12
대한피부미용학회지 제7권 제3호 239 <목 > Ⅰ.서론 Ⅱ.본론 1.이론적배경 2.실험재료 3.실험방법 Ⅲ.결과 및 고찰 Ⅳ.결론 참고문헌 아토피 피부염의 동물 모델인 NC/Ngamice 고삼 증류수 추출물 크림이 미치는 영향에 대한 연구 송다해 김형주 건국대학교 생물공학과 초록 아토피(atopy)는‘이상한(strange)’혹은‘부적절한(outofplace)’이라는의미를지닌용어로서,음식 물 또는 흡입성 물질에 대한 알레르기 반응이 유전적으로 발생하는 경우를 일컫는다.난치성인 이 질환 을 위해 다양한 치료법들이 시도되고 있으나,많은 부작용들로 인해 아토피 피부염 환자들은 늘어만 가 고 있는 실정이다.따라서 본 연구는 치료효과는 높으면서 부작용이 적은 천연물의 계발을 위해 기초 자 료검색을 통해 가능성이 있다고 사료되는 고삼을 선별하였다.본 연구에 사용한 고삼(Sophore fla- vescentisradix)은콩과에속한다년생초본으로우리나라전국각지의산야의양지의초원에자생하며 ,봄과 가을에 채취하여 햇볕에 말린 것을 사용하며 근은 고삼,종자는 고삼실이라 칭하며 약용한다. 고 삼의작용으로항균작용,소염작용,항알레르기작용,항암작용,이뇨작용,강심작용,항원충작용,항바이 러스 작용,진정작용,항뇌수종 작용 등이 알려져 있다. 따라서본연구에서는고삼을distilledwater로추출하여엑스로만들어크림으로조제후NC/Nga 마우스들에 도포하여 Clinicalskinscore,혈청IgE,마우스귀의부종및두께변화,피부의염증,수분, 유분정도를 측정한 결과 유의한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다. 주제어:아토피피부염,고삼, Sophoreflavescentisradix ,IgE,NC/Nga마우스 교신담당저자 : 김 형 주 E-mail:[email protected] Tel:010-9279-7276 접수일자:2009년7월26일 수정일자:2009년8월12일 게재확정일자:2009년8월14일

아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

대한피부미용학회지 제7권 제3호 239

< 목 차 >

Ⅰ.서 론

Ⅱ.본 론

1.이론 배경

2.실험 재료

3.실험방법

Ⅲ.결과 고찰

Ⅳ.결론

참고문헌

아토피 피부염의 동물 모델인 NC/Ngamice에

고삼 증류수 추출물 크림이 미치는 향에 한 연구

송 다 해 ・김 형 주†

건국 학교 생물공학과

아토피(atopy)는 ‘이상한 (strange)’혹은 ‘부 한 (outofplace)’이라는 의미를 지닌 용어로서,음식

물 는 흡입성 물질에 한 알 르기 반응이 유 으로 발생하는 경우를 일컫는다.난치성인 이 질환

을 해 다양한 치료법들이 시도되고 있으나,많은 부작용들로 인해 아토피 피부염 환자들은 늘어만 가

고 있는 실정이다.따라서 본 연구는 치료효과는 높으면서 부작용이 은 천연물의 계발을 해 기 자

료검색을 통해 가능성이 있다고 사료되는 고삼을 선별하 다.본 연구에 사용한 고삼(Sophorefla-

vescentisradix)은 콩과에 속한 다년생 본으로 우리나라 국 각지의 산야의 양지의 원에 자생하며

,과 가을에 채취하여 햇볕에 말린 것을 사용하며 근은 고삼,종자는 고삼실이라 칭하며 약용한다. 고

삼의 작용으로 항균작용,소염작용,항알 르기 작용,항암작용,이뇨작용,강심작용,항원충 작용,항바이

러스 작용,진정작용,항뇌수종 작용 등이 알려져 있다.

따라서 본 연구에서는 고삼을 distilledwater로 추출하여 엑스로 만들어 크림으로 조제 후 NC/Nga

마우스들에 도포하여 Clinicalskinscore, 청 IgE,마우스 귀의 부종 두께변화,피부의 염증,수분,

유분정도를 측정한 결과 유의한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다.

