Embed Size (px)
DESCRIPTION
Ιός της Νέας Γρίπης Η1Ν1 Ιολογία - Εργαστηριακή διάγνωση. Δρ Α. Μεντής , Διευθυντής Ερευνών Ιατρός Βιοπαθολόγος, Κλινικός Μικροβιολόγος Εθνικό Εργαστήριο Αναφοράς Γρίπης Ν. Ελλάδος Ελληνικό I νστιτούτο Pasteur. Ιοί γρίπης Α. Ιοί γρίπης Α. Ιοί γρίπης Α. Ιοί γρίπης Α. - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
Ιός της Νέας Γρίπης Η1Ν1 Ιολογία - Εργαστηριακή διάγνωση
Δρ Α. Μεντής, Διευθυντής Ερευνών Ιατρός Βιοπαθολόγος, Κλινικός Μικροβιολόγος Εθνικό Εργαστήριο Αναφοράς Γρίπης Ν. Ελλάδος
Ελληνικό Iνστιτούτο Pasteur
Ιοί γρίπης Α
Ιοί γρίπης Α
Ιοί γρίπης Α Ιοί γρίπης Α
Πολλαπλασιασμός του ιού ΗΑ
ΝΑ
Αντιγονική παρέκκλιση και μεταβολή
Αντιγονική παρέκλιση (drift) Σε ιούς γρίπης Α και Β Σημειακές μεταλλάξεις στα γονίδια Η και Ν Υπεύθυνη για εποχική γρίπη
Αντιγονική μεταβολή (shift) Σε ιούς γρίπης Α μόνο Μεγάλη μεταβολή στη δομή Η και Ν Νέος ιός με νέο αντιγονικό προφίλ Δυνητικά πανδημία
Αντιγονική παρέκκλιση Α/Panama/H3N2
Αντιγονική παρέκκλιση Α/Panama/H3N2 Α/Fujian/H3N2
Αντιγονική παρέκκλιση και μεταβολή
Αντιγονική παρέκλιση (drift)
Αντιγονική μεταβολή (shift) Σε ιούς γρίπης Α μόνο Μεγάλη μεταβολή στη δομή Η και Ν Νέος ιός με νέο αντιγονικό προφίλ Δυνητικά πανδημία
Aντιγονική μεταβολή – ανασυγκρότηση
Aντιγονική μεταβολή – ανασυγκρότηση
Triple rassortant virus
Triple rassortant virus
Triple rassortant virus
PB2-North American Avian
PB1-Human H3N2
PA-North American avian
H1-Classical swine
NP-Classical swine
N1-Eurasian avian-like swine
M-Eurasian avian-like swine
NS-Classical swine
Triple rassortant virus
Neumann, Nature, 2009
Διαφορές στην αιμοσυγκολλητίνη του H1N1v και Η1Ν1 εποχικής
Gallacher G, 2009
Gatherer D, 2009
Διαφορές ιών γρίπης στην αμινοξική αλληλουχία
MMWR, 58,2009
Ηλικιακή ομάδα (έτη)
Ποσοστό παρουσίας διασταυρούμενων αντισωμάτων για H1N1v (ΜΝ, τίτλος > 160)
18 – 40 6%
18 - 64 9%
> 60 33%
... Εμβολιαμός με εμβόλια εποχιακής γρίπης δεν είναι πιθανό να παρέχει προστασία έναντι του ιού Η1Ν1v…
Hanckock K, NEJM, 2009
Neutralizing antibodies according to birth decade.
