Upload
others
View
9
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ
Ìåòîäû âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâàáàêòåðèé ãðóïïû êèøå÷íûõ ïàëî÷åê
(êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé)
Èçäàíèå îôèöèàëüíîå
ÔÅÄÅÐÀËÜÍÎÅ ÀÃÅÍÒÑÒÂÎ
ÏÎ ÒÅÕÍÈ×ÅÑÊÎÌÓ ÐÅÃÓËÈÐÎÂÀÍÈÞ È ÌÅÒÐÎËÎÃÈÈ
ÁÇ
8—
2008/2
07
Í À Ö È Î Í À Ë Ü Í Û ÉÑ Ò À Í Ä À Ð Ò
Ð Î Ñ Ñ È É Ñ Ê Î ÉÔ Å Ä Å Ð À Ö È È
ÃÎÑÒ Ð52816—
2007
Ïðåäèñëîâèå
Öåëè è ïðèíöèïû ñòàíäàðòèçàöèè â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè óñòàíîâëåíû Ôåäåðàëüíûì çàêîíîìîò 27 äåêàáðÿ 2002 ãîäà ¹ 184-ÔÇ «Î òåõíè÷åñêîì ðåãóëèðîâàíèè», à ïðàâèëà ïðèìåíåíèÿ íàöèîíàëü-íûõ ñòàíäàðòîâ Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè — ÃÎÑÒ Ð 1.0— 2004 «Ñòàíäàðòèçàöèÿ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðà-öèè. Îñíîâíûå ïîëîæåíèÿ»
Ñâåäåíèÿ î ñòàíäàðòå
1 ÐÀÇÐÀÁÎÒÀÍ Ãîñóäàðñòâåííûì íàó÷íûì ó÷ðåæäåíèåì «Âñåðîññèéñêèé íàó÷íî-èññëåäîâàòå-ëüñêèé èíñòèòóò êîíñåðâíîé è îâîùåñóøèëüíîé ïðîìûøëåííîñòè» (ÃÍÓ ÂÍÈÈÊÎÏ) íà îñíîâå àóòåí-òè÷íûõ ïåðåâîäîâ ñòàíäàðòîâ, óêàçàííûõ â ïóíêòå 4
2 ÂÍÅÑÅÍ Òåõíè÷åñêèì êîìèòåòîì ïî ñòàíäàðòèçàöèè ÒÊ 93 «Ïðîäóêòû ïåðåðàáîòêè ôðóêòîâ,îâîùåé è ãðèáîâ»
3 ÓÒÂÅÐÆÄÅÍ È ÂÂÅÄÅÍ Â ÄÅÉÑÒÂÈÅ Ïðèêàçîì Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó ðå-ãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè îò 27 äåêàáðÿ 2007 ã. ¹ 443-ñò
4 Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ÿâëÿåòñÿ ìîäèôèöèðîâàííûì ïî îòíîøåíèþ ê ìåæäóíàðîäíûì ñòàíäàð-òàì:
- ÈÑÎ 4831:2006 «Ìèêðîáèîëîãèÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è êîðìîâ äëÿ æèâîòíûõ. Ãîðèçîíòàëüíûéìåòîä äëÿ âûÿâëåíèÿ è ïîäñ÷åòà êîëè÷åñòâà êîëèôîðì. Ìåòîä íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà» (ISO4831:2006 «Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal måthod for the detection andenumeration of coliforms — Most probable number technique», MOD);
- ÈÑÎ 4832:2006 «Ìèêðîáèîëîãèÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è êîðìîâ äëÿ æèâîòíûõ. Ãîðèçîíòàëüíûéìåòîä ïîäñ÷åòà êîëèôîðì. Ìåòîä ïîäñ÷åòà êîëîíèé» (ISO 4832:2006 «Microbiology of food and animalfeeding stuffs — Horizontal måthod for the enumeration of coliforms — Colony-count technique», MOD) â ÷àñ-òè ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ.
Ïðè ýòîì äîïîëíèòåëüíûå ïîëîæåíèÿ è òðåáîâàíèÿ, âêëþ÷åííûå â òåêñò ñòàíäàðòà äëÿ ó÷åòà ïî-òðåáíîñòåé íàöèîíàëüíîé ýêîíîìèêè Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè è îñîáåííîñòåé ðîññèéñêîé íàöèîíàëüíîéñòàíäàðòèçàöèè, âûäåëåíû â òåêñòå ñòàíäàðòà êóðñèâîì.
Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé óêàçàííûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàí-äàðòîâ ïðèâåäåíî â äîïîëíèòåëüíîì ïðèëîæåíèè Á.
Íàèìåíîâàíèå íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà èçìåíåíî îòíîñèòåëüíî íàèìåíîâàíèÿ óêàçàííîãî ìåæäó-íàðîäíîãî ñòàíäàðòà äëÿ ïðèâåäåíèÿ â ñîîòâåòñòâèå ñ ÃÎÑÒ Ð 1.5—2004 (ïîäðàçäåë 3.5).
Ïðè ïðèìåíåíèè íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ðåêîìåíäóåòñÿ èñïîëüçîâàòü ñâåäåíèÿ î ñîîòâåòñòâèèññûëî÷íûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ íàöèîíàëüíûì ñòàíäàðòàì Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè, èñïîëüçî-âàííûì â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå â êà÷åñòâå íîðìàòèâíûõ ññûëîê, óêàçàííûå â ïðèëîæåíèè Â
5 ÂÂÅÄÅÍ ÂÏÅÐÂÛÅ
Èíôîðìàöèÿ îá èçìåíåíèÿõ ê íàñòîÿùåìó ñòàíäàðòó ïóáëèêóåòñÿ â åæåãîäíî èçäàâàåìîì èí-
ôîðìàöèîííîì óêàçàòåëå «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû», à òåêñò èçìåíåíèé è ïîïðàâîê — â åæåìåñÿ÷-
íî èçäàâàåìûõ èíôîðìàöèîííûõ óêàçàòåëÿõ «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû».  ñëó÷àå ïåðåñìîòðà
(çàìåíû) èëè îòìåíû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñîîòâåòñòâóþùåå óâåäîìëåíèå áóäåò îïóáëèêîâàíî â
åæåìåñÿ÷íî èçäàâàåìîì óêàçàòåëå «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû». Ñîîòâåòñòâóþùàÿ èíôîðìàöèÿ,
óâåäîìëåíèå è òåêñòû ðàçìåùàþòñÿ òàêæå â èíôîðìàöèîííîé ñèñòåìå îáùåãî ïîëüçîâàíèÿ — íà
îôèöèàëüíîì ñàéòå Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè â ñåòè
Èíòåðíåò
© Ñòàíäàðòèíôîðì, 2008
Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò íå ìîæåò áûòü ïîëíîñòüþ èëè ÷àñòè÷íî âîñïðîèçâåäåí, òèðàæèðîâàí è ðàñ-ïðîñòðàíåí â êà÷åñòâå îôèöèàëüíîãî èçäàíèÿ áåç ðàçðåøåíèÿ Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêî-ìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè
II
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ñîäåðæàíèå
1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12 Íîðìàòèâíûå ññûëêè . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 Òåðìèíû è îïðåäåëåíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ïî ìåòîäó ÍÂ×. . . . . . . . 2
4.1 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24.2 Ìåòîä ÍÂ× — îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
5 Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé — ïîäñ÷åò êîëîíèé . . . . . . . . . . . . 35.1 Ìåòîä ïîñåâà â àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó . . . . . . . . . . . . . . . 35.2 Ìåòîä ïîñåâà íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó . . . . . . . . . . . . . . . 3
6 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è ðåàêòèâû . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 Àïïàðàòóðà, ïîñóäà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 78 Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 810 Äîïîëíèòåëüíîå ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûÿâëåííûõ áàêòåðèé ê êîëèôîðìíûì
áàêòåðèÿì . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1111 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12Ïðèëîæåíèå À (ñïðàâî÷íîå) Ñõåìà âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé . . . . . . . . . . . . . . . . 13Ïðèëîæåíèå Á (ñïðàâî÷íîå) Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðàìè
ïðèìåíåííûõ â íåì ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14Ïðèëîæåíèå  (ñïðàâî÷íîå) Ñâåäåíèÿ î ñîîòâåòñòâèè ññûëî÷íûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ
íàöèîíàëüíûì ñòàíäàðòàì Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè, èñïîëüçîâàííûì â íàñòîÿùåìñòàíäàðòå â êà÷åñòâå íîðìàòèâíûõ ññûëîê . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
III
������+�������%8$
�#0�-!��"-1� ,-0#&74#5'��,�� [�#.#%����[� -�� 0�� '��,"�&7�#%#� '�1'&�5�,1�!#&,��-"'��!#�%�&�4#50#&#X,"�&7��[� -"�2,!#!!#'� ,� ]FENMLPBJBJJKHEKCIKH�'�.�-&#X,�#'#��0�#5 �!3,,8
5�B'�������8/(%� ���:3�K���=�5'��J�E*�B�P��*���7�E��*��*����@�������B'�������������I�DE���F��E�'�M��'JBB*���"�I�*H�B���I���O����@��',�*H�F��E�'�MQ
9�!�!#.�.�-"� �0���"��# �#&X�#�/�"7
��4 �&��8��#-&���"'��"#%#��/4�3�
*
������+�������%8$
�#0�-!��"-1�,-0#&74#5'��,�� [�#.#%����[� -�� &1�0�� '��,"�&7�#%#�'�51'&��,1�!#&,��-"'��/�!"�5�,��%��00��!,j����[�0�5&#��!��!#&,2#�.��[�/�!5"��,�$� '� .�-&#X,�#'#�0�# �!3,,8
(d
Í À Ö È Î Í À Ë Ü Í Û É Ñ Ò À Í Ä À Ð Ò Ð Î Ñ Ñ È É Ñ Ê Î É Ô Å Ä Å Ð À Ö È È
ÏÐÎÄÓÊÒÛ ÏÈÙÅÂÛÅ
Ìåòîäû âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé ãðóïïû êèøå÷íûõ ïàëî÷åê(êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé)
Food products. Methods for detection and quantity determination of coliformes
Äàòà ââåäåíèÿ — 2009—01—01
1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ
Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íà ïèùåâûå ïðîäóêòû, êðîìå ìîëîêà è ìîëî÷íûõ ïðîäóê-òîâ, è óñòàíàâëèâàåò ìåòîä âûÿâëåíèÿ â îïðåäåëåííîé íàâåñêå ïèùåâîãî ïðîäóêòà êîëèôîðìíûõ áàê-òåðèé è òðè ìåòîäà îïðåäåëåíèÿ èõ êîëè÷åñòâà: ìåòîä íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà (ÍÂ×) è ìåòîäûïîñåâà â èëè íà àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû.
Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ÍÂ× êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïðåäíàçíà÷åí äëÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ, ñîäåðæà-ùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóêòà ìåíåå 150 èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà ìåíåå 15 êëåòîê êîëèôîðìíûõ áàê-òåðèé.
Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïîñåâîì â àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äè-àãíîñòè÷åñêèå ñðåäû ïðåäíàçíà÷åí äëÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóêòà áîëåå150 èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà áîëåå 15 êîëîíèåîáðàçóþùèõ åäèíèö (ÊÎÅ) êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé.
Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïîñåâîì íà àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâ-
íî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû ïðåäíàçíà÷åí äëÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ, ñîäåðæàùèõ â 1 ã òâåðäîãî ïðîäóê-
òà áîëåå 1500 èëè â 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà áîëåå 150 ÊÎÅ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé.
2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè
 íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå èñïîëüçîâàíû íîðìàòèâíûå ññûëêè íà ñëåäóþùèå ñòàíäàðòû:ÃÎÑÒ Ð 51446—99 (ÈÑÎ 7218—96) Ìèêðîáèîëîãèÿ. Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Îáùèå ïðàâèëà ìèêðî-
áèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé
ÃÎÑÒ 9284—75 Ñòåêëà ïðåäìåòíûå äëÿ ìèêðîïðåïàðàòîâ. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿ
ÃÎÑÒ 10444.1—84 Êîíñåðâû. Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ ðåàêòèâîâ, êðàñîê, èíäèêàòîðîâ è ïè-
òàòåëüíûõ ñðåä, ïðèìåíÿåìûõ â ìèêðîáèîëîãè÷åñêîì àíàëèçå
ÃÎÑÒ 24104—2001 Âåñû ëàáîðàòîðíûå. Îáùèå òåõíè÷åñêèå òðåáîâàíèÿ
ÃÎÑÒ 25336—82 Ïîñóäà è îáîðóäîâàíèå ëàáîðàòîðíûå ñòåêëÿííûå. Òèïû, îñíîâíûå ïàðàìåò-
ðû è ðàçìåðû
ÃÎÑÒ 26668—85 Ïðîäóêòû ïèùåâûå è âêóñîâûå. Ìåòîäû îòáîðà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñ-
êèõ àíàëèçîâ
ÃÎÑÒ 26669—85 Ïðîäóêòû ïèùåâûå è âêóñîâûå. Ïîäãîòîâêà ïðîá äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ
àíàëèçîâ
ÃÎÑÒ 26670—91 Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Ìåòîäû êóëüòèâèðîâàíèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ
ÃÎÑÒ 29184—91 Ïðîäóêòû ïèùåâûå. Ìåòîäû âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà áàêòåðèé
ñåìåéñòâà Åntårîbàñtåriàceae
ÃÎÑÒ 30425—97 Êîíñåðâû. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ïðîìûøëåííîé ñòåðèëüíîñòè
1
Èçäàíèå îôèöèàëüíîå
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ï ð è ì å ÷ à í è å — Ïðè ïîëüçîâàíèè íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì öåëåñîîáðàçíî ïðîâåðèòü äåéñòâèå ññûëî÷-íûõ ñòàíäàðòîâ â èíôîðìàöèîííîé ñèñòåìå îáùåãî ïîëüçîâàíèÿ — íà îôèöèàëüíîì ñàéòå Ôåäåðàëüíîãîàãåíòñòâà ïî òåõíè÷åñêîìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè â ñåòè Èíòåðíåò èëè ïî åæåãîäíî èçäàâàåìîìó èíôîðìà-öèîííîìó óêàçàòåëþ «Íàöèîíàëüíûå ñòàíäàðòû», êîòîðûé îïóáëèêîâàí ïî ñîñòîÿíèþ íà 1 ÿíâàðÿ òåêóùåãî ãîäà, èïî ñîîòâåòñòâóþùèì åæåìåñÿ÷íî èçäàâàåìûì èíôîðìàöèîííûì óêàçàòåëÿì, îïóáëèêîâàííûì â òåêóùåì ãîäó.Åñëè ññûëî÷íûé ñòàíäàðò çàìåíåí (èçìåíåí), òî ïðè ïîëüçîâàíèè íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì ñëåäóåò ðóêîâîäñòâî-âàòüñÿ çàìåíÿþùèì (èçìåíåííûì) ñòàíäàðòîì. Åñëè ññûëî÷íûé ñòàíäàðò îòìåíåí áåç çàìåíû, òî ïîëîæåíèå, â êî-òîðîì äàíà ññûëêà íà íåãî, ïðèìåíÿåòñÿ â ÷àñòè, íå çàòðàãèâàþùåé ýòó ññûëêó.
3 Òåðìèíû è îïðåäåëåíèÿ
 íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå ïðèìåíåíû ñëåäóþùèå òåðìèíû ñ ñîîòâåòñòâóþùèìè îïðåäåëåíèÿìè:3.1 êîëèôîðìíûå áàêòåðèè: Áàêòåðèè, êîòîðûå ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ ôåðìåíòèðóþò ëàêòîçó ñ
îáðàçîâàíèåì ãàçà ïî ìåòîäàì, ïðèâåäåííûì â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå.3.2 âûÿâëåíèå êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé: Îïðåäåëåíèå ïðèñóòñòâèÿ èëè îòñóòñòâèÿ êîëèôîð-
ìíûõ áàêòåðèé â îïðåäåëåííîé ìàññå èëè îáúåìå ïðîäóêòà â ñîîòâåòñòâèè ñ íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì.3.3 îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé:3.3.1 Êîëè÷åñòâî áàêòåðèé, ñîäåðæàùååñÿ â 1 ñì3 èëè 1 ã ïðîäóêòà, îïðåäåëåííîå ïóòåì ïîñåâà
ïðîäóêòà è (èëè) åãî ðàçâåäåíèé â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó, ïîäñ÷åòåïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé è îïðåäåëåíèè âîçìîæíîñ-òè áàêòåðèé èç ýòèõ êîëîíèé ôåðìåíòèðîâàòü ëàêòîçó ñ îáðàçîâàíèåì ãàçà ïî ìåòîäàì, ïðèâåäåííûì âíàñòîÿùåì ñòàíäàðòå.
Ïðè íåîáõîäèìîñòè, ïîäòâåðæäàþò ïî áèîõèìè÷åñêèì ïðèçíàêàì ïðèíàäëåæíîñòü âûäåëåí-
íûõ êîëîíèé ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì.
3.3.2 Êîëè÷åñòâî áàêòåðèé, ñîäåðæàùååñÿ â 1 ñì3 èëè 1 ã ïðîäóêòà, îïðåäåëåííîå ïî ìåòîäó ÍÂ×,óêàçàííîìó â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå.
4 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé è îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâàïî ìåòîäó ÍÂ×
Ñóùíîñòü ìåòîäîâÌåòîäû âûÿâëåíèÿ è îïðåäåëåíèÿ ÍÂ× êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé îñíîâàíû íà âûñåâå îïðåäåëåí-
íîãî êîëè÷åñòâà ïðîäóêòà è (èëè) ðàçâåäåíèé íàâåñêè ïðîäóêòà â æèäêóþ ñåëåêòèâíóþ ñðåäó ñ ëàêòîçîé,èíêóáèðîâàíèè ïîñåâîâ, ó÷åòå ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê, ïåðåñåâå êóëüòóðàëüíîé æèäêîñòè â æèäêóþñåëåêòèâíóþ ñðåäó äëÿ ó÷åòà ãàçîîáðàçîâàíèÿ èëè ïåðåñåâà, ïðè íåîáõîäèìîñòè, êóëüòóðàëüíîé æèä-
êîñòè íà ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé ñðåäû äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ïî
áèîõèìè÷åñêèì è êóëüòóðàëüíûì ïðèçíàêàì ðîñòà ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ êîëîíèé ê êîëèôîð-
ìíûì áàêòåðèÿì.
4.1 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé4.1.1 Ïðîáèðêó ñ ñåëåêòèâíîé îáîãàòèòåëüíîé ñðåäîé èíîêóëèðóþò ïðîäóêòîì èëè ðàçâåäåíèåì
íàâåñêè ïðîäóêòà è èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ 24 èëè 48 ÷.4.1.2 Ïðîáèðêó ñ ïîäòâåðæäàþùåé ñðåäîé èíîêóëèðóþò èç ïðîáèðêè, ïîëó÷åííîé ïî 4.1.1, ãäå îò-
ìå÷åíî îáðàçîâàíèå ãàçà è/èëè ïîìóòíåíèå è èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ 24 èëè 48 ÷.4.1.3 Ïðèñóòñòâèå êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ñ÷èòàåòñÿ ïîäòâåðæäåííûì, â ñëó÷àå åñëè îòìå÷åíî
ïîìóòíåíèå è îáðàçîâàíèå ãàçà ïîñëå îñìîòðà ïðîáèðêè, ïîëó÷åííîé ïî 4.1.2.4.2 Ìåòîä ÍÂ× — îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé4.2.1 Òðè ïðîáèðêè ñ æèäêîé ñåëåêòèâíîé îáîãàòèòåëüíîé ñðåäîé äâîéíîé êîíöåíòðàöèè èíîêóëè-
ðóþò îïðåäåëåííûì êîëè÷åñòâîì ïðîäóêòà, åñëè èñõîäíûé ïðîäóêò æèäêèé, èëè îïðåäåëåííûì êîëè-÷åñòâîì èñõîäíîé ñóñïåíçèè â ñëó÷àå äðóãîãî ïðîäóêòà.
4.2.2 Òðè ïðîáèðêè ñ æèäêîé ñåëåêòèâíîé îáîãàòèòåëüíîé ñðåäîé íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè èíî-êóëèðóþò îïðåäåëåííûì êîëè÷åñòâîì ïðîäóêòà è/èëè ðàçâåäåíèåì ïðîäóêòà, åñëè èñõîäíûé ïðîäóêòæèäêèé, èëè îïðåäåëåííûì êîëè÷åñòâîì èñõîäíîé ñóñïåíçèè è/èëè ðàçâåäåíèåì â ñëó÷àå äðóãîãî ïðî-äóêòà.
4.2.3 Ïîñåâû â ïðîáèðêàõ, ñîäåðæàùèå îáîãàòèòåëüíóþ ñðåäó äâîéíîé êîíöåíòðàöèè, èíêóáèðó-þò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ 24 ÷. Ïîñåâû â ïðîáèðêàõ ñî ñðåäîé íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè, èíêóáèðóþò 24
2
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
èëè 48 ÷, ïîñëå ýòîãî â ýòèõ ïðîáèðêàõ îòìå÷àþò íàëè÷èå ãàçà è/èëè ïîìóòíåíèÿ, ìåøàþùåãî âûÿâëå-íèþ îáðàçîâàíèÿ ãàçà.
4.2.4 Ïðîáèðêè ñ ïîäòâåðæäàþùåé ñðåäîé èíîêóëèðóþò êóëüòóðàìè èç ïðîáèðîê ñ îáîãàòèòåëü-íîé ñåëåêòèâíîé ñðåäîé äâîéíîé êîíöåíòðàöèè è êóëüòóðàìè èç ïðîáèðîê ñ îáîãàòèòåëüíîé ñåëåêòèâ-íîé ñðåäîé íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè, â êîòîðûõ îòìå÷åíî îáðàçîâàíèå ãàçà è/èëè ïîìóòíåíèå.