주제어:아토피 피부염,고삼,Sophoreflavescentisradix,IgE,NC/Nga마우스

†교신담당 자 :김 형 주 E-mail:[email protected] Tel:010-9279-7276

• 수일자 :2009년 7월 26일 •수정일자 :2009년 8월 12일 •게재확정일자 :2009년 8월 14일

Page 2: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

240

Ⅰ.서 론

아토피(atopy)는 ‘이상한 (strange)’혹은 ‘부

한 (outofplace)’이라는 의미를 지닌 용어로

서,음식물 는 흡입성 물질에 한 알 르기 반

응이 유 으로 발생하는 경우를 일컫는다.1925

년 Coca가 선천 으로 음식물과 흡입성 물질에

한 알 르기 반응의 결과로 피부염이나 천식,

고 열이 나타나는 경향을 아토피라고 기술한 이

후부터 쓰이게 되었는데,아토피성 질환에는 아토

피 피부염 이외에 천식,알 르기성 비염,알 르

기성 결막염 등이 있다.1)

아토피 피부염의 치료를 해 다양한 약물요법

이 시도되고 있으나 국 등학생의 24.9%, 학

생의 12.8%가 아토피 피부염을 진단받았으며,

6-12세 사이의 아토피 유병률이 1995년 15.3%에

서 2000년 17%로 증가한 것으로 나타났다.2)

한 스테로이드제는 장기간 투여 시 피부 축

이나 moonface,쿠싱 증후군,buffallohump등

의 발생가능성과 primecrolimus의 경우 피부 도

포 시 홍반,가려움,부종 종,짖무름 등의 부작

용등이 보고되고 있다.3)

따라서 본 연구는 치료효과는 높으면서 부작용

이 은천연물의 계발을 해 기 자료검색을통

해 가능성이 있다고 사료되는 고삼을 선별하 다.

본 연구에 사용한 고삼(Sophoreflavescentis

radix)은 콩과에 속한 다년생 본으로 우리나라

1)김정원,변 규,은희철,김 근,피부과학 개정4 ,서

울:한 피부과학회 교과서 편찬 원회 편 ,p.694-701,

2001

2)김철홍,이상일,이수 ,최성연,이 성,김규언,1995

년과 2000년의 학동기와 2003년 학동 기 소아에서의 아

토피 피부염의 역학 변화에 한 국 인 연구,소아

알 르기 호흡기학회지,13(4):p.227-237,2003

3) 은희철, 피부 면역학, 서울:서울 학교 출 부,

p27-34,1999

국 각지의 산야의 양지의 원에 자생하며,

과 가을에 채취하여 햇볕에 말린 것을 사용하며

근은 고삼,종자는 고삼실이라 칭하며 약용한다.

4)5)

고삼의 작용으로 항균작용,소염작용,항 알 르

기 작용,항암작용,이뇨작용,강심작용,항원충 작

용,항바이러스 작용,진정작용,항뇌수종작용 등이

알려져 있다.6),7)

고삼을 이용한 각 피부염에 한 연구는 보고되

고 있으나 아토피 피부염과 련 특히 고삼을 경구

용이 아닌 국소 으로 피부에 용 시 효과에 한

연구는 거의 이루어지지 않고 있다.

이러한 배경으로 본 연구에서는 고삼을 distillde

water로 추출하여 엑스로 만들어 크림으로 조제 후

NC/Nga마우스들에 도포하여 Clinicalskinscore,

청 IgE,마우스 귀의 부종 두께변화,피부의

염증,수분,유분정도를 측정한 결과 유의한 결과를

얻었기에 이를 보고하는 바이다.

Ⅱ.본 론

1. 이론적 배경

아토피 피부염의 치료로 여러 가지 측면에서의

치료법이 있는데 피부과 치료법은 가려움증

피부염의 완화를 하여 항히스타민제를 사용하

며,국소 부신피질 호르몬제는 아토피 피부염의

기본 인 치료 약제로 소염작용과 면역억제 작용

이 있어 병변의 염증을 완화시키는 작용을 해

4)이 노,한국식물도감,서울:교학사,p.366-367,2001

5)김태정,한국의 자원식물,서울 학교 출 부,p200,

1996

6)김호철,한약약리학,서울,:집문당,p141-143,2001

7)지형 ,이상인,학약 학약 외 한약규격주해,

서울:한국메디칼인덱스사,p.397-398,1998

Page 3: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

대한피부미용학회지 제7권 제3호 241

사용한다.다만 스테로이드제는 장기간 투여 시

피부 축이나 moonface,쿠싱 증후군,buffallo

hump등이 발생가능성과 항히스타민제의 경우 졸

음,어지러움 등의 부작용이 보고되고 있다.

