UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE ZACATECAS

“Francisco García Salinas”Unidad Académica de Ciencias Químicas

Químico Farmacéutico BiólogoFarmacia Industrial I

Docente: Edmundo Zuñiga Carrillo

Ensayos de IdentidadPonentes

Geraldine G. Ávila MartínezBenjamín Bretado De Santiago

ESPECTROFOTOMETRIAINFRARROJA

Se basa en la medición de la absorción de la radiación infrarroja debida a Ia interacción con los enlaces que forman los grupos funcionales presentes en las moléculas orgánicas.EI espectro se presenta en unidades de numero de onda (cm-1) o longitud de onda (µm) en la abscisa y unidades de transmitancia o absorbancia (análisis cuantitativo) en la ordenada.

INSTRUMENTO.EI espectrofotómetro utilizado para registrar el espectro en la región del infrarrojo deberá contar con un sistema óptico o un interferómetro capaz de suministrar radiación monocromática en la región de 12 800 a 4000 cm-1 (0.8 a 2.5 µm) para el análisis en el infrarrojo cercano y de 4000 a 200 cm-1 (2.5 a 50 µm) para el infrarrojo medio, y de medir y efectuar la adquisición de los espectros en transmitancia o absorbancia de la luz incidente.

Diagrama de un espectrofotómetro de un solo haz.

Diagrama general de un espectrofotómetro IR de doble haz.

Diagrama general de un espectrofotómetro IR con Transformadas de Fourier (FTIR).

TABLA 1.

SUSTANCIA ACTIVA MÉTODO ESPECIFICACIONES DEL MÉTODO.

Ácido Acetilsalicílico. MGA 0351. Espectrofotometría infrarroja

El espectro IR de una dispersión de la muestra en bromuro de potasio, corresponde con el obtenido con una preparación similar de la SRef de acido acetilsalicílico.

ALOPURINOL. MGA 0351. Espectrofotometría infrarroja

MGA 0361.Espectrofotometría visible y

ultravioleta

En un matraz volumétrico de 100 mL,disolver 10 mg de la muestra en 1.0 mL de solución de NaOH 0.1 N, llevar al volumen con solución de HCl 0.1 N y mezclar. Pasar 10 mL de esta solución a un matraz volumétrico de 100 mL y llevar al aforo con solución de HCl 0.1 N; medir la absorbancia a 231 y 250 nm. EI espectro IJV de la solución final, corresponde con el obtenido con una preparación similar de la SRef-FEUM de alopurinol La relación A2J/Ames de 0.52 a 0.62.

BENZOILO, PEROXIDO MGA 0351. Espectrofotometría infrarroja.

EI espectro IR de una dispersión de la muestra en bromuro de potasio corresponde con el obtenido con una preparación similar de peróxido de benzoílo de pureza conocida.

CARBIDOPA MGA 0351. Espectrofotometría infrarroja.

MGA 0241.CLAR.

EI espectro IR de una dispersi6n de lamuestra en aceite mineral corresponde con el obtenido con una preparación similar de la SRef de carbidopa.

Comparar los tiempos de retención del pico principal en los cromatogramas obtenidos enla Valoración. El tiempo de retención obtenido con la preparación de Ia muestra corresponde al tiempo de retención obtenido con la preparación de referencia.

ENFLURANO MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.

EI espectro IR. De una película de Ia muestra corresponde con el obtenido con una preparación similar de Ia SRef de enflurano.

FAMOTIDINA MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.

MGA 0361.Espectrofotometría visible y

ultravioleta

El espectro UV de la preparación de Iamuestra (25 µg/mL en solución amortiguadora de fosfatos) corresponde con el de la preparación de Ia SRef defamotidina a 265 nm calculado sobre base seca y no difiere por mas de 3.0 %. Para la preparación de la solución amortiguadora de fosfatos, colocar en un matraz volumétrico de 500 mL, 250 mL de ácido fosfórico 0.02 M y ajustar con solución de hidróxido de sodio (l en 10) a un pH de 2.5,Llevar al volumen con agua y mezclar.

