СКОРОСТЬ ОСЕДАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ)

СКОРОСТЬ ОСЕДАНИЯ

ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ)ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ)

"новости гематологического

анализа и приборного

обеспечения: Автоматические

СОЭ-метры"

ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА

� Польский терапевт Эдмунд Биернацки(Biernacki) (1866-1912). Он в 1897 году впервые отметил повышенную скорость повышенную скорость оседания эритроцитов у больных и предположил, что это было вследствие изменения белкового состава крови.

ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА

� В 1918 г. шведский исследователь Роберт Санно Фареус (Faohraeus) (1888-1968) продолжил работу Биернаки. Его

� Альф Вильгельм Альбертсон

Вестергрен (1881-1968) определил технику выполнения СОЭ и установил его полезность при работу Биернаки. Его

начальной мотивацией было исследование СОЭ в качестве теста на беременность, но его интерес был расширен на исследование СОЭ при заболеваниях.

полезность при определении прогноза для пациентов с туберкулезом.

Тесту дали название Тест Фареуса-

Вестергрена, или чаще в английской

литературе – метод Вестергрена.

ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА

� Вариация метода выполнения СОЭ была опубликована Винтроубом в 1935 г.и с тех пор широко и с тех пор широко используется.

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ И ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА СОЭ(механизм СОЭ)

ТРИ ФАЗЫ СОЭ

1. Фаза агрегации: когда, вследствие патологических причин, начинается формирование

2. Фаза седиментации: осаждение «монетных столбиков»формирование

«монетных столбиков»

столбиков»

3. Фаза упаковки: осевшие «монетные столбики» плотно упаковываются.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

0 10 20 30 40 50 60

Осе

да

ни

е (

мм

)

Время (минуты)

Сигмоидальная кривая оседания

ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА СОЭ

1. Размеры

2. Заряд эритроцитов.

� 1. ----------� 2. Снижение ведет к

ускорению оседания

Физиологические РЕЗУЛЬТАТ

эритроцитов.

3. Различие в удельной плотности эритроцитов (1.0950) и плазмы (1.0265).

4 Вязкость плазмы.

5. Температура

� 3. -----------

� 4. Увеличение замедляет СОЭ

� 5. Увеличение температуры ведет к ускорению СОЭ

� Мембрана эритроцитов содержит отрицательно заряженные молекулы сиаловых кислот, вследствие чего происходит взаимное

Нормальные условия: Поверхность эритроцитов

СОЭ: – НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

чего происходит взаимное отталкивание клеток.

� Поэтому, формирование «монетных столбиков» не происходит и скорость осаждения очень низка.

8

----

----

----

----

---- -

---

----

-----

----

----

----

----

---- -

---

----

-

Малый уровень осаждения

СОЭ – НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

----

----

----

----

----

----

----

----

--- -

--

----

----

----

----

----

----

----

----

60 минут

9

ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА СОЭ ПРИ

ЗАБОЛЕВАНИЯХ

� 1. Размеры эритроцитов

� 2. Различия в удельной плотности эритроцитов (1,0950) и плазмы крови (1,0265)

� 3. Вязкость плазмы

4. Заряд поверхности эритроцитов� 4. Заряд поверхности эритроцитов

� 5. Температура

ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ, ДИСПРОТЕИНЕМИЯХ

� Увеличение в плазме крови белков глобулиновых фракций:� Фибриноген � Иммуноглобулины� Белки ОФВ

� Результат:

� Снижение заряда поверхности эритроцитов, за счет его «нейтрализации»

� Доля протеинов в значении СОЭ:

� фибриноген 55%

� альфа-2-макроглобулин 27%

� иммуноглобулины 11%

� альбумин 7%

Ускоренное осаждение

----

----

- --

-

----

+

+

++++

+

----

----

----

----

---- -

---

----

-----

+

++

+

+

++ +

++

++

+

+

+

+

+

++

+

++ + ++

+

СОЭ – ПАТОЛОГИЯ

60 минут

----

----

----

----

----

---

----

----

----

----

----

----

----++

+

+ +

+

+

+----

+

+

++++++

+

+

+

+ ++

+ +

+----

----

----

----

----

----

----

----

+

+

++

+

++++++

+++

+

++

++ +

++

++

+ ++

+

++

+ = фибриноген, альбумин...

12

МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОЭ И ИХ СТАНДАРПТИЗАЦИЯ

СТАНДАРТИЗАЦИЯ СОЭ

� СОЭ – измерение скорости осаждения эритроцитов в разведенной цитратом крови за определенный промежуток времени.