250 260 270 280 290 300 310 320 ....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|A/California/05/2009(H1N1) VMTDGPSNGQASYKIFRIEKGKIVKSVEMNAPNYHYEECSCYPDSSEITCVCRDNWHGSNRPWVSFNQNLEYQIGYICSG A/Washington/28/2009(H1N1) ..................................Y............................................. A/Athens/3974/2009(H1N1) .......D........................................................................ A/Athens/3975/2009(H1N1) .......D........................................................................ A/Crete/4008/2009(H1N1) .......D........................................................................ A/Crete/4057/2009(H1N1) .......D........................................................................ A/ Tripoli/4081/2009(H1N1) .......D........................................................................ A/Zakynthos /3802/2009(H1N .......D........................................................................ A/Crete/3809/2009(H1N1) .......D........................................................................ A/Aigio/3893/2009(H1N1) ................................................................................ 330 340 350 360 370 380 390 400 ....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|A/California/05/2009(H1N1) IFGDNPRPNDKTGSCGPVSSNGANGVKGFSFKYGNGVWIGRTKSISSRNGFEMIWDPNGWTGTDNNFSIKQDIVGINEWS A/Washington/28/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/3974/2009(H1N1) ....................................................................~~~~~~~~~~~~ A/Athens/3975/2009(H1N1) ....................................................................~~~~~~~~~~~~ A/Crete/4008/2009(H1N1) ....................................................................~~~~~~~~~~~~ A/Crete/4057/2009(H1N1) ....................................................................~~~~~~~~~~~~ A/ Tripoli/4081/2009(H1N1) ....................................................................~~~~~~~~~~~~ A/Zakynthos /3802/2009(H1N ....................................................................~~~~~~~~~~~~ A/Crete/3809/2009(H1N1) ....................................................................~~~~~~~~~~~~ A/Aigio/3893/2009(H1N1) ....................................................................~~~~~~~~~~~~
NA
90 100 110 120 130 140 150 160 ....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|A/California/05/2009(H1N1) NPECESLSTASSWSYIVETSSSDNGTCYPGDFIDYEELREQLSSVSSFERFEIFPKTSSWPNHDSNKGVTAACPHAGAKS A/Athens/728/2009(H1N1)) ................................................................................ A/Athens/893/2009 (H1N1) ................................................................................ A/Athens/919/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/920/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/924/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/926/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/939/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/940/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/943/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/948/2009(H1N1) ................................................................................ A/Athens/3124/2009(H1N1) ................................................................................ A/Zakynthos/3802/2009(H1N1 ................................................................................ A/Crete/3809/2009(H1N1) Y............................................................................... A/Athens/3974/2009(H1N1) ................................................................................ A/Crete/4057/2009(H1N1) ................................................................................ A/ Tripoli/4081/2009(H1N1) ................................................................................ 170 180 190 200 210 220 230 240 ....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|....|/California/05/2009(H1N1) FYKNLIWLVKKGNSYPKLSKSYINDKGKEVLVLWGIHHPSTSADQQSLYQNADAYVFVGSSRYSKKFKPEIAIRPKVRDQ A/Athens/728/2009(H1N1)) ................................................................................ A/Athens/893/2009 (H1N1) ...........................................................T..................E. A/Athens/919/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/920/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/924/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/926/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/939/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/940/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/943/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/948/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/Athens/3124/2009(H1N1) ................................................................................ A/Zakynthos/3802/2009(H1N1 ...........................................................T.................... A/Crete/3809/2009(H1N1) ...........................................................T...................~ A/Athens/3974/2009(H1N1) ...........................................................T...................~ A/Crete/4057/2009(H1N1) ...........................................................T.................... A/ Tripoli/4081/2009(H1N1) ...........................................................T....................
