新型卵巢癌标记物新型卵巢癌标记物 HE4HE4的研究进展的研究进展

崔 恒崔 恒北京大学人民医院北京大学人民医院

妇科肿瘤中心妇科肿瘤中心

世界范围统计资料世界范围统计资料 癌癌 新发 新发 死亡 死亡 宫颈 宫颈 470,000470,000 230,000 230,000

卵巢卵巢 190,000190,000 114,000114,000

内膜 内膜 188,000188,000 45,000 45,000

美国 2008

卵巢癌的现状卵巢癌的现状 一个难题：无成熟的早期诊断方法；一个难题：无成熟的早期诊断方法； 二个二个 70%70% ：确诊时约：确诊时约 70%70% 已属晚期；治已属晚期；治

疗后即使是已达到临床完全缓解的病人仍疗后即使是已达到临床完全缓解的病人仍有有 70%70% 最终将复发；最终将复发；

三个进展：手术病理分期、肿瘤细胞减灭三个进展：手术病理分期、肿瘤细胞减灭术、紫杉醇术、紫杉醇 ++ 卡铂化疗方案卡铂化疗方案

四个焦点：保留生育四个焦点：保留生育 // 生理功能、早期的辅生理功能、早期的辅助治疗、晚期的治疗、复发的诊断和治疗助治疗、晚期的治疗、复发的诊断和治疗

卵巢癌的诊断策略卵巢癌的诊断策略 ----早期诊断早期诊断

卵巢癌的早期诊断一直是卵巢癌研究中卵巢癌的早期诊断一直是卵巢癌研究中最具挑战性的课题最具挑战性的课题

肿瘤诊断的三大支柱肿瘤诊断的三大支柱 图像诊断：图像诊断： BB 超超 CTCT 、、 MRIMRI PET/CTPET/CT 血液与体液检测：肿瘤标记物血液与体液检测：肿瘤标记物 细胞学与组织学诊断细胞学与组织学诊断

现阶段卵巢癌的诊断

目前常用的诊断方法包括：目前常用的诊断方法包括： 11 ）妇科）妇科三合诊；三合诊； 22 ）阴式彩色）阴式彩色 BB 超；超； 33 ）血）血清清 CA125CA125 的检测；的检测； 44 ）计算机断层）计算机断层扫描（扫描（ CTCT ）、磁共振成像（）、磁共振成像（ MRIMRI ）、）、正电子发射断层扫描（正电子发射断层扫描（ PETPET 或或PET/CTPET/CT ）等）等

关于诊断正在研究中的有：关于诊断正在研究中的有： 放射免疫显像（放射免疫显像（ RIIRII ）） 新的或多种血清标记物的检测新的或多种血清标记物的检测 血清中卵巢癌特异抗体的检测血清中卵巢癌特异抗体的检测 恶性肿瘤危险指数评分（恶性肿瘤危险指数评分（ RMI)RMI) 癌基因和抗癌基因突变的检测，特别癌基因和抗癌基因突变的检测，特别

是与遗传相关基因的检测（芯片）是与遗传相关基因的检测（芯片） 发现和寻找新的特异抗原和基因发现和寻找新的特异抗原和基因

肿瘤标记物的定义

与肿瘤相关的抗原或某种生物活性物质与肿瘤相关的抗原或某种生物活性物质 肿瘤细胞异常表达肿瘤细胞异常表达 反映癌变发生、发展过程反映癌变发生、发展过程 可被检出可被检出

有效的肿瘤标记物

特异性强特异性强 敏感性高敏感性高 交叉反应小交叉反应小 早期诊断率高早期诊断率高 随病情变化监测值变化明显随病情变化监测值变化明显

临床应用

肿瘤诊断及鉴别诊断肿瘤诊断及鉴别诊断 肿瘤残存肿瘤残存 复发的预测及复发部位监测复发的预测及复发部位监测 疗效观察及预后评估疗效观察及预后评估 对无症状早期癌及高危人群的筛查 对无症状早期癌及高危人群的筛查

