THE HEPATITIS B VIRUS IS A SMALL VIRUS OF HEPADNAVIRIDAE FAMILY

THAT CAUSES CHRONIC INFLAMMATION OF LIVER AND THEN

CIRRHOSIS OR HEPATOCELLULAR CARCINOMA.

GENOME: IS PARTIALLY DOUBLE-STRANDED DNA WITH 3200 BP LONG

AND CONTAINS:

• THE CORE (CENTRAL PARTICLE OF THE VIRUS)

• THE SURFACE ( SURFACE AG )

• THE POLYMERASE

• THE X GEN

THIS VIRUS IS TRANSMITTED BY CONTACT WITH CONTAMINATED

BLOOD, SEX AND MATERNAL-FETAL TRANSMISSION .

HEPATOCELLULAR CARCINOMA IS THE MOST

COMMON PRIMARY TUMOR AND BECAUSE MOST OF

THEM ARE DEVELOPED ON A CIRRHOTIC LIVER , THE

PATIENT MAY SUFFER THE TYPICAL SYMPTOMS OF

CIRRHOSIS . THE ONCOGENIC MECHANISM OF HBV

IS UNKNOWN, BUT RECENT STUDIES SUGGEST THAT

COULD ACT THROUGH THE INTEGRATION OF ITS

DNA INTO THE GENOME OF HEPATOCYTE.

LIVER CANCER

FKBP3

PDCD5

APOPTOSIS

RKIP

CELLULAR

PROLIFERATION

FOR

DECREASE

OF THE

EXPRESSION

OF

THIS IS CAUSED

BY THE

EXPRESSION OF

THE HBV

WHOLE-X GENE

THEY WANTED TO KNOW WHICH IS

THE INFLUENCE OF THE HBV IN

THE DEVELOPMENT OF THE

LIVER´S CANCER

2

• EXPRESIÓN DEL GEN X DEL HBV EN EL PLÁSMIDO pCMV-Tag2A

3

• EXPRESIÓN DEL GEN X COMPLETO DEL HBV EN EL PLÁSMIDO pCMV-Tag2A

4• EXPRESIÓN DEL

PLÁSMIDO pCMV-Tag2A

A• SE EVIDENCIA EL GRADO

DE TRANSCRIPCIÓN DE LOS GENES :

• CARRIL 2 Y 3: EXPRESIÓN DEL HBX

• CARRIL 4 Y 5: EXPRESIÓN DEL GEN X COMPLETO DEL HBV

• CARRIL 6 Y 7: NO HAY RESULTADO PUES CORRESPONDE A LAS CÉLULAS CONTROL QUE SOLO TENIAN EL PLÁSMIDO PERO NO LOS GENES DEL VIRUS.

B•SE USÓ EL WESTERN BLOT PARA ANALIZAR EL NIVEL DE EXPRESIÓN DE LAS PROTEÍNAS:

•SE EVIDENCIA QUE EL PLÁSMIDO QUE SUFRIÓ CLONACIÓN DEL GEN X TIENE ALTO GRADO DE EXPRESIÓN DE ÉSTE GEN Y QUE EL PLÁSMIDO QUE SUFRIÓ CLONACIÓN DEL GEN X COMPLETO MUESTRA UN GRAN GRADO DE EXPRESIÓN DEL MISMO.

•EL PLÁSMIDO QUE NO CONTIENE NI EL GEN X NI EL GEN X COMPLETO NO MUESTRA EXPRESIÓN.

C• PARA VERIFICAR LA

EFICACIA DE LA TRANSFECCIÓN SE UTILIZÓ UN PLÁSMIDO CON pEGFP CON EL GEN X Y EL GEN X COMPLETO Y SE DEMOSTRÓ QUE LA EFICACIA FUE MAYOR AL 90%

SE IDENTIFICARON 18 PROTEÍNAS QUE CAMBIARON SU EXPRESIÓN EN LAS

CÉLULAS QUE TENÍAN EL PLÁSMIDO CON GEN X COMPLETO

LADO IZQUIERDO:SE MUESTRAN LAS PROTEÍNAS EXPRESADAS POR LAS CÉLULAS QUE TENÍAN EL PLÁSMIDO

SIN LA PRESENCIA DE LOS GENES

LADO DERECHO: SE MUESTRAN LAS PROTEÍNAS EXPRESADAS POR LAS

CÉULAS HL-7702 QUE TENÍAN EL PLÁSMIDO CON EL GEN X COMPLETO

LA EXPRESIÓN DE 10

PROTEÍNAS SE VIO

INCREMENTADA EN LAS

CÉLULAS QUE HABÍAN SIDO

MODIFICADAS CON EL

PLÁSMIDO QUE CONTENÍA EL

GEN X COMPLETO, LAS

PROTEÍNAS TENÍAN

FUNCIONES COMO

METABOLISMO, APOPTOSIS,

REGULACIÓN DE LA

TRANSCRIPCIÓN, ENTRE

OTRAS.

