消防員尿中消防員尿中 8-hydroxydeoxyguanosine(8-OHdG)8-hydroxydeoxyguanosine(8-OHdG) 與血漿中與血漿中 nitric oxide(NO)nitric oxide(NO) 關係之探關係之探討討學生：邱文德 指導老師：賴錦皇學生：邱文德 指導老師：賴錦皇

變 項 暴 露 組n=167n(%)

非 暴 露 組n=36n(%)

p-value

年齡 ( 歲 )(Mean±SD) <0.01

28.46±9.31 38.81±13.31BMI(kg/m2) (Mean±SD) 0.702

24.65±3.48 24.41±3.00籍貫 0.368

閩南 136(90.1) 29(87.9)

客家 12(7.9) 2(6.1)

外省籍 2(1.3) 2(6.1)

原住民 1(0.7) 0(0.0)

學歷 <0.01

高中 141(86.0) 19(55.9)

大專 23(14.0) 15(44.1)

婚姻狀況 <0.01

未婚 114(68.3) 9(25.7)

已婚 ( 再婚 ) 53(31.7) 26(74.3)

宗教信仰 0.182

佛教 41(39.8) 17(58.6)

道教 54(52.4) 11(37.9)

其他 8(7.8) 1(3.4)

前言前言

目的目的

材料與方法材料與方法

尿液中尿液中 8-OHdG8-OHdG 的測定的測定 以酵素結合免疫吸附分析法 (ELISA ； enzyme linked immunosorbent assay) 分析之。步驟如下：一、將尿液以及 8-OHdG 特定單株抗體於 37°C 下培養 1 小時。二、以 ph7.4 之磷酸鹽緩衝溶液 (phosphate buffered saline; PBS) 清洗三 次去除結合物。三、加入以山葵根過氧化 (horseradish peroxidase) 標幟之抗體於 37°C 下 培養 1 小時。四、以 PBS 清洗三次去除未結合物。五、加入呈色劑 (3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine) 於暗室下置 15 分鐘，產 生淡藍色。六、加入中止劑 (1M 磷酸 ) 顏色變為黃色，反應 3 分鐘，測 450 nm 的吸 光值， 30 分鐘內判讀完畢。七、呈色吸光值以及 8-OHdG 標準溶液 0.5 、 2 、 8 、 20 、 80 和 200 ng/mL 濃度之 log 值與吸光值作圖，再以樣本的吸光值換算出濃度，結果 以 µg/g creatinine 表示。

結果與討論結果與討論

變 項 暴 露 組n=167n(%)

非 暴 露 組n=36n(%)

p-value

抽菸 0.976 是 51(76.1) 13(76.5) 否 16(23.9) 4(23.5)喝酒 0.852 是 96(57.5) 21(60) 否 71(42.5) 14(40)運動 <0.05 是 125(74.9) 19(55.9) 否 42(25.1) 15(44.1)檳榔 0.135 是 10(6.1) 0(0.0) 否 155(93.9) 35(100.0)燒香 0.437 是 5(3.4) 2(6.5) 否 140(96.6) 29(93.5)使用蚊香 0.185 是 16(10.3) 1(3.0) 否 139(89.7) 32(97.0)

表一 研究對象之基本人口學資料

表二 研究對象之生活習慣

1. 尿液中 8-OHdG 含量以及血漿中 NO 含量可以反映 DNA 受損的程度，但會受到年齡、 BMI 、性別、 抽煙、運動習慣、嚼食檳榔、飲食、氣喘等疾病 等的影響。表一及表二顯示，在本次研究中，僅 年齡與運動二個變項在兩組中達到統計上的顯著 意義，其餘皆未發現有差異。另外，在學歷及婚 姻狀況二個變項亦有差異。

表三 暴露組與非暴露組 8-OHdG 之關係變 項 暴 露 組

n=164非 暴 露 組

n=32 p-value

8-OHdG(Mean±SD) 14.51±7.79 10.94±7.99 <0.05Log(8-OHdG) (Mean±SD) 1.06±0.36 0.93±0.40 0.066

表四 暴露組與非暴露組 NO 之關係變 項 暴 露 組

n=126非 暴 露 組

n=35 p-value

NO(Mean±SD) 73.88±39.13 79.19±43.31 0.367

Log(NO) (Mean±SD) 1.82±0.21 1.85±0.20 0.386

2. 由表三及表四結果可知，暴露組與非暴露組之 8-OHdG 及 NO ，僅有 8-OHdG 之 p-value<0.05 ， 亦即兩組之間，僅有 8-OHdG 有差異。

表五 Simple linear regression of urinary log (8-OHdG) by plasma log (NO)

※SE β=standard error of β coefficient.

圖一 Log NO 與 Log 8-OHdG/Creatitine 之線性關係

3. 綜合表五及圖一 的結果，在控制 二組間有差異的 變項對尿液中 8-OHdG 和血漿中 NO 濃度的影響之 後，進行線性迴 歸分析，發現尿 液中 8-OHdG 及血 漿中 NO 沒有相關 性。

結論結論

研究對象與統計工具研究對象與統計工具 本研究採橫斷式研究，選擇來自某縣政府消防局消防員 167 員作為暴露組，來自局本部辦公室行政人員 36 員作為對照組。利用上班時間進行問卷調查及體檢。問卷內容為個人基本資料以及過去病史等。另抽取靜脈血以了解體內 NO 濃度之情形，並提供尿液以測量尿中8-OHdG 的濃度，以 SPSS 12.0 進行統計分析。

血漿中血漿中 NONO 的測定的測定 以一氧化氮分析儀來分析。步驟如下：一、將血漿樣本以 -4°C 99% 的酒精去除其中的蛋白質成分。二、離心去除沉澱物後，取上清液注入反應槽中。三、以三氯化釩 (VCl3) 將 nitrate 以及 nitrite還原成 NO 。四、 NO 與分析儀裡的臭氧 (O3) 反應，並由分析儀測釋放出來的能量， 再換算成 NO 的濃度。

此次研究結果雖然顯示兩者之間無相關性，但是，本次研究並未針對樣本的疾病史、工作暴露情況以及飲食習慣等作進一步了解，是否因此影響本次研究之結果，值得深入探討。

本研究乃欲了解消防員血漿 NO 與 DNA 氧化傷害指標尿中 8-OHdG之關係，同時比較暴露組與非暴露組之間 8-OHdG 及 NO 之濃度差異。

火災一直是社會新聞上層出不窮的問題。當火災發生時，火場中的材料經過燃燒之後，會產生一些對消防員可能有害的物質。 受損害的 DNA 於體內經過外核苷酸酶修復而產生水溶性的8-OHdG排泄至尿液中，尿液中的 8-OHdG 含量可反映 DNA 受損程度以及修復之情形。 NO 是一種活性氮化物種。在 Goldstein 等人的研究中發現， NO 與超氧陰離子 (O2

-) 進行反應會形成過氧化硝酸鹽 (ONOO-) ，會對 DNA造成氧化傷害，因此 NO 可作為氧化壓力的指標。

Variable β (SE β)* t 95% CIUnadjusted relation

Plasma Log (NO) -0.01 0.14 -0.06 -0.29~0.27Adjusted relation

Plasma Log (NO) 0.02 0.15 0.16 -0.27~0.32組別 -0.17 0.09 -1.79 -0.35~0.02年齡 0.001 0.004 0.29 -0.007~0.01婚姻狀況 0.03 0.05 0.65 -0.06~0.12學歷 0.02 0.09 0.22 -0.15~0.19運動 -0.05 0.70 -0.76 -0.19-0.08