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Prof. Aurico Sousa Fonseca
Cátedra de Microbiología e Inmunología
Departamento de Patología Veterinaria FCV-UCV
BACTERIAS ANAEROBIAS NO ESPORULADAS
ANAEROBIOS
ESPORULADOS NO ESPORULADOS
GRAMPOSITIVOS GRAMPOSITIVOS GRAMNEGATIVOS
BACILOS
CLOSTRIDIUM COCOS BACILOS BACILOS
PEPTOSTREPTOCOCCUS ACTINOMYCES SPP DICHELOBACTER
INDOLICUS EUBACTERIUM SPP (BACTEROIDES)
PROPIONIBACTERIUM SPP FUSOBACTERIUM
BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS ANAERÓBICAS PATÓGENAS NO FORMADORAS DE ESPORAS
• Muchas causan infecciones oportunistas mixtas, a menudo en asociación con anaerobios facultativos. Las interacciones sinérgicas son
comunes.
• Especies de Fusobacterium y especies de bacterias antes conocidas como Bacteroides conforman más del 50% de los microorganismos anaerobios aislados. Cambios taxonómicos a los miembros
del género Bacteroides
CONSIDERACIONES, TAXONOMIA Y ANTECEDENTES HISTORICOS DEL GÉNERO Fusobacterium
• Familia Fusobacteriaceae: Género Fusobacterium con 13 especies
• Knorr (1923) propuso el Género. • Las especies de este género están
presentes como microflora normal oral, gastrointestinal y genitourinaria del hombre y de los animales.
• Se hallan en infecciones purulentas, necróticas y ulcerativas junto a otras bacterias anaerobias, microaerófilas o aerobias. Ej: F. necrophorum, Dichelobacter nodosus,
Arcanobacterium pyogenes
ESPECIES PATÓGENAS DEL GÉNERO Fusobacterium
HUESPED
ENFERMEDAD
Fusobacterium necrophorum
Bovinos
Ovinos
Cerdos
Conejos
Difteria ternero (focos necrótico en
laringe, tráquea y cavidad bucal)
Abscesos hepáticos, Metritis,
Celulitis y Mastitis
Abscesos podales
Dermatitis interdigital contagiosa
Enteritis necrótica
Abscesos en hígado
Necrobacilosis
de labios y boca
ESPECIES PATÓGENAS DEL GÉNERO Fusobacterium
HUESPED
ENFERMEDAD
Fusobacterium nucleatum
Algunas
especies
animales
y hombre
Infecciones en heridas y en el
Tracto respiratorio superior y
en cavidad pleural.
Gatos y
hombre
Infecciones supurativas en
tejido blando (gato) y
abscesos perianales en el
hombre.
HUESPED
ENFERMEDAD
Fusobacterium russii
HÁBITAT NATURAL • Encontradas a menudo en las
membranas mucosas de las vías digestivas de los animales y el hombre.
• Se excretan en las heces • Pueden sobrevivir por períodos
cortos en el medio ambiente. • Dichelobacter nodosus, sobrevive
menos de 4 días en el barro Patógeno primario de los tejidos
epidérmicos de la región de la pezuña de los rumiantes.
PROCEDIMIENTOS DIAGNÓSTICOS
• Muestras obtenidas por muestreo directo de descargas o lesiones, y por punción.
• Deben ser procesadas inmediatamente después de su recolección.
• Se pueden emplear kits y medios de transporte comerciales disponibles para los especímenes Núcleo de muestra de tejido de más de 2 cm3,
mantiene un microambiente anaeróbico.
• Son adecuadas para el cultivo anaeróbico las muestras líquidas en una jeringa, si el aire se expulsa de la misma y la aguja se mantiene conectada.
INCUBACIÓN Y CULTIVO
• Se utilizan para la incubación de cultivos Jarras anaeróbicas Atmósfera libre de oxígeno, con hidrógeno
y 10% de C02, a 37 °C hasta 7 días.
• El Agar sangre para el aislamiento de anaerobios debe ser complementado con: 5 a 10% de eritrocitos de rumiantes Extracto de levadura Vitamina K Hemina
• Medios selectivos pueden ser preparados adicionando agentes antimicrobianos apropiados.
