杨友金

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绪 论

浙江大学医学院解剖细胞生学系杨友金

目 录目 录

组织学与胚胎学研究内容和意义

• 组织学发展简史和当代组织学 组织学发展简史和当代组织学

• 组织学的学习方法 组织学的学习方法

• 组织学技术简介 组织学技术简介

一、组织学与胚胎学的研究内容

组织学（ histology ）：研究机体微细结构

及其相关功能的科

学 胚胎学（ embryology ）：研究人体发生、

生长及其发育机

制的一门科学

组织学研究内容：

细胞 (cell)

细胞间质(intercellular substance)

组织(tissue)

上皮组织

结缔组织

肌肉组织

神经组织

器官和系统 人体

胚胎学研究内容：

受精卵 胚 胎 儿（前 8 周） （ 9~38

周）胚胎早期发生胚胎早期发生

组 织 类 型组 织 类 型

胃的大体解剖

胃的细微解剖

骨骼肌的光镜图 骨骼肌的电镜图

显微结构 超微结构

学习组织与胚胎学的意义

组胚学是生物学和医学的基础课程 组胚学与人类社会面临的众多实际问题和疾病防治密切相关

组胚学与众多学科交叉，如分子生物学、细胞生物学、生理学、生物化学、免疫学、病理学、组织工程学和环境毒理学等学科，理论上相互关联渗透，技术相互引用促进。

只有了解正常的机体结构、组成及其基本生命现象，才能理解机体异常的病理变化。同时也能将生命科学研究不断引向深入。

二、组织学发展简史和当代组织学

发展简史：从细胞的发现和细胞学说的建立起始 ， 300 余年 Hooke 、 Malpighi 、 leeuwenhoek 、 Graaf 、 Bicha

t 、 Meyer 、 Schleiden 和 Schwann 等人均有所发现。

• 当代组织学：当代组织学：– 新仪器和相关技术，如流式细胞仪、图像分析仪、新仪器和相关技术，如流式细胞仪、图像分析仪、

共焦激光扫描显微镜、免疫组织化学、原位杂交技共焦激光扫描显微镜、免疫组织化学、原位杂交技术等。术等。

组胚学发展概况

Histology (microanatomy)

细胞发现和细胞学说的建立　　 组织学说　　迄今（经历了三百多年）

英国　　 Hooke 　 1635-1703 “cell” 意大利　 Malpighi 1628-1694 脾，肺，肾等组织结构荷兰　　 Leeuwenhoek 1632-1723 精子，红细胞，肌细胞，神经细胞法国　　 Bichat 1771-1882 “tissue”德国 Schleiden 1838-18? 9 创立细胞学说　　　　 Schwann 　　　　　　　　 19 世纪中期　 组织学　　　　　　　　 20 世纪初 组化，组培 20 世纪 40 年代 细胞，组织超微结构

我国 20 世纪初 从人体解剖学分化出—组织学 马文昭 1886-1965 细胞水平 张作干 1907-1969 细胞，组织超微结构

三、组织学的学习方法

平面与立体 结构与功能 静态与动态 综合与比较

平面与立体

单柱上皮不同方位的切片图

结构与功能

舒张状态

收缩状态

静态与动态

综合与比较

光镜技术四、组织学技术简介

⒈ 　普通光学显微镜术 石蜡切片术：适用于大多数组织样品的制作。

主要步骤：取材 → 固定 → 水洗 → 脱水 → 透明 → 包埋 → 切片 → 贴片 → 染色 → 封片 。

其它制片方法：适用于某些特殊样品的制作，许多步骤与上相同，但某些步骤则有所不同，如：涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等。

问题 解决方法

观察对象太小 放大 显微镜

观察对象无色，无反差 染色（ HE 染色）

观察对象生化成分不同 细胞化学、免疫组织化学

观察对象是活体 培养

组织胚胎学研究技术

一般光学显微镜（ light microscope, LM ）技术

HE 染色：苏木精（ Hematoxylin ）伊红（ Eosin ）染色

碱性染料

将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝色

酸性染料

将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色

细胞核中的 DNA 、 RNA, 细胞质中的 RNA

细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网）

Sampling fixed embedded staining

光学显微镜Light microscope

形态学研究 石蜡切片

冰冻切片

铺片

磨片

涂片

smear

Ground section

Stretched

电镜技术（ Electron Microscopy ）

透射电镜（ Transmission electron microscopy TEM ） :

取材 固定 包埋 超薄切片 电子染色 透射成像 用途 : 观察细胞内部结构

扫描电镜（ Scanning electron microscopy SEM ） : 取材 固定 干燥 喷金 扫描成像

用途 : 观察组织或细胞表面的立体结构

扫描电镜 （ Scanning electron microscope, SEM ）

观察细胞或组织的表面结构

以电子束穿透样品 , 经聚合放大后 , 显像于荧光屏上进行观察与摄片

透射电子显微镜 Transmission electron microscope

观察细胞内部结构观察细胞内部结构

组织块经取材组织块经取材固定后固定后 , , 干燥 干燥 ,,在标本表面先在标本表面先后喷一层碳膜后喷一层碳膜和合金膜和合金膜 ,, 镜镜下扫描成像下扫描成像

冷冻蚀刻复型术 (freeze etch replica)

兔胰腺腺细胞的冷冻割断电镜像 ×2000冷冻蚀刻复型术

组织化学和细胞化学技术 (histochemistry&cytochemistry)

利用化学或物理反应原理显示组织切片或细胞内某种化学成分 , 进行定位 , 定量及其与功能

相关的研究 .

过碘酸 Schiff 反应 (periodic acid Schiff reaction) ：简称

PAS 反应，是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法。 原理：

多糖 PA

氧化 醛Schiff

试剂紫红色沉淀

多糖显示法—》 PAS 反应 DNA 显示法 ------ 》 Feulgen 反应

免疫细胞（组织）化学 :

利用抗原（ antigen, Ag ），抗体（ antibody ）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。

激光扫描共聚焦显微镜 Laser scanning confocal microscope

原位杂交术In situ hybridization

通过检测细胞内 mRNA 和 DNA序列片段 ,原位研究细胞合成某种多肽和蛋白质的表达 .

细胞培养 (cell culture)