POR OTRO LADO SE VIO UN

DESCENSO EN LA EXPRESIÓN

DE 8 PROTEÍNAS EN LAS

CÉLULAS CON EL GEN X

COMPLETO, LAS PROTEÍNAS

ESTÁN IMPLICADAS EN

PROCESOS DE APOPTOSIS,

SPLICING, REGULACIÓN DEL

GENOMA VIARL, ENTRE OTRAS.

PROTEÍNA FUNCIÓN GRADO DE EXPRESIÓN

RKIPREGULACIÓN DE MUCHAS

VÍAS DE SEÑALIZACIÓN

PDCD5RELACIONADA CON LA

APOPTOSIS Y TIENE

EFECTOS ANTITUMORALES

POTENTES

KHSRPREGULACIÓN DE LA

TRANSCRIPCIÓN

PSMB4REPARACIÓN DEL DNA,

SPLICING, ANGIOGENESIS

Y REMOCIÓN DE

PROTEINAS DAÑADAS

PCR WESTERN-BLOT

CÉLULAS

CONTROL

CÉLULAS

CON HBX

CÉLULAS

CON EL GEN

X COMPLETO

pCMV-

Tag2A

pCMV-Tag2A-X pCMV-Tag2A-

WHOLE X

N NRKIP

PDCD5

KHSRP

PSMB4

AUTHOR WHAT DID HE/SHE SAY? YES OR NO

Xu L, Hu J, Zhao Y, Xiao

J, Wang Y, Ma D.

It has been believed that PDCD5 is

a positive regulator in the P53

pathway by interacting with P53

Du YJ, Xiong L, Lou Y,

Tan WL, Zheng SB

Downregulation of PDCD5

expression has been found in

several types of human tumors,

and changing of the protein level is

used for the prognosis of cancer

progression.

Walker EJ, Rosenberg

SA, WaNds JR, Kim M

Studies have shown that RKIP

mRNA and protein were

downregulated in HCC.

Paterlini P, Poussin K,

Kew M, Franco D,

Brechot C

HBV DNA integrates into the

chromosomal genome of human

hepatocytes, which is recognized

to play a crucial role in the

pathogenesis of the HCC.

• THE EXPRESSION OF PROTEINS SUCH AS ( RKIP, PDCD5,

KHSRP,PSMB4 )MODIFIES THE FUNCTION OF THE

HEPATOCYTES DUE TO THE ALTERATION THAT THE

PROTEINS SUFFER IN THE PRESENCE OF THE X GENE OF

THE HEPATITIS B VIRUS.

• THE DECREASED EXPRESSION OF THE PROTEIN PDCD5 IS

RELATED WITH THE DECLINE IN THE APOPTOTIC ACTIVITY

OF CANCEROUS CELLS, IMPROVING ABNORMAL CELL

PROLIFERATION AND FAVORING THE OCCURENCE OF

HEPATOCARCINOMA.

• WHEN THEY COMPARED THE PROFILE OF PROTEINS

PRODUCED BY CELLS WITHOUT WHOLE-X GENE WITH CELLS

HAVING ON GENE OVER EXPRESSION OF WHOLE-X GENE

THERE WAS A SIGNIFICANT DIFFERENCE IN THE

EXPRESSION OF 18 PROTEINS, THIS WAS VERY INTERESTING

BECAUSE IT WAS ALREADY KNOWN THAT THESE PROTEINS

WERE INVOLVED IN CELL PROLIFERATION, IN SIGNALING

TRANSDUCTION AND APOPTOSIS.

• IT IS KNOWN THAT RKIP GENE INHIBITS SEVERAL PATHWAYS

LEADING TO THE PRODUCTION OF VARIOUS CANCERS

HUMAN FOR EXAMPLE BREAST CANCER AND RENAL CELL

CARCINOMA , IN THIS STUDY THE RKIP WAS

DOWNREGULATED AND THAT COULD LEAD TO

HEPATOCARCINOGENESIS MEDIATED BY HBX GENE.