Ïîñåâû â ïðîáèðêàõ ñ ïîäòâåðæäàþùåé ñðåäîé èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ 24 èëè 48 ÷, ïî-ñëå ýòîãî â ïðîáèðêàõ îòìå÷àþò îáðàçîâàíèå ãàçà.
4.2.5 Íàèáîëåå âåðîÿòíîå ÷èñëî êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé â 1 ñì3 èëè 1 ã ïðîáû ïðîäóêòà (ÍÂ×) ðàñ-ñ÷èòûâàþò èñõîäÿ èç ÷èñëà ïðîáèðîê ñ ïîäòâåðæäàþùåé ñðåäîé (4.2.4), ïîêàçàâøèõ îáðàçîâàíèå ãàçà.Äëÿ îïðåäåëåíèÿ íàèáîëåå âåðîÿòíîãî ÷èñëà ïîëüçóþòñÿ òàáëèöåé ÃÎÑÒ 26670.
5 Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé —ïîäñ÷åò êîëîíèé
Ñóùíîñòü ìåòîäîâÌåòîäû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïîñåâîì â èëè íà àãàðèçîâàííûå ñåëåê-
òèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèå ñðåäû îñíîâàíû íà âûñåâå îïðåäåëåííîãî êîëè÷åñòâà ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàç-âåäåíèé â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó ñ ëàêòîçîé, èíêóáèðîâàíèèïîñåâîâ, ïîäñ÷åòå òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé, ïåðåñåâå òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé â æèäêóþñåëåêòèâíóþ ñðåäó ñ ëàêòîçîé äëÿ îïðåäåëåíèÿ ãàçîîáðàçîâàíèÿ, ïîäòâåðæäåíèÿ, ïðè íåîáõîäèìîñ-
òè, ïî áèîõèìè÷åñêèì ïðèçíàêàì ïðèíàäëåæíîñòè âûäåëåííûõ êîëîíèé ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì.
5.1 Ìåòîä ïîñåâà â àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó
5.1.1 Äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïî 1 ñì3 ïðîäóêòà, åñëè ïðîäóêò æèä-êèé, èëè ïî 1 ñì3 èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ â ñëó÷àå äðóãîãî ïðîäóêòà âíîñÿò â äâå ñòåðèëüíûå ÷àøêè Ïåò-ðè.
Äðóãóþ ïàðó ÷àøåê èñïîëüçóþò äëÿ äðóãèõ êîëè÷åñòâ — èñõîäíîé ñóñïåíçèè è/èëè äåñÿòèêðàòíûõðàçâåäåíèé ïðîäóêòà.
×àøêè ñ âíåñåííûì â íèõ ïðîäóêòîì èëè åãî ðàçâåäåíèåì çàëèâàþò àãàðèçîâàííîé ïèòàòåëüíîéñðåäîé.
Ïîñåâû â ÷àøêàõ èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ â òå÷åíèå 24 ÷.5.1.2 Òèïè÷íûå è àòèïè÷íûå êîëîíèè ïîäñ÷èòûâàþò è îïðåäåëÿþò ó áàêòåðèé èç òèïè÷íûõ è
àòèïè÷íûõ êîëîíèé âîçìîæíîñòü ôåðìåíòàöèè ëàêòîçû.
5.1.3 ×èñëî êîëîíèé íà 1 ñì3 èëè íà 1 ã ïðîäóêòà ðàññ÷èòûâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670 èñõîäÿ èç ÷èñëàïîäòâåðæäåííûõ òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé, âûðîñøèõ íà ÷àøêàõ.
5.2 Ìåòîä ïîñåâà íà àãàðèçîâàííóþ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêóþ ñðåäó
5.2.1 Íà ïîäñóøåííóþ ïîâåðõíîñòü àãàðèçîâàííîé ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé ñðåäû â äâóõ
÷àøêàõ Ïåòðè íàíîñÿò 0,1—0,2 ñì3 ïðîäóêòà, åñëè ïðîäóêò æèäêèé, èëè èñõîäíîé ñóñïåíçèè â ñëó÷àå
äðóãîãî ïðîäóêòà.
Äðóãóþ ïàðó ÷àøåê èñïîëüçóþò äëÿ äðóãèõ êîëè÷åñòâ — èñõîäíîé ñóñïåíçèè èëè äåñÿòèêðàò-
íûõ ðàçâåäåíèé ïðîäóêòà.
Âíåñåííûé â ÷àøêè ïðîäóêò èëè åãî ðàçâåäåíèÿ ðàñïðåäåëÿþò ïî ïîâåðõíîñòè àãàðèçîâàííîé
ïèòàòåëüíîé ñðåäû ñòåðèëüíûì øïàòåëåì.
Ïîñåâû â ÷àøêàõ èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ â òå÷åíèå 24 ÷.
5.2.2 Òèïè÷íûå è àòèïè÷íûå êîëîíèè ïîäñ÷èòûâàþò è îïðåäåëÿþò ó áàêòåðèé èç ýòèõ êîëî-
íèé âîçìîæíîñòü ôåðìåíòàöèè ëàêòîçû.
5.2.3 ×èñëî êîëîíèé íà 1 ñì3 èëè íà 1 ã ïðîäóêòà ðàññ÷èòûâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670 èñõîäÿ èç ÷èñëà
ïîäòâåðæäåííûõ òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé, âûðîñøèõ íà ÷àøêàõ.
6 Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è ðåàêòèâû
Õèìè÷åñêèå âåùåñòâà, èñïîëüçóåìûå äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïèòàòåëüíûõ ñðåä è ðåàêòèâîâ, äîë-
æíû áûòü àíàëèòè÷åñêîãî êà÷åñòâà.
6.1 Ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà (ëàóðèë ñóëüôàò òðèïòîçíûé áóëüîí)
6.1.1 Ñîñòàâ ñðåäû ïðèâåäåí â òàáëèöå 1.
3
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ò à á ë è ö à 1
Ñîñòàâ ñðåäûà)
Ñðåäà äâîéíîéêîíöåíòðàöèè
á)Ñðåäà íîðìàëüíîé
êîíöåíòðàöèè
Ôåðìåíòàòèâíûé ïåðåâàð ìîëîêà è æèâîòíûõ ïðîòåèíîâ, ãËàêòîçà (Ñ12Í22Î11� Í2Î), ãÄâóçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé êàëèé (Ê2ÍÐÎ4), ãÎäíîçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé êàëèé (ÊÍ2ÐÎ4), ãÍàòðèé õëîðèñòûé, ãÍàòðèé ëàóðèë ñóëüôàò, ãÂîäà, ñì3
40105,55,5100,2
1000
205
2,752,75
50,1
1000
6.1.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ ãîòîâóþ ñðåäó â âîäå. Óñòàíàâ-
ëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (6,8 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °Ñ.Ðàçëèâàþò ñðåäó ïî 10 ñì3 â ïðîáèðêè ðàçìåðîì ïðèáëèçèòåëüíî 16 � 160 ìì, ñîäåðæàùèå
ïðîáèðêè Äàðõàìà (ïîïëàâêè), â ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ñðåäû íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè, è â ïðîáèðêèðàçìåðîì ïðèáëèçèòåëüíî 20 � 200 ìì, íå ñîäåðæàùèå ïðîáèðêè Äàðõàìà (ïîïëàâêè), â ñëó÷àå èñïîëü-çîâàíèÿ ñðåäû äâîéíîé êîíöåíòðàöèè.
Ñòåðèëèçóþò ñðåäó â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (121 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 15 ìèí. Ïðîáèðêè Äàðõàìà(ïîïëàâêè) ïîñëå ñòåðèëèçàöèè íå äîëæíû ñîäåðæàòü ïóçûðüêîâ âîçäóõà.
6.2 Áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé ëàêòîçíûé æåë÷íûé áóëüîí
6.2.1 Ñîñòàâ:ôåðìåíòàòèâíûé ïåðåâàð êàçåèíà . . . . . . . . . . . 10 ã;ëàêòîçà (Ñ12Í22Î11 � Í2Î) . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 ã;æåë÷ü . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 ã;áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,0133 ã
(èëè 2,66 ñì3
ðàñòâîðà,
ïðèãîòîâëåííîãî ïî 6.2.3, â ñëó÷àå
ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû èç îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);
âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1000 ñì3.6.2.2 ÏðèãîòîâëåíèåÏðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ ãîòîâóþ ñðåäó â âîäå. Óñòàíàâ-
ëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë (7,2 � 0,2) ïðè òåìïåðàòóðå 25 °Ñ. Ðàçëèâàþò èñòåðèëèçóþò ñðåäó ïî 6.1.2.
6.2.3 Ðàñòâîð áðèëëèàíòîâîãî çåëåíîãî
6.2.3.1 Ñîñòàâ:
áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé . . . . . . . . . . . . . . . . 0,5 ã;
âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 ñì.3
6.2.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â äèñ-
òèëëèðîâàííîé âîäå. Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé
äî ìåòêè.
6.3 Ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà (áóëüîí Ìàê-Êîíêè)
6.3.1 Ñîñòàâ áóëüîíà Ìàê-Êîíêè ïðèâåäåí â òàáëèöå 2.
Ò à á ë è ö à 2
Ñîñòàâ ñðåäû
à)
Ñðåäà äâîéíîé
êîíöåíòðàöèè
á)
Ñðåäà íîðìàëüíîé
êîíöåíòðàöèè
Ïåïòîí, ãËàêòîçà (Ñ12Í22Î11 � Í2Î), ãÆåë÷ü, ã
402010
20105
4
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Îêîí÷àíèå òàáëèöû 2
Ñîñòàâ ñðåäû
à)
Ñðåäà äâîéíîé
êîíöåíòðàöèè
á)
Ñðåäà íîðìàëüíîé
êîíöåíòðàöèè
Ðàñòâîð áðîìêðåçîëîâîãî ïóðïóðîâîãî, ñì3
Íàòðèé õëîðèñòûé, ãÂîäà, ñì
3
210
1000
15
1000
6.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ïðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû â âîäå. Íàãðåâàþò íà ñëàáîì îãíå äî êèïåíèÿ, êèïÿ-
òÿò 1—2 ìèí, ôèëüòðóþò ÷åðåç âàòíî-ìàðëåâûé ôèëüòð, äîâîäÿò îáúåì äî 1 äì3, îõëàæäàþò äî
45 °Ñ — 55 °Ñ è óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë ïðè òåìïåðàòóðå
25 °Ñ (7,2 � 0,1). Ðàçëèâàþò è ñòåðèëèçóþò ñðåäó ïî 6.1.2.
6.3.3 Ðàñòâîð áðîìêðåçîëîâîãî ïóðïóðîâîãî
6.3.3.1 Ñîñòàâ:
áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 ã;
ðàñòâîð ãèäðîîêèñè íàòðèÿ ñ (NaOH) = 0,1 ìîëü/äì3 . . . . . . . . . . . . 19 ñì
3;
âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 80 ñì3.
