管理肠道健康 ·实现无抗养殖—— 霉菌毒素及仔猪腹泻的防控心得

孙进华 博士、副研究员

东北农业大学动物科技学院

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一、非传染性腹泻 ■ 营养性■ 生理性腹泻■ 应激性腹泻 仔断奶换料腹泻 大多数人认为断奶腹泻是由于换料应激造成的，其实不够准确。 酶系发育不健全，蛋白酶、脂肪酶配方设计要求仔猪易消化的营养物质。

引起仔猪腹泻的原因

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仔猪出生后消化酶的变化动态

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二、传染性腹泻 （病原性）

病原菌引起：1 、细菌性腹泻（主要是革兰氏阴性菌）2 、病毒性腹泻3 、寄生虫性腹泻4 、霉菌毒素性腹泻

引起仔猪腹泻的原因

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主要致病菌： 大肠杆菌（黄、白痢）、沙门氏菌（副伤寒）、产气荚膜梭菌（红痢）、痢疾密螺旋体 （猪痢疾）。

致病机理： 致病菌能够吸附于肠粘膜绒毛细胞的表面，破坏小肠绒毛上皮细胞细胞； 影响营养物质消化吸收； 产生的毒素造成小肠脱水。

细菌性腹泻

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添加抗生素■ 过量添加造成药物残留、危害人类健康；同时造成小肠绒毛及隐窝的破坏，抑制后期仔猪生长；

■ 常量添加效果不够明显，并且持续反复刺激容易造成耐药性的产生。

普通防控措施

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改善养殖环境■ 养殖环境不是饲料企业所能控制的；

肠道环境

■ 肠道环境 添加益生菌在饲料生产过程中损耗过大，效果不够明显。

普通防控措施

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■ 霉菌毒素破坏肠绒毛上皮细胞，造成营养物质消耗吸收受阻、直肠温度升高。

■ 引起脱水、呕吐、粘膜炎、消瘦、腹泻。

■ 主要引起腹泻的毒素：赭曲霉毒素（ OTA ） 、烟曲霉毒素（ FUM ） 、呕吐毒素（ DON ）等。

霉菌毒素引起的腹泻

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■ 霉菌毒素是谷物或饲料中霉菌生长产生的次级代谢物。主要危害：致癌性、致突变性、致畸胎性、致雌激素异常、致出血、免疫毒性、肾毒性、肝毒性、皮肤毒性及神经毒性等

■ 美国 2002年就已经将霉菌毒素列为饲料安全的第二大危险因素。

■ 大多数霉菌毒素在动物采食饲料后的 30分钟内，就会释放到消化道中，小肠是霉菌毒素吸收的主要场所。

霉菌毒素

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■ 黄曲霉毒素（ Aflatoxins， AFB1）

■ 玉米赤霉烯酮（ Zearalenone， ZEA ）

■ 呕吐毒素（ Vomitoxin DON）

■ T—2 毒素（ T-2 Toxin）

■ 赭曲毒素（ Ochartoxins OTA）

■ 烟曲霉毒素（ Fumonisins， FUM）

影响畜牧业的霉菌毒素种类

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霉菌毒素 敏感动物 主要表现症状

黄曲霉毒素 所有动物 肝脏受损伤，生长延缓，免疫力下降

呕吐毒素 猪 呕吐，厌食，拒食，免疫抑制

玉米赤霉烯酮 猪、奶牛 （与 DON 几乎同时存在）异常发情、发情延迟、阴门肿大

T—2 毒素 猪 厌食、皮炎、干扰凝血

烟曲霉毒素 猪、禽 肺脏水肿，胚胎畸形，腹泻、生长受抑制

赭曲霉毒素 猪、禽 肾脏受损，腹泻，生殖器肿胀

主要霉菌毒素的危害

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1、原料外观很好，没有霉菌污染变化（原料的隐蔽性）； 2、养殖场没有表现霉菌毒素的症状（危害的隐蔽性）； 3、只认为发生黑变是发霉（不知道霉变也有白变，红变）； 4、只知道原料储存时发霉，不知道原料在田间已经污染霉菌。

霉菌毒素认识误区

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霉菌毒素种类 允许量（ µg/kg ）黄曲霉毒素 B1 玉米、花生饼粕、菜籽饼粕、棉籽

