FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA YCIENCIAS DEL MAR

FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO

CÓDIGO

MATERIA Cultivo de plancton FMAR02519

NOMBREDavid Quiñonez

PARALELO 1

TEMA DE LA PRÁCTICA

Cultivo de microalgas y mantención de cepas.

OBJETIVOS GENERALES:Cultivo de microalgas, tetraselmis sp.

Mantención de cepas de tetraselmis sp.

INTRODUCCIÓN:Parámetros del cultivo:

Un cultivo tiene tres diferentes componentes: un medio de cultivo contenido en un recipiente adecuado;

las algas creciendo en el medio y aire, para permitir el intercambio de dióxido de carbono entre el medio y

la atmósfera. Los parámetros más importantes que regulan el crecimiento de las algas son, cantidad y

calidad de nutrientes, luz, pH, turbulencia, salinidad y temperatura. (Fao, 2007)

-Nutrientes:

Requerimientos Compuestos químicos Valores

C CO2, CO3 g/100ml

O,H O2, H2O g/100ml

N N2, NH4, NO3 g/100ml

P PO4 g/100ml

S SO4 g/100ml

Na, K, Ca, Mg Sales g/100ml

Fe, Zn, Mn, B, Br, Si Sales mg/100ml

Cu, Co, Cl, I, Sr, Rb, Al, et Sales µg/100ml

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Vitaminas B12, tiamina y biotina µg/100ml

-Temperatura:

La mayoría de la especies de microalgas toleran temperaturas entre 16 y 27ºC, aunque esto puede variar de

acuerdo a la composición del medio de cultivo o la especie cultivada. Un valor intermedio de 18-20ºC es

frecuentemente empleado. Temperaturas por debajo de los 16ºC pueden retardar el crecimiento, mientras

que aquellas por arriba de los 35ºC son letales para cierto número de especies.

-Luz:

Como en las plantas, la luz es la fuente de energía que promueve las reacciones fotosintéticas en las algas.

Aquí, la intensidad, la calidad espectral y el fotoperiodo deben ser considerados.

-pH:

El rango del pH para la mayoría de las especies de algas cultivadas es entre 7 y 9, siendo el rango óptimo

8.2-8.7. Para mantener un pH aceptable es necesario airear el medio de cultivo.

-Aireación:

La aireación es necesaria para prevenir la sedimentación de las algas, para asegurar que todas las células de

la población están igualmente expuestas a la luz y los nutrientes, y para mejorar el intercambio de gases

entre el medio de cultivo y el aire.

Mantenimiento de cepas:

En esta etapa la cepas (stocks) de algas se mantienen en fiolas o matraces de 250 cc con 100 ml de medio

de cultivo y/o en placas con agar. El medio de cultivo se prepara según el procedimiento descrito para cada

caso y según la especie, sea ésta de mar o de agua dulce. Esta etapa tiene carácter de cultivo axénico por lo

que un máximo de cuidado se debe tener para no contaminar las cepas. La intensidad de luz debe estar

entre 500 y 1000 lux y la temperatura de 15 grados centígrados constante. La cepa se mantiene en una

incubador que brinda todas estas facilidades. Las cepas también se mantienen en tubos de ensayo con tapa

rosca o de algodón de 20 cc. (Arellano, 1994)

EQUIPOS Y MATERIALES:Aza de platinoMecheroCaja Petri con tetraselmis sp.

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Medio de cultivo agar-agarMedio de cultivo f/2 GuillardAlcoholTubo de ensayosBotellas de vidrio

PROCEDIMIENTO:Mantención de cepas de microalgas:a) Prepare cajas Petri, conteniendo medio de cultivo solidificado con 1 a 1,5% de agar. b) Con el asa de platino (punta esterilizada sumergida en alcohol y quemada), coger una pequeña porción de la cepa de la caja Petri con la muestra dada.c) Con el asa de platino (punta esterilizada sumergida en alcohol y quemada), bajo criterio de asepsia, rayar en paralelo la muestra de la colección en el agar. d) Luego repetir el paso b).e) Transfiera las unidades algales de una colonia a un medio líquido (tubo de ensayo).f) Al agar con la cepa se lo lleva al refri, mientras que los tubos de ensayos se los lleva a un ambiente controlado ya descrito en la introducción,g) Este proceso de mantención de cepa se puede repetir tanto del agar como del tubo de ensayo, pero para la mantención de cepa en el tubo de ensayo, lo que se hace es colocar ¾ partes en una botella de medio litro, y la parte restante a otro tubo de ensayo con medio de cultivo, y así mantener la cepa.

Transferencia a botella de medio y un litro:a) Luego de permanecer una semana la microalga (tetraselmis sp) en el tubo de ensayo se lo pasa a un medio con más volumen, en nuestro caso la botella de medio litro.b) Se coloca los mecheros alrededor del tubo y las botellas que contienen el medio de cultivo.c) Colocar ¾ partes en una botella de medio litro, y la parte restante a otro tubo de ensayo con medio de cultivod) Luego de varias semanas repetiremos el procedimiento de transferencia pero esta vez a una botella de un litro.e) llevar a un ambiente controlado, pero en este caso se añadirá aireación y más luz.

RESULTADOS: (Puede incluir información, características)Mantuvimos las cepas en el refri, atreves de cajas Petri.Cultivamos exitosamente tetraselmis sp en una botella de un litro

Conclusión:El proceso de mantención de cepas en agar sirve para cultivar algas, siempre que queramos o se nos haya muertos las que cultivamos en las botellas.El proceso de transferencia de tubo-botella medio litro-botella de un litro sirve para aumentar el volumen de nuestra alga.

BibliografíaArellano, H. G. (1994). http://mail-cenaim.espol.edu.ec. Obtenido de http://mail-

cenaim.espol.edu.ec: http://mail-cenaim.espol.edu.ec/publicaciones/algas/capitulo_3.pdf

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