6.3.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Áðîìêðåçîëîâûé ïóðïóðîâûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó ñ 19 ñì3 ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè
íàòðèÿ ñ(NaOH) = 0,1 ìîëü/äì3 è ïîñëå ðàñòâîðåíèÿ äîáàâëÿþò âîäó.
6.4 Ñåëåêòèâíàÿ îáîãàòèòåëüíàÿ ñðåäà (ñðåäà Êåññëåðà)
6.4.1 Ñîñòàâ ñðåäû Êåññëåðà ïðèâåäåí â òàáëèöå 3.
Ò à á ë è ö à 3
Ñîñòàâ ñðåäû
à)
Ñðåäà äâîéíîé
êîíöåíòðàöèè
á)
Ñðåäà íîðìàëüíîé
êîíöåíòðàöèè
Ïåïòîí, ãËàêòîçà (Ñ12Í22Î11·Í2Î), ãÆåë÷ü, ãÐàñòâîð êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî, ñì
3
Âîäà, ñì3
205104
1000
102,552
1000
6.4.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ïðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû â âîäå. Íàãðåâàþò íà ñëàáîì îãíå äî êèïåíèÿ, êèïÿ-
òÿò 1—2 ìèí, ôèëüòðóþò ÷åðåç âàòíî-ìàðëåâûé ôèëüòð, äîâîäÿò îáúåì äî 1 äì3, îõëàæäàþò äî
45 °Ñ — 55 °Ñ è óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë ïðè òåìïåðàòóðå
25 °Ñ (7,2 � 0,1).
Ðàçëèâàþò ñðåäó ïî 6.1.2 è ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå (115 � 1) °Ñ â òå÷åíèå
20 ìèí.
6.4.3 Ðàñòâîð êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî
6.4.3.1 Ñîñòàâ:
êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé . . . . . . . . . . . . . 1 ã;
âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 ñì3.
6.4.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â
âîäå. Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî ìåòêè.
6.5 Êðèñòàëë âèîëåò íåéòðàëüíûé êðàñíûé æåë÷íûé ëàêòîçíûé àãàð (VRBL — àãàð)
6.5.1 Ñîñòàâ:ôåðìåíòàòèâíûé ïåðåâàð æèâîòíûõ òêàíåé . . . . . . 7 ã;äðîææåâîé ýêñòðàêò . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 ã;
5
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
ëàêòîçà (Ñ12Í22Î11 � Í2Î) . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 ã;õëîðèñòûé íàòðèé . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 ã;æåë÷íûå ñîëè . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1,5 ã;íåéòðàëüíûé êðàñíûé . . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,03 ã
(èëè 1 ñì3
ðàñòâîðà,
ïðèãîòîâëåííîãî ïî 6.5.3, â ñëó÷àå
ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû èç
îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);
êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé. . . . . . . . . . . . . . 0,002 ã(èëè 0,2 ñì
3ðàñòâîðà,
ïðèãîòîâëåííîãî ïî 6.4.3,
â ñëó÷àå ïðèãîòîâëåíèÿ
ñðåäû èç îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ);
àãàð . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12—18 ã(çàâèñèò îò æåëèðóþùåé
ñïîñîáíîñòè àãàðà);âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1000 ñì3.
6.5.2 ÏðèãîòîâëåíèåÎñíîâíàÿ öåëü ïðàâèëüíîãî ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû — ïîëó÷åíèå íåîáõîäèìîé ñåëåêòèâíîé ñïî-
ñîáíîñòè è ñïåöèôè÷íîñòè ñðåäû.Òùàòåëüíî ðàçìåøèâàþò êîìïîíåíòû èëè äåãèäðàòèðîâàííóþ ãîòîâóþ ñðåäó â âîäå è îñòàâëÿþò
íà íåñêîëüêî ìèíóò. Óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû ïîñëå êèïåíèÿ îí ñîñòàâëÿë (7,4 � 0,2) ïðè òåìïåðàòó-ðå 25 °Ñ. Íàãðåâàþò äî êèïåíèÿ, ïîìåøèâàÿ âðåìÿ îò âðåìåíè. Ïîñëå 2 ìèí êèïåíèÿ íåìåäëåííî îõëàæ-äàþò â âîäÿíîé áàíå ïðè òåìïåðàòóðå 44 °Ñ — 47 °Ñ. Èçáåãàþò ïåðåãðåâà ñðåäû, íå ïðèìåíÿÿâòîðè÷íîãî íàãðåâàíèÿ. Ñðåäó íå ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå. Êîíòðîëèðóþò ñòåðèëüíîñòü ñðåäû âî âðå-ìÿ èñïîëüçîâàíèÿ. Èñïîëüçóþò ñðåäó â òå÷åíèå 4 ÷àñ ïîñëå ïðèãîòîâëåíèÿ.
6.5.3 Ðàñòâîð íåéòðàëüíîãî êðàñíîãî
6.5.3.1 Ñîñòàâ:
íåéòðàëüíûé êðàñíûé . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 ã;
âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 ñì3.
6.5.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Íåéòðàëüíûé êðàñíûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â äèñòèë-
ëèðîâàííîé âîäå. Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî
ìåòêè.
6.6 Àãàð ëàêòîçíûé ñ áðèëëèàíòîâûì çåëåíûì è ôåíîëîâûì êðàñíûì
6.6.1 Ñîñòàâ:ìÿñíîé ýêñòðàêò. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 ã;
ïåïòîí . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10 ã;
ëàêòîçà (Ñ12Í22Î11 �Í 2Î) . . . . . . . . . . . . . . . . 10 ã;
õëîðèñòûé íàòðèé. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 ã;
äâóçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé êàëèé (Ê2ÍÐÎ4) . . 0,5 ã;
ðàñòâîð ôåíîëîâîãî êðàñíîãî ïî 6.6.3 . . . . . . . . 40 ñì3;
ðàñòâîð áðèëëèàíòîâîãî çåëåíîãî ïî 6.2.3. . . . . . 2 ñì3;
àãàð . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12—18 ã
(çàâèñèò îò æåëèðóþùåé
ñïîñîáíîñòè àãàðà);
âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1000 ñì3.
6.6.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ïðè íàãðåâàíèè ðàñòâîðÿþò â âîäå êîìïîíåíòû. Ïðè îòñóòñòâèè ìÿñíîãî ýêñòðàêòà äîïóñ-
êàåòñÿ èñïîëüçîâàòü âìåñòî ìÿñíîãî ýêñòðàêòà, ïåïòîíà è äèñòèëëèðîâàííîé âîäû ìÿñîïåïòîí-
íûé áóëüîí, ïðèãîòîâëåííûé ïî ÃÎÑÒ 10444.1. Ñìåñü íàãðåâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ
êîìïîíåíòîâ, äîâîäÿò îáúåì äî 1 äì3, îõëàæäàþò äî 45 °Ñ — 55 °Ñ, óñòàíàâëèâàþò ðÍ òàê, ÷òîáû
ïîñëå ñòåðèëèçàöèè îí ñîñòàâëÿë ïðè òåìïåðàòóðå 25 °Ñ (7,0 � 0,1), ðàçëèâàþò ìåðíî â êîëáû èëè
ôëàêîíû. Ñðåäó ñòåðèëèçóþò ïðè òåìïåðàòóðå (115 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí, çàòåì îõëàæäàþò
6
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
äî 45 °Ñ — 55 °Ñ. Ïîñëå ñòåðèëèçàöèè ïðèáàâëÿþò ðàñòâîð ôåíîëîâîãî êðàñíîãî è ðàñòâîð áðèë-
ëèàíòîâîãî çåëåíîãî.
6.6.3 Ðàñòâîð ôåíîëîâîãî êðàñíîãî
6.6.3.1 Ñîñòàâ:
ôåíîëîâûé êðàñíûé . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,2 ã;
âîäà . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 ñì3.
6.6.3.2 Ïðèãîòîâëåíèå
Ôåíîëîâûé êðàñíûé ïåðåíîñÿò â ôàðôîðîâóþ ñòóïêó è ïîñòåïåííî ðàñòâîðÿþò â äèñòèëëè-
ðîâàííîé âîäå. Ðàñòâîð ïåðåëèâàþò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è äîâîäÿò âîäîé äî ìåò-
êè.
6.7 Àãàð Ýíäî
Ñðåäó ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèè íà ýòèêåòêå.
6.8 Ñðåäà Ãèññà ñ ëàêòîçîé
Ñðåäó ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèè íà ýòèêåòêå èëè ïî ÃÎÑÒ 10444.1.
6.9 ÃÐÌ- àãàð (ñóõîé ïèòàòåëüíûé àãàð íà îñíîâå ãèäðîëèçàòà ðûáíîé ìóêè äëÿ êóëüòè-
âèðîâàíèÿ áàêòåðèé)
Ñðåäó ãîòîâÿò ïî èíñòðóêöèè íà ýòèêåòêå.
6.10 Ìÿñîïåïòîííûé àãàð
Ñðåäó ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1.
6.11 Ïðè èñïîëüçîâàíèè äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïèòàòåëüíûõ ñðåä íàòóðàëüíîé ãîâÿæüåé æåë÷è
åé çàìåíÿþò ñóõóþ (1 ã ñóõîé æåë÷è ðàâåí 10 ñì3 íàòóðàëüíîé æåë÷è). Ïðè ýòîì êîëè÷åñòâî äèñòèë-
ëèðîâàííîé âîäû, èñïîëüçóåìîé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåä, óìåíüøàþò íà êîëè÷åñòâî íàòóðàëüíîé
æåë÷è (ò.å. îáùèé îáüåì ñðåäû äîëæåí áûòü ðàâåí 1 äì3 ).
6.12 Ðàñòâîðû, ïðèãîòîâëåííûå ïî 6.2.3, 6.3.3, 6.4.3, 6.5.3 è 6.6.3, õðàíÿò â çàêðûòûõ ñîñóäàõ
èç òåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå íå áîëåå 3 ìåñ.
6.13 Ðàñòâîðû è ðåàêòèâû äëÿ îêðàñêè ïî Ãðàìó ãîòîâÿò ïî ÃÎÑÒ 10444.1.
6.14 Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ãîòîâûõ è äåãèäðàòèðîâàííûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä, â ò.÷. õðî-
ìîãåííûõ, îòå÷åñòâåííîãî è èìïîðòíîãî ïðîèçâîäñòâà, çàðåãèñòðèðîâàííûõ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðà-
öèè.
7 Àïïàðàòóðà, ïîñóäà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû
Ïðèåìëåìîé àëüòåðíàòèâîé ïîñóäå ìíîãîðàçîâîãî ïðèìåíåíèÿ ÿâëÿåòñÿ îäíîðàçîâàÿ ïîñóäà,
åñëè îíà îòâå÷àåò ñîîòâåòñòâóþùèì òðåáîâàíèÿì.