한다른치료에반응을보이지않는심한경우

에 UVB,고용량의 UVA,UVB와 UVA병합요법,

PUVA등의 다양한 치료방법을 시도할 수 있다.

증상이 심한 환자의 치료에 면역억제제인

cyclosporin경구 제제가 도움이 되기도 하나,부

작용으로 고 압,신독성 간독성 등이 발생할

수 있다.본 실험에 사용한 NC/Nga마우스는 태

어난 후 어렸을 때부터 일반사육환경

(conventionalsystem)에서 노출되어 자라게 되는

경우 8주령 이후부터 사람의 아토피 피부염과 같

은 피부 발진 소양증 등이 발생함은 물론 IgE

의과 생산으로 아토피 피부염의 모델로 보고되고

있다.8)

보통 아토피 환자들에게 페치테스트,스크 치

검사등을사정해보면집먼지진드기항원에높은

양성반응을 보이는데,집먼지 진드기의 주종은

Dermatohagoidesfarinae로 이것의 몸체와 배설

물은 아토피 피부염의 주 환경유발 항원으로 잘

알려져 있다.9)

고삼은 맛이 쓰고 인삼의 효능이 있어 소화불

량,신경통,간염,황달,치질,피부 소양 등에 처방

하며,성질은차가우며맛은쓰다.민간에서는 기나

8)VestergaardC,YoneyamaH, MuraiM,NakamuraK,

TamakiK, Terashima Y, et al., Overproduction of

Th2-specipicchemokinesinNC/Ngamiceexhibitingatopic

dermatitis-likelesions.JClinInveset.,104(8):p.1907-105,

1999

9)omoyukiOshio,YasuharuSasaki,Megumi

Funakoshi-Tago,ErikoAizu-Yokota,YoshikoSonodaetal.,

Dermatophagoidesfarinaeextractinducesseveredermatitis

inNC/Ngamice,whichiseffectivelysuppressedbythe

administrationoftacrolimusointment.,Intermational

Immunohamacology.,9,p.403-411,2009

잎을 달여서 살충제로 쓰기도 한다.10),11)

고삼에는여러종류의alkaloids(3-4%)가포함되어있

는데,주성분은 matrine,oxymatrine,sophoranol,hydrox

ymatrine, anagyrine, methylcytisine, baptifoline

sophocarpin등이 함유되어 있고,그 외 flavonoid화합물

(6-10%)인 xanthohumol,isoxanthohumol,kurarinone,

kushenolC,kuchenolG,Kurarinol등을함유하고있다.12)

고삼의 작용으로 항균작용,소염작용,항알 르

기 작용,항암작용,이뇨작용,강심작용,항원충 작

용,항바이러스작용,진정작용,항뇌수종작용등

이 알려져 있다.

한 고삼의 matrine 성분과 황 의 최근

baicalin성분을결합한국소용 연고는항염효과가

있어 피부의 습진,신경성 피부염,건선에 효과가

있으며13),피부 백선균에도 고백반 등을 배합하여

연고를 만들어 환부에 붙여서 치료한다.14)

와같은문헌고찰들을통해 고삼을아토피피

부염의치료제혹은보조제로계발하고자 본연구

를 시작하 다.

2. 실험 재료

1) 시약

본실험에사용된시약은다음과같다.(에탄올,아세톤뺏

습니다.) IgEELISA kit는 Shibayagi社(Japan)일본,

stearylalchol,whitevaselin,tween80,propyleneglycol은

덕산 미컬(한국)에서구입하 다.

