ñoä daøi xöôngxöông

5.0% CBP 0.5% CBP 0.05% CBP Nhoùm

chuaån

Hieäu quaû cuûa CBP leân troïng Hieäu quaû cuûa CBP leân troïng löôïng vaø ñoä daøi cuûa xöônglöôïng vaø ñoä daøi cuûa xöông

0.6

0.7

0.8

0.9

1.0

Tro

ïng

löôïn

g xö

ôn

g (g

)

Con

.

0.05

0.50

5.00

35.0

36.0

37.0

38.0

39.0

40.0

Con

.

0.05

0.50

5.00

Ñoä d

aøi

xöôn

g (m

m)

*

***

**

▶ Troïng löôïng xöông ñuøi (ñoä daøi) = (phaûi + traùi)/2

▶ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05, ** p<0.01)

Hieäu quaû cuûa CBP leân Osteocalcin trong huyeát thanh & ALP trong xöông

0.0

1.0

2.0

3.0

4.0

Bon

e A

LP (

u/l)

Con

.

0.05

0.50

5.00

3 0

6 0

9 0

1 2 0

1 5 0

1 8 0

Con

.

0.05

0.50

5.00

Ser

um O

steo

calc

in (

ng/m

l)

**

*

▶ Osteocalcin ELISA (BT-490, Biomedical Technologies Inc.)

▶ ALP trong xöông (Metra TM BAP kit, Quidel Co., USA)

▶ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05)

Hieäu qua ûcuûa CBP leân maät Hieäu qua ûcuûa CBP leân maät ñoä khoaùng chaát trong xöôngñoä khoaùng chaát trong xöông

0.100

0.105

0.110

0.115

0.120

0.125 *

Maät

ñoä k

hoaùn

g ch

aát

tron

g xö

ôn

g (g

/cm

3)

Nhoùm 0.05 0.50 5.00 (%)

chuaån

▶ Xöông ñuøi khoâ : loø saáy (75oC, 3 giôø)

▶ NORLAND XR SERIES X-RAY SOURCE 319A051, USA)

▶ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05)

Hieäu quaû cuûa CBP leân hoùc moân taêng tröôûng trong huyeát thanh

0.00

0.02

0.04

0.06

0.08H

où

c m

oân

taên

g tr

öôû

ng

(ñôn

vò/m

l)

Nhoùm 0.05 0.50 5.00 (%)

chuaån

*

▶ RIMA kit (Daiichi Radioisotope Lab. Co., Japan)

▶ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05)

Hieäu quaû cuûa CBP leân huyeát thanh IGF-1

800

1000

1200

1400

1600

Hu

yeát

than

h

IGF

-1 (

ng/

ml)

Nhoùm 0.05 0.50 5.00 (%)

chuaån

*

**

▶ OCTEIA Rat IGF-1 kit (IDS Co., USA)

▶ Khaùc bieät coù yù nghóa so vôùi nhoùm ñoái chöùng (* p<0.05 , ** p<0.01)

Keát luaän

1. CBP : Caùc Protein töø 1 kDa ~ 30 kDa phaân laäp töø Söõa non

2. Thöû nghieäm in vitro (trong phoøng thí nghieäm)

Söï nhaân leân cuûa teá baøo xöông

Taêng tieát ALP, NO töø teá baøo xöông

3. Thöû nghieäm in vivo (treân sinh vaät soáng)

Taêng maät ñoä cuûa GH & IGF-1 trong maùu

Taêng maät ñoä vaø söï phaùt trieån cuûa xöông

Taêng theå troïng vaø troïng löôïng xöông