饼粕≤ 50 ，豆粕≤ 30玉米赤霉烯酮 玉米、配合饲料≤ 500呕吐毒素 猪配合饲料≤ 1mg/kgT—2 毒素 玉米、花生饼粕、菜籽饼粕、棉籽

饼粕＜ 50 ，豆粕＜ 30

赭曲霉毒素 A 猪配合饲料≤ 1mg/kg

饲料中霉菌毒素允许量标准

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项目能量饲料（玉米） 全价饲料 蛋白质饲料

检出率 超标率 检出率 超标率 检出率 超标率

黄曲霉毒素 83.90% 0% 100% 0% 100% 8.00%

烟曲霉毒素 77.30% 45.50% 91.70% 66.70% 72.70% 4.09%

赭曲霉毒素 60% 0% 93.70% 18.70% 76.10% 41.30%

T—2 毒素 87.50% 0% 100% 0% 97.80% 28.30%

呕吐毒素 100% 69.20% 100% 0% 87.00% 47.80%

玉米赤霉烯酮 100% 30.80% 100% 21.40% 92.90% 35.70%

三类被检饲料霉菌毒素污染情况

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■ 玉米 100%被霉菌污染，只是程度不同而已

■ 受目前整体环境影响，已经不存在无污染的地区

■ 传统认为北方干燥没有霉菌的概念，是完全错误的，玉米采购标准由霉粒 2%以下，放宽至5%

霉菌污染现状

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1 、物理脱毒： 高温、水洗、剔除、辐射等（费时、费力、费钱，不便规模操作）； 无机吸附剂：铝硅酸盐类矿物吸附剂，利用多层空间结构和表面形成的离子极性，吸附具有相同离子极性的霉菌毒素，对于没有相同极性和非极性的霉菌毒素吸附能力很差； 有机吸附剂（甘露聚糖、酵母细胞壁）吸附霉菌毒素。其对极性和非极性的霉菌毒素都有广泛的吸附作用。

常规清除方法

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2 、化学脱毒： 氯气、氨气、氢氧化钠、氢氧化钙、次氯酸钠等（可减少少量的霉菌毒素，但会造成二次污染）。

常规清除方法

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3 、生物脱毒： 微生物（乳酸杆菌等）、酶制剂（脂类氧化酶、葡萄糖氧化酶等）。

常规清除方法

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如何更好的解决霉菌毒素污染？

如何更科学的防治仔猪腹泻？

如何保持肠道健康

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了解一个新产品

——亿霉脱 霉菌毒素吸附与抗腹泻双重功效

亿霉脱

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■ 结构成分一 埃洛石为含水层状硅酸盐矿物，其显微结构为纤细型弯曲管状结构，这种管状结构对霉菌毒素具有优异的吸附固定作用，不受霉菌毒素自身极性影响，因而对于 ZEA等非极性的霉菌毒素具有良好的吸收效果。

亿霉脱特色结构成分

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■ 结构成分二 高络合有机酸载铜蒙脱石

强大的比表面积，对具有极性的霉菌毒素具有高效吸附及强有力的杀菌能力。

亿霉脱特色结构成分

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■ 结构成分三 酵母细胞壁提取物、甘露聚糖等多种有效成分。

提升免疫，修复动物受损脏器，恢复器官生理机能。

亿霉脱特色结构成分

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■ 蒙脱石是天然的层状硅酸盐纳米材料，每层厚度仅 1 nm，颗粒细小，比表面积巨大，每立方毫米( 半个米粒 ) 能容纳三千亿个颗粒，每克粉剂就能覆盖 110平米的篮球场大小的消化道表面，可加强黏膜屏障的作用；加上蒙脱石的不均匀电荷特性，基本层中带负电，层间带正电，使得蒙脱石具有强大的吸附能力。

亿霉脱载体选择

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■ 蒙脱石

亿霉脱载体选择

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生产工艺流程图

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■ 提纯

■ 酸溶

■ 酸洗

■ 络合、加载

独特生产工艺

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独特生产工艺

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独特生产工艺

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独特生产工艺

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因蒙脱石硅氧四面体和八面体组成的层结构，层结构之间是易于被取代的阳离子层，将多核[Cu(AIO)n(H2O)4-n]Χ+络离子替代蒙脱石层间的Ca2+、 Na+等离子，同时 Cu2+离子还可进入蒙脱石Si-O四面体晶内孔和八面体中的空位，从而导致蒙脱石电价失衡，使矿物带有正电荷。而大多数细菌细胞壁表面带有负电荷，载铜蒙脱石与细菌之间的静电引力，能使细菌能够更有效地被大量吸附在矿物表面 。 蒙脱石、亿霉脱、大肠杆菌在 pH为 6 时的Zeta电位分别为 -21mV、 928mV、 -22mV 。

