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TINCIÓN BACTERIANA Daniela Sinchiguano Xavier Chavarría–Bayot Cornelio Williams Universidad San Francisco de Quito Laboratorio de Microbiología Aplicada MCR 0250L

Tinción Bacteriana. Tinción Simple, Tinción Diferencial (Tinción GRAM, Tinción Ziehl-Neelsen, Acid-Fast), Tinción Estructural

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TINCIÓN BACTERIANADaniela Sinchiguano

Xavier Chavarría–BayotCornelio Williams

Universidad San Francisco de QuitoLaboratorio de Microbiología Aplicada MCR 0250L

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• Simples Un colorante (morfología)• Diferenciales Mas de un colorante (característica)• Estructurales Varios colorantes (estructuras)

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TINCIÓN SIMPLE

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¿Qué es tinción simple?

• Es la tinción que usa un solo colorante

• Teñir el microorganismo entero• Reconocer estructuras y

morfología• Azul de metileno, safranina,

fucsina fenicada

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 65Madigan, T., Martinko, J., Bender, K., Buckley, D. & Stahl, D. (2015). Brock Biology of Microbiology. Pearson. p. 28

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TINCIÓN DIFERENCIAL

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¿Qué es tinción diferencial?

• Reaccionan diferentemente con diferentes microorganismos

• Se puede usar para diferenciar entre bacterias

• Más de un colorante

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 65Madigan, T., Martinko, J., Bender, K., Buckley, D. & Stahl, D. (2015). Brock Biology of Microbiology. Pearson. p. 28

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¿Qué es la tinción ácido-alcohol resistente?• Tinción diferencial• Clasifica bacterias en ácido-alcohol resistentes y acido-

alcohol no resistentes

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 66

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Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 66-67

Ácido-alcohol resistentes Ácido-alcohol no resistentes• Paredes celulares con ácidos grasos

• E.g.: Género Nocardia y Mycobacterium: Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium leprae

• Resisten decoloración con alcohol-ácido

• Paredes celulares sin ácidos grasos

• Fucsina es solubilizada en ácido-alcohol, decoloriza la célula

• Azul de metileno por contraste

E.g: Ziehl-NeelsenKinyounAuramina-Rodamina

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¿Qué es la tinción Gram?• Tinción diferencial• Clasifica bacterias en dos grandes grupos:

grampositivas y gramnegativas• Gram positivas se tiñen de azul• Gramnegativas no se tiñen de azul

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. pp. 80-84

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¿Qué es la tinción Gram?

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. pp. 65

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Hans Christian Gram• Botánico y Medico Danés

• Copenhagen (1853-1938)

• Paul Ehrlich – tuberculosis

• Klebsiella pneumoniae y  Neumococo

• Carl Weigert – safranina

Witworth, J., & Firkin, B. (2002). Dictionary of medical eponyms. Carnforth. Lancaster: Parthenon.

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Diferencia estructural Gram+ y Gram-

Madigan, T., Martinko, J., Bender, K., Buckley, D. & Stahl, D. (2015). Brock Biology of Microbiology. Pearson. pp. 42-46

Grampositivas Gramnegativas• Una membrana• Pared celular rica en péptidoglicano• Ácido teioico y ácido lipoteioico

• Doble membrana• Periplasma• Pared celular baja en pépitodglicano• Lipopolisacáridos: Antígeno O, KDO,

Lípido A

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Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 84.

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Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 82.

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¿Por qué las Gram+ se tiñen de azul/violeta?

Grampositivas:• Resistencia a la

decoloración

• Capas péptidoglicano gruesa

• Compuesto CV-I demasiado grande para escapar

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. pp. 65-66

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¿Por qué las Gram- se tiñen de rojo/rosa?

Gramnegativas:• Membrana soluble

solventes orgánicos, lipopolisacáridos

• Capas peptidoglicano fina

• Retiene safranina

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. pp. 65-66

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TINCIÓN ESTRUCTURAL

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¿Qué es tinción estructural?

• Usada para colorar estructuras bacterianas• Endosporas, cápsulas, flagelos

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 67

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Tortora, G., Funke, B. & Case., C. (2016). Microbiology: An Introduction. Pearson. p. 68