Методы сбора и выделения водных грибов

Методы сбора, выделения и сохранения водных грибов

Водные грибы систематически являются

очень разнородной группой, большинство

представителей которой относится к

ложным грибам.

Надцарство Chromalveolata

Царство Chromista (= Stramenopiles)

Отдел Oomycota ( = Peronosporomycota)

Водным грибам принадлежит существенная роль в круговороте веществ в водных

экосистемах, в процессах разложения и минерализации органических веществ

разнообразного происхождения. Многие их представители паразитируют на

рыбах, беспозвоночных и других животных, а также на водорослях.

Имеется 2 максимума их развития – весной и осенью.

Для изучения водных грибов в основном применяют 4 метода:

1. Собирают субстрат, находящийся в воде.

2. Собирается пена, скапливающаяся вблизи преград или под водопадом, в которой находятся споры водной микобиоты. Пену собирают в банки, бутылки или пробирки. Содержимое необходимо просмотреть как можно быстрее.

3. Стекла, покрытые слоем агара, помещают в месте падения водопадов, там, где в воздухе постоянно стоит водяная пыль. Конидии водных грибов, приносимые брызгами воды, оседают на стеклах с агаром и при последующем микроскопировании сравнительно легко обнаруживаются, идентифицируются.

4. Метод «приманок».

Метод «приманок» считается основным методом работы с водными ложными грибами

Метод разработан Такстером в 1890 годуи является наиболее распространенным наряду с непосредственным сбором природных субстратов

пораженных грибами из водоемов с последующей их микроскопией

• приманку погружают непосредственно в водоем • пробы из водоемов доставляют в лабораторию и опускают

в них приманку

Для выделения водной микобиоты, в исследуемых водоемах собирают:

• скелетизированные листья• веточки деревьев• стебли трав• бумагу• а также другой субстрат, на котором могут

быть обнаружены данные грибы

В качестве субстратов-приманок можно использовать:

• незрелые плоды яблок, груш, томатов, шиповника

• пыльцу растений• семена конопли, льна• остатки мертвых насекомых• целлофан• «яйца» муравьев• крылья мух• кусочки кожи змей

и т.д

1. Сбор материала• Из водоема берется проба воды (больший объем

предпочтительней)• В водоемах с чистой прозрачной водой перед

взятием проб воду взбалтывают (пробы лучше брать ближе ко дну, берегу)

• Проба может быть взята в одном месте или же поэтапно (в одну емкость вода собирается с определенным шагом от 5 до 50м)

2. Культивирование в лаборатории• В лабораторных условиях пробу воды

выливают в стеклянные бюксы или чашки Петри и туда помещают «приманки»

• Инкубируют при комнатной температуре (с обязательной маркировкой пробы)

• Через 3-5 суток «приманки»

обрастают мицелием, еще через 1-2 суток может наступить спороношение

3. Определение видового состава

Для определения необходимо самое простое оборудование

Наиболее значимым признаком, разграничивающим роды семейства Saprolegniaceae является тип формирования и

освобождения зооспор

1 – Saprolegnia; 2 – Achlia; 3 – Dyctiuchus; 4 – Aplanes

На уровне рода морфологическим признаком может быть форма и положение зооспорангия

Saprolegnia-тип

Achlia-тип

Dyctiuchus-тип

На уровне вида основное значение имеют структуры

полового размножения

•Форма оогония и антеридия•структура оболочки оогония•строение и количество ооспор (различное расположение запасных веществ в цитоплазме позволило выделить типы ооспор: центрические, субцентрические, эксцентрические и др.). •положение антеридиев относительно оогония (разное положение определяет тип антеридия: андротипный, гипотипный, моноклинный и т.д. )

оогоний

антеридий

Диклинический антеридий

Моноклинный антеридий

Гипогинный антеридий

Андрогинный антеридий

Андрогинный антеридий

Диклинный антеридий

Saprolegnia ferax

Saprolegnia ferax

Achlya debaryana

Saprolegnia parasitica

Achlya orion

Achlya orion

Achlya caroliniana

Saprolegnia torulosa

Achlya glomerata

Saprolegnia diclina

Pythium sp.

4. Сохранения водных грибов в культуре

1. Хранение в пробирках на скошенных агаризованных питательных средах. 2. На стерильных конопляных зернах в дистиллированной воде. Культуры

сохраняются в течение года. 3. Использование минерального масла. Важно, чтобы уровень масла над

поверхностью агара был около 1 см, меньшее количество будет способствовать высыханию среды, избыток погубит колонию. Пробирки с культурой хранят вертикально в штативах при +5°С