10)심민교 편 ,임상본 학,서울:림사,p394-396,1997

11)김창민,신민교 외 약 사 ,서울:도서출 정담,

,p261-267,1997

12)Ding,Y.,Tian,R.H.,Kinjo,J.,Nohara,T.and

Kitagawa,I.,threenewoleaneneglycosidesfromsophora

flavescens,Chem.Pharm.Bull.,40,p.2990-2994,1992

14) Ding Ting, et al., The preparing and clinical

applicationsofComplexMatineLiniment,ACTAChinese

MedicineandPharmacology,30(2):p.47-48,2002

14) 과학백과사 , 약 의 성분과 이용 서울:일원서

각,p344,1991

Page 4: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

242

PraparationKushen

cream

Base

cream

stearylalchol 30 30

whitevaselin 15 15

tween80 3.5 3.5

propyleneglycol 10 10

distilledwater q.s q.s

Sophoreflavescentisradixex. 10 -

Total 100g 100g

2) 기기

본 실험에 사용된 기기는 Rotary vaccum evapor

ator(Tokyorikakikaico.Japan),waterbath(Sunileyela,

korea), Deep freezer(Ilshin, korea), Freeze dryer(

Ilshin,korea),Homomixer(Sam yang,korea),Digital

caliper(Fuso,china),Waterbath(Dongsue,korea)ELISA

reder(MolecularDervices,U.S.A),ELISA washer(Diaw

asher,ELX50,U.S.A),scale(ohausco.U.S.A),micro-pipet

(Gilson,france)등을사용하 다.

3) 실험동물

수컷 6주령의 atopy dermatitis model인

NC/Ngamice는 일본 SLC에서 공 받아 실험당

일까지 사료(CharlesRiver,SL79)와 물을 공

하 다.

온도 22±2℃,습도 55±15%,12시간(light-dark

cycle)에서 2주간 응시킨 후 실험에 사용하 다.

4) 고삼크림의 제조

(1)고삼의 용매 추출법

본 연구에 사용한 고삼은 경동시장에서 한국산

을 구입하 으며,잘게 썰은 고삼 뿌리 150g을

distilledwater4000ml이 들은 삼각 라스크에

넣고 50℃ 에서 3시간 동안 환류 추출하 다.

이와 같이 세 번 반복 추출하여 얻은 추출물을

0.4마이크로미터필터로거른 후여과액을35℃에

감압농축시켜냉동 건조하 다.그리하여 증류수

추출물 18g(12%)을 얻었다.

(2)고삼 크림의 제조

고삼 크림의 제조는 stearylalchol white

vaselin을 75℃로 한 비이커에 탕으로 가온하고,

다른비이커엔tween80,propyleneglycol그리고

정제수를 탕 가온 한 다음 Homomixer로 교반

하면서 고삼 엑스분말을 가하여 균질하게 혼합하

여 냉장하 다.그리하여 kushencream을얻었다.

Table 1. Formaulas of creams

5) Biostar Mite Antigen Cream

이실험에사용한BiostarMiteAntigenCream(BMAC)

는진드기항원으로제조된것으로 앙실험동물에서공

받았으며,Dermatophagoidesfarinaecrudeextract(mite

extract,lyophilized)되었다.이연고는진드기항원0.5%와

Tween20으로만들어졌다.

3. 실험방법

1) 피부염의 유도 및 평가방법

6주령의 NC/Ngamouse(15-20g)는 일본 SLC

사에서 공 받아 2주간의 순환을 시킨 후 마취제

zoktil,kylazie,isohurane으로 마취하고 등,목 부

를 깨끗하게 제모제로 털을 제거한 후 피부의

미세 상처가 자연 치유되도록 24시간 방치하 다.

그리고 앙실험 동물사의 Biostar Mite

AntigenCream (BMAC)를 일주일에 2회씩 3주

간,등과 목,귀에 고르게 100mg씩 도포하 고(8

Page 5: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

대한피부미용학회지 제7권 제3호 243

주-11주), BMAC도포 2-3시간 에 4%

SDS(Sodiumdodelylsulfate)를 분무하여 피부층

을 괴하 다.