亿霉脱加载工艺特点

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■有效的杀菌功能

■有效的粘膜保护功能

■强大的吸附脱霉、解毒能力

同时解决霉菌毒素污染及仔猪细菌性腹泻，有效地保护仔猪小肠绒毛和隐窝。

亿霉脱的优势

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■ 实验 1 ：大肠杆菌培养实验结果显示： 培养液中天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、丙氨酸氨基转移酶活性显著升高 。 在正常情况下 , 细菌胞内酶很少释放到菌体外 , 只有当细菌细胞膜结构发生变化 , 通透性明显增强时 , 胞内酶才能释放到菌体外。

加入亿霉脱（终浓度 2ug/ml)

亿霉脱的杀菌作用

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亿霉脱对天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶的影响

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■杀菌原理：

亿霉脱主要成分之一高络合酸洗载铜蒙脱石带有较高的正电荷，大肠杆菌细菌表面带有负电荷，库仑力的作用下，大肠杆菌被吸引到 MMT-Cu表面， MMT表面富集的 Cu2-使细菌细胞膜通透性增加或受损严重，酶从菌体内大量释放出来，从而导致细菌死亡。

杀菌原理

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■ 实验 2 ：Caco-2细胞是体外培养的肠上皮单层细胞病原菌选用 E.coli K88、 S.choleraesuis

亿霉脱的粘膜保护作用

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①病原菌吸附实验

Caco-2 细胞

分别培养1 、 3 、 6h

分别培养1 、 3 、 6h

亿霉脱

DMEM

加入病原菌

加入病原菌

用 Hankˊs液洗裂解细胞

计数

亿霉脱的粘膜保护作用

涂板

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亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响

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用 MMT-Cu 处理过的 Caco-2 细胞，使病原菌 E.coli K88和 S.choleraesuis 被的数量明显增加，与对照组相比，差异显著。

吸附的病原菌是否能够入侵细胞？

亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响

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②病原菌入侵实验

Caco-2 细胞

分别培养1 、 3 、 6h

分别培养1 、 3 、 6h

亿霉脱

DMEM

加入病原菌

加入病原菌

用 Hankˊs液洗庆大作用 裂解细胞 涂板

计数洗

亿霉脱的粘膜保护作用

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亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响

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对照组病原菌入侵到 Caco-2 细胞内的数量并随时间的延长入侵数量在增加。而用亿霉脱处理过的 Caco-2 细胞，均可明显减少 E.coli K88和 S.choleraesuis 侵入到 Caco-2 细胞内的数量，与对照组相比，差异极显著。并随着作用时间的延长，可持续抑制E.coli K88、 S.choleraesuis 的入侵。

入侵致病菌对细胞的破坏情况？

亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响

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③病原菌对细胞的破坏试验 用培养基中 LDH 的活性来判断细胞膜的完整性

C

Caco-2 细胞

分别培养1 、 3 、 6h

分别培养1 、 3 、 6h

亿霉脱

DMEM 加入病原菌

分别在 1 、 3 、 6h取培养液

检测 LDH活性

亿霉脱的粘膜保护作用

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分别培养1 、 3 、 6h

DMEM

DMEM

加入病原菌

Ⅰ

Ⅱ

检测 1 、 3 、 6h培养液中 LDH的含量 对照组为正常培养 Caco-2细胞，试验组Ⅰ为致病菌感染组，试验组Ⅱ为添加亿霉脱致病菌感染组。

检测 1、 3、 6h培养液中 LDH 的含量

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图 A 表示正常生理条件下的 Caco-2 细胞表面绒毛密集而整齐； 图 B 表示加入亿霉脱后，可见细胞表面有一层膜状物覆盖，好象与外界形成一层屏障，绒毛仍然排列整齐、致密。