� Метод Панченкова� Метод Панченкова

� Метод Вестергрена

УНИФИКАЦИЯ МЕТОДОВ

� В 1977 г.Международный Комитет по Стандартизации в

� Унифицированный метод исследования СОЭ в капиллярной

Международная Страны бывшего СССР

Стандартизации в Гематологии (ICSH -International Committee for Standardization in Hematology) рекомендовал применение метода Вестергрена по всему миру

СОЭ в капиллярной крови по Панченковув СССР и используется в России и странах СНГ

� Стандартные диаметр и длина капилляра :

• Длина: 174 мм• Диаметр:

• Наружный 5 мм

Метод Метод Метод Метод ПанченковаПанченковаПанченковаПанченкова

• Наружный 5 ммВнутренний 1 мм

� Стандартные температура и условия

� Время измерения:60 минут (один час)

ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ПАНЧЕНКОВА

� Отсутствие необходимости венепункции (нужно 200 мкл крови)

� Может

� Более высокая вариабельность результатов.

� ПРИЧИНЫ:� Влияние «массажа»

места забора крови (механическое

Достоинства Недостатки

Может использоваться как стабилизированная антикоагулянтом капиллярная, так и венозная кровь

(механическое разрушение агрегированных эритроцитов)

� Меньшая длина капилляра

� Высокая возможность технической ошибки «ошибки»

� Классический метод Вестергрена:� Забор минимум

2 мл венозной крови

� Стандартные диаметр и длина пробирки :• Диаметр: 12,55 мм ±±±± 0,15

мм• Длина грудуированной

части : вначале составляла 75 мм (3 дюйма), сейчас 200 мм(градуирована через 1мм)

Метод Метод Метод Метод ВестергренаВестергренаВестергренаВестергрена((((WestergrenWestergrenWestergrenWestergren))))

� Кровь может храниться до 2 часов при комнатной температуре и до 6 часов в холодильнике

� Стандартные температура и условия

� Время измерения: один час (при необходимости может выполняться и за 2 часа)

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НОРМ

Группы пациентов Значения СОЭ (мм/ч)

Метод Панченкова МетодВестергрена

Дета до 11 лет 4 – 11 2 – 10

Мужчины До 50 лет 1 – 10 2 – 15

> 50 лет 2 – 20> 50 лет 2 – 20

Женщины До 50 лет 2 – 15 2 – 20

> 50 лет 2 – 30

ПРИМЕРЫ СРАВНЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ СОЭ [ЦИТ. ЛУГОВСКАЯ С. А., МОРОЗОВА В. Т., ПОЧТАРЬ М. Е., ДОЛГОВ В. В., ЛАБОРАТОРНАЯ

ГЕМАТОЛОГИЯ, ТВЕРЬ: ТРИАДА, 2006, - 223 С.]

Метод Вестергрена (мм/ч) Метод Панченкова (мм/ч)

15 14

16 15

20 18

22 20

30 26

36 30

40 33

49 40

� Метод Винтроба(метод Вестергрена в модификацииWintrobe) :� Забор 1 мл венозной

крови

� Использование 2 мл венозной крови

� Стандартные диаметр и длина пробирки :

• Длина: 100 мм ± 1,5 мм• Диаметр: 2,55 мм ± 0,15

мм

Метод Метод Метод Метод ВинтробаВинтробаВинтробаВинтроба((((WWWWintrobeintrobeintrobeintrobe))))

� Кровь может храниться до 2 часов при комнатной температуре и до 6 часов в холодильнике

• Диаметр: 2,55 мм ± 0,15 мм

� Стандартные температура и условия

� Время измерения: один час

ПРОБЛЕМЫ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ

СТАНДАРТНЫХ МЕТОДИК ОПРЕДЕЛЕНИЯ

СОЭ

МЕТОД ПАНЧЕНКОВА И МЕТОД ВЕСТЕРГРЕНА

– РУЧНЫЕ МЕТОДЫ

ПОТРЕБНОСТИ ЛАБОРАТОРИИ

� Автоматизация

� Простота использования

� Минимум обслуживания

� Управление данными

� Надежность результатов

� Быстрое выполнение, особенно срочныхрезультатов

� Низкая стоимость

АВТОМАТИЗАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ СОЭЛинейка приборов «Ves-matic»

СТАНДАРТИЗАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ СОЭ

� Экспертная группа по реологии крови Международного Совета по стандартизации в

� Национальный

Комитет

Клинических стандартизации в гематологии (Expert Panel on Blood Rheology of the International Council for Standarization in Haematology – ICSH)

� Издано 4 документа по этой теме: 1973, 1977,

1988, 1993

Лабораторных

Стандартов

(National Committe for

Clinical Laboratory

Standards – NCCLS)

� Издано 3 документа по этой теме: 1988, 1993,

2000

АВТОМАТИЗИРОВАННЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СОЭ

� Измерения, вводимые в практику для гарантирования воспроизводимости метода

• Внутри и между лабораториями

• Внутри и между методами

� Для получения этого все лаборатории должны использовать

Стандартизация ≡ “Нормализация”

СОЭ – СТАНДАРТИЗАЦИЯ

� Для получения этого все лаборатории должны использовать одинаковый метод без внесения каких-либо вариаций, или используемые методы должны быть верифицированы на основе статистического протокола или адекватной статистики, что несмотря на различия, методы дают эквивалентные результаты.