FENlLEFRINA MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.MGA 0511.

IDENTIFICACION DE lONES,GRUPOS FUNCIONALES Y

RADICALES.

Este metodo se basa en la identificación de iones, grupos funcionales 0 radicales de compuestos, contenidos en un medicamento dado, por reacciones cualitativas bajo condiciones establecidas, produciendo una reacción química de precipitación, de color u olor característico.

Una solución de la muestra (1:100), dareacción positiva a las pruebas de identidad para cloruros.

HALOPERIDOL MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.MGA 0361.

Espectrofotometría visible y ultravioleta

MGA 05II.Identificación de iones,

grupos funcionales y radicales.

El espectro UV de una solución de la muestra que contenga 20µ/mL en una mezcla de HCL (1 en 100):isopropanol (l :9), corresponde con el obtenido con una preparación similar de la SRef de haloperidol y sus respectivas absorbancias calculadas con referencia a la sustancia seca a la longitud de máxima absorbancia de 245 nm no difieren mas del 3.0 %.

En un crisol de porcelana, transferir 0.1 g de la muestra, adicionar 0.5 g de carbonato de sodio anhidro, calentar sobre la flama durante 10 min. Enfriar, adicionar5.0 mL de SR de acido nítrico diluido, filtrar. Diluir 1.0 mL del filtrado can 1.0 mL de agua. La solución da positiva a las pruebas de Identidad de cloruros.

HAlOTANO MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.

EI espectro IR de una solución de la muestra en disulfuro de carbono (l :25),corresponde con el obtenido con una preparación similar de la SRef de halotano.

IBUPROFENO MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.MGA 0241, CLAR.

Comparar los tiempos de retención delpico principal en los cromatogramas obtenidos en la Valoración.El tiempo de retención obtenido con la preparación dela muestra corresponde al tiempo de retención obtenido con lapreparación de referencia.

IDOXURIDINA MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.MGA 0361.

Espectrofotometría visible y ultravioleta

Solución amortiguadora pH 12, Preparar con 7.46 g de cloruro de potasio y 24 mL de solución de hidróxido de sodio 1.0 N y disolver en 2 000 mL de agua.Preparación de referencia, Solución de la SRef de idoxuridina contenga 33.3 µg/mL en solución amortiguadora pH 12.Preparación de la muestra. Solución de Ia muestra que contenga 33.3 µg/mL en solución amortiguadora pH 12.Procedimiento. El espectro UV de la solución de la muestra corresponde con el obtenido con la preparación de referencia

INDOMETACINA MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.MGA 0241. CLAR.

Comparar los tiempos de retención delpico principal en los cromatogramas obtenidos en la Valoración.El tiempo de retención obtenido con la preparación dela muestra corresponde al tiempo de retención obtenido con lapreparación de referencia.

KETOCONAZOl MGA 0351. Espectrofotometría

infrarroja.

MGA 05II.Identificación de iones,

grupos funcionales y radicales.

A 30 mg de Ia muestra, agregar 300 mg decarbonato de sodio anhidro, Calcinar durante 10 min, Dejar enfriar, disolver el residuo con 5 mL de acido nítrico yfiltrar. A I mL del filtrado agregar 1 mL de agua, La solución da reacción positiva a las pruebas de identidad para cloruros.

Preparados Farmacéuticos

• Las especialidades farmacéuticas o preparados farmacéuticos, además de fármaco(s) pueden llevar sustancias adicionadas aditivos, tales como colorantes, saborizantes, conservadores, diluyentes, bases, desintegrantes, reguladores, etc., para dar mayor estabilidad, elegancia, aceptación, facilitar su preparación uso, etc., siempre y cuando no este específicamente limitado en la monografía correspondiente en cualquier otro capitulo de la FEUM.

