The Production of The Production of R-PACR-PAC using using

Two-Phase Two-Phase Biotransformation System Biotransformation System

from from Dried LonganDried Longan with Ion with Ion Sensitive Field Effect Sensitive Field Effect

Transistor (ISFET) as Transistor (ISFET) as a pH Monitoring Probea pH Monitoring Probe

คณะผู้��จั�ดทำ�� น�ยพี�รวั�ส ใจัวั�งโลก

น�ยกฤช ส�ทำธิ�วั�งค�ก�ลอ�จั�รย�ทำ� ปร"กษ� อ.ดร.นพีพีล เล%กสวั�สด�&

IntroductionIntroduction

ปั�ญหาราคาพืชผลทางการเกษตรอย่�าง เงาะ มั�งค�ด ลองกอง และล�าไย่ ท� ตกต� าของปัระเทศไทย่ย่�งคงเก#ดข$%นอย่�างต�อเน อง

วั�นทำ� 18 ส�งห�คม 2550 เกษตรกรส่�วนใหญ�ในพื%นท� จั�งหว�ดเช�ย่งใหมั�และล�าพื+น ได,ร�บความัเดอดร,อนจัากปั�ญหาราคาล�าไย่ตกต� าเน องจัากบร#ษ�ทในปัระเทศส่าธารณร�ฐปัระชาชนจั�นไมั�มั� นใจัในค�ณภาพืล�าไย่ส่ดท� ผล#ต

ปั�จัจั�บ�นมั�ล�าไย่ค,างส่ต2อกอย่+�ท� องค3การคล�งส่#นค,าถึ$ง 2 แส่นต�น

IntroductionIntroduction

ข,อเส่นอแนะในการแก,ปั�ญหา การน�าล�าไย่อบแห,งท� หมัดอาย่�มัาเปั5นแหล�งอาหาร

คาร3บอนส่�าหร�บการผล#ตเปั5นเอทานอลท� ส่ามัารถึน�า มัาผส่มัก�บน�%ามั�นเบนซิ#นเพื อผล#ตเปั5นแก2ส่โซิฮอล3 (gasohol ) ได, จั$งน�าจัะมั�ส่�วนช�วย่บรรเทาปั�ญหาน�%ามั�นในตลาดโลก ท� มั�ราคาเพื# มัส่+งข$%นในปั�จัจั�บ�น ท�%งน�%มัวลช�วภาพืท� ผล#ตข$%นย่�งใช,เปั5นต�วเร�งปัฏิ#ก#ร#ย่าช�วภาพืเพื อผล#ตส่ารต�%งต,นส่�าหร�บส่ารเคมั�เพื อการค,า เช�น R-phenylacetylcarbinol (R-PAC ) ได,อ�กด,วย่

IntroductionIntroduction PAC = Phenyl-Acetyl-Carbinol R- is from Rectus (Latin) means “right” S-

is from Sinister (Latin) means “left”

ObjectivesObjectives ศึ"กษ�ผู้ลกระทำบของส�ดส,วันโดยปร�ม�ตรของโมล�ซทำ� ใช�ผู้สมก�บ

ส�รละล�ยสก�ดจั�กล��ไยอบแห�งต,อก�รผู้ล�ตเอนไซม�ไพีร�เวัตด�ค�ร�บอกซ�เลสจั�กล��ไยอบแห�งของ C. utilis ส�มส�ยพี�นธิ1�

เพี2 อศึ"กษ�ก�รเจัร�ญของจั1ล�นทำร�ย�ในอ�ห�รเล�4ยงปร�ม�ตร 100 ml ทำ� ม�ส�รสก�ดจั�กล��ไยอบแห�งและโมล�ซผู้สมก�นในอ�ตร�ส,วัน 100:0, 75:25, 50:50, 25:75 และ 0:100 เป5นแหล,งอ�ห�รค�ร�บอน โดยม�ควั�มเข�มข�นของน�4�ต�ลทำ�4งหมด 63.5-64.4 g/l และใช�เวัล�เพี�ะเล�4ยง 48 ช� วัโมง ณ 25.6ºC

เพี2 อผู้ล�ตเซลล�รวัมในถั�งช�วัภ�พีขน�ด 5 ล�ตร ทำ� ใช�ส�รสก�ดจั�กล��ไยอบแห�งและโมล�ซในอ�ตร�ส,วัน 1:1 เป5นแหล,งอ�ห�รค�ร�บอน น��เซลล�ทำ� ได�ไปผู้ล�ต PAC จั�กไพีร�เวัตและเบนซ�ลด�ไฮด� ส��หร�บระบบสองเฟส