血清肿瘤标志物的检测血清肿瘤标志物的检测 CA125CA125 是应用最多的卵巢癌血清肿瘤标志物，是应用最多的卵巢癌血清肿瘤标志物，

特别是最常用的监测卵巢癌复发的指标。特别是最常用的监测卵巢癌复发的指标。 ⅠⅠ期卵巢癌患者仅有约期卵巢癌患者仅有约 30-50% 30-50% ＞＞ 35u/ml35u/ml ，，

监测复发的敏感性、特异性、阳性预测值分别为监测复发的敏感性、特异性、阳性预测值分别为7979％、％、 9595％、％、 100100％。 ％。

11 ％健康妇女、％健康妇女、 33 ％良性卵巢肿瘤、％良性卵巢肿瘤、 66 ％非卵巢％非卵巢相关的良性疾病可有血清相关的良性疾病可有血清 CA125CA125 水平升高。在水平升高。在子宫内膜异位症、盆腔结核、炎症等甚至高达子宫内膜异位症、盆腔结核、炎症等甚至高达50-70%50-70%

卵巢癌相关的其它标志物卵巢癌相关的其它标志物 基因分析和组织化学分析已发现许多新的可能与卵巢癌相关基因分析和组织化学分析已发现许多新的可能与卵巢癌相关

的标志物的标志物 MUC1MUC1 KallikreinsKallikreins ：： hK4, hK6, hK8, hK10hK4, hK6, hK8, hK10 MesothelinMesothelin Antileukoproteinase 1 (ALP1)Antileukoproteinase 1 (ALP1) OsteopontinOsteopontin VEGFVEGF S100A1S100A1 InhibinInhibin LPALPA B7-H4B7-H4

HE4HE4 ，，表达上调在卵巢癌中最常见，且在早、晚期患者中表达上调在卵巢癌中最常见，且在早、晚期患者中mRNAmRNA 和蛋白的表达均上调。和蛋白的表达均上调。

HE4HE4 HE4 HE4 （（ Human Epididymis Secretory Human Epididymis Secretory

Protein 4,Protein 4, 人附睾分泌蛋白人附睾分泌蛋白 44 ） ） 19911991年由年由 KirchhoffKirchhoff 等从人的附睾中克隆出等从人的附睾中克隆出

cDNAcDNA ，基因定位在染色体 ，基因定位在染色体 20q12-q13.120q12-q13.1 ，，全长为全长为 12kb12kb左右，由左右，由 55 个外显子和个外显子和 44 个内含子个内含子组成，编码的蛋白质与细胞外蛋白酶抑制剂有很组成，编码的蛋白质与细胞外蛋白酶抑制剂有很高的同源性，是一种酸性蛋白质。高的同源性，是一种酸性蛋白质。

• 1999 年 Schummer 等发现 HE4 mRNA 在卵巢癌组织中高表达，而在癌旁组织中 不表达。 HE4 在恶性肿瘤中的高表达多见于卵巢癌、子宫内膜癌，少见于肺腺癌及间皮瘤。

• HE4 在早期（ I 期）的卵巢癌中的敏感性及检测卵巢癌总的敏感性均高于 CA125，是卵巢癌敏感及特异的标志物，可用于对卵巢癌的早期诊断及辅助监控卵巢癌患者的治疗情况。

英国的一项研究对英国的一项研究对 200200 ，， 000000 妇女用妇女用 3030多种肿瘤标记物分别单独或与多种肿瘤标记物分别单独或与 CA125CA125 联联合进行卵巢癌筛查，合进行卵巢癌筛查， HE4HE4 可以使诊断卵可以使诊断卵巢癌的敏感度和特异度提高 巢癌的敏感度和特异度提高

Biochemistry of HE4Biochemistry of HE4HE4 - Human Epidiymis secretory HE4 - Human Epidiymis secretory

protein 4protein 4 Member of the WAP-gene family of Member of the WAP-gene family of

protease inhibitors protease inhibitors (new name WFDC-(new name WFDC-gene family)gene family)

Characterized by an approx 50 aa Characterized by an approx 50 aa sequence with 8 highly conserved cysteine sequence with 8 highly conserved cysteine residues that form 4 disulphide bridges.residues that form 4 disulphide bridges.

