低离子聚凝胺技术

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低离子聚凝胺技术. 原理 聚凝胺( Polybrene ),一种高价离子季胺盐多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减小,能引起 正常 红细胞 可逆性 的 非特异性 凝集。如果是 抗体致敏 的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集 不可逆 。. 当溶液中缺少离子时,抗原抗体之间的静电作用力较强. 当溶液中离子增多时,抗原抗体之间的静电作用力减弱. 抗体. 抗原. 静电作用力. 非离子. 抗原. 抗体. 静电作用力. 离子. LISS( 低离子强度溶液 ) 的原理. 基本操作方法 1 、试管中加入待检血清或血浆 1 滴 - PowerPoint PPT Presentation

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低离子聚凝胺技术

原理 原理 聚凝胺(聚凝胺( PolybrenePolybrene ),一种高价离子季胺盐),一种高价离子季胺盐多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减小,红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减小,能引起能引起正常正常红细胞红细胞可逆性可逆性的的非特异性非特异性凝集。如凝集。如果是果是抗体致敏抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集不可逆不可逆。。

LISS(LISS( 低离子强度溶液低离子强度溶液 )) 的原理的原理

抗原

非离子静电作用力

抗体

静电作用力 离子

抗原 抗

当溶液中离子增多时,抗原抗体之间的静电作用力减弱

当溶液中缺少离子时,抗原抗体之间的静电作用力较强

基本操作方法基本操作方法11、试管中加入待检血清或血浆、试管中加入待检血清或血浆 11滴滴22、加入用、加入用 LIMLIM溶液配置的溶液配置的 2~32~3的红细胞悬液的红细胞悬液 2~32~3滴滴33、摇匀,室温放置、摇匀,室温放置 11分钟(时间长,效果好)分钟(时间长,效果好)44、加、加 PolybrenePolybrene试剂试剂 11滴,混匀后滴,混匀后 3400rpm3400rpm离心离心 1515秒秒55、轻摇观察由、轻摇观察由 PolybrenePolybrene引起的红细胞非特异性凝 引起的红细胞非特异性凝 集,若未见红细胞凝集则需重做试验集,若未见红细胞凝集则需重做试验66、加入、加入 11滴重悬液,轻摇观察结果滴重悬液,轻摇观察结果 由由 PolybrenePolybrene引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在 11

分钟内完全散开,若是由免疫抗体引起的凝集反应则分钟内完全散开,若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开不会散开

聚凝胺聚凝胺 (Polybrene)(Polybrene) 配血方法配血方法

患患者者

献献血血者者

主主侧侧次次侧侧

室温放置室温放置

1 1 分钟分钟主次侧均主次侧均加聚凝胺加聚凝胺

聚凝胺聚凝胺 (Polybrene)(Polybrene) 配血方法配血方法

离离心心 聚凝胺引起聚凝胺引起

红细胞非特红细胞非特异性凝集异性凝集

阳阳性性

阴阴性性

主次侧均主次侧均加重悬液加重悬液看结果看结果

经典操作方法经典操作方法11、试管中加、试管中加 22滴待检血清或血浆,加滴待检血清或血浆,加 11滴试剂红细胞滴试剂红细胞22、 加、 加 LIMLIM溶液溶液 0.60.6毫升(或毫升(或 1212滴)混匀,室温放置滴)混匀,室温放置 11

分钟分钟33、加、加 PolybrenePolybrene试剂试剂 22滴,混匀后滴,混匀后 3400rpm3400rpm离心离心 1515秒秒44、倒去上清液,轻摇观察由、倒去上清液,轻摇观察由 PolybrenePolybrene引起的红细胞引起的红细胞 非特异性凝集,若未见红细胞凝集则需重做试验非特异性凝集,若未见红细胞凝集则需重做试验44、 加入、 加入 11滴重悬液,轻摇观察结果滴重悬液,轻摇观察结果 由由 PolybrenePolybrene引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在 11分钟分钟内完全散开,若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开内完全散开,若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开

结果判定结果判定

阴性结果:红细胞迅速散开,并在阴性结果:红细胞迅速散开,并在 11分钟内完全散开分钟内完全散开

阳性结果:红细胞不完全散开,弱凝集可能在阳性结果:红细胞不完全散开,弱凝集可能在 3030分钟分钟

内明显减弱或消失,因此,以内明显减弱或消失,因此,以立刻观察结立刻观察结

果为准果为准

质控试验:可以用阳性对照液代替待检血清,按同样质控试验:可以用阳性对照液代替待检血清,按同样

步骤进行质控试验,结果应为步骤进行质控试验,结果应为““ 1+”1+”的弱凝的弱凝

集集

说明及注意事项说明及注意事项11、配置、配置 LIMLIM 红细胞悬液:红细胞悬液: 取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接加胞可直接加 LIMLIM 溶液配置悬液,若红细胞中含有溶液配置悬液,若红细胞中含有较多血清或血浆,则需要用较多血清或血浆,则需要用 LIMLIM 溶液洗涤红细胞溶液洗涤红细胞一次,红细胞一次,红细胞

悬液为悬液为 2~3%2~3% ,,该悬液可替代盐水红细胞悬液使该悬液可替代盐水红细胞悬液使用用

22、加入血清量应严格按照操作方法,多加血清会提、加入血清量应严格按照操作方法,多加血清会提 高离子强度,降低致敏效果。高离子强度,降低致敏效果。33、使用肝素抗凝的血浆配血需多加、使用肝素抗凝的血浆配血需多加 11滴滴 PolybrenePolybrene ,, 以中和肝素以中和肝素