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Pruebas bioquimas para enterobacterias.
Lic. Benjamín Castillo
Características de las enterobacterias
Crecen en agar MacConkey Bacilos Gram negativas Desdoblan los nitratos a nitritos Aerobios facultativos Oxidasa (-) Catalasa (+) Fermentan glucosa
Bioquímica
LIA UREA
TSI (Triple Sugar Iron)
• Color: rojo ladrillo
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: rojo de fenol
• Sustratos principales: lactosa, sacarosa y glucosa (la proporción en el medio de lactosa y sacarosa es de 10: 1 con la glucosa)
• Sustratos secundarios: tiosulfato sódico, peptona, citrato férrico amoniacal y extractos.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembra por estrías en el pico
TSI (Triple Sugar Iron)
TSI (Triple Sugar Iron)
TSI (Triple Sugar Iron)
1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa +
A/A +;-
Ej.: Escherichia coli
A/A -;-
TSI (Triple Sugar Iron)
A/A ++, ++
Ej.: Citrobacter freundii
TSI (Triple Sugar Iron)
2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +; lactosa y sacarosa -)
K/A -, ++++
Ej.: Proteus mirabilis
K/A -;-
Ej.: Shigella flexneri
TSI (Triple Sugar Iron)
N/N -;-
Pseudomonas
* Este resultado no es de una enterobacteria
3.- Bacilos no fermentadores
LIA (Lysine Iron Agar)
• Color: lila
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: lisina y glucosa
• Sustratos secundarios: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levaduras.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico
LIA (Lysine Iron Agar)
LIA (Lysine Iron Agar)
LIA (Lysine Iron Agar)
1.- Lisina descarboxilasa +
Lisina cadaverina (alcaliniza el medio)
lisina descarboxilasa
Ej.: Escherichia coli
LIA (Lysine Iron Agar)
2.- Lisina descarboxilasa +, H2S +
Ej.: Salmonella
LIA (Lysine Iron Agar)
3.- Lisina descarboxilasa -
Ej.: Shigella
LIA (Lysine Iron Agar)
4.- Lisina deaminasa +
Lisina alfa cetácidoLisina deaminasa
Ej.: Proteus mirabilis
LIA (Lysine Iron Agar)
N/N -;-
Pseudomonas
* Este resultado no es de una enterobacteria
Citrato de Simmons
• Color: verde
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: azul de bromotimol
• Sustrato principal: citrato de sodio
• Sustratos secundarios: fosfato dipotásico, cloruro de sodio, sulfato de magnesio y fosfato monoamónico.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico.
Citrato de Simmons
Citrato de Simmons
Este medio nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de carbono.
La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a azul prusia.
Citrato de Simmons
1.- Citrato positivo:
La bacteria consume el citrato como fuente exclusiva de carbono
Cit- Na+ Cit+ Na+ OH –
alcaliniza el medio
Ej.: Klebsiella pneumoniae
citritasa
Citrato de Simmons
2.- Citrato negativo
La bacteria no consume el citrato como fuente de carbono.
Ej.: Escherichia coli
Úrea
En este medio se observa la capacidad de la bacteria de degradar la úrea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio por lo cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza.
• Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia
• Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y Enterobacter.
• Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
Urea
Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganiiEj.: Klebsiella pneumoniae
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
• Color: lila
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: ornitina y glucosa.
• Sustratos secundarios: peptona, triptona y extractos.
• Se siembra por picadura profunda
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
Este medio se usa para la identificación de enterobacterias en base a su movilidad, producción de indol y actividad de ornitina descarboxilasa.
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: negativa
I: positivo
O: negativo
Ej.: Klebsiella oxytoca
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
I: negativo
O: positiva
Ej: Enterobacter aerogenes
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
I: positivo
O: positivo
Ej.: Escherichia coli
GRACIAS!!!!!!
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