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Cortex orbitofrontal. Bulbe olfactif. Tractus olfactif latéral. Cortex olfactif. Epithélium olfactif. 1. PRESENTATION DU MODELE. Organisation générale du système olfactif. (D’après A. Holley). Cellule mitrale. Neurone sensoriel. Vers les centres olfactifs secondaires. - PowerPoint PPT Presentation
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Epithélium olfactif
Bulbe olfactif
Cortex orbitofrontal
Tractus olfactiflatéral
Cortex olfactif
Organisation générale du système olfactif
(D’après A. Holley)
Neurone sensoriel Cellule mitrale
Epithélium Olfactif Bulbe Olfactif
Système nerveux périphérique Système nerveux central
Vers les centres olfactifs secondaires
1. PRESENTATION DU MODELE
Le bulbe olfactif (BO)• Paléocortex laminaire• Cellules relais: cellules mitrales• 2 niveaux de modulation de l’activité
des cellules mitrales– Cellules périglomérulaires (CGl)– Cellules granulaires (CGr)
Organisation anatomique et synaptique du bulbe olfactif
BO
Couche du nerf olfactif
Couche glomérulaire
Couche plexiforme externe
Couche des cellules mitrales
Couche plexiforme interne
Couche granulaire
Neurogenèse bulbaire:Prolifération, Migration, Différentiation: de la ZSV au BO
Corps CalleuxNéocortex
Cervelet
BO
Ventricule Latéral
Flux rostral migratoire
Gl
Gr
ZSV
ZSV: Zone sous ventriculaireGl: couche glomérulaireGr: couche granulaire
ZSV
Deux couches du bulbe olfactif concernées par la neurogenèse:-la couche glomérulaire - la couche granulaire
A Observer: coupes histologiques colorées en Crésyl Violet du bulbe olfactif
CCNC
CV
BO
VL
Localisation de la zone sous ventriculaire
Ventricule Latéral
A observer: marquage BrdU dans la zone sous ventriculaire, Lames 27 AV
Evaluation de neurogenèse dans le bulbe olfactif par la méthode de la BrdUInjection du marqueur de prolifération
6 heures 6 jours 12 jours et plus
Prolifération
Migration
DifférenciationSurvie
Cellules BrdU-positive dans la couche granulaire du BO
2.MESURE DE LA NEUROGENESE: METHODES
Coupe 1
Coupe 2 Coupe 3
ANIMAL 10
Méthode de comptage des cellules marquées par la BrdU
Elaboration d’une maquette à partir des coupes histologiques
12
3
4
5678
1 et 5: couche glomérulaire2 et 6: couche plexiforme externe3 et 7: couche granulaire4 et 8: Zone sous ventriculaire
Sur certaines maquettes, toutes les couches n’ont pas été tracées
3.1 Evaluation de la survie à long terme des cellules néoformées dans le bulbe olfactif et rôle des entrées sensorielles: principe de l’expérience
1 2 3 15 30 45 60 180 jours post BrdUOcc unilatérale
BrdU
3. EXPERIENCES ET OBSERVATIONS
Vérification de l’efficacité de l’occlusion de la narine par immunocytochimie de la Tyrosine Hydroxylase, enzyme de synthèse de la dopamine, qui ne s’exprime plus dans le bulbe olfactif en absence d’entrées sensorielles.
contrôle occlus
Observer -coupes histologiques portant révélation immunocytochmique du BrdU-maquettes correspondantes pour une série d’animaux sacrifiés à différents temps après l’administration de BrdU:10 et 27: 15 jours 65et 72: 45 jours 48: 6 mois
Utiliser les tableaux fournis qui indiquent pour chaque maquette le nombre de cellules comptées et la surface de la couche granulaire pour calculer la densité de cellules marquées et tracer la courbe de survie des cellules.
Les régions grisées correspondent au côté du bulbe olfactif qui a été privé d’information sensorielle.
Evaluation de la survie à long terme des cellules néoformées dans le bulbe olfactif et rôle des entrées sensorielles
Durée de vie limitée de la majorité des neurones néoformésExistence d’une période critique pendant laquelle la survie des cellules néoformées est sensible à l’entrée sensorielle
contrôlesobturés
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
16000
18000
0
15 30 45 60 180
Num
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