Èñïîëüçóþò îáû÷íîå ëàáîðàòîðíîå îáîðóäîâàíèå è ðåàêòèâû äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäî-âàíèé ïî ÃÎÑÒ Ð 51446, ÃÎÑÒ 10444.1 ñî ñëåäóþùèìè äîïîëíåíèÿìè:
- âåñû ëàáîðàòîðíûå ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ 200 ã (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ðåàêòèâîâ)
ñ ïðåäåëîì äîïóñêàåìîé àáñîëþòíîé ïîãðåøíîñòè îäíîêðàòíîãî âçâåøèâàíèÿ íå áîëåå � 0,01 ìã ïî
ÃÎÑÒ 24104;
- âåñû ëàáîðàòîðíûå ñ íàèáîëüøèì ïðåäåëîì âçâåøèâàíèÿ 1 êã (äëÿ âçâåøèâàíèÿ ïðîäóêòà) ñ
ïðåäåëîì äîïóñêàåìîé àáñîëþòíîé ïîãðåøíîñòè îäíîêðàòíîãî âçâåøèâàíèÿ íå áîëåå � 20 ìã ïî
ÃÎÑÒ 24104;
- ìèêðîñêîï áèîëîãè÷åñêèé, îáåñïå÷èâàþùèé ïðîñìîòð â ïðîõîäÿùåì ñâåòå, ñ óâåëè÷åíèåì
900õ — 1000õ;
- ïðèáîð äëÿ ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè;
- áàêòåðèîëîãè÷åñêàÿ ïåòëÿ ïëàòèíî-èðèäèåâàÿ èëè íèêåëü-õðîìîâàÿ ïðèáëèçèòåëüíî 3 ìì â äè-àìåòðå;
- ñòåêëà ïðåäìåòíûå ïî ÃÎÑÒ 9284;
- ïðîáèðêè ðàçìåðîì ïðèáëèçèòåëüíî 16 � 160 ìì è 20 � 200 ìì ïî ÃÎÑÒ 25336;- ïðîáèðêè Äàðõàì (ïîïëàâêè), ðàçìåðîì, ïîäõîäÿùèì äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â ïðîáèðêàõ ðàçìåðîì
16 � 160 ìì;- òåðìîñòàò ñ äèàïàçîíîì ðàáî÷èõ òåìïåðàòóð 28 °Ñ — 55 °Ñ, ïîçâîëÿþùèé ïîääåðæèâàòü çàäàí-
íóþ òåìïåðàòóðó ñ äîïóñòèìîé ïîãðåøíîñòüþ � 1°Ñ;- áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé;
7
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
- æåë÷ü ãîâÿæüÿ ñóõàÿ èëè íàòóðàëüíàÿ;- ìÿñíîé ýêñòðàêò;- íåéòðàëüíûé êðàñíûé;- òðèïòè÷åñêèé ãèäðîëèçàò æåëàòèíû;- òðèïòîçà;- ôåíîëîâûé êðàñíûé;- ôåðìåíòàòèâíûé ïåðåâàð æèâîòíûõ òêàíåé;- ôåðìåíòàòèâíûé ïåðåâàð êàçåèíà;- ôåðìåíòàòèâíûé ïåðåâàð ìîëîêà è æèâîòíûõ ïðîòåèíîâ;- äðîææåâîé ýêñòðàêò.
8 Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá
Îòáîð è ïîäãîòîâêà ïðîá ïî ÃÎÑÒ 26668, ÃÎÑÒ 26669.
Âàæíî, ÷òîáû äëÿ èñïûòàíèÿ ïîñòóïèëà ïðåäñòàâèòåëüíàÿ ïðîáà, íå ïîâðåæäåííàÿ è íå èçìå-
íåííàÿ â õîäå òðàíñïîðòèðîâàíèÿ èëè õðàíåíèÿ.
9 Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ
Ñõåìà ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ïðèâåäåíà â ïðèëîæåíèè À.
9.1 Ìåòîä âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé
9.1.1 Íàâåñêà è èñõîäíîå ðàçâåäåíèåÎòáîð íàâåñîê è ïðèãîòîâëåíèå èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ — ïî ÃÎÑÒ 26669.
9.1.2 Èíîêóëÿöèÿ è èíêóáàöèÿ9.1.2.1 Â çàâèñèìîñòè îò òðåáóåìûõ ïðåäåëîâ âûÿâëåíèÿ õ ñì3 æèäêîé ïðîáû èëè õ ñì3 èñõîäíîé
ñóñïåíçèè ïðè èñïîëüçîâàíèè äðóãèõ ïðîäóêòîâ ïåðåíîñÿò â ïðîáèðêó, ñîäåðæàùóþ 10 ñì3 îáîãàòèòåëü-íîé ñåëåêòèâíîé ñðåäû äâîéíîé êîíöåíòðàöèè [ñì. òàáëèöû 1à, 2à, 3à], êîãäà 1ñì3 < õ �10 ñì3, èëè â ïðî-áèðêó, ñîäåðæàùóþ 10 ñì3 îáîãàòèòåëüíîé ñåëåêòèâíîé ñðåäû íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè [ñì. òàáëèöû1á, 2á, 3á] , åñëè õ � 1 ñì3.
Ïðè èñïûòàíèè âûñîêîêèñëîòíûõ ïðîäóêòîâ äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ðåçêîãî ñíèæåíèÿ ðÍ (íà 0,5
è áîëåå) ïèòàòåëüíûõ ñðåä ïîñëå âíåñåíèÿ â íèõ ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèÿ ðÍ ïèòàòåëüíûõ ñðåä
äîâîäÿò äî äîïóñòèìûõ çíà÷åíèé ñ ïîìîùüþ ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè íàòðèÿ, ïðèãîòîâ-
ëåííîãî ïî ÃÎÑÒ 10444.1, èëè ïðè ïðèãîòîâëåíèè ïèòàòåëüíûõ ñðåä ðÍ óñòàíàâëèâàþò âûøå çà-
äàííîãî ñ ó÷åòîì åãî ïîñëåäóþùåãî ñíèæåíèÿ ïðè âíåñåíèè ïðîäóêòà. Êîëè÷åñòâî äîáàâëÿåìîãî
ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè íàòðèÿ èëè âåëè÷èíó, íà êîòîðóþ íåîáõîäèìî óâåëè÷èòü ðÍ ïðè
ïðèãîòîâëåíèè ïèòàòåëüíûõ ñðåä, óñòàíàâëèâàþò îïûòíûì ïóòåì.
Äîïóñêàåòñÿ äîâîäèòü ðÍ äî íåéòðàëüíîãî çíà÷åíèÿ ñ ïîìîùüþ ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðà ãèäðî-
îêèñè íàòðèÿ â ñàìîì âûñîêîêèñëîòíîì ïðîäóêòå.
9.1.2.2 Ïðîáèðêè ñ ïîñåâàìè â ñðåäó äâîéíîé êîíöåíòðàöèè (ñì. 9.1.2.1) èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðà-òóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 2) ÷.
9.1.2.3 Ïðîáèðêè ñ ïîñåâàìè â ñðåäó íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè (ñì. 9.1.2.1) èíêóáèðóþò ïðè òåì-ïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 2) ÷. Åñëè íåò îáðàçîâàíèÿ ãàçà èëè ïîìóòíåíèÿ, çàòðóäíÿþùåãî âû-ÿâëåíèå ãàçà, ïðîäîëæàþò èíêóáàöèþ åùå (24 � 2)÷.
9.1.3 Ïîäòâåðæäåíèå9.1.3.1 Èç ïðîáèðîê (ñì. 9.1.2.2) ïîñëå èíêóáàöèè èíîêóëèðóþò ïåòëåé ïîäòâåðæäàþùóþ ñðåäó
íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè (ñì. 6.1 — 6.4). Ïîñåâû èíêóáèðóþò â òåðìîñòàòå ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñâ òå÷åíèå (24 � 2) ÷, åñëè íåò îáðàçîâàíèÿ ãàçà, òî ïðîäîëæàþò íàáëþäåíèå äî (48 � 2) ÷.
 êà÷åñòâå àðáèòðàæíîé ñðåäû èñïîëüçóþò áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé ëàêòîçíûé æåë÷íûé áóëüîí.9.1.3.2 Ïîâòîðÿþò ïðîöåäóðó, îïèñàííóþ â 9.1.3.1, äëÿ ïðîáèðîê ïîñëå èíêóáàöèè ïî 9.1.2.3, â êî-
òîðûõ îòìå÷åíî îáðàçîâàíèå ãàçà èëè ïîìóòíåíèå, ïðåïÿòñòâóþùåå âûÿâëåíèþ îáðàçîâàíèÿ ãàçà, ïî-ñëå (24 � 2) ÷ èëè ïîñëå (48 � 2) ÷ èíêóáèðîâàíèÿ.
9.1.4 Îöåíêà ðåçóëüòàòîâ
Âîçìîæíûå ñëó÷àè îöåíêè ðåçóëüòàòîâ ïðèâåäåíû â ïðèëîæåíèè À.
Ïðîáèðêè ïî 9.1.3.1 èëè 9.1.3.2, â êîòîðûõ îòìå÷åíî îáðàçîâàíèå ãàçà ïîñëå (24 � 2) ÷ èëè ïîñëå(48 � 2) ÷, ñ÷èòàþò ïîëîæèòåëüíûìè.
8
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ïðè âûÿâëåíèè êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé îòìå÷àþò ïðèñóòñòâèå èëè îòñóòñòâèå èõ â íàâåñêå õ ã èëèõ ñì3 ïðîäóêòà.
9.2 Ìåòîä ÍÂ× — îïðåäåëåíèå êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé
Ïðè îïðåäåëåíèè êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïî ìåòîäó ÍÂ× âûñåâàþò íå ìåíåå òðåõ ïî-ñëåäîâàòåëüíûõ íàâåñîê ïðîäóêòà è (èëè) åãî ðàçâåäåíèé, îòëè÷àþùèåñÿ ïî êîëè÷åñòâó ïðîäóêòà â íèõâ 10 ðàç.
9.2.1 Íàâåñêà, èñõîäíàÿ ñóñïåíçèÿ è ðàçâåäåíèÿÎòáîð íàâåñîê, ïðèãîòîâëåíèå èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ è äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé ïðîâîäÿò
ïî ÃÎÑÒ 26669.
Ãîòîâÿò äîñòàòî÷íîå ÷èñëî ðàçâåäåíèé ïî ÃÎÑÒ 26669, ãàðàíòèðóÿ, ÷òî âñå ïðîáèðêè, ñîîòâåò-ñòâóþùèå êîíå÷íîìó ðàçâåäåíèþ, ïîêàæóò îòðèöàòåëüíûé ðåçóëüòàò.