WFDC (Whey Acidic Protein Four WFDC (Whey Acidic Protein Four Disulphide Core)Disulphide Core)

Tumour associated WFDC-proteinsTumour associated WFDC-proteins ALP1, Elafin, HE4 (WFDC2), PS20 (WFDC1)ALP1, Elafin, HE4 (WFDC2), PS20 (WFDC1)

Chromosome 20q12- q13.1 contains a locus with several members of the WFDC family.

Amplified in several cancers: ovarian, breast, Colon, pancreatic, lung cancer

WFDC gene locus

HE4 mRNA expression profile

Restricted expression profile in normal tissue

• Expressed in normal epididymis, and epithelia of the respiratory and reproductive tract

• Tumor-restricted expression in ovarian cancer

• > 90 % of serous ovarian cancer

• HE4 mRNA highly expressed in lung adenocarcinomas

• > 60 % high expression in AdC• < 10 % high expression in SqC

From Galgano et al Modern Pathol (2006)19; 847 - 853

Expression of HE4 mRNA in cancer

HE4 antigen expression in Ovarian cancer

Galgano et al Modern Pathol (2006)19; 847 - 853

HE4 antigen is highly expressed in serous, endometroid and clear cell ovarian cancer

Mucinous, germ cell or sex cord ovarian cancer barely express HE4

Drapkin et al Cancer Res (2005) 65;2162-2169

HE4 是一种适宜的卵巢癌血清标志物

• HE4 可分泌入体液• 正常卵巢不表达，而在卵巢癌高表达 -- 特异性好• 在早期和晚期 HE4 表达均呈高度上调 – 早期病例具有高度敏感性• HE4 的表达独立于 CA125 的表达 – 联合检测将较各自单独检测获得更 多的信息

HE4HE4 诊断试剂盒诊断试剂盒 HE4 EIA试剂盒由瑞典 Fujirebio

Diagnostics AB公司生产，已经获得了FDA认证和 CE认证，在美国、欧洲等多个国家上市销售，现正在申请在中国上市注册。

Fujirebio Diagnostics AB公司研制的 HE4 EIA试剂是国外唯一用于定量检测人血清中 HE4 的试剂，国内尚无任何检测 HE4 的试剂上市销售。

HE4 EIA 方法的建立 • 主要试剂：

2H5 and 3D8 MAb established using HE4-Mouse Ig fusion protein as immunogen Hellstrom et al, Cancer Research 63, 3695 – 3700, 2003

• 检测原理：Two-step forward sandwich

immunoassay based on Bio 2H5 MAb for catching of HE4 and HRP 3D8 MAb for detection

HE4 用于监测卵巢癌

约 80% 患者 HE4 与 CA125 相符，与病情一致

0

80

160

240

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0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.50

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HE4 EIA (pM)

Architect CA125II (U/mL)

RS R

Months from Initial Draw

CA

125

(U/m

L) H

E4 (pM

)

•Study on 80 patients, 4,4 observations/patient•Measured concordance between biomarker change & clinical status•Compared HE4 and CA125

0

500

1000

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8500

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 110

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010020030040050060070080090010001100120013001400150016001700180019002000210022002300

HE4 EIA (pM)

Architect CA125II (U/mL)

PDS SR S PD

Months from Initial Draw

CA

125

(U/m

L) H

E4 (pM

)

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HE4 EIA (pM)

Architect CA125II (U/mL)

S PDS PDPD PD

Months from Initial Draw

CA

125

(U/m

L) H

E4 (pM

)

HE4 在卵巢癌的动态监测中与CA125 具有良好的互补性

Conclusion: HE4 and CA 125 show equivalent but complementary performance for monitoring of ovarian cancer

05

101520253035404550556065707580859095

100105

0.0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8 5.2 5.605

101520253035404550556065707580859095

100105

05101520253035404550556065707580859095100105

HE4 EIA (pM)