• Preparados Inyectables• Preparaciones Oftálmicas(Tópicos para ojos)• Preparaciones Óticas(Semisólidos, Ünguentos)• Preparaciones Nasales• Preparaciones Dérmicas• Tabletas o comprimidos• Cápsulas• Líquidos Orales• Supositorios

Preparado Farmacéutico Método Datos Técnicos

Ácido Acetilsalicílico

Tableta

a. MGA 0241Cromatografía CLAR

Proceder como se indica en la valoración. El tiempo de retención obtenido en el cromatograma con la preparación de la muestra corresponde al obtenidocon la preparación de referencia.

b.ColoraciónTriturar una tabletas, mezclar el polvo con 50 mL de agua y llevar a ebullición durante 5 min, enfriar, agregar una 0 dos gotas de solución de cloruro férrico al 9.0 % (m/v). Se produce un color rojo-violeta.

a. Fase móvil: 1-heptanosulfonato de sodio en mezcla agua:acetonitrilo (850:150) Solición de Dilución: Mezcla de Acetronitrilo:ácido fórmico (99:1)Referencia: 0,015mg/mL de AASColumna de 30 cm x 4 mm Detector UV: λ 280nm y flujo 2 mL/min

AlopurinolTabletas

a. MGA 0351 Espectrofotometría IREl espectro de absorción en la región infrarroja del residuo al obtenido, en una dispersión de bromuro de potasio, corresponde al obtenido con una preparación similar de la SRef-FEUM de alopurinol.

b. MGA0241 CLAREl valor de retención relativo obtenido en el cromatograma con la preparación de la muestra corresponde al obtenido con la preparación de referencia de alopurinol, preparadas como se indica en la Valoración.

a. 50 mg en total de 10 tabletas50 mg de alopurinol10ml de NaOH al 0,1N. Mezclar y filtrarAcidular ácido acético 1NLavar el precipitado con éterSecar con aire y posterior a 105°CLeer en el espectro en la región IRb. Soporte: Celulosa con indicador de fluorescente con espesor de 0,16mmFase móvil: n-butanol e hidróxido de amonio al 45%Referencia: Hidroxido de amonio al 45%(v/v) Cromatoplaca en carriles Detector: Lámpara UV

Peróxido de Benzoílo

Gel Dérmico

MGA 0241Cromatografía CLAR

El tiempo de retención obtenido en el cromatograma con la preparación de la muestra, corresponde al obtenido en el cromatograma con la preparación de referencia. Proceder como se indica en la Valoración.

Fase móvil: Acetonitrilo:agua (5:5)Patrón interno: Solución de benzoato de etilo en acetonitriloReferencia: 320µg/mL de peróxido de benzoílo anhídridoColumna: 30cm x4mm de acero inoxidable Detector: UV λ254nm

Carbidopa y LevododaTabletas

a. MGA 0241 Cromatografía Capa DelgadaEl cromatograma obtenido con Ia preparación de la muestra, exhibe dos manchas, una color café rojizo correspondiente a levodopa y otra color amarillo naranja, correspondiente a carbidopa, con RF similar, cada una, a la mancha obtenida en el cromatograma con su correspondiente preparación de referencia

b. MGA 0241Cromatografía CLAR

Los valores de retención relativos obtenidos en el cromatograma con la preparación de Ia muestra, corresponden a los valores de retención relativos obtenidos en el cromatograma con la preparación de referencia, trabajados como se indica en la Valoración.

