REPORTE DE PRÁCTICA DE BIOQUIMICA II

NOMBRE DEL ALUMNO (A) _______________________________GRADO Y GPO_____CALIF______ INSTRUCCIONES: LLENAR CON TINTA NEGRA Y LETRA CLARA CADA UNO DE LOS ESPACIOS DE ACUERDO A LO QUE SE PIDE.NÚMERO Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA:

Práctica Nº 4: La membrana y transporte celular

OBJETIVO: Tener conocimientos acerca de los componentes de una membrana. Conocer los factores que puedan afectar y/o alterar la integridad de una membrana Explicar cómo se da la osmolaridad en los tejidos. Identificar cuándo la célula se encuentra hipotónica, isotónica e hipotónica

INTRODUCCIÓN:

La membrana celular está formada por una capa doble de fosfolípidos, proteínas y carbohidratos. Cada fosfolípido está compuesto por glicerol, ácidos grasos y fosfato, que en conjunto crean una barrera hidrofóbica entre los compartimientos acuosos de la célula. Las proteínas permiten el paso de moléculas hidrofílicas a través de la membrana, determinan las funciones específicas de ésta e incluyen bombas, canales, receptores, moléculas de adhesión, transductores de energía y enzimas. Las proteínas periféricas están asociadas con las superficies, mientras que las integrales están incrustadas en la membrana y pueden atravesar completamente la capa doble. La función de los carbohidratos adheridos a las proteínas (glucoproteínas) o a los fosfolípidos (glucolípidos) es la de adhesión y comunicación intercelular. El colesterol , que es un esteroide (lípido), determina la fluidez de la membrana.

Para que la célula funcione eficientemente, debe mantenerse en la misma un ambiente estable conocido como homeostasis . Para mantener este equilibrio existen mecanismos para el transporte selectivo de materiales hacia el interior o exterior de la célula. Las membranas de la célula son selectivamente permeables , permitiendo el paso de algunas sustancias o partículas (moléculas, átomos, o iones), e impidiendo el paso de otras. Esta selectividad se debe a la capa doble de fosfolípidos de la membrana. La manera en que las moléculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Las moléculas hidrofóbicas, o no polares, pasan con relativa libertad a través de la capa de lípidos, mientras que moléculas hidrofílicas, o polares, incluyendo el agua, y las moléculas de mayor tamaño, pasan a través de canales formados por proteínas transportadoras . La regulación del transporte de las moléculas, o la dirección en que se mueven depende de su gradiente de concentración (diferencia en concentración entre dos lugares).

Las moléculas se mueven constantemente debido a su energía cinética y se esparcen uniformemente en el espacio disponible. Este movimiento, llamado movimiento browniano , es la fuerza motriz de la difusión. Difusión se define como el movimiento natural de las partículas de un área de mayor concentración a un área de menor concentración hasta alcanzar un equilibrio dinámico , en el cual el movimiento neto de partículas es cero. La difusión no requiere gasto de energía por parte de la célula y por lo tanto es un movimiento pasivo . Cuando la célula transporta sustancias en contra de un gradiente de concentración (de un área de menor concentración a un área de mayor concentración) se requiere energía (ATP) y sucede movimiento activo .

FUNDAMENTO:

La membrana celular está formada por una capa doble de fosfolípidos, proteínas y carbohidratos. Cada fosfolípido está compuesto por glicerol, ácidos grasos y fosfato, que en conjunto crean una barrera hidrofóbica entre los compartimientos acuosos de la célula.Las membranas de la célula son selectivamente permeables , permitiendo el paso de algunas sustancias o partículas (moléculas, átomos, o iones), e impidiendo el paso de otras. Esta selectividad se debe a la capa doble de fosfolípidos de la membrana. La manera en que las moléculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Las moléculas hidrofóbicas, o no polares, pasan con relativa libertad a través de la capa de lípidos, mientras que moléculas hidrofílicas, o polares, incluyendo el agua, y las moléculas de mayor tamaño, pasan a través de canales formados por proteínas transportadoras .Cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la célula está en una solución hipotónica , y como consecuencia, el agua entra a la célula causando que se expanda Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se dice que la célula está en una solución hipertónica ; la célula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la célula está en una solución isotónica , donde el movimiento neto es cero.

EQUIPO, MATERIAL Y SUSTANCIAS:

EXPERIMENTO 1.- EFECTO DE LA TEMPERATURAMATERIAL Y SUSTANCIAS

Gradilla Agua destilada 1 vaso de 100 ml 1 remolacha 1 vaso de 250 ml hielo 6 tubos de 14 x 125 1 vaso de 500 ml 1 horadador 1 termómetro 1 regla 1 nevera 1 navaja o exacto 1 pinza para tubo de ensayo 1 aguja de disección 1 probeta de 25 ml 1 pipeta de 5 ml 1 Perilla 1 marcador de cera