Architect CA125II (U/mL)

PDSS

Months from Initial Draw

CA

125

(U

/mL

) HE

4 (pM)

HE4 EIAHE4 EIA 中国注册临床试验总结中国注册临床试验总结

瑞典康乃格公司市场部 瑞典康乃格公司市场部 20092009 年年 33 月月

临床研究方案 样本量及样本量确定的依据

根据国食药监械 [2007]240号发布的《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》（以下简称“临床导则”）， HE4 EIA属于进口三类体外诊断试剂。

临床导则要求临床验证至少要在三家省级以上医院进行实施，总样本数不少于1000 人份。

样本选择依据

HE4 EIA试剂属于国内首次申请注册的用于定量检测患者血清中的 HE4浓度，可用于上皮性卵巢癌患者的辅助诊断和疗效监测。因此，临床试验收集的血清样本包括：

上皮性卵巢癌样本、盆腔包块疑似样本、正常健康人样本、其他肿瘤样本、良性疾病样本及干扰样本等。同时包括临床收集的跟踪样本。

入选标准：不同样本组收集的血清，要求知道当前受试者的临床诊断。收集的血清样本要求足够用于试剂盒的检测。

样本收集：根据样本要求，医院收集常规的血清样本，要求标记清楚。

样本保存：血清样本在 2-8℃条件下可以保存 3天，或者

- 40℃下长期保存。 样本运输：血清样本的运输需要在 2-8℃条件下进行，样本的使用不能超过限定时间。所有人体来源的样本必须按照国家和国际的运输规章运送。

金标准的确立：临床采用病理检测结果作为卵巢癌诊断的金标准。

质量控制方法： 严格按照产品的说明书要求进行操作，要求质控

品 C1 和 C2结果在标示范围内； 严格执行编盲的原则，避免主观判断影响产品的

检测结果； 产品检测过程中，为了避免人为试验误差，在产品解盲后，如果研究试剂和金标准结果不一致，要求进行重复测定。

临床研究观察指标

CUT-OFF 值 汇总正常健康女性样本的检测结果，给出 P95结果作为 CUT-OFF 值。参考试剂盒提供的 CUT-OFF 值，对中国健康人群的 CUT-OFF 值进行评价。

灵敏度、特异性、总符合率、阳性预期值和阴性预期值。

临床疗效监测 将浓度变化和病程发展汇总到 2x2 表格中，分

析 HE4 在疗效跟踪上的有效性。 临床试验中的精密度、重复性的检测。

多中心临床研究医院医院 检测样本数检测样本数 主要研究者主要研究者

第第 11 分中心分中心 339339 例例 崔恒崔恒

第第 22 分中心分中心 344344 例例 张震宇张震宇

第第 33 分中心分中心 394394 例例 张晓霞张晓霞

合计：合计： 10771077 例例

检测样本分布

分组分组 样本类型样本类型 样本数样本数 年龄分布年龄分布11 上皮性卵巢癌上皮性卵巢癌 9696例例 25-7525-75岁岁

22 健康人群健康人群 363363例例 17-8217-82岁岁

33 其他肿瘤其他肿瘤 （肺癌、乳腺癌、肠癌 （肺癌、乳腺癌、肠癌等）等）

9898例例 20-8020-80岁岁

44 疑似样本疑似样本 （盆腔包块患者） （盆腔包块患者） 305305例例 12-8712-87岁岁

55 干扰样本（高胆红素、高脂）干扰样本（高胆红素、高脂） 110110例例 13-7913-79岁岁

66 良性疾病良性疾病 （高血压、妇科炎症等） （高血压、妇科炎症等） 9595例例 21-8221-82岁岁

77 交界性肿瘤交界性肿瘤 1010例例 25-8725-87岁岁

合计合计 10771077例例

中国人群 CUT-OFF 值的评价 临床检测正常健康人群样本 363例， HE4浓度检测值范围为：22.8-106.0pM

73.7pM ：中国健康人组（ P95 ）的参考值。

150pM ：试剂盒提供的参考值。

各中心健康人 CUT-OFF 值的评价

中心分布中心分布 CUT-OFF(P95)CUT-OFF(P95)