电镜扫描细胞表面

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图 C ， D 可见，当 E.coli K88和 S.choleraesuis 粘 附 于 Caco-2 细 胞 上时，可见绒毛萎缩而凌乱，绒毛变短，甚至细胞上绒毛已脱落，而且细胞破裂。表明 E.coli K88和 S.choleraesuis 粘附肠上皮细胞后，可破坏细胞的完整性，使细胞死亡。 由于致病菌粘附细胞后，可分泌一种不利于细胞存活的毒素从而破坏细胞膜的完整性，使细胞绒毛受损。

电镜扫描细胞表面

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从图 E， F 可见，亿酶脱与 Caco-2 细胞共同温育后， E.coliK88和 S.choleraesuis 再粘附细胞时，可见绒毛排列依旧很整齐、致密，肠上皮细胞完好。 这充分说明亿霉脱，能阻止病原菌对消化道粘膜的侵害，维护消化道正常的生理功能。

电镜扫描细胞表面

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是由于亿霉脱主要成分之一是高络合酸洗载铜蒙脱石（ MMT-Cu ），它能连续覆盖在肠上皮细胞表面与糖蛋白结合，又由于它们表面 Zeta电位的不同，对病原菌具有较强的吸附作用，可将病原菌固定在其表面，从而阻止细菌进入到肠细胞内（ 因为不能再与肠上皮细胞上的受体结合）。而且 MMT-Cu 中的 富集表面的高浓度 Cu2+可将病原菌杀死。

粘膜保护机理

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以上试验充分证明了亿霉脱具有吸附、杀灭病原菌的作用，同时对肠上皮细胞没有危害，因而可作为一种消化道粘膜保护剂。

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亿霉脱对六种细菌的最小抑菌（ MIC)和杀菌浓度 (MBC)

大肠杆菌

沙门氏菌

产气荚膜梭菌

痢疾密螺旋体

枯草芽孢杆菌

嗜酸乳酸杆菌

MIC 75mg/L 75mg/L 100mg/

L

200mg/L 1000mg/L 1000mg/L

MBC 150mg/

L

150mg/

L

200mg/

L

400mg/L >1000mg/

L

>1000mg/

L

亿霉脱体外对四种病原菌及两种肠道有益菌杀菌作用

50

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

0h 2h 4h 6h 12h 24h

CUF/

mL

亿霉脱对不同微生物作用时间结果

大肠杆菌沙门氏菌C型产气荚膜梭菌痢疾密螺旋体嗜酸乳酸杆菌枯草芽孢杆菌

2 倍MBC对六种微生物的影响

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亿霉脱对大肠杆菌、沙门氏菌、 C 型产气荚膜梭菌 、痢疾密螺旋体 (革兰氏阴性菌 )的杀菌效果明显优于嗜酸乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌 (革兰氏阳性菌 )。主要是由于革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌的细胞壁结构不同。

■ 接触

在 pH为 6 时革兰氏阴性菌的 Zeta电位大于革兰氏阴性菌，由于亿霉脱带有正电荷，因此，革兰氏阴性菌比革兰氏阳性菌更易被吸附。

不杀灭有益菌群的机理

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■ 细胞壁结构

1.革兰氏阳性菌细胞壁所含的肽聚糖是革兰氏阴性菌的 3~20倍，

2.细胞壁厚度是阴性菌的 4-8倍。

3.同时革兰氏阳性菌细胞壁表面还含有一层磷壁酸。

4.革兰氏阴性菌的细胞壁较革兰氏阳性菌的细胞壁薄 ,对杀菌剂具有不同的敏感性。因此 ,革兰氏阳性菌比阴性菌不容易被破坏杀灭。

不杀灭有益菌群的机理

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■ 高效吸附：

高效络合铜蒙脱石强大的比表面积，巨大的吸附能力。

■ 不可逆吸附毒素：

亿霉脱化学稳定性强，与霉菌毒素结合后形成聚合物后使之不易解吸，随肠道蠕动排出体外，不会产生次级代谢产物；

亿霉脱强大的吸附能力

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■ 广谱吸附毒素能力：

络合铜蒙脱石能特异性地吸收黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等含有极性基团或共面苯环结构的霉菌毒素，而埃洛石能够很好的吸附玉米赤霉烯酮等非极性毒素。