1 envase 1 tripié 1 tela de asbesto 1 mechero Bunsen

EXPERIMENTO 2. EFECTO DE SOLVENTES

MATERIAL Y SUSTANCIAS 2 a 4 huevos de gallina Etanol al 1%, 25%, 50% 1 gradilla Acetona al 1%, 25%, 50% 6 tubos de 14 x 125 10 ml de aceite

1 remolacha

EXPERIMENTO3. DIFUSIÓNA. DIFUSIÓN DE MOLÉCULAS DE AGUA

MATERIAL Y SUSTANCIAS

2 vasos de precipitados de 100 o 250 ml 1 probeta de 50 ml

Agua fría

Agua a temperatura ambiente

Colorante vegetal

B. DIFUSIÓN A TRAVÉS DE UNA MEMBRANA SELECTIVAMENTE PERMEABLE (DIÁLISIS)

MATERIAL Y SUSTANCIAS

1 vaso de precipitados de 500 ml Reactivo de Benedict 1 bolsa de diálisis y cordón o banda de goma Solución de Yodo 1 gradilla 25 ml Solución de glucosa

al 30% Tubos de 13 x 100 25 ml Solución de almidón

al 1% 1 baño maría 1 matraz Erlenmeyer de 125 o 250 ml 1 probeta de 50 ml 1 pinzas para tubo de ensayo

PROCEDIMIENTO (HACER DIAGRAMA DE FLUJO):

OBSERVACIONES (HACER DIBUJOS Y EXPLICARLOS EN FORMA ORDENADA):

Experimento 2: Efectos de solventes

Experimento 3: Difusión. A. -"Difusión de moléculas de agua"

Experimento 3: B. "Difusión a través de una membrana selectivamente permeable (diálisis)"

6 tubos de ensaye de 14 x 125 rotulados de acuerdo a las especificaciones y con los cortes de la remolacha de 15 mm

bolsa de diálisis con la mitad de solución de glucosa y la mitad de solución de almidón.

Experimento 4: ÓSMOSIS: A) En células animales

RESULTADOS (HACER TABLA Y/O GRÁFICA CON SU INTERPRETACIÓN):(HOJA ANEXA)

CONCLUSIÓN:

Se concluye con esta práctica la importancia que tiene saber acerca de los componentes de una membrana así como todos aquellos factores que pueden alterar sus componentes, esto nos conlleva a conocer que la membrana es permeable y que no permite el paso de cualquier sustancia o partícula a la célula y la manera en que las moléculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Es vital por supuesto mencionar que hay otros puntos que se aprendieron y se lograron observar en esta práctica, como lo fue: el gradiente de concentración en donde cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la célula está en una solución hipotónica , y como consecuencia, el agua entra a la célula causando que se expanda. Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se dice que la célula está en una solución hipertónica ; la célula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la célula está en una solución isotónica , donde el movimiento neto es cero.CUESTIONARIO (HOJA ANEXA)

Laminillas en donde se pudieron observar los cambios de los eritrocitos de la sangre de vaca.

Como se observan los eritrocitos en las laminillas 1-4 en el microscopio.

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.ehowenespanol.com/efectos-temperatura-membranas-celulares-sobre_168388/

http://www.buenastareas.com/ensayos/Factores-Que-Afectan-a-La-Membrana/6897212.html

http://www.buenastareas.com/ensayos/Difusi%C3%B3n-a-Trav%C3%A9s-De-Una/27168908.html

http://facultad.bayamon.inter.edu/amlugo/biol2013/MEMBRANAS%20BIOL%C3%93GICAS.htm

http://dianapatcruzhdz.blogspot.mx/2010/11/practica-2-accion-de-la-amilasa-sobre.html

http://www.medvet.una.ac.cr/carrera/mva505_Practica2.pdf

Tampico, Tam., a ______ de ____________________ de _______

CUESTIONARIOS DE LA PRÁCTICA Nº 4.

EXPERIMENTO 1.- EFECTO DE LA TEMPERATURA

CUESTIONARIO1. ¿Qué tubo mostró más intensidad de color?

El tubo N°12. ¿Qué indica la intensidad del color?

Nos indica que a mayor daño que sufre la membrana, mayor es la cantidad de pigmento que escapa de la célula.

3. ¿Cómo afectan las temperaturas altas a las membranas celulares?Las colas de ácidos grasos de la bicapa fosfolípida pueden "disolverse" a altas temperaturas, lo que significa que se vuelven más fluidas, posibilitando un mayor movimiento. Esto modifica la permeabilidad de la célula, lo que puede permitir el ingreso de moléculas que no deberían ingresar y, por ello, dañar a la célula.

4. ¿Qué le pasa a las células en temperaturas bajas?Las colas de ácidos grasos presentes en los fosfolípidos se tornan más rígidas cuando se exponen a temperaturas frías. Esto afecta la fluidez, la permeabilidad y la capacidad de supervivencia de las células. Cuando las células pierden fluidez, quedan imposibilitadas de moverse y de crecer. El descenso de la permeabilidad implica que moléculas vitales no puedan ingresar a las células. Además, las temperaturas más frías pueden provocar una disminución o el freno de las reacciones celulares.