第第 11 分中心分中心 78.3pM78.3pM

第第 22 分中心分中心 67.8pM67.8pM

第第 33 分中心分中心 72.6pM72.6pM

中国健康人群中国健康人群 73.7pM73.7pM

各分中心评价中国健康人群的 CUT-OFF 值基本一致，可以选择 73.7pM作为中国

正常健康人群的参考范围。

不同的 CUT － OFF 值对卵巢恶性肿瘤的诊断能力

CUTCUT －－ OFF OFF 灵敏度 特异性 总符合率 阳性预检值 阴性预检灵敏度 特异性 总符合率 阳性预检值 阴性预检值值

73.7pM 91.773.7pM 91.7 ％ ％ 84.484.4 ％ ％ 85.185.1 ％ ％ 36.836.8 ％ ％ 99.099.0 ％％

150pM 77.1150pM 77.1 ％ ％ 98.198.1 ％ ％ 96.396.3 ％ ％ 80.480.4 ％ ％ 97.797.7 ％％

结论：以 73.7 pM作为 CUT-OFF 值时，可以大大提高对上皮性卵巢癌病人的诊断率，避免漏检。 以 150 pM作为 CUT-OFF 值时， HE4 在健康人群及良性疾患等对照组中的具高特异性，能有效的鉴别诊断卵巢良、恶性肿瘤，为临床上皮性卵巢癌的辅助诊断提供有力帮助。

入组患者血清 HE4水平分布

样本类型样本类型 HE4HE4 测定值分布（测定值分布（ n=1067n=1067 例）例） 阳性率（％）阳性率（％）

总例数总例数 0-73.7pM0-73.7pM 73.7-73.7-150pM150pM

>150p>150pMM

CUTOFF=73.7CUTOFF=73.7pMpM

CUTOFF=150CUTOFF=150pMpM

上皮性卵巢癌上皮性卵巢癌 9696 88 1414 7474 91.791.7 ％（％（ 88/988/966 ））

77.1%(74/9677.1%(74/96))

盆腔良性疾病盆腔良性疾病 305305 262262 4040 33 14.1%(43/3014.1%(43/305)5)

0.98%(3/3050.98%(3/305))

非盆腔良性疾病非盆腔良性疾病 9595 6262 3232 11 34.7%(33/95)34.7%(33/95) 1.05%(1/95)1.05%(1/95)

其它肿瘤患者其它肿瘤患者 9898 6262 3333 33 36.7%(36/98)36.7%(36/98) 3.1%(3/98)3.1%(3/98)

健康人群健康人群 363363 345345 1818 00 4.95%(18/364.95%(18/363)3)

00

干扰样本干扰样本 110110 8989 1010 1111 19.1%(21/1119.1%(21/110)0)

10%(11/110)10%(11/110)

说明：在干扰样本中，提示高胆红素可能对 HE4 的检测有干扰，与国外研究结果

一致。

HE4 在卵巢癌恶性肿瘤中的动态监测的评价

动态监测 HE4浓度变化要求： 为了避免试剂检测中存在的偏差，选择 2.5倍的最大精密

度 (CV)作为 HE4浓度变化的指标。 HE4 的阳性变化（阳转） / 阴性变化（阴转）为当前结果比前一测试结果的测定值升高或者降低至少 2.5倍最大 CV 。

动态监测样本： 多中心临床动态监测评价，共收集 34例上皮性卵巢癌

患者的 64份血清。 32例患者同时收集了术前、术后样本。 2 例患者动态监测均为术后样本。

HE4浓度变化与病程发展情况统计

HE4HE4浓度变化浓度变化 恶化恶化 无恶化无恶化 合计合计

阳转阳转 00 33 33

无阳转无阳转 00 6161 6161

合计合计 00 6464 6464

临床动态监测符合率 : 61/64=95.3% ， HE4 可以用于上皮性卵巢癌的疗效监测。

32例患者术前 /术后 HE4浓度变化图

备注： HE4浓度变化值 = （手术后 HE4浓度 -手术前 HE4浓度） /手术前HE4浓度×100%

其中 1-25号为阴转样本， 26-32号为非阴转样本。

-120.00%

-100.00%

-80.00%

-60.00%

-40.00%

-20.00%

0.00%

20.00%

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314151617181920212223242526272829303132