INCUBACIÓN Y CULTIVO
• Los medios de cultivo deben ser previamente reducidos Almacenamiento en ambiente
anaerobio durante al menos 6 horas pre-inoculación.
• Los medios líquidos son útiles para los sub-cultivos, pero no son adecuados para el aislamiento primario Caldo de carne cocida o el medio
tioglicolato suplementado con vitamina K y hemina,.
INCUBACIÓN Y CULTIVO
• Se requieren medios selectivos especiales para el aislamiento de Dichelobacler nodosus Pezuña podrida en rumiantes
(Skerman, 1989).
• En algunas formulaciones de medios se agrega polvo de pezuña ovina para promover un mayor crecimiento.
DIFERENCIACIÓN DE LAS BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS ANAERÓBICAS PATÓGENAS NO FORMADORAS DE ESPORAS
• Se diferencian sobre la base de: Morfología de las bacterias Aspecto colonial Pruebas de sensibilidad antibiótica Producción de ácidos grasos
MORFOLOGÍA MICROSCOPICA
• Dichelobacter nodosus Bacilos gruesos, rectos
o ligeramente curvos, hasta a 6 µm de largo y abultado en uno o ambos extremos.
• Fusobacterium necrophorum Forma filamentosas
largas, de irregular tinción, sin ramificaciones
Azul de metileno Gram
Gram
CARACTERÍSTICAS DE CULTIVO
• Las colonias de bacterias Gram-negativos anaerobios no esporuladas suelen tener un olor fétido o podrido Debido a la
producción de ácidos grasos volátiles
ASPECTO COLONIAL • Dichelobacter nodosus
Aspecto colonial variable (Stewart et al., 1986).
• Cepas virulentas de pezuña podrida ovina tienen una zona central oscura, una zona pálida medio granular y una irregular propagación de la periferia con una apariencia de vidrio.
• Fusobacterium necrophorum Las colonias son de color gris, redondas y
brillantes.
Algunas cepas son hemolíticas.
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES
• Se utilizan de manera más precisa para la identificación de las especies: Las pruebas de sensibilidad
antibiótica
Pruebas bioquímicas
Cromatografía de gas líquido • Ac. acético, Ac. propiónico,, Ac. Isobutírico,
Ac. Butírico y Ac. isovaleriánico.
Pruebas bioquímicas Fusobacterium
ESQUEMA DE CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS
ANAEROBIAS ESTRICTAS DE IMPORTANCIA EN MEDICINA
VETERINARIA, BASADA EN LA PRODUCCIÓN O NO
PRODUCCIÓN DE ACIDOS GRASOS VOLTILES.
BACILOS GRAMNEGATIVOS
Dichelobacter
Fusobacterium
Bacteroides
(A), (P), (IB), (B), (IV), (L), (S)
B, (P), (A), (V), (L), (S)
(A), (P), (IB), (B), (IV), (L), (S)
A: ácido acético, P:ácido propiónico; IB: ácido isobutírico; B: ácido butírico;
IV: ácido isovalérico; V: ácido valérico, L: ácido láctico; S: ácido succínico;
( ): puede estar presente.
• Métodos para la detección de cepas virulentas de Dichelobacter nodusus incluyen: Zimograma Electroforético: para
determinar los patrones de isoenzimas proteolítica
ELISA: utilizando anticuerpos monoclonales.
PCR: Técnicas de Reacción en Cadena de Polimerasa
FACTORES DE VIRULENCIA Fusobacterium
• Endotoxina - fracción tóxica Lípido A (Acción necrotica).
• Exotoxina con acción leucocitolítica (Leucotoxina) y sinérgica con otras bacterias
• Enzimas: Lipasas, Desoxirribonucleasas
• Hemolisinas
PATOGÉNESIS Y LA PATOGENICIDAD • Suelen ejercer efectos
patógenos cuando las barreras anatómicas fallan lo que permite invasión de los tejidos subyacentes.
• Se replican sólo ante potenciales de reducción bajos o negativos.
• La mayoría producen superóxido dismutasa Les permite sobrevivir en los
tejidos oxigenados hasta que el potencial de reducción (Eh) alcanza niveles que favorecen su crecimiento.