9.2.2 Èíîêóëÿöèÿ è èíêóáàöèÿ9.2.2.1 Èñïîëüçóþò òðè ïðîáèðêè äëÿ êàæäîé íàâåñêè ïðîäóêòà è (èëè) åãî ðàçâåäåíèÿ.9.2.2.2 Ñòåðèëüíîé ïèïåòêîé ïåðåíîñÿò â êàæäóþ èç òðåõ ïðîáèðîê ñ îäíîé èç ñåëåêòèâíûõ îáîãà-
òèòåëüíûõ ñðåä äâîéíîé êîíöåíòðàöèè [ñì. òàáëèöû 1à, 2à, 3à ] 10 ñì3 ïðîáû, åñëè îíà æèäêàÿ, èëè10 ñì3 èñõîäíîé ñóñïåíçèè ïðè èñïîëüçîâàíèè äðóãèõ ïðîäóêòîâ.
Êàæäóþ íàâåñêó ïðîäóêòà â òðåõêðàòíîé ïîâòîðíîñòè âûñåâàþò â ñðåäó äâîéíîé êîíöåíòðàöèè âïðîáèðêè ðàçìåðîì 20 � 200 ìì.
Ñîîòíîøåíèå ìåæäó êîëè÷åñòâîì âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà è ïèòàòåëüíîé ñðåäîé äâîéíîé êîí-
öåíòðàöèè 1 : 1.
9.2.2.3 Äðóãîé ñòåðèëüíîé ïèïåòêîé ïåðåíîñÿò â êàæäóþ èç òðåõ ïðîáèðîê ñ îäíîé èç ñåëåêòèâíûõîáîãàòèòåëüíûõ ñðåä íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè [ñì. òàáëèöû 1á, 2á, 3á] 1 ñì3 ïðîáû, åñëè ïðîäóêò æèä-êèé, èëè 1 ñì3 èñõîäíîé ñóñïåíçèè ïðè èñïîëüçîâàíèè äðóãèõ ïðîäóêòîâ.
Êàæäóþ íàâåñêó ïðîäóêòà è (èëè) åãî ðàçâåäåíèÿ â òðåõêðàòíîé ïîâòîðíîñòè âûñåâàþò â ïðîáèðêèðàçìåðîì 16 � 160 ìì.
Ñîîòíîøåíèå ìåæäó êîëè÷åñòâîì âûñåâàåìîãî ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèåì è ïèòàòåëüíîé
ñðåäîé 1 : 10.
9.2.2.4 Êàæäîå ïîñëåäóþùåå ðàçâåäåíèå âûñåâàþò â ñîîòâåòñòâèè ñ 9.2.2.3, èñïîëüçóÿ íîâóþñòåðèëüíóþ ïèïåòêó. Îñòîðîæíî ïåðåìåøèâàþò èíîêóëóì è ñðåäó.
9.2.2.5 Ïðîáèðêè ñ ïîñåâàìè â ñðåäó äâîéíîé êîíöåíòðàöèè (ñì. 9.2.2.2) èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðà-òóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 2) ÷.
9.2.2.6 Ïðîáèðêè ñ ïîñåâàìè â ñðåäó íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè (ñì. 9.2.2.3 è 9.2.2.4) èíêóáèðóþòïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 2) ÷. Åñëè íåò îáðàçîâàíèÿ ãàçà è/èëè ïîìóòíåíèÿ, ïðåïÿò-ñòâóþùåãî âûÿâëåíèþ îáðàçîâàíèÿ ãàçà, ïðîäîëæàþò èíêóáèðîâàíèå åùå (24 � 2) ÷.
9.2.3 Ïîäòâåðæäåíèå9.2.3.1 Èç êàæäîé ïðîáèðêè ïîñëå èíêóáàöèè ïî 9.2.2.5 èíîêóëèðóþò ïåòëåé ïîäòâåðæäàþùóþ
ñðåäó (6.1á — 6.4á). Ïîñåâû èíêóáèðóþò â òåðìîñòàòå ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 2) ÷.Åñëè íåò îáðàçîâàíèÿ ãàçà è/èëè ïîìóòíåíèÿ, òî ïðîäîëæàþò èíêóáèðîâàíèå åùå (24 � 2) ÷.
 êà÷åñòâå àðáèòðàæíîé ñðåäû èñïîëüçóþò áðèëëèàíòîâûé çåëåíûé ëàêòîçíûé æåë÷íûé áóëüîí.9.2.3.2 Ïîâòîðÿþò ïðîöåäóðó, îïèñàííóþ â 9.2.3.1 äëÿ ïðîáèðîê ïîñëå èíêóáàöèè ïî 9.2.2.6, ïîêà-
çàâøèõ îáðàçîâàíèå ãàçà è/èëè ïîìóòíåíèå ïîñëå (24 � 2) ÷ èëè ïîñëå (48 � 2) ÷.Äîïóñêàåòñÿ íå ïðîâîäèòü ïåðåñåâ íà æèäêóþ ïîäòâåðæäàþùóþ ñðåäó ïðè ÿâíîì ãàçîîáðàçî-
âàíèè íà æèäêèõ ñðåäàõ íîðìàëüíîé êîíöåíòðàöèè, ñ÷èòàÿ ïðè ýòîì ýòè ïîñåâû ïîëîæèòåëüíûìè.
9.2.4 Îöåíêà ðåçóëüòàòîâ
Âîçìîæíûå ñëó÷àè îöåíêè ðåçóëüòàòîâ ïðèâåäåíû â ïðèëîæåíèè À.
Äëÿ êàæäîé íàâåñêè ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàçâåäåíèÿ ïîäñ÷èòûâàþò ÷èñëî ïðîáèðîê, â êîòîðûõ îáíàðó-æåíî îáðàçîâàíèå ãàçà (ïîëîæèòåëüíûå ïðîáèðêè) ïîñëå (24 � 2) ÷ è (åñëè èñïîëüçîâàëè) ïîñëå (48 � 2) ÷.
9.2.5 Ïîäñ÷åò è âûðàæåíèå ðåçóëüòàòîâÏîäñ÷èòûâàþò íàèáîëåå âåðîÿòíîå ÷èñëî, èñõîäÿ èç ÷èñëà ïîëîæèòåëüíûõ ïðîáèðîê â êàæäîé íà-
âåñêå ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàçâåäåíèè. Ïî ÃÎÑÒ 26670 îïðåäåëÿþò ÍÂ× êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé â 1 ã èëè1 ñì3 ïðîäóêòà.
9.3 Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé — ïîäñ÷åò êîëîíèé
9.3.1 Íàâåñêà è èñõîäíîå ðàçâåäåíèåÎòáîð íàâåñîê è ïðèãîòîâëåíèå èñõîäíîãî ðàçâåäåíèÿ — ïî ÃÎÑÒ 26669.
9
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
9.3.2 Èíîêóëÿöèÿ è èíêóáàöèÿ9.3.2.1 Äëÿ ïîñåâà æèäêîãî ïðîäóêòà è/èëè êàæäîãî ðàçâåäåíèÿ èñïîëüçóþò äâå ïàðàëëåëüíûå
÷àøêè Ïåòðè. Ïåðåíîñÿò ñòåðèëüíîé ïèïåòêîé 1 ñì3 æèäêîãî ïðîäóêòà èëè ñîîòâåòñòâóþùåãî ðàçâåäå-íèÿ â öåíòð êàæäîé ÷àøêè. Ïðè ïîñåâå æèäêîãî ïðîäóêòà è/èëè êàæäîãî ðàçâåäåíèÿ â ÷àøêó Ïåòðè èñ-ïîëüçóþò îòäåëüíóþ ñòåðèëüíóþ ïèïåòêó.
9.3.2.2  êàæäóþ ÷àøêó Ïåòðè (9.3.2.1) íàëèâàþò îêîëî 15 ñì3 îäíîé èç ñðåä (6.5 — 6.7) òåìïåðà-òóðîé 44 °Ñ — 47 °Ñ. Âðåìÿ, ïðîøåäøåå ìåæäó ïîñåâîì ïðîäóêòà è/èëè åãî ðàçâåäåíèÿ â ÷àøêó Ïåòðè èçàëèâêîé ñðåäû, íå äîëæíî ïðåâûøàòü 15 ìèí.
Àêêóðàòíî ïåðåìåøèâàþò èíîêóëÿò ñî ñðåäîé è îñòàâëÿþò ñìåñü äëÿ çàñòûâàíèÿ, äëÿ ýòîãî ÷àøêèÏåòðè ïîìåùàþò íà õîëîäíóþ ãîðèçîíòàëüíóþ ïîâåðõíîñòü.
 êà÷åñòâå àðáèòðàæíîé ñðåäû èñïîëüçóþò VRBL — àãàð.
Ïàðàëëåëüíî äëÿ êîíòðîëÿ ñòåðèëüíîñòè àãàðèçîâàííîé ñðåäû â ñòåðèëüíóþ ÷àøêó Ïåòðè íàëèâà-þò ïðèáëèçèòåëüíî 15 ñì3 ñðåäû è èíêóáèðóþò âìåñòå ñ ïîñåâàìè.
9.3.2.3 Ïîñëå çàñòûâàíèÿ ñðåäû â ÷àøêàõ Ïåòðè íà åå ïîâåðõíîñòü íàëèâàþò îêîëî 4 ñì3 èñïîëü-çîâàííîé àãàðèçîâàííîé ñðåäû (6.5 — 6.7) òåìïåðàòóðîé 44 °Ñ — 47 °Ñ äëÿ ñîçäàíèÿ âòîðîãî ñëîÿ. Äî-áàâëåííàÿ ñðåäà äîëæíà çàòâåðäåòü, êàê îïèñàíî â 9.3.2.2.
9.3.2.4 Ïðè îïðåäåëåíèè êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïîñåâîì íà àãàðèçîâàííûå ñåëåêòèâíî-äèàã-
íîñòè÷åñêèå ñðåäû (6.5 — 6.7) ïî 0,1 èëè 0,2 ñì3
íàâåñêè ïðîäóêòà èëè åãî ðàçâåäåíèÿ íàíîñÿò íà ïî-
âåðõíîñòü îäíîé èç ýòèõ ñðåä, ðàçëèòûõ â äâå ïàðàëëåëüíûå ÷àøêè Ïåòðè. Ïîäãîòîâêó ÷àøåê Ïåòðè
ñî ñðåäîé ê ïîñåâó è ïîñåâ ïðîâîäÿò ïî ÃÎÑÒ 26670.
Ïðè ïðèìåíåíèè ìåòîäà ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâ ïî ÃÎÑÒ 26670 ôèëüòðû ïåðåíîñÿò íà ïîâåð-
õíîñòü àãàðèçîâàííîé ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêîé ñðåäû, èçáåãàÿ îáðàçîâàíèÿ ïóçûðüêîâ âîçäóõà
ìåæäó ñðåäîé è ôèëüòðîì. Ïîâåðõíîñòü ôèëüòðà ñ îñåâøèìè íà íåé áàêòåðèÿìè äîëæíà áûòü îáðà-
ùåíà ââåðõ.
Ïðè ïîñåâå ìåòîäîì ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâ íà íèõ ïîäñ÷èòûâàþò êîëè÷åñòâî êîëîíèé è â òîì
ñëó÷àå, åñëè èõ ìåíåå 15.