卵巢癌患者姓名

HE4

浓度

变化

值（

%）

HE4 EIA精密度的评价 三家临床医院测定的 3 份高、中、低临床样本结果分别进行汇总分析

每份样本有 30次检测结果，分别计算 CV值， CV 值均低于 15%

符合临床试验方案要求。

HE4 在交界性肿瘤的浓度分布 临床试验过程中共检测了 10例交界性肿瘤，其中 2 例 HE4浓度分布为 150-300pM ，3 例为 73.7-150pM ， 5 例低于73.7pM 。

研究结果 当以 73.7 pM作为 CUT-OFF 值时，临床在进行诊断中如果能结合其它的临床诊断方法，可以大大提高对上皮性卵巢癌病人的诊断率，避免漏检，以免贻误患者的治疗。

当以 150 pM作为 CUT-OFF 值时， HE4 在健康人群及良性疾患等对照组中的具高特异性，能有效的鉴别诊断卵巢良、恶性肿瘤，为临床上皮性卵巢癌的辅助诊断提供有力帮助。

HE4浓度变化与病情发展间的一致性为 95.3% (61/64) ，说明 HE4 EIA 可以用于上皮性卵巢癌的疗效监测。

精密度试验结果提示证明试剂盒性能可靠、方法稳定。

HE4HE4 与与 CA125CA125 血清检测比较血清检测比较（北京大学人民医院）（北京大学人民医院）

总例数 总例数 HE4(pmol/L) CA125 (ku/L) HE4(pmol/L) CA125 (ku/L) P P 值值

中位数中位数 (( 范围范围 ) ) 阳性率 中位数阳性率 中位数 (( 范围范围 ) ) 阳性率 阳性率

卵巢恶性肿瘤 卵巢恶性肿瘤 30 243.8( 27.3~1306.2) 63.3% 601.4(6.2~797.6) 30 243.8( 27.3~1306.2) 63.3% 601.4(6.2~797.6) 86.7% 0.03 86.7% 0.03

卵巢良性疾病卵巢良性疾病 卵巢良性肿瘤 卵巢良性肿瘤 45 24.7(8~ 65.7) 0 12.0(2.8~735.5) 45 24.7(8~ 65.7) 0 12.0(2.8~735.5)

8.9% 0.058 8.9% 0.058

子宫内膜异位 子宫内膜异位 57 38.3(6.5~67.3) 0 52.9(8.9~ 644.9) 57 38.3(6.5~67.3) 0 52.9(8.9~ 644.9) 56.1% 0.00056.1% 0.000

盆腔炎性疾病 盆腔炎性疾病 8 26.5(11~ 36.7) 0 41.3(6.3~741.6) 8 26.5(11~ 36.7) 0 41.3(6.3~741.6) 62.5% 0.00062.5% 0.000

健康人 健康人 137 32.4(19.4~107.2) 0 11.1(1.4~28.8) 0 137 32.4(19.4~107.2) 0 11.1(1.4~28.8) 0 / /

Allard Allard 在在 20082008 年年 ASCOASCO会议上报道，对会议上报道，对 8080例上皮性卵巢癌患者经过治疗后监测复发的例上皮性卵巢癌患者经过治疗后监测复发的 434434个血清样本，分别检测其个血清样本，分别检测其 CA125CA125 和和 HE4HE4 ，临床，临床用用 CTCT影像学来判断肿瘤大小和复发。结果 影像学来判断肿瘤大小和复发。结果 CA125 CA125 或或 HE4 HE4 联合应用与临床一致性较高，联合应用与临床一致性较高，为 为 83.8% (67/80)83.8% (67/80) 。。

连续动态监测临床符合率： 连续动态监测临床符合率： CA125CA125 78.8% 78.8% (63/80)(63/80) ； ； HE4 76.2% (61/80). HE4 76.2% (61/80).