PATOGÉNESIS Y LA PATOGENICIDAD
• El tejido traumatizado y necrótico seguido de la multiplicación de bacterias anaerobias facultativas pueden reducir los niveles de Eh a un rango adecuado para la proliferación de organismos anaerobios no formadora de esporas.
• La mayoría de las infecciones que involucran a estos microorganismos son mixtas.
• Dos o más especies de bacterias, que interactúan de manera sinérgica pueden producir lesiones que los organismos individuales no podrían.
Interacción sinérgica de Fusobacteriun necrophorum con Arcanobacterium pyogenes y con Dichelobacter nodosus en el desarrollo y progresión de lesiones podales en rumiantes
Fusobacterium necrophorum
Arcanobacterium pyogenes Dichelobacter nodosus
Leucotoxina Facilita supervivencia De A. pyogenes
Tejidos dañados facilitan invasion por D. nodosus
Factor de Crecimiento
Factor de Crecimiento
BIOTIPOS DE F. necrophorum
• Se reconocen tres biotipos de F. necrophorum Biotipo A:
• Designado F. necrophorum subespecie necrophorum
• Tiene mayor actividad hemolítica y es más virulento que el biotipo B,
Biotipo B: • F. necrophorum subespecie funduliforme.
Biotipo C: • Reclasificadas como F. pseudonecrophorum • Parece ser no patógenas.
Dichelobacter nodosus • Características de Dichelobacter
nodosus que se correlacionan con su capacidad de dañar tejidos incluyen:
• Producción de proteasas termoestables y elastasas
• Presencia de actividad agarolítica (sobre agar) basado en medios que contienen pezuña en polvo.
DIFTERIA DEL TERNERO • Faringitis o laringitis necrótica en
terneros menores de 3 meses de edad. • F. necrophorum penetra a través de
abrasiones en la mucosa de la faringe o la laringe Por ingestión de alimentos gruesos.
• Los signos clínicos incluyen: Fiebre, depresión, anorexia, salivación
excesiva, dificultad respiratoria y mal olor de la boca.
Terneros no tratados desarrollan neumonía necrotizante fatal.
• Suele ser eficaz el tratamiento con sulfamidas o tetraciclinas potenciadas al principio del curso de la enfermedad.
ABSCESO HEPÁTICO BOVINA • Formación de abscesos hepáticos secundarios a
ruminitis • frecuencia en animales de engorde. • Alimentación con raciones ricas en carbohidratos
y la consiguiente fermentación intraruminal rápida puede conducir al desarrollo de las úlceras.
• Fusobacterium necrophorum, junto con otros anaerobios y Arcanobacterium pyogenes invaden el tejidos, y las embolia ocasionales que llegan al hígado a través de la vena porta inician la formación de abscesos.
• Lesiones suelen ser detectados en la línea de matanza.
• Técnicas de manejo en corrales para reducir la incidencia de rumenitis.
• Clortetraciclina en alimentación durante el acabado reduce prevalencia de absceso hepático.
LA RINITIS NECRÓTICA DE LOS CERDOS • Condición esporádica, que afecta
principalmente a los cerdos jóvenes • Supuración y necrosis del hocico como
resultado de la infección por F. necrophorum, a menudo en asociación con otros anaerobios.
• Penetración a través de abrasiones en la mucosa nasal.
• Síntomas incluyen hinchazón de la cara, estornudos y nariz con descarga mal oliente.
• Infección crónica: deformación permanente de los huesos de la cara y de las fosas nasales ("Nariz de toro”).
PODODERMATITIS EQUINA O PUDRICIÓN DEL PIE
• Necrosis de los cascos del caballo • Falta de higiene, condiciones de
humedad y la falta de limpieza regular de los cascos.
• La infección por F. necrophorum, (secundaria al daño del casco), resulta de una respuesta inflamatoria localizada.
• Secreción con mal olor en el surco cerca de la ranilla.
• Tratamiento: Regeneración de la ranilla,
proporcionando establos limpios y secos, atención regular de los cascos y ejercicio.
PUNTO NEGRO DE LOS PEZONES DE LA ESPECIE BOVINA
• Punto negro o viruela negra del orificio del pezón y el esfínter de las vacas lecheras
• Área localizada de necrosis con la formación de costras negro debido a la invasión por Fusobacterium necrophorum.
• Contribuye a la estenosis del esfínter y predispone a la mastitis.
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