9.3.2.5 Ïåðåâîðà÷èâàþò êðûøêîé âíèç ïðèãîòîâëåííûå ÷àøêè ïî 9.3.2.3 è 9.3.2.4 è èíêóáèðóþò âòåðìîñòàòå ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 2) ÷.
9.3.3 Ïîäñ÷åò êîëè÷åñòâà êîëîíèéÏîñëå èíêóáàöèè ïî 9.3.2.5 îòáèðàþò ÷àøêè, íà êîòîðûõ âûðîñëî îò 15 äî 150 êîëîíèé. Ïîñåâû
ïðîñìàòðèâàþò è îòìå÷àþò ðîñò òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé.Íà VRBL-àãàðå òèïè÷íûå êîëîíèè êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïóðïóðíî-êðàñíûå äèàìåòðîì íå ìåíåå
0,5 ìì, èíîãäà îêðóæåíû êðàñíîâàòîé çîíîé ïðåöèïèòàòà (îñàäêà) æåë÷è.Íà àãàðå ñ áðèëëèàíòîâûì çåëåíûì è ôåíîëîâûì êðàñíûì òèïè÷íûå êîëîíèè êîëèôîðìíûõ
áàêòåðèé çåëåíîâàòûå, îêðóæåííûå ÿðêîé æåëòî-çåëåíîé çîíîé.
Íà ñðåäå Ýíäî òèïè÷íûå êîëîíèè êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé îò ðîçîâîãî äî êðàñíîãî öâåòà, ÷àñ-
òî ñ ìåòàëëè÷åñêèì áëåñêîì.
Àòèïè÷íûå êîëîíèè îòëè÷àþòñÿ îò òèïè÷íûõ ïî öâåòó è ðàçìåðó. Ê àòèïè÷íûì îòíîñÿò òàêæå âñå òè-ïè÷íûå êîëîíèè, âûðîñøèå â ðåçóëüòàòå ôåðìåíòàöèè ñàõàðîâ, çà èñêëþ÷åíèåì ëàêòîçû, ñîäåðæàùèõ-ñÿ â ïèùåâûõ ïðîäóêòàõ. Òàêèå êîëîíèè íå áóäóò ïðèíàäëåæàòü ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì.
Ïîäñ÷èòûâàþò íà àãàðèçîâàííûõ ñðåäàõ îòäåëüíî êîëè÷åñòâî òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé.9.3.4 Ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè áàêòåðèé èç êîëîíèé ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿìÎòáèðàþò íå ìåíåå ÷åì ïî ïÿòü àòèïè÷íûõ è òèïè÷íûõ êîëîíèé. Êàæäóþ îòîáðàííóþ êîëîíèþ ïå-
ðåñåâàþò â ïðîáèðêè ñ îäíîé èç æèäêèõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä, ïðèãîòîâëåííîé ïî 6.1 — 6.4. êà÷åñòâå àðáèòðàæíîé ñðåäû èñïîëüçóþò ëàêòîçíûé áóëüîí ñ áðèëëèàíòîâûì çåëåíûì è æåë-
÷üþ.Ðîñò ñ ãàçîîáðàçîâàíèåì ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå 24 ÷ óêàçûâàåò íà ïðèíàäëåæíîñòü
áàêòåðèé èç àòèïè÷íûõ è òèïè÷íûõ êîëîíèé ê êîëèôîðìíûì.9.3.5 Ïîäñ÷åò è âûðàæåíèå ðåçóëüòàòîâÅñëè ïðè ïîäòâåðæäåíèè òèïè÷íûõ èëè àòèïè÷íûõ êîëîíèé â 80 % ñëó÷àåâ, òî åñòü íå ìåíåå ÷åì â
÷åòûðåõ èç ïÿòè êîëîíèé, ïîäòâåðæäåí ðîñò êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé, òî ñ÷èòàþò, ÷òî âñå êîëîíèè, âûðîñ-øèå íà ÷àøêå Ïåòðè (ñì. 9.3.3), ïðèíàäëåæàò ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì.  îñòàëüíûõ ñëó÷àÿõ êîëè÷åñ-
10
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
òâî êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé îïðåäåëÿþò, èñõîäÿ èç ïðîöåíòíîãî îòíîøåíèÿ ïîäòâåðæäåííûõ êîëîíèé êîáùåìó êîëè÷åñòâó êîëîíèé, âçÿòûõ äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ.
Ïåðåñ÷åò êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé, îïðåäåëåííîãî ïîñåâîì â èëè íà àãàðèçîâàííûåñðåäû, íà 1 ã (ñì3) ïðîäóêòà ïðîâîäÿò ïî ÃÎÑÒ 26670.
Ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé è âûÿâëåíèÿ èõ â îïðåäåëåííîé íà-âåñêå ïðîäóêòà çàïèñûâàþò ïî ÃÎÑÒ 26670.
9.3.6 Äîïóñêàåòñÿ òàêæå âûÿâëåíèå êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïðîâîäèòü ïîñåâîì â èëè íà àãà-
ðèçîâàííóþ ñðåäó ïðè óñëîâèè, ÷òî íàâåñêó ïðîäóêòà, â êîòîðîé ïðåäóñìàòðèâàåòñÿ âûÿâëåíèå, âîç-
ìîæíî ïîñåÿòü ïî ýòîìó ìåòîäó.
Ïðè âûÿâëåíèè êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïîñåâîì â èëè íà àãàðèçîâàííóþ ñðåäó ïîäñ÷åòà êîëè-
÷åñòâà êîëîíèé íå ïðîâîäÿò.
10 Äîïîëíèòåëüíîå ïîäòâåðæäåíèå ïðèíàäëåæíîñòè âûÿâëåííûõáàêòåðèé ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì
10.1 Ïðè íåîáõîäèìîñòè, äëÿ äîïîëíèòåëüíîãî ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèíàäëåæíîñòè áàêòåðèé,
âûðîñøèõ íà æèäêèõ ñðåäàõ (òàì, ãäå îòìå÷åíî ãàçîîáðàçîâàíèå), ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì äåëà-
þò ïåðåñåâû ïî ÃÎÑÒ 26670 íà ïîâåðõíîñòü îäíîé èç àãàðèçîâàííûõ ñåëåêòèâíî-äèàãíîñòè÷åñêèõ
ñðåä (6.5 — 6.7). Ïîñåâû èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 3) ÷. Ïîñëå òåðìîñ-
òàòèðîâàíèÿ îòìå÷àþò ðîñò òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé.
10.2 Äëÿ äîïîëíèòåëüíîãî ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèíàäëåæíîñòè âûðîñøèõ áàêòåðèé ê êîëèôîð-
ìíûì áàêòåðèÿì îòáèðàþò íå ìåíåå ÷åì ïî ïÿòü òèïè÷íûõ è àòèïè÷íûõ êîëîíèé èç ÷àøåê Ïåòðè ñ
ïîñåâàìè ïî 9.3.3.
Àòèïè÷íûå êîëîíèè îòáèðàþò òå, â êîòîðûõ ïîäòâåðæäåíî íàëè÷èå êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé
ïîñåâîì â æèäêóþ ïîäòâåðæäàþùóþ ñðåäó.
10.3 Êàæäóþ îòîáðàííóþ äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ êîëîíèþ ïåðåñåâàþò íà ïîâåðõíîñòü ñêîøåííîãî
ïèòàòåëüíîãî àãàðà ïî 6.9 èëè 6.10, ïîñåâû òåðìîñòàòèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (31 �1) °Ñ â òå÷å-
íèå (24 � 3) ÷.
Ïðèíàäëåæíîñòü ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì îïðåäåëÿþò ïî îòíîøåíèþ ê îêðàñêå ïî Ãðàìó, ïî
îòñóòñòâèþ îêñèäàçû, ïî ôåðìåíòàöèè ëàêòîçû íà ñðåäå Ãèññà.
10.3.1 Îêðàñêà ïî Ãðàìó
Ïðèãîòîâëåíèå ìàçêîâ èç êóëüòóð, âûðîñøèõ íà ñêîøåííîé ïîâåðõíîñòè ïèòàòåëüíîãî àãàðà,
è îêðàñêó èõ ïî Ãðàìó, ïðîâîäÿò ïî ÃÎÑÒ 30425. Êîëèôîðìíûå áàêòåðèè ÿâëÿþòñÿ ãðàìîòðèöàòåëü-
íûìè ïàëî÷êàìè.
Äîïóñêàåòñÿ îêðàñêó ïî Ãðàìó çàìåíÿòü òåñòîì Ãðåãîðñåíà, äëÿ ýòîãî íà ïðåäìåòíîì ñòåêëå
â êàïëå 3 % -íîãî âîäíîãî ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðîîêèñè ýìóëüãèðóþò ïåòëåé êóëüòóðó ìèêðîîðãàíèç-
ìîâ, âçÿòóþ èç êîëîíèè ñ ïëîòíîé ñðåäû. Åñëè ÷åðåç íåñêîëüêî ñåêóíä çà ïåòëåé òÿíóòñÿ ñëèçèñòûå
íèòè, òî ýòî óêàçûâàåò íà ïðèíàäëåæíîñòü èñïûòóåìîé êóëüòóðû ê ãðàìîòðèöàòåëüíîìó âèäó. Ó
ãðàìïîëîæèòåëüíûõ áàêòåðèé ñëèçèñòûõ íèòåé íå îáðàçóåòñÿ.
10.3.2 Îïðåäåëåíèå îòñóòñòâèÿ îêñèäàçû
Îïðåäåëåíèå îòñóòñòâèÿ îêñèäàçû ïðîâîäÿò ïî ÃÎÑÒ 29184.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ îêñèäàçû äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå äèñêîâ è ðàñòâîðîâ îòå÷åñòâåííîãî è
èìïîðòíîãî (çàðåãèñòðèðîâàííûõ â Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè) ïðîìûøëåííîãî ïðîèçâîäñòâà. Äëÿ êîí-
òðîëÿ êà÷åñòâà äèñêîâ è ðàñòâîðîâ èñïîëüçóþò ìóçåéíûå îêñèäàçîïîëîæèòåëüíûå è îêñèäàçîîòðè-
öàòåëüíûå êóëüòóðû.
10.3.3 Îïðåäåëåíèå ôåðìåíòàöèè ëàêòîçû
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôåðìåíòàöèè ëàêòîçû èñïûòóåìóþ êóëüòóðó âûñåâàþò óêîëîì â ñðåäó Ãèññà
ñ ëàêòîçîé.
Ïîñåâû òåðìîñòàòèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå (37 � 1) °Ñ â òå÷åíèå (24 � 3) ÷.
Êîëèôîðìíûå áàêòåðèè ôåðìåíòèðóþò ëàêòîçó ñ îáðàçîâàíèåì êèñëîòû (öâåò ñðåäû ìåíÿ-
åòñÿ) è ãàçà.