CA125 CA125 不符时不符时 , HE4, HE4符合率 符合率 23.5% (4/17).23.5% (4/17). ；；HE4 HE4 不符时 不符时 CA125 CA125 符合率 符合率 31.6% (6/19). 31.6% (6/19).

联合 联合 CA125 or HE4 CA125 or HE4 临床符合率 临床符合率 83.8% 83.8% (67/80). (67/80).

• 1 out of 5 women will be diagnosed with an adnexal mass during their lifetime1

• 5 - 10% of women will have surgery for an ovarian neoplasm

• 13 - 21% of these masses will be malignant

• 由妇科肿瘤专科医生施行手术将改善卵巢癌的预后

• 问题是： How do we identify malignant pelvic masses from benign masses?

术前确诊可改善卵巢癌预后

Improved survival with surgery by ovarian cancer specialists

Paulsen et al, Int J Gynecol Ca, 2006: 16; 11-17C- 45C- 45

TH: Teaching hospitalNTH: Nonteaching hospital

Type of Surgeon Impacts Survival rates

Type of Hospital Impacts Survival rates

ROMAPremenopausal women

Predictive Index (PI) = --12.0 + 2.38*LN[HE4] + 0.0626*LN[CA125]

Postmenopausal women

Predictive Index (PI) = - 8.09 + 1.04*LN[HE4] + 0.732*LN [CA125]

ROMA value = expPI / [1 + expPI] x 100

• Risk of Ovarian Malignancy Algorithm (ROMA) value

• Estimate of the risk of ovarian cancer given that the patient had a pelvic mass; their HE4 and CA125 values; and their menopausal status

Biomarker and ROMA Scatterplot

ROMA Validation trial - Conclusions

• At a specificity of 75%, the overall sensitivity for EOC+LMP was 89%

• Overall sensitivity for EOC was 94%• Pre-menopausal women 89%• Post-menopausal women 95%

• NPV 94% for EOC+LMP in Pre- and postmenopausal women combined

• NPV 97% for EOC• 17/279 (6%) patients classified as low risk had EOC or LMP• 9/17 had LMP tumor• 1 (0.4%) had late stage (III/IV) cancer

• ROMA effectively stratifies patients with pelvic mass into groups with low and high risk of having epithelial ovarian cancer

C- 50

ROMA™ vs RMI

Risk of Malignancy Index (RMI)

RMI = U x M x serum CA 125 levelU = 0 for imaging score of 0= 1 for imaging score of 1= 3 for imaging score of 2-5

M = 1 if premenopausal= 3 if postmenopausal

Jacobs I et al. Br J Obstet Gynecol.1990; 97:992-929.

ROMA™ has increased sensitivity compared with RMI

Pre & PostMenopaus

al

Benign (n = 315) vs EOC (n = 124)

Sensitivity* (95% CI)

Specificity (95% CI)

RMI 85% (77% to 90%) 75% (70% to 80%)

ROMA™ 94% (89% to 98%) 75% (70% to 80%)

Benign and EOC: All Stages

*Two Sample Test of Equality of Proportions p=0.0129CI: Confidence Interval

ROMA™ Has Increased Sensitivity vs RMI For Early

Stage Cancer

Pre & PostMenopausa

l

Benign (n=315) vs Stage I-II EOC (n=35)

Sensitivity* (95% CI)

Specificity (95% CI)

RMI 66% (48% to 81%) 75% (70% to 80%)

ROMA™ 86% (70% to 95%) 75% (70% to 80%)