ObjectivesObjectives เพี2 อศึ"กษ�ผู้ลกระทำบของแอลกอฮอล�หร2อไฮโดรค�ร�บอน

10 ชน�ด (จั��นวันส�ยค�ร�บอนต�4งแต, - 110 และ dipropylene glycol ต,อก�รผู้ล�ต R- PAC ในระบบ

- two phase biotransformation ด�วัยเอนไซม�ไพีร�เวัตด�ค�ร�บอกซ�เลสโดยใช� ล��ไยอบแห�งเป5นแหล,งอ�ห�รค�ร�บอน

เพี2 อศึ"กษ�ผู้ลกระทำบของส�รผู้สมระหวั,�ง dipropylene glycol และไฮโดรค�ร�บอนส�ยย�วั

- (C7 C9) ต,อก�รผู้ล�ต R- PAC ในระบบ - two phase biotransformation ด�วัยเอนไซม�ไพีร�เวัตด�ค�ร�

บอกซ�เลส โดยใช�ล��ไยอบแห�งเป5นแหล,งอ�ห�รค�ร�บอน

MaterialMaterial

Candida utilis

ExperimentsExperiments

ทำดสอบก�บเช24อจั1ล�นทำร�ย� Candida utilis

3 ส�ยพี�นธิ1� ในอ�ห�รเล�4ยงเช24อ 10 ml

ใช�ส�ดส,วันโดยปร�ม�ตรของ โมล�ซก�บส�รละล�ยสก�ดจั�กล��ไยอบ

แห�ง(อ�ตร�ส,วัน 100:0,75:25,50:50,25:75,100:0)

เป5นแหล,งอ�ห�รค�ร�บอน ณ 25.6OC

ก�รเพี�ะเล�4ยงกล��เช24อ 48 ช� วัโมง

ExperimentsExperiments

ทำดสอบก�บเช24อจั1ล�นทำร�ย� Candida utilis 3 ส�ยพี�นธิ1� ในอ�ห�รเล�4ยงเช24อ 100 ml น��กล��เช24อในก�รทำดลองทำ� 1 ม�เพี�ะเล�4ยงต,ออ�ก 48 ช� วัโมง ณ 25.6OC

ก�รเล�4ยงด�วัยส�รสก�ดล��ไยอบแห�ง:โมล�ซอ�ตร�ส,วัน 100:0, 25:75, 50:50 และ 0:100

ExperimentsExperiments

HPLC MethodSugars (glucose sucrose fructose)EthanolAcetic acidCitric acid

Dry biomass pH PDC activity Total soluble solid Total sugar Protein analysis OD 600

ExperimentsExperiments

ResultsResults

ResultsResults

ResultsResults

Discussion and Discussion and ConclusionsConclusions Candida utilis TISTR TISTR 5032 75:25 5032 75:25 Candida utilis TISTR TISTR 5032 0:100 5032 0:100 ระด�บความัเข,มัข,นเอทานอลส่+งส่�ดท� ได,น�%มั�ค�าน,อย่กว�า S.

cerevisiae TISTR 5020 & 5606 ถึ$ง 10 เท�า การผล#ตมัวลช�วภาพืข�%นตอนถึ�ดไปัในระด�บ 1 ล#ตร

จั�านวน 5 ขวด ส่�าหร�บกระบวนการไบโอทรานส่3ฟอร3เมัช� นเพื อผล#ต R-PAC เลอกใช,

S. cerevisiae แทน C. utilis

Future worksFuture works ทำ��ก�รผู้ล�ตเซลล�ย�สต�

S.cerevisiae TISTR 5606 ในระด�บ1 ล�ตร

5 ขวัด และน��มวัลช�วัภ�พีทำ� ได�ม�ใช�ส��หร�บกระบวันก�รไบโอทำร�นส�ฟอร�เมช� นแบบสองเฟสในส�รละล�ยบ�ฟเฟอร�และไฮโดรค�ร�บอน ไฮโดรค�ร�บอน 10 10 ชน�ด ชน�ด ((จั��นวันส�ยค�ร�บอนต�4งแต, จั��นวันส�ยค�ร�บอนต�4งแต,

- 110- 110 และ และ dipropylene glycol dipropylene glycol

Future worksFuture works ศ$กษาผลกระทบของส่ารผส่มั

ระหว�างแอลกอฮอล3ท� มั� carbon backbone ส่าย่ย่าว -7(C

9C ) และ dipropylene glycol ต�อการผล#ต

R-PPP ในระบบ - two phase biotransformation

ต#ดตามัการเปัล� ย่นแปัลงค�า pH ด,วย่ด,วย่ห�วว�ดแบบ Ion Ion

Sensitive Field Effect Sensitive Field Effect Transistor (ISFET Transistor (ISFET))