11
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
10.4 Ïî ðåçóëüòàòàì äîïîëíèòåëüíîãî ïîäòâåðæäåíèÿ ê êîëèôîðìíûì áàêòåðèÿì îòíîñÿò
àýðîáíûå è ôàêóëüòàòèâíî-àíàýðîáíûå íå îáðàçóþùèå ñïîð ãðàìîòðèöàòåëüíûå îêñèäàçîîòðèöà-
òåëüíûå ïàëî÷êè, ñáðàæèâàþùèå ëàêòîçó ñ îáðàçîâàíèåì êèñëîòû è ãàçà.
11 Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ
Ðåçóëüòàòû îöåíèâàþò ïî êàæäîé ïðîáå îòäåëüíî.
Ïðîòîêîë èñïûòàíèÿ äîëæåí âêëþ÷àòü:- âñþ èíôîðìàöèþ, íåîáõîäèìóþ äëÿ ïîëíîé èäåíòèôèêàöèè ïðîäóêòà;- èñïîëüçóåìûé ìåòîä â ñîîòâåòñòâèè ñ íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì;- âñå äåòàëè èñïûòàíèÿ, íå óñòàíîâëåííûå íàñòîÿùèì ñòàíäàðòîì;- ïîëó÷åííûé(å) ðåçóëüòàò(û).
12
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ïðèëîæåíèå À(ñïðàâî÷íîå)
Ñõåìà âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé
À.1 Ñõåìà âûÿâëåíèÿ êîëèôîðìíûõ áàêòåðèé ïðèâåäåíà íà ðèñóíêå À.1.
13
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ðèñóíîê À.1
Ïðèëîæåíèå Á(ñïðàâî÷íîå)
Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé ïðèìåíåííûõâ íåì ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâ
Á.1 Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîé ÈÑÎ 4831:2006 ïðèâåäåíî â òàáëèöå Á.1
Ò à á ë è ö à Á.1
Ñòðóêòóðà ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòà ÈÑÎ 4831:2006 Ñòðóêòóðà íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà
Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû
1 Îáëàñòü ðàñ-ïðîñòðàíåíèÿ
— — 1 Îáëàñòü ïðè-ìåíåíèÿ
— —
2 Íîðìàòèâíûåññûëêè
— — 2 Íîðìàòèâíûåññûëêè
— —
3 Òåðìèíû èîïðåäåëåíèÿ
3.1—3.3 — 3 Òåðìèíû èîïðåäåëåíèÿ
3.1—3.3 3.3.1, 3.3.2
4 Ñóùíîñòü ìå-òîäà
4.1, 4.2 4.1.1—4.1.3,4.2.1— 4.2.6
4 Ìåòîä âûÿâ-ëåíèÿ êîëèôîð-ìíûõ áàêòåðèéè îïðåäåëåíèåêîëè÷åñòâà ïîìåòîäó ÍÂ×
4.1, 4.2 4.1.1—4.1.3,4.2.1—4.2.5
5 Ïèòàòåëüíûåñðåäû è ðàçâå-äåíèÿ
5.1—5.4 — 6 Ïèòàòåëüíûåñðåäû è ðåàêòè-âû
6.1—6.14 —
6 Àïïàðàòóðà èïîñóäà
6.1—6.7 — 7 Àïïàðàòóðà,ïîñóäà, ìàòåðè-àëû è ðåàêòèâû
— —
7 Îòáîð ïðîá — — 8 Îòáîð è ïîä-ãîòîâêà ïðîá
— —
8 Ïðèãîòîâëå-íèå ïðîá
— —
9 Èñïûòàíèå 9.1, 9.2 9.1.1—9.1.4,9.2.1—9.2.4
9 Ïðîâåäåíèåèñïûòàíèÿ
9.1, 9.2 9.1.1—9.1.4,9.2.1—9.2.5
10 Ïîäñ÷åò èâûðàæåíèå ðå-çóëüòàòîâ
— — 10 Äîïîëíè-òåëüíîå ïîä-òâåðæäåíèåïðèíàäëåæíîñòèâûÿâëåííûõáàêòåðèé ê êîëè-ôîðìíûì áàêòå-ðèÿì
10.1—10.4 —
11 Òî÷íîñòü — — — — —
12 Ïðîòîêîë èñ-ïûòàíèÿ
— — 11 Ïðîòîêîë èñ-ïûòàíèÿ
— —
Ïðèëîæåíèå À — — Ïðèëîæåíèå À — —
14
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Á.2 Ñîïîñòàâëåíèå ñòðóêòóðû íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà ñî ñòðóêòóðîéÈÑÎ 4832:2006 ïðèâåäåíî â òàáëèöå Á.2
Ò à á ë è ö à Á.2
Ñòðóêòóðà ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòà ÈÑÎ 4832:2006 Ñòðóêòóðà íàñòîÿùåãî ñòàíäàðòà
Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû Ðàçäåë Ïóíêòû Ïîäïóíêòû
1 Îáëàñòü ðàñ-ïðîñòðàíåíèÿ
— — 1 Îáëàñòü ïðè-ìåíåíèÿ
— —
2 Íîðìàòèâíûåññûëêè
— — 2 Íîðìàòèâíûåññûëêè
— —
3 Òåðìèíû èîïðåäåëåíèÿ
3.1 — 3 Òåðìèíû èîïðåäåëåíèÿ
3.1—3.3 —
4 Ñóùíîñòü ìå-òîäà ïîñåâà âàãàðèçîâàííóþñðåäó
4.1—4.4 — 5 Ìåòîäû îïðå-äåëåíèÿ êîëè-÷åñòâà êîëè-ôîðìíûõ áàêòå-ðèé — ïîäñ÷åòêîëîíèé
5.1, 5.2 5.1.1—5.1.3,5.2.1—5.2.3
5 Ïèòàòåëüíûåñðåäû è ðàçâå-äåíèÿ
5.1—5.4 — 6 Ïèòàòåëüíûåñðåäû è ðåàêòè-âû
6.1—6.14 —
6 Àïïàðàòóðà èïîñóäà
6.1—6.11 — 7 Àïïàðàòóðà,ïîñóäà, ìàòåðè-àëû è ðåàêòèâû
— —
7 Îòáîð ïðîá — — 8 Îòáîð è ïîä-ãîòîâêà ïðîá
— —
8 Ïîäãîòîâêàïðîá
— —
9 Èñïûòàíèå ñïîäòâåðæäåíè-åì ïðèíàäëåæ-íîñòè òîëüêîàòèïè÷íûõ êîëî-íèé ê êîëèôîð-ìíûì áàêòåðè-ÿì
9.1—9.4 9.2.1—9.2.4 9 Ïðîâåäåíèåèñïûòàíèÿ
9.3 9.3.1—9.3.6
10 Âûðàæåíèåðåçóëüòàòîâ
— — 10 Äîïîëíè-òåëüíîå ïîä-òâåðæäåíèåïðèíàäëåæíîñòèâûÿâëåííûõáàêòåðèé ê êîëè-ôîðìíûì áàêòå-ðèÿì
10.1—10.4 —
11 Òî÷íîñòü — — — — —
12 Ïðîòîêîë èñ-ïûòàíèÿ
— — 11 Ïðîòîêîë èñ-ïûòàíèÿ
— —
— — — Ïðèëîæåíèå À — —
15
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ïðèëîæåíèå Â(ñïðàâî÷íîå)
Ñâåäåíèÿ î ñîîòâåòñòâèè ññûëî÷íûõ ìåæäóíàðîäíûõ ñòàíäàðòîâíàöèîíàëüíûì ñòàíäàðòàì Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè, èñïîëüçîâàííûì
â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå â êà÷åñòâå íîðìàòèâíûõ ññûëîê
Ò à á ë è ö à Â.1
Îáîçíà÷åíèå ññûëî÷íîãîìåæãîñóäàðñòâåííîãî è íàöèîíàëüíîãî
ñòàíäàðòà Ðîññèéñêîé Ôåäåðàöèè
Îáîçíà÷åíèå è íàèìåíîâàíèå ññûëî÷íîãî ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòà èóñëîâíîå îáîçíà÷åíèå ñòåïåíè åãî ñîîòâåòñòâèÿ ññûëî÷íîìó íàöèîíàëüíîìó
ñòàíäàðòó
ÃÎÑÒ Ð 51446 — 99 (ÈÑÎ 7218—96) ÈÑÎ 7218:1996 «Ìèêðîáèîëîãèÿ ïðîäóêòîâ ïèòàíèÿ è êîðìîâûõ ïðî-äóêòîâ. Îáùèå ïðàâèëà ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé» (ÌÎD)
ÃÎÑÒ 9284—75 —
ÃÎÑÒ 10444.1—84 —
ÃÎÑÒ 24104—2001 —
ÃÎÑÒ 25336—82 —
ÃÎÑÒ 26668—85 —
ÃÎÑÒ 26669—85 —
ÃÎÑÒ 26670—91 —
ÃÎÑÒ 29184—91 —
ÃÎÑÒ 30425—97 —
Ï ð è ì å ÷ à í è å —  íàñòîÿùåé òàáëèöå èñïîëüçîâàíî ñëåäóþùåå óñëîâíîå îáîçíà÷åíèå ñòåïåíè ñîîòâåò-ñòâèÿ ñòàíäàðòîâ:- ÌÎD — ìîäèôèöèðîâàííûé ñòàíäàðò.
ÓÄÊ 663/.664:543.9:006.354 ÎÊÑ 07.100.30 Í09 ÎÊÑÒÓ 9109
Êëþ÷åâûå ñëîâà: êîëèôîðìíûå áàêòåðèè, êîëîíèåîáðàçóþùèå åäèíèöû (ÊÎÅ), òèïè÷íûå è àòèïè÷íûåêîëîíèè, ïèòàòåëüíûå ñðåäû, èíêóáèðîâàíèå ïîñåâîâ, îêñèäàçà, îêðàñêà ïî Ãðàìó, íàèáîëåå âåðîÿòíîå÷èñëî (ÍÂ×)
ÃÎÑÒ Ð 52816—2007
Ðåäàêòîð Ë.Â. Êîðåòíèêîâà
Òåõíè÷åñêèé ðåäàêòîð Â.Í. Ïðóñàêîâà
Êîððåêòîð Ì.Ñ. Êàáàøîâà
Êîìïüþòåðíàÿ âåðñòêà Â.È. Ãðèùåíêî
Ñäàíî â íàáîð 19.09.2008. Ïîäïèñàíî â ïå÷àòü 17.11.2008. Ôîðìàò 60õ841/8. Áóìàãà îôñåòíàÿ. Ãàðíèòóðà Àðèàë.Ïå÷àòü îôñåòíàÿ. Óñë. ïå÷. ë. 2,32. Ó÷.-èçä. ë. 2,00. Òèðàæ 553 ýêç. Çàê. 1244.
________________________________________________________________________________________________________
ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ», 123995 Ìîñêâà, Ãðàíàòíûé ïåð., 4.www.gostinfo.ru [email protected]
Íàáðàíî âî ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ» íà ÏÝÂÌÎòïå÷àòàíî â ôèëèàëå ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ» — òèï. «Ìîñêîâñêèé ïå÷àòíèê», 105062 Ìîñêâà, Ëÿëèí ïåð., 6