Aglutinación pasivas

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS INMUNOLOGIA

INTEGRANTES:

GARCÍA GARCÍA CÉSAR ANDRÉS.

MORALES VARGAS MA. ANALY

PÉREZ MARTÍNEZ JESSICA ALEJANDRA

Reacciones de aglutinación

Químico Farmacéutico Industrial

5FV1 equipo. 6

REACCIONES DE AGLUTINACIÓNAGLUTINACIÓN PASIVA

Hemaglutinación pasiva

AGLUTINACIÓN

Proceso realizado in vitro.Evidencia reacción Ag-Ac.Ag insoluble o particulado.

Fenómeno de unión completo:

Presencia de grumos visibles.

Etapas1. Unión del Ag con Ac.

Fuerza iónica, temperatura y pH del medio.

2. Formación de malla (Ac hacen puente de unión entre los Ag).

Disminuir potencial Z

Elevar temperatura, centrifugar o sedimentar c/sustancias químicas.

AGLUTINACIÓN PASIVA

Utilizado para:

Evidenciar reacciones Ag-Ac.

Ag soluble.

Precipitación.

Modificación:

Fijar Ag (a veces Ac) a partículas insolubles.

Poliestireno, látex o bentonita.

HEMAGLUTINACIÓN PASIVA

Variación de aglutinación pasiva.

Glóbulos rojos son el soporte.

Se debe a la presencia de antígenos en los eritrocitos, antígenos capaces de reaccionar con anticuerpos o bien con proteínas específicas de algunos microorganismos

VENTAJAS

Eritrocitos:

Recubiertos con Ag;

Ag acoplados de manera espontánea (polisacáridos).

Acoplamiento químico (ácido tánico, bencidina bisdiazotizada, cloruro crómico)

Disponibilidad inmediata Alta sensibilidad como indicadores

(medir antígenos a concentraciones de 0.2- 9 µg/ml).

Almacenamiento prolongado.

La hemaglutinación indirecta o pasiva con células sensibilizadas a las proteínas puede identificar anticuerpos a concentraciones tan bajas como 0.03 µg/ml.

Inhibición de la hemaglutinación

La inhibición de la hemoaglutinación (IHA) es la unión de anticuerpos a la sustancia que se absorbe para la hemaglutinación.

GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA

Secretada por la placenta.

Detectada en orina o suero humanas.

3° día de pérdida del periodo menstrual.

Aumenta hasta las 10 semanas de gestación.

ANTECEDENTES

Wide y Gemzell descubren métodos inmunológicos para detectar HGC (1960).

Inhibición de la aglutinación de hematíes de carnero sensibilizados.

Suero antigonadotropo de conejo.

Actualmente se utilizan partículas inertes como el látex.

PROCEDIMIENTO

Enfriar la orina. Filtrar o

centrifugar a 3 000 rpm por

5min.

0.25 ml de suero anti-HCG

en tubo de ensaye.

0.25 ml de solución control en un tubo de

ensaye.

0.25 ml de orina a c/u de

los tubos

Una gota de eritrocitos

sensibilizados en cada tubo

Colocar los tubos en una gradilla.

Incubar a temperatura

ambiente por 2 hrs.

Observar resultados.

RESULTADOS

AGLUTINACIÓN PASIVA

Los antígenos se acoplan de manera artificial a partículas que solo funcionan como soporte.

PRUEBA CUALITATIVA O SEMICUANTIATIVA

DETERMINACIÓN DE FACTOR REUMATOIDE

PRUEBA DE AGLUTINACIÓN EN LÁTEX.

Es un método de laboratorio para examinar ciertos anticuerpos o antígenos en una variedad de fluidos corporales, como la saliva, la orina, el líquido cefalorraquídeo o la sangre.

La muestra se mezcla con gotas de látex cubiertas con un anticuerpo (Ig G)o un antígeno específico. Si la sustancia sospechosa está presente, las gotas de látex se agruparán (aglutinarse).

Los resultados de la aglutinación en látex demoran aproximadamente de 15 minutos a una hora.

RAZONES POR LAS QUE SE HACE EL EXAMEN.

Esta prueba es una manera rápida de determinar la ausencia o presencia de un antígeno o anticuerpo.

FACTOR REUMATOIDEOEn el suero aparecen anticuerpos anti-anticuerpos

dirigidos a Ig G´s principalmente y los más abundantes pertenecen a la clase Ig M, el médico puede hacer otro examen de sangre (anticuerpo anti-PCC) para ayudar a diagnosticar la artritis reumatoidea.

PCC. PÉPTIDO CÍCLICO CITRULINADO

FACTOR REUMATOIDEO.

Este examen se usa con mayor frecuencia para el diagnóstico de la artritis reumatoidea o el síndrome de Sjogren.

VALORES NORMALES

Los resultados generalmente se reportan en una de dos formas:Menos de 40-60 u/mLTítulo menor de 1:80Un número bajo (resultado normal) por lo regular significa que

usted no tiene artritis reumatoidea o el síndrome de Sjogren. Sin embargo, algunas personas que en realidad padecen estas afecciones aún tienen un factor reumatoideo (FR) bajo o "normal".

!No toda persona con niveles más altos de factor reumatoide tiene artritis reumatoide o síndrome de Sjogren.!

PROCEDIMIENTO

Preparación dilución 1:20 del suero problema con amortiguador de glicina.

Añadir una gota de dilución seguido de reactivo látex-γ globulina.

Mezclar con agitador de madera

Oscilar placa suavemente.

RESULTADOS

PROTEÍNA C REACTIVA

PERTENECE A LA FAMILIA DE LAS PENTRAXINAS, UN GRUPO DE PROTEÍNAS PENTAMERICAS HOMOLOGAS EN SU ESTRUCTURA.

SE UNE AL COMPONENTE FOSFORILCOLINA DE LOS LIPOPOLISACARIDOS DE LA PARED CELULAR BACTERIANA.

• SE UNE A LOS MICROBIOS Y ACTIVA EL COMPLEMENTO

• Cuando hay un proceso de infeccion umenta hasta 1000 veces su concentracion.

• Es una proteina de fase aguda

INICIO

Colocar 1 gota del suero problema + 1 gota del reactivo de latex-anti-PCR, en una placa de vidrio.

RESULTADOS

Imagen 1: Reaccion de aglutinación (Proteina C reactiva)

DISCUSIÓNLA PRUEBA DE PROTEÍNA C REACTIVA MUESTRA AGLUTINACIÓN POR TANTO LA PRUEBA ES POSITIVA POR LO QUE PODEMOS SUGERIR QUE EL INDIVIDUO AL CUAL SE LE REALIZO TAL PRUEBA PASABA POR UN PROCESO DE INFECCIÓN, POR LO QUE EL NIVEL DE PROTEÍNA C REACTIVA AUMENTO.