Benign and EOC: Stage I & II

*Two Sample Test of Equality of Proportions p=0.0510CI: Confidence Interval

表 患者被 ROMA划分为高危组和低危组的分布 月经状态 疾病 高危 (例 ) 低危 ( 例 ) 合计 ( 例 ) 敏感性 (%) 特异性 (%) PPV (%) NPV (%) 绝经后 恶性 35 2 37 EOC 28 0 28 良性 4 8 12 合计 a 32 8 40 100.0 66.7 87.5

100.0 合计 b 39 10 49 94.6 66.7 89.7

80.0 绝经前 恶性 12 4 16 EOC 8 0 8 良性 23 103 126 合计 a 31 103 134 100.0 81.7 25.8

100.0 合计 b 35 107 142 75.0 81.7 22.9

96.3 全部 恶性 47 6 53 EOC 36 0 36 良性 27 111 138 合计 a 63 111 174 100.0 80.4 57.1

100.0 合计 b 74 117 191 88.7 80.4 63.5

94.9

a ：指 EOC 与良性肿瘤的合计， b ：指恶性肿瘤与良性肿瘤的合计

HE4 Clinical Investigations Italy

Mestre-Venice – Pelvic mass Milano – Pelvic mass Brescia – Endometrial cancer Roma – Ongoing real life study

Norway Oslo – Many biobank studies

Sweden Stockholm – Biobank pelvic mass

Brasil Sao Paolo – Ovarian cancer

Belgium Leuven – Pelvic mass

HE4 Clinical Investigations

HE4 用于卵巢癌的动态监测和对复发的诊断 血清 HE4 与 CA125联合检测用于鉴别卵巢

癌和卵巢子宫内膜异位症 血清 HE4 检测用于子宫内膜癌的诊断和随访 血清 HE4 用于肺癌的诊断

HE4联合 CA125鉴别诊断子宫内膜异位症和卵巢癌

HE4 的编码基因 WFDC2主要在卵巢子宫内膜样癌、子宫内膜癌中有表达 , 并且在正常的子宫内膜腺体中也有表达，但是在子宫内膜异位病灶中是否有表达尚不明确，

我们实验室最检测了 57例卵巢子宫内膜异位症患者血浆中 HE4 和 CA125 的浓度。数据结果与 49例卵巢癌， 60例卵巢良性肿物， 50例健康对照作对比，初步探讨血清人附睾分泌蛋白 4(HE4) 和 CA125水平检测在鉴别诊断子宫内膜异位症和卵巢癌的价值。

（ 1 ） CA125 在各组中的中位数 （ 2 ） HE4 在各组中的中位数

在子宫内膜异位症中 在卵巢癌中 HE4 和 CA125 无相关性 HE4 和 CA125 有相关性

r=0.14

P=0.125

r=0.475

P<0.05

卵巢子宫内膜异位囊肿以正常为参照 卵巢子宫内膜异位囊肿以良性肿物为参照 HE4:ROC-AUC<0.5 无诊断意义 HE4:ROC-AUC<0.5 无诊断意义

HE4:ROC-AUC =0.453

HE4:ROC-AUC

=0.453

卵巢癌以卵巢子宫内膜异位囊肿为参照 HE4:ROC-AUC=0.933

HE4:ROC-AUC=0.933

CA125:ROC-AUC=0.821

HE4+CA125 :ROC-AUC=0.936

HE4 和 CA125联合诊断 CA125 可以排除良性卵巢肿物和盆腔子宫内膜异位症，但是不能鉴别卵巢子宫内膜异位囊肿和卵巢

癌 HE4 对卵巢癌有高度的敏感性，因此可以将卵巢子宫内膜异位囊肿和卵巢癌区分开

相同特异度下的敏感度

因此， HE4联合 CA125 可作为子宫内膜异位囊肿和卵巢癌的鉴别诊断依据

对超声显示有盆腔包块的患者： HE4 和 CA125水平同时升高提示卵巢癌可

能； CA125升高 HE4 无明显升高提示卵巢子宫

内膜异位可能；

HE4作为卵巢癌、子宫内膜异位症和其他恶性肿瘤的标志物，正在临床发挥越来越重要的作用。随着对 HE4 基础研究的深入，还有可能在临床产生更加重大的意义。

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