ANALISI NIR FORMAGGI ACCREDITAMENTO DELLA PROVA DA PARTE DI ACCREDIA-SINAL Caterina Melilli 10°...

ANALISI NIR FORMAGGI

ACCREDITAMENTO DELLA PROVA DA PARTE DI

ACCREDIA-SINAL

Caterina Melilli

10° Meeting AIA-LSL Montegrotto Terme (PD)

Associazione Italiana Allevatori

Laboratorio Standard Latte

• Dal 2007 NIRS 5000 Foss; • analisi sui foraggi;• analisi sui formaggi facendo uso delle curve di

taratura messe appunto da altri lab della rete AA (es: ARAS, Lab Aosta);

I vantaggi dell’uso del NIR:• Rapidità di esecuzione• No reagenti• Costi bassi• Buona ripetibilità

L’uso principale del NIR è per il controllo della stabilità e omogeneità durante le fasi di preparazione di un ring test.

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INTRODUZIONE

Il LSL accredita le prove che utilizza nella preparazione dei Materiali di Riferimento e dei materiali per la preparazione di ring test.

Alla fine del 2007 sono state avviate le attività per l’accreditamento delle analisi al NIR secondo la ISO 21543/IDF 201:2006: Milk products – Guidelines for the application of near infrared spectrometry.

Contemporaneamente sono state avviate le procedure per il corrispondente accreditamento dei metodi di riferimento: Umidità (APHA 2004), Proteine (ISO/TS17837/IDF25:2008),Grasso (ISO/TS1735/IDF5:2004).

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INTRODUZIONE

ISO 21543/IDF 201:2006Milk products – Guidelines for the application of near infrared spectrometry

1 Scopo

Solidi Totali, Grasso e Proteine nel

formaggio,

Umidità, Grasso, Proteine e Lattosio nel

latte in polvere, siero in polvere e latticello

in polvere,

Umidità, Grasso, Solidi non grassi e sale

nel burro.Analisi NIR Formaggi10° Meeting AIA-LSL

ISO 21543/IDF 201:2006Milk products – Guidelines for the application of near infrared spectrometry

Near InfraRed (NIR):

esegue misurazioni sia in riflettanza

diffusa che in trasmittanza nell’intero range di

lunghezza d’onda del vicino infrarosso (700 nm

- 2500 nm) o in segmenti di questi o

specifiche lunghezze d’onda selezionate

all’interno della regione.

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Utilizzare un set di campioni indipendenti,

che ricopra tutte le possibili variazioni della

popolazione di campioni e

deve essere di almeno 25 campioni. (…)

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ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

1. Selezionati 25 diversi campioni di formaggio

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Latte (ovino, vaccino, misto)

Stagionatura (3-24 mesi)

Area di produzione

(nord, centro, sud)

Umidità = 35-55 %

Grasso = 20-35 %

Proteine = 25-38%

ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

2. Analizzati per via Chimica secondo le metodiche ufficiali (in contemporaneo accreditamento):

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ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

Umidità: APHA Standard Methods for the examination of dairy product 17th edition 2004 Cap. 15.

Proteine: ISO/TS 17837/ IDF 25:2008. Milk and milk products. Determination of nitrogen content and

crude protein calculation. Kjeldahl methodGrasso: ISO 1735/IDF 5:2004. Cheese and processed cheese

products – Determination of fat content – Gravimetric method (Reference method).

3. Analizzati al NIR

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ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

Tutte le analisi sono state condotte in doppio e nel periodo di tempo

di 2 settimane (Marzo 2008)

ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

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SEP = 0.342 BIAS = 0.014 R2 = 0.995

ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

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SEP = 0.694 BIAS = -0.105 R2 = 0.968

ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

Analisi NIR Formaggi10° Meeting AIA-LSL

SEP = 0.288 BIAS = 0.000 R2 = 0.992

ISO 21543/IDF 201:20066.5 Validazione dei modelli di taratura

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SEP < 2 * SEL

Errore di Ripetibilità (SEL):Scarto tipo del laboratorio

√∑(rip1 –rip2)2

2n

Errore Standard di Predizione (SEP): differenza fra i dati chimici e NIRS di validazione

ISO 21543/IDF 201:20067 Statistiche della performance del metodo

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SEP BIAS R2UMIDITA' 0,342 0,014 0,995GRASSO 0,694 -0,105 0,966PROTEINE 0,288 0,000 0,992

SEL x 21,0901,5600,700

SEP < 2 * SEL

ISO 21543/IDF 201:20067 Statistiche della performance del metodo

Ottemperata la ISO 21543/IDF 201:2006.Redatto il documento di dettaglio (Procedura di Prova -SINAL DG007 p.to 5.4.1).Validazione del processo di prova attraverso la partecipazione al ring test.

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VALIDAZIONE DEL PROCESSO DI PROVA - Ring Test

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Z-ScoreCircuito NIRS

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Z-ScoreMetodi di Riferimento

La norma ISO 21543/IDF 201:2006 non riporta dati di accuratezza (r, R).IL LSL in ottemperanza al documento SINAL DT0002/6 ha calcolato lo scarto tipo di ripetibilità eseguendo 11 prove sullo stesso campione di formaggio.Pertanto è stato confrontato il valore σ (scarto tipo di ripetibilità del ring test) con lo Sr (scarto tipo di ripetibilità del laboratorio). Il rapporto Sr/σ deve ricadere nel range della tabella di Fisher (Tabella 1 DT0002/6).

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CONTROLLO DELLA RIPETIBILITA‘

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Tabella di Fisher - limiti di fiducia min e max

n=n-1 min (p=0,025) max (p= 0,975)

5 0,408 1,602

6 0,454 1,551

7 0,491 1,512

8 0,522 1,480

9 0,548 1,454

10 0,570 1,431

11 0,589 1,412

15 0,646 1,354

20 0,692 1,307

25 0,724 1,275

30 0,748 1,251

UmiditàSr / σ = 0.650

GrassoSr / σ = 0.843

ProteineSr / σ = 0.590

ESITO POSITIVO

CONTROLLO DELLA RIPETIBILITA‘

Soddisfatto il requisito DT0002/6 il Laboratorio associa, al risultato di prova, come incertezza di misura, lo scarto tipo di Riproducibilità dei ring test (SR). Es: SRgrasso= 0.87

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INCERTEZZA DI MISURA

“…Al fine di non imbrattare la cella di lettura il TL frappone tra il campione ed il vetrino una pellicola trasparente (film plastico) dalle seguenti caratteristiche: Destinata al contatto con i prodotti alimentari;Composto da polimeri termoplastici;Conforme alle norme vigenti in materia (dichiarazione di conformità da parte del produttore);Spessore 0.012 mm…”Analisi NIR Formaggi

10° Meeting AIA-LSL

PROCEDURA DI PROVA P13 REV 2

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Prova accreditata SINAL da Maggio 2008!!!!!