2) 약물처리 및 치료평가

월요일과 목요일에 BMAC를 3주간(8주-11주령)

4%SDS용액을 분무 2시간 경과후 등과 후두부․

귀 등 에 100mg씩 도포하 다.그리고 BMAC도

포 3주 후 피부 발진 홍반 가피 형성 등을 확인

하여 아토피 피부염의 유발을 확인하 다.그 후

아토피 피부염이 유발된 mouse18마리 피부

염증수치를 기 으로 300미만인 mouse는 아토피

피부염이 충분히 유발되지 않았다고 단되어 제

외되었다.그리고 15마리를 무작 로 3마리씩 분

류해 놓은 cage안에서 임의로 a,b,c로 명명하여

5개의 group이 나왔다.그 각 이지당 a만 모

아 control군을 b만 모아 kushencream군,나머지

c만을 모아 base크림 군을 만들었다.이 게15마

리의 mouse를 3그룹으로 나 후,11주령에서 13

주령까지,kushencream군에는 매일고삼 추출물

크림을,basecream군에는 cream기제만을 1회

100mg씩 도포하 다.그리고 control그룹은 2주

간 아무 처리도 하지 않았다.

3) Clinical skin score

피부 임상지수 평가는 Yamamotomatsuda의

방법을 참고하여 11주,13주령에 시행하 다.

① Erythema/hemorrhage(소양행동을 동반한

홍반), ② Scarring/dryness(인설/건조) ③

Edema(부종/ 종)➃Excoriation/erosion(찰과

상/진무름)➄Lichenification(태선화)를 0(none),

1(mild),2(moderate),3(severe)로 개체마다 평

가 기록하여 총 수로 평가하 는데 최소 0 에

서,최고 15 사이의 수를 얻을 수 있었다.

4) 혈청 내 IgE측정

NC/Ngamouse의 에서 11주,13주령에 capillarytube

를 이용하여 약 100㎕의 액을 채 후 원심분리기

6500rpm에서 20분간 원심분리한 후 30㎕의 청을 분리하

여 IgE를측정하 다.

NC/Ngamouse의 청 내 IgE농도는 enzyme-linked

immuno-sorbentassay로 측정하 다.IgE는 NC/Nga

mouse에서채 한 청1㎕(1/50dilution)와dilutionbuffer

49㎕를혼합하여96wellplate의각well에분주하 다.각각

2시간동안25℃실온에서놓아둔후2회washing완충용

액으로세척후antibodybiotin-IgEconjugated를넣고2

시간 두었다.다시 2회 수세 후 완충용액으로 세척한 후

antibodyAvidin-HRPconjugeted100㎕를처리하고1시간

실온에서놓아둔후세척하 다.

TMB기질을100㎕씩분주하고암소에서30분간방치후

100㎕의stop용액을처리후ELISAleader450nm에서IgE

에 한흡 도를측정하 다.

5) 귀 두께

NC/Ngamouse의 귀를 Digitalcaliper를 사용

해 BMAC로 3주간 아토피 피부염의 유도가 끝난

11주,13주에 측정하 다.펜으로 표시된 귀 부

를 3회 측정하여 평균값을 내어 기록하 다.

6) 피부 측정검사

피부 표면의 홍반 유분․ 수분 측정 BMAC

도포 후 아무처리 하지 않은 control그룹과

BMAC도포 후 크림 베이스만을 도포한 그룹,

kushencream을 도포한 그룹들에 11주,13주에

C+K electronicGmbH사의 피부 수분 보유도를

측정하는Corneometer(CM825),피부표면유분량

을 측정하는 Sebumeter(SM815),피부홍반과 멜

라닌 색소를 측정하는 Mexameter(MX18)를 사

Page 6: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

244

용하 다.측정시 roomcondition은 22±2℃,and

55±15%airhumidity이 다.

Corneometer는 보통 피부표면에 하는

probe를통해 달되는미미한 류의정 부하용

량(capacitance)계측을 통해 이루어진다.수분의

함량과 정 부하용량은 서로 비례하는 경향이 있

어피부의보습도가높을수록측정되는수치가높

아지는데,Corneometer의 장 으로는 화장품,약

물의 도포에 크게 향을 받지 않는 상태에서 각

질층 하방 30-40micrometer깊이 이내의 수분함

량을 일정하게 측정하는 기능을 갖고 있다.

Mexameter는 피부색조분석에 가장 합한 멜

라닌과 색소(혹은 bilirubin)에 응하는서로다

른3종의 장 를갖는 원(다이오드)16개가원형으로배

치된센서probe를특징으로하는측정기법(narrow-band

reflectancespectrophotometricmeasurement)을사용하여

측정된다.