Soporte: Gel de síliceAcetona:Cloroformo:n-butanol:ácido acético glacial:agua(60:40:40:35).Referencia: Solución de HCL 0,05N que contenga 2mg/ml levodopa y 0,2mg/mL de carbidopa.Revelado: 300mg de tricetohidrindeno en 100mL de n-butanol acidificado con 3ml de ácido acético glacial.Columna: 20cm x4mm Detector: UV λ 282nm

CefalexinaCapsulas

a. MGA 0241Cromatografía Capa delgada

La mancha principal obtenida en el cromatograma con la preparación de la muestra corresponde en tamaño, color y RF a la mancha obtenida en el cromatograma con la preparación de referencia.

b.MGA 0241Cromatografía CLAR

EI valor de retención relativo obtenido En el cromatograma con la preparación de la muestra corresponde al obtenido en el cromatograma con la preparación de referencia preparados como se indica en la Valoración.

a. Soporte: Gel de sílice HFFase móvil: Acetona: solución de fosfato dibásico de sodio al 7.2% (m/v): solución de ácido cítrico al 2.1% (m/v)(3:80:120).Cromatograma: Solución de n-tetradecano al 5,0%(v/v).

b. Fase móvil: agua:acetononitrilo:,etanol:tretilamina (850:100:50:15)Calumna: 25cm x 4,6mm Detector: UV λ 254nm

DiazepamTableta

a. MGA 0361Espectrofotometría Vis-UV

El espectro UV obtenido con la preparación de la muestra corresponde con el de la preparación de referencia; emplear celdas de 1cm y solución de acido sulfúrico al 0.5 % (m/v) en metanol como blanco de ajuste.

b. MGA 0241Cromatografía CLAR

Proceder como se indica en la Valoración. EI valor de retención relativo obtenido en el cromatograma can la preparación de Ia muestra corresponde al obtenido en el cromatograma con Ia preparación de referencia.

a. 10 mg de Diazepam y pasar a matraz volumétrico

Mezclar con 5 mL de agua90 ml de ácido sulfúrico 0.5%λ de 242 nm, celdas de 1 cm, blanco HCL 0.1Nb. Fase móvil: Acetonitrilo:agua:metanol (40:40:20)Columna 3,9mm x 15cmDetector: UV λ 254nm

Enflurano Líquido

a. MGA 0351 Muestras líquidasEspectrofotometría IR

Para muestras enforma liquida. EI espectro IR obtenido con Ia muestra, corresponde con el de una preparaciónsimilar de la SRef de enflurano

a. Solución en disolvente

Concentraciones de 1 a 10%

Famotidina Tabletas

a. MGA 0241Cromatografía CLAR

Proceder como se indica en la Valoración. El tiempo de retenci6n obtenido en el cromatograma con la preparación de la muestra, corresponde al obtenido en el cromatograma con la preparación de referencia.

Fase móvil: Solución

reguladora:acetonitrilo (93:7)

Diluyente: Fosfato monobásico de

epotasioColumna: 15cm x

4,6mmDetector UV λ

275nm

Cloruro de Fenilefrina y sulfato de ZincSolución Oftálmica

a. MGA 0241 Cromatografía Capa DelgadaProceder como se indica en la Valoración de Clorhidrato de fenilefrina. EI tiempo de retención obtenido en el cromatograma con la preparación de la muestra, corresponde al obtenido en el cromatograma con la preparación de referencia.

b. MGA 0511Identificación de iones, grupos funcionales y radicales.La mancha principal obtenida en el cromatograma con Ia preparaciónde la muestra, corresponde en tamaño, color y RF a Ia mancha obtenida en el cromatograma con Ia preparaci6nde referencia

a. Soporte: Gel de síliceFase móvil: Metanol:agua:hidróxido de amonio (72:25:3)

b. La muestra de reacción positiva a las pruebas para zinc y sulfato

HalotanoLíquido

MGA 0351 Espectrometría InfrarrojaEI espectro IR obtenido con la muestra, presenta máximos solamentea las mismas longitudes de onda que una preparaci6n similarde la SRef de halotano, en celdas de 0.1 mm y usando disulfuro de carbono como blanco de ajuste.

Pasar una alícuota de 1 mL de la muestra del matraz de 25 ml y aforar con disulfuro de carbono y mezclar.

Bibliografía

• Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (2014),México, D.F., Undécima Edición.