� Вначале, по всему миру использовался первый способ, но затем второй способ был выбран для того, чтобы “обеспечить” новые разработки, особенно развитие автоматизации.

28

АВТОМАТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

� Сокращение времени анализа в 3-6 раз (20 или 10 минут)

� Высокая производительность (от 40 до 200 тестов/час)

� Точность и объективность (отсутствие влияния человеческого фактора)

� Безопасность (одноразовые расходные материалы)

� Удобство и простота (работа без присутствия оператора)

� Коррекция результатов с учетом температуры

� Штрих-кодирование проб, подключение к ЛИС

ｇｇｈＺＳｆｈｓｈＺＳｆｈｓ ТТБПБП MAРЕCMAРЕC

� Ves matic Easy

7

� Ves matic Easy� Ves matic 20� Ves matic 30� Ves matic 30 plus� Ves matic Cube 200

МОДИФИЦИРОВАННЫЙ МЕТОД

Использует специальные капилляры с заранее внесенным антикоагулянтом, с объемом пробы 1 мл и возможностью нанесения штрих-кода

УСТОЙЧИВОСТЬ К НЕРАВНОМЕРНОСТИ

ЗАПОЛНЕНИЯ: +5ММ -12ММ

+5мм (объем пробы завышен)-12мм (объем пробы занижен)

СИСТЕМА VES-MATIC

� Датчик температуры

� Автоматическая детекция уровня пробы

� Отсутствие гидросистемы - помп и клапанов

� Нет внешних реагентов

� Внешний считыватель штрих-кода� Внешний считыватель штрих-кода

� Встроенный термопринтер

� ЖК-дисплей

� Простота в использовании

БЮДЖЕТНЫЙ ВАРИАНТ

Ves-matic EASYVes-matic 20

� Совместимость с компьютерными системами лаборатории

� Простота и удобство в эксплуатации

� Стандартизация процедуры определения СОЭ

� Высокая скорость анализа

� Внешний считыватель штрих-кодов для идентификации проб

КЛАССИЧЕСКИЙ ВАРИАНТ

СОЭ Ves-Matic 30

СОЭ Ves-Matic 30+ (встроенный считыватель штрих-кодов)

� 30 позиций для проб

� Автоматическое перемешивание

� Результаты через 10 и 20 минут

� Настольное исполнение

� До 180 тестов/час

� Память 3 последних цикла

VES-MATIC 30 I.S. (CUBE)

� Измерение 30 проб крови одновременно

� Объединяет функции перемешивания

образцов крови и измерения

результатов результатов

� Определение СОЭ напрямую

в первичных пробирках с ЭДТА

� Производительность до 60 тестов/час

ПРИБОРЫ ПРЕМИУМ КЛАССА

Ves-matic 80 (Cube) Ves-matic 200 (Cube)

• Работают с первичными пробирками• Интегрируются в систему анализа крови с гематологическими

анализаторами

СДЕЛАЙТЕ СВОЙ ВЫБОР

� Стандартизация процедуры

� Безопасность (уменьшение контакта с кровью)

� Удобство (простая и надежная конструкция, работа без присутствия оператора)

� Безреагентная методика� Безреагентная методика

� Скорость (10-20 минут)

� Точность исследований (оптимальное соотношение кровь/цитрат)

� Минимальное сервисное обслуживание

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ

www.diеsse.ruwww.westmedica.ru

Ваша дружба и ваше доверие очень важны для нас, но самое главное —мы оказываем вам поддержку на высоком профессиональном уровне.

Подготовительный модуль

ККАКАК АНАЛИЗАТОРАНАЛИЗАТОР РАБОТАЕТРАБОТАЕТ

Анализирующий модуль

Сортировочный модуль

ППОДГОТОВИТЕЛЬНЫЙОДГОТОВИТЕЛЬНЫЙ БЛОКБЛОК..

Предназначен для загрузки держателей пробирок. Максимум 20 держателей, каждый из них содержит 10 пробирок. Через ПО задается определение скорости осаждения

4

2

1

6

определение скорости осаждения эритроцитов. Система автоматически загрузит пробирки в «анализирующий» блок.