5. ¿Por qué se usa remolacha?

Dado que las células de la remolacha poseen almacenada en la vacuola central una gran cantidad de pigmento rojo llamado betacianina. Cuando ocurre un daño a la membrana este pigmento puede escapar de la célula. Por lo tanto ante la presencia de un tensor físico o químico el pigmento escapa de la célula. A mayor daño a la membrana, mayor cantidad de pigmento escapará de la célula.

EXPERIMENTO 2. EFECTO DE SOLVENTES

1. ¿En qué tubos se observaron reacciones?En todos los tubos se pudieron observar reacciones.2. Basado en lo que se observó en los tubos de ensayos (refiriéndose a los tubos 1 - 6 y A - F), ¿cómo afecta la acetona a la membrana?

La acetona es un disolvente orgánico que actúa rompiendo la estructura de la membrana ya que es más apolar debido al doble enlace, por lo que disolvería más los lípidos.

3. ¿Cómo afecta el etanol a la membrana?El etanol al igual que otros alcoholes puede actuar en las membranas biológicas fundamentalmente de 3 formas: l) alterando la fluidez de las membranas, lo que indirectamente afectaría el funcionamiento de las proteínas como enzimas y canales; 2) produciendo una deshidratación a nivel de las membranas; 3) interactuando directamente con las proteínas de la membrana.

4. ¿Qué indican los resultados sobre los componentes de la membrana?Indican que al haber una alteración en la membrana, sus componentes no podrán cumplir sus funciones

EXPERIMENTO3. DIFUSIÓNA. DIFUSIÓN DE MOLÉCULAS DE AGUA

¿Afectó la temperatura la difusión del tinte? Si afecto ya que la temperatura es directamente proporcional a la velocidad de difusión de un liquido. A mayor temperatura mayor velocidad en la difusión.

B. DIFUSIÓN A TRAVÉS DE UNA MEMBRANA SELECTIVAMENTE PERMEABLE (DIÁLISIS)

1. ¿Cuáles son los resultados de este experimento para las pruebas de yodo y de Benedict? Explique.La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva.La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como la glucosa y la maltosa2. ¿Qué indican estos resultados? La prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH anomérico libre), como el lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.3. ¿Qué característica tiene la membrana de diálisis que afecta los resultados?Su  composición química y la capacidad de depuración. Alta permeabilidad y gran capacidad de absorción.

4. Escribe la reacción química de la prueba de Benedict

Cu+ + OH - → Cu(OH) (precipitado amarillo) El hidróxido pierde agua

2Cu(OH) → Cu2O (precipitado rojo ladrillo) + H2O La aparición de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la presencia de un azúcar reductor.

EXPERIMENTO 4. ÓSMOSIS: A) EN CÉLULAS ANIMALES

CUESTIONARIO1. ¿Qué le pasó a las células al entrar en contacto con cada una de las soluciones? ¿Por qué?Fueron cambiando de aspecto hasta el grado de que ocurriera una eritrocateresis, ya que cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la célula está en una solución hipotónica , y como consecuencia, el agua entra a la célula causando que se expanda. Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se dice que la célula está en una solución hipertónica ; la célula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la célula está en una solución isotónica , donde el movimiento neto es cero.2. ¿Cuáles de las soluciones usadas fueron hipotónicas, hipertónicas e isotónicas para los eritrocitos?

ERITROCITOSSol. hipotónica Sacarosa 0.1 y 0.6 MSol. hipertónica Sacarosa 0.3 MSol. Isotónica Solo la sangre de vaca

3. ¿En qué solución sucedió hemólisis de los eritrocitos y por qué?En la solución hipotónica ya que éste pasa por un estado de turgencia (se hincha por el exceso de líquido) y luego esta célula estalla debido a la presión.4. ¿Qué indican los resultados acerca de la concentración de solutos en el plasma sanguíneo?

Indican que cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la célula está en una solución hipotónica.

Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se dice que la célula está en una solución hipertónica

Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la célula está en una solución isotónica

TABLAS DE LOS EXPERIMENTOS

Experimento 1. Efecto de la temperatura

Tubo Solución Intensidad de color. 1=menos intenso. 6= más intenso

1 70º C 62 55º C 43 37º C 34 20º C 55 En baño del hielo 26 En congelador 1

Experimento 2. Efectos de solventes

Tubo Solución Intensidad de color. 1=menos intenso. 6= más intenso

1 Etanol 1% 32 Etanol 25 % 53 Etanol 50 % 64 Acetona 1% 45 Acetona 25 % 26 Acetona 50 % 1

Experimento 4. Ósmosis. A) En células animales

ERITROCITOSSol. hipotónica Sacarosa 0.1 y 0.6 MSol. hipertónica Sacarosa 0.3 MSol. Isotónica Solo la sangre de vaca

ERITROCITOSLAMINILLA OBSERVACIÓN1 Los eritrocitos se ven normales2 Los eritrocitos se ven ensanchados3 Se nota la separación de los eritrocitos4 Ocurrió una eritrocateresis.