Sebumeter는 특수한 반투명 지질흡수테이 를

피부에부착한후묻어나오는피지량을 학 반

사원리(photometricreflection)로측정하는기기이

다.단 면 당 유분량(microgram/cm2)의 측정

은 피지선의 기 사활동에 향을 받으므로 일

정한 조건하에서 일상 피지분비량 (casual

sebumexcretionrate)으로 계측된다.

7)통계처리

통계 로그램은 SPASS11.5를 사용하 으며,

유의성 검증은 응표본 t-test분석방법을 이용

하여 결정하 다.

Ⅲ.결과 고찰

1. 실험 전후 lgE 변화

Figure 1 Serum IgE changes of atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC.Atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC treatment in the back of skin, BMAC treatment for 3weeks(control), BMAC treatment for 2weeks with base cream, BMAC treatment for 2weeks with distilled water Soflavescentis radix cream.Blood was collected from retro-orbital plexus under zoktil, kylazie,isohurane anesthesia and heparinized immediately thereafter. plasma samples were obtained by centrifugation and stored at -20℃ until use. Total IgE levels were measured by a sandwich ELISA using an ELISA kit.

실험 후 IgE의 변화를 분석한 결과 고삼 크

림군에서 유의미한 차이가 있는 것으로 나타났으

며,3718.29에서 1217.4074로 크게 감소하 다.따

라서 고삼크림이 IgE수치를 감소시키는데 효과가

있는 것으로 보인다(p<.001).그러나 Basecream,

Control은 유의미한 감소를 보이지 않았다.

정선 (2002)은 고삼의 물 추출물을 경구로 복

용시켰을때IgE발 의억제효과가있었다는보

고를 했었는데,15)본 연구처럼 피부 용 시에도

IgE수치가 떨어짐을 알 수 있었다.특히나 아토

피 피부염의 성기에는 피부장벽 괴나 표피

박리등으로고삼성분의투입이용이해지므로피

부에 직 용 시에도 효과가 있는 것으로 사료

15)정선 :고삼이 생쥐의 B-cells에 미치는 항알 르기

효과,서울,경희 학원,2002pp41-49

Page 7: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

대한피부미용학회지 제7권 제3호 245

된다.

2. 피부 염증 수치 변화

Figure 2. Erythema changes of atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC. Atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC treatment in the back of skin, BMAC treat-ment for 3weeks(control), BMAC treatment for 2weeks with base cream, BMAC treatment for 2weeks with kushen cream.Erythema of skin was defined by C+K electronic GmbH's Mexameter (MX18)

실험 ․후 염증 수치의 변화를 분석한 결과

고삼크림 용 군에서 통계 으로 유의미한 차이

를 보 으며,502.0에서 282.4로 수치가 감소 즉

염증 수치를 낮추어 고삼크림이 효과 인 것으로

보인다 (p<.001).Basecream군도 490에서 457.4

로 비교 수치가 낮아졌으나 통계 으로 유의미

한 감소는 아닌 것으로 단된다.

정선 (2005),엄재연(2008)16)등 의 보고에 따

르면 고삼의 항산화 항염 효과는 지속 으로

보고 되어왔다.

이 연구에서도 고삼연고의 용 시 NC/Nga

mice의 아토피 피부염의 염증수치 감소가 나타났

다.연고기제 자체도 통계 인 감소는 없으나 수

16) 엄재연(2008), 고삼으로 분리된 trifolirhizin과

desmethylicartin의 이완에 한 연구,원 학원,

박사논문

치가 비교 낮게 나왔는데 이는 cream의

ingredients특성상 보습 성분인 propyleneglycol

과 whitevaselin의 작용으로 소양증 유발을 감소

시켜 염증 수치 한 감소된 것으로 생각된다.

3. 수분 수치 변화

Figure 3 Moisture value changes of atopic dermati-tis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC.Atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC treatment in the back of skin, BMAC treatment for 3weeks(control), BMAC treatment for 2weeks with base cream, BMAC treatment for 2weeks with kush-en cream.Moisture values of skin was defined by C+K electronic GmbH's Corneometer CM825.