Подготовительный блок. Принтер2

2

Производит печать данных проанализированных тестовых пробиркок (дата, время, температура), находящихся в держателе и всю необходимую информацию о рабочем цикле (дата, время, температура).

ААНАЛИЗИРУЮЩИЙНАЛИЗИРУЮЩИЙ БЛОКБЛОК

2

1. Цепь для крепления тестовой пробирки.

2. Система смешивания.

3. Система считывания 1 и 2.

1- время 0’

2- время 20’

4. Температурный датчик.

5. Система для испарения.

4

1

3

4

5

Анализирующий блок.

Система для смешивания.

Цепь для крепления тестовых пробирок.

Сортировочный блок

1. Система для перемещения тестовых пробирок.

2. Система выталкивания.

Сортировочный блок

Пустая подставка для пробирок на правой стороне прибора.

Подставка для пробирок на левой стороне с проанализированными образцами.

ｇｇｈＷＺｄｋｑＷｉｊＴＲｈＷＺｄｋｑＷｉｊＴＲ ТБП MAРЕCТБП MAРЕC� Безопасность (уменьшение контакта с кровью)

� Удобство (простота, работа без присутствия оператора)

Скорость (10 минут)� Скорость (10 минут)

� Доказанная корреляция и стандартизация (большоеколичество научных публикаций)

� Точность (оптимальное соотношение кровь/цитрат)

31

� Минимизация потери вакуума в упакованных

тестовых пробирках: правильные условия хранения: хранить при 18–24°C.

� Хранить тестовые пробирки в их оригинальных упаковках.

� Оптимизация перемешивания с антикоагулянтом:полностью перевернуть пробирку 2–3 раза сразу после сбора пробы и перед загрузкой в прибор.

32

Пожалуйста, посетите наш стенд как можно скорее для того, чтобы посмотреть приборы.……для того, чтобы посмотреть приборы.……

Характеристики описываемых методов в документах ICSH (1993)

Метод

ICSH Референтный ICSH Стандартный ICSH Выбранный

Цель Контроль сравнимости Как альтернативный Продвижение использования новых

методов

между методами референтному методу со специальными предупреждениями

относительно биологического

риска

Проба Стабилизированная цельная кровь Стабилизированная цельная кровь Разведенная при сборе кровь

с ЭДТА при Hct ≤ 0,35* с ЭДТА при Hct ≤ 0,35 (4+1) или собранная с ЭДТА

и разведенная после с

эквивалентным соотношением

СОЭ – СТАНДАРТИЗАЦИЯ

эквивалентным соотношением

Пробирка Тип Вестергрена Больший объем достаточный для Характеристики, не обозначенные

измерения до 200 мм оседания (∅ ≥ 2,55 мм) или не имеющие значения при контроле

сравнимости результатов

Соотношение 95% различие по отношению Оценен по референтному или

референтному методу ≤5 мм стандартному методам

в диапазоне 15-105 мм СОЭ с подтверждением

детальным протоколом

* Для сравнения методов, которые используют разведенную кровь, принято уравнение: СОЭ (разведенная кровь)=0,86 СОЭ (цельная кровь)

50

Характеристики описываемых методов в документах NCCLS (2000)NCCLS (2000)NCCLS (2000)NCCLS (2000)

СОЭ – СТАНДАРТИЗАЦИЯ

Метод

Референтный Выбранный

Цель Оценка будущих методов, характеризация

референсных материалов

Разработан для рутинного использования,

“гармонизация” различных методов, когда

референтный метод не применим

ПробаВенозная кровь, собранная в течение менее 30 с и немедленно перемешанная с ЭДТА

в конечной концентрации 3,5 – 5,4 мольl/л (в случае с K3EDTA.2H2O эквивалент 1,6 – 2,4 мг/мл)

51

ПреаналитикаОпределение гематокрита (Hct). Если он ≥ 0,35 –

развести плазму до Hct 0,35

Развести 4 объема крови 1 объемом физиологического

раствора (NaCl 0,145 мл/л эквивалентно 8,5 моль/л)

или 1 объемом раствора цитрата натрия 0,109 моль/л

ПробиркаОднотипный внутренний диаметр > 2,55мм и длина, достаточная для определения оседания до 200мм (*).

Детальные отметки мм на пробирке или на штативе, который обеспечивает точную настройку

ИзмерениеЧерез 60 ± 1 минут, измерить расстояние в миллиметрах от мениска плазмы до верхней части столбика

эритроцитов

*Соответствие пробирке Вестергрена, различие было в основном в диаметре, который был 2,65мм ± 0,15мм.

Здесь нет верхнего предела, если не учитывать объем пробы крови.