HA
Εργαστηριακή επιτήρηση γρίπης
Διάγνωση Μοριακή ανίχνευση ιών γρίπης Α και Β Ταχείες διαγνωστικές δοκιμασίες
Ορολογικές εξετάσεις
Ορολογική τυποποίηση
Καλλιέργεια σε κύτταρα MDCK-SIAT, αναστολή αιμοσυγκολλήσεως (IHA)
Γενετικός χαρακτηρισμός
Αλληλούχηση των γονιδίων Η, Μ και Ν απομονωθέντων στελεχών γρίπης και φυλογενετική ανάλυση
Ευαισθησία στα αντιικά φάρμακα
Εντοπισμό της μετάλλαξης στο γονίδιο της νευραμινιδάσηςΜε ενζυμική μέθοδο
Κριτήρια λήψης δείγματος στη Φάση Προστασίας των Ασθενών
(ΚΕΕΛΠΝΟ, 24/07/09)
Ασθενείς με σοβαρές εκδηλώσεις γρίπης με εισαγωγή σε νοσοκομείο
Ασθενείς που κατέληξαν με αδιευκρίνιστη λοίμωξη του αναπνευστικού
Συρροές κρουσμάτων
Κατά την κρίση του θεράποντος (π.χ. αντοχή σε παράταση θεραπείας, σε νησιά και πόλεις σε περιπτώσεις που ο ιός δεν έχει ανιχνευθεί ακόμη)
CDC kit
CDC kit rRT-PCR για Η1Ν1v
Όνομα Γονίδιο Σχόλια
InfA Matrix A Ανίχνευση όλων των ιών γρίπης Α
SW InfA universal
NP Ανίχνευση όλων των ιών γρίπης Α των χοίρων
SW H1 Η Ειδική ανίχνευση Η1Ν1v
RnaseP RnaseP Για έλεγχο επάρκειας δείγματος
CDC kit - ερμηνεία αποτελεσμάτων rtRT-PCR
InfA +
SW InfA universal +
SW H1 +
RnaseP +
CDC kit - ερμηνεία αποτελεσμάτων rtRT-PCR
InfA + -
SW InfA universal + -
SW H1 + -
RnaseP + +
CDC kit - ερμηνεία αποτελεσμάτων rtRT-PCR
InfA + - -
SW InfA universal + - -
SW H1 + - -
RnaseP + + -
CDC kit - ερμηνεία αποτελεσμάτων rtRT-PCR
InfA + - - +
SW InfA universal + - - -
SW H1 + - - -
RnaseP + + - +
CDC kit - ερμηνεία αποτελεσμάτων rtRT-PCR
InfA + - - +
SW InfA universal + - - -
SW H1 + - - -
RnaseP + + - +
H1 εποχιακής +/-
Η3 εποχιακής +/-
CDC kit - ερμηνεία αποτελεσμάτων rtRT-PCR
Ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα Δειγματοληψία όχι εντός 1-7 ημερών
από έναρξη συμπτωμάτων Μικρός αριθμός ιικών σωματίων στο
κλινικό δείγμα Ακατάλληλη συλλογή, μεταφορά και
χειρισμός των κλινικών δειγμάτων
Tι γίνεται μετά λήψη οσελταμιβίρης;
Επίδραση αγωγής με οσελταμιβίρη στην ανίχνευση ιών εποχιακής γρίπης
J INFECT DIS 2009
Ταχείες διαγνωστικές δοκιμές
Ανοσοφθορισμός Ανοσοχρωματικες μέθοδοι ανίχνευσης
αντιγόνου (νουκλεοπρωτείνης) σε 30 min Aνιχνεύουν και διαχωρίζουν Α και Β Ανιχνεύουν ιούς γρίπης (Α και Β) αλλά δεν
τους διαχωρίζουν Ανιχνεύουν μόνο Α Δεν διαχωρίζουν υπότυπους (Η1Ν1 – Η3Ν2)
Μεγαλύτερη ευαισθησία σε παιδιά από ότι σε ενήλικες
Evaluation of Rapid Influenza Diagnostic Tests for Detection of Novel Influenza A (H1N1) Virus — United States, MMWR, 2009
Αρνητικό για γρίπη Α ή Β
Θετικό για γρίπη Α
Πιθανοί ιοί:
Νέας Γρίπη Η1Ν1v,
Εποχιακής Η1Ν1 ή Η3Ν2.
Θεραπεία αν απαιτείται
Έλεγχος ανάγκης για:
•Επιβεβαιωτικές δοκιμές
•Αντιβιοτική θεραπεία
Δεν μπορεί να αποκλεισθεί γρίπη (ευαισθησία 40-70%)
Θεραπεία σε όσους ενδείκνυται, παρά το αρνητικό αποτέλεσμα
Το αρνητικό αποτέλεσμα να μη χρησιμοποιείται για να στέλνονται συμπτωματικά παιδιά στο σχολείο, ή για αποκλεισμό παρουσίας γρίπης σε ιδρύματα
Έλεγχος ανάγκης για: •Επιβεβαιωτικές δοκιμές•Αντιβιοτική θεραπεία
WHO, 10 Aug 2009