실험 ․후 수분 수치의 변화를 분석한 결과

고삼크림의 경우 8.8에서 37로 수분이 증가한 것

으로 나타났다.Basecream군도 9.2에서 15.4로

비교 수치가 높아졌으나 통계 으로 유의미한

증가는아닌것으로나타나수분수치를증가시키

는데 고삼크림이 효과 인 것으로 단된다

(p<.001).즉수분수치의변화도 염증수치변화와

비슷한 양상을 띈다.

여기서 주목할 은 BaseCream 용 시 염증,

유분,수분이 어느 정도 향상 되었다는것인데 이

는아토피피부염환자들에게보습제 용이얼마

나 요한것인지를 역설 으로 보여 다.손상된

피부는항원투입이 쉬워지고이로 인해염증이유

Page 8: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

246

발되고 소양증을 야기 시킨다.이는 다시 피부건조

와염증을심화시키고더욱더 극심한 소양증으로

환자에게 불편을 야기 시키는데 이 과정 어느

한가지라도 차단 시켜주는 것이 요하다.

BaseCream자체도 통계 으로 의미는 없지만

염증의 감소,유․수분 증가로 보아 어느 정도의

보습효과로 소양증을 감소시켜 치료 보조제로 도

움이 되리라 보여진다.여기에고삼추출물을추

가 시킬 경우 항 알 르기 효과와 더불어 더욱 효

과가 있으리라 사료된다.

4. 유분 수치 변화

Figure 4 Sebum value changes of atopic dermati-tis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC.Atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC treatment in the back of skin, BMAC treatment for 3weeks(control), BMAC treatment for 2weeks with base cream, BMAC treatment for 2weeks with kush-en cream.Sebum values of skin was defined by C+K electronic GmbH's SM815.

실험 후 유분 수치의 변화를 분석한 결과 고

삼크림의 경우 6에서 33.2로 유분이 증가한 것으

로 나타났다 (p<.001).Basecream의 경우도 6.6

에서 24.4로 유분 수치가 높아졌다.따라서 유분

수치 증가에 고삼크림,Basecream의 용이 효

과 인 것으로 단된다.

이는 cream ingredients특성상 보습 성분인

propyleneglycol과 whitevaselin의 작용이 가해

져서 이 진 것으로 사료된다.

한 피부의 유분 유지는 피부의 hydration을

도와 소양증을 감소시켜 아토피 피부염 치료에 도

움이되므로이크림의기제자체도피부의유분유

지에 도움이 되리라 본다.

5. Clinical skin SCORD 변화

Figure 5 Clinical skin features and severity of atopic dermatitis skin lesions in Atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC.Atopic dermatitis-like skin NC/Nga mouse induced by BMAC treatment in the back of skin, BMAC treatment for 3weeks(control), BMAC treatment for 2weeks with base cream, BMAC treatment for 2weeks with kush-en cream.A total clinical severity score for atopic dermatitis like skin lesions was defined as the sum of the Individual scores graded as 0(nonde), 1 (mild), 2(moderate) and 3 (severe) for each of five signs and symptoms( Erythema/hemorrhage, Scarring /dryness , Edema ,Excoriation/erosion , Lichenific ation) on the body. Each point represents the mean of 5mice.

SCORD는 B,Kunz등이 제안한 방법으로 재

아토피피부염의 악을 해임상에서가장많이

사용되는 지표 의 하나이다.주로 환자의 아토

피 피부염 병변의 면 과 증상의 정도,소양증,야

간증상 등을 수화 시켜 총 을 내며,이것으로

Page 9: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

대한피부미용학회지 제7권 제3호 247

환자의 상태를 악한다.

본 연구에서는 사람이 아닌 마우스에 SCORD

를 용시켰는데,이는 Yamamotomatsuda의방

법으로 ① Erythema/hemorrhage(소양행동을동

반한 홍반),② Scarring/dryness(인설/건조)③

Edema(부종/종)➃Excoriation/erosion(찰과

상/진무름)➄Lichenification(태선화)를 0(none),

1(mild),2(moderate),3(severe)로 개체마다 평

가 기록하 다.

실험 후SCORD의변화를 분석한 결과 고삼

크림도 9.6에서 2.4로 높은 감소폭을 보 다.이에

따라 고삼크림이 SCORD의 수치를 감소시키는데

효과 인 것으로 보인다(p<.001).Basecream의

경우9.4에서8.4로수치가동일하게감소하 으나

이는통계 으로유의미한 차이는 아닌것으로나

타났다.