■ 选择性吸附：

亿霉脱有稳定的阳离子交换值，因而对饲料中各种营养物质如矿物质、氨基酸、维生素（包括部分B族维生素）、色素无破坏性吸附性。

亿霉脱强大的吸附能力

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■ 生物类黄酮物质

可抑菌、消炎、解毒，尤其在毒素已被机体吸收的状况下可入血解毒，提高机体免疫力，快速恢复健康。

■ 酯化葡甘露聚糖

产品添加了酯化葡甘露聚糖，加强对镰刀霉菌毒素的吸附，实现高效快速吸附。酯化处理后，葡聚糖、甘露聚糖更稳定，吸附能力和效果大为增强。

亿霉脱生物解毒功能

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■ 酶制剂分解

本品添加了多种酶制剂及生物活性成分，能够在畜禽体内增加有益菌数，减少有害霉菌的生存空间，同时酶制剂能有效打开双呋喃环，破坏黄曲霉素，从而降解其毒性。

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亿霉脱的毒素降解功能

耐高温、稳定性好

■ 亿霉脱在制粒、膨化具有较高的稳定性；在肠胃不同 pH值环境中 Cu2+具的解离率为 5-10%左右。因此亿霉脱能与霉菌毒素高效结合通过肠道安全排出体外。

亿霉脱在饲料生产上的优势

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■ 显著降低料肉比，提高动物生产性能　 项目 对照组 亿霉脱

仔猪

日采食量 /g 562.67±2.08b 596.93±23.18a

日增重 /g 325.27±6.43 347.33±14.50

料重比 1.73±0.03 1.72±0.05

生长猪

日采食量 /g 1809.33±54.45 1818.35±35.92

日增重 /g 665.23±37.32 672.43±24.11

料重比 2.72±0.07 2.70±0.09

育肥猪

日采食量 /g 3089.33±270.78 2986.00±141.86

日增重 /g 823.92±232.49b 922.23±284.90a

料重比 3.74±0.06A 3.24±0.21B

全程

日采食量 /g 1781.33±92.65 1735.21±90.28

日增重 /g 623.33±31.97 650.31±14.04

料重比 2.86±0.03a 2.67±0.14b

注：同一行肩标相同小写字母或不标者差异不显著（ P＞ 0.05 ）；肩标不同小写字母者差异显著（ P＜ 0.05 ）；肩标不同大写字母差异极显著（ P＜ 0.01 ）

亿霉脱在生产性能上的优势

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■ 根据目标原料、饲料的受污染程度和畜禽出现的临床症状，合理确定添加比例：

■ 本产品具有良好的流畅性，采用一般预混法

■ 预防用量： 1～ 2 公斤 /吨，已污染的饲料根据霉变程度轻重添加 2～ 3 公斤 /吨。

正确的使用方法

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地址：北京市海淀区永泰园新地标 14-105 邮编： 100192电话： 010-82751546 81915662 传真： 010-82751549网址： www.yirukeji.com 邮箱：yirukeji@accro.cn

外商投资批准号：商外资京字 [2003]14006号出口饲料企业检验检疫注册登记证号： 1100FA014

ISO9001： 2008国际质量管理体系认证： UQ131607R1ISO14001： 2004国际环境管理体系认证： 04313E20709R1M

ISO22000： 2005HACCP国际食品安全管理体系认证： 115FSMS1300168

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工厂实景

■ 亿如科技（北京）有限公司专注于饲用添加剂的研发、生产的高新企业。

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工厂实景 工厂实景

车间设备 ■ 在产品研发中公司将动物营养，预防兽医，食品科学，生物发酵，精细化工，地质矿物学等多学科的最新研究成果，开发新产品及新工艺，应用到动物生产中。

喷雾干燥车间 精细合成车间63

实验室 ■ 在产品研发中公司将动物营养，预防兽医，食品科学，生物发酵，精细化工，地质矿物学等多学科的最新研究成果，开发新产品及新工艺，应用到动物生产中。

研发中心实验室 高效液相色谱检测室64

亿如科技（北京）有限公司ACCRO SCIENCE AND TECHNICAL（ BEIJING） CO.,LTD.

地址：北京市海淀区永泰园新地标 14-105 邮编： 100192电话： +86-10-82751546 81915662 传真： +86-10-82751549

邮箱： yirukeji@accro.cn 网址： www.yirukeji.com

谢谢大家65