Ⅳ.결 론

본연구는 아토피피부염환자들의빠른 회복을

해 치료효과는 높으면서 부작용이 은 천연물

의 계발을 해 기 자료검색을 통해 가능성이

있다고 사료되는 고삼을 선별하 다.그리고

BMAC로아토피성피부염이발생된NC/Nga마우

스에서고삼추출물을이용한크림의도포는아래

와 같은 결론을 얻었다.

BMAC를 NC/Nga마우스에 3주간 도포하여

아토피성피부염이유발되어고삼크림을2주간도

포한 결과

1)고삼크림의 피부 용은 IgE수치를 유의하

게 감소시켰다.

2)고삼크림의 피부 용은 Clinicalskinscore

를 유의하게 감소시켰다.

3)고삼크림 의 피부 용은 피부의 Erythema

를 유의하게 감소 시켰다.

4)고삼크림의 피부 용은 피부의 유분 수치를

유의하게 증가 시켰다.

5)고삼크림의 피부 용은 피부의 수분 수치

를 유의하게 증가 시켰다.

의 결과로 미루어 보아,고삼크림의 한

사용은아토피피부염개선에도움이되리라사료

된다. 한고삼성분 유효성분의보다정확한

결과의도출을 해, 표 성분의 표 물질들을 구

해,각 성분별 실험을 진행하고 있어 그 결과가 기

되는 바이다.

참고문헌

김정원․변 규․은희철․김 근,피부과학 개정4 ,

서울:한 피부과학회 교과서 편찬 원회 편 ,

p.694-701,2001

김창민,신민교 외 약 사 ,서울:도서출 정담,,

p261-267,1997

김태정, 한국의 자원식물, 서울:서울 학교 출

부,p.200,1996

과학백과사 ,약 의 성분과 이용,서울:일원서각,

p.344,1991

김호철,한약약리학,서울,:집문당,p141-143,2001

심민교 편 ,임상본 학,서울:림사,p394-396,1997

이 노,한국 식물도감,서울:교학사,p.366-367,2001

지형 ,이상인,학약 학약 외 한약규격주

해,서울:한국메디칼인덱스사,p.397-398,1998

은희철, 피부 면역학, 서울:서울 학교 출 부,

p27-34,1999

김철홍,이상일,이수 ,최성연,이 성,김규언,1995

년과 2000년의 학동기와 2003년 학동 기 소아

에서의 아토피 피부염의 역학 변화에 한

Page 10: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

248

국 인 연구,소아알 르기 호흡기학회

지,13(4):p.227-237,2003

김찬 ,Allergy성 피부염에 한 고삼,황 의

Iontophoresis치료효과,한방 안이비인후피부과

학회지,18(1):p.199-220,2005

민경업,고삼으로부터 항염증활성 물질의 분리와 구조

에 한 연구,원 학원,2006

ColemanR,Trembath,R.C,andHarper,J.I.,Genetic

studiesofatopyandatopicdermatitis.Br.J.

Dermatol.,136:p1-5,1997

Ding,Y.,Tian R.H,Kinjo,J.,Nohara,T.and

Kitagawa,I.,threenew oleaneneglycosides

from sophoraflavescens,Chem.Pharm.Bull.,

40:p.2990-2994,1992

DingTing,etal.,Thepreparingandclinicalappli-

cationsofComplexMatineLiniment,ACTA

Chinese Medicine and Pharmacology,

30(2):p.47-48,2002

InagakiN.,andNagai,H.,Evaluationofdrugsfor

thetreatmentofatopicdermatitisinmice.

Foria.phamacol.jpn,127:p.109-115,2006

KimH.A,YouH.K,ShinH.S,KimY.C,KangT.H,

YuH.H,YouY.O.Effectsofaqueousextract

ofSophoraflavescensontheexpressionof

cellcycleregulatoryproteinsinhumanoral

mucosal fibroblasts. Am J Chin Med.

31:p.563-72,2003

KimD.W,ChiY.S.,SonK.H,ChangH.W,KimJ.S,

Kang S.S., Kim H.P, Arch .pharm

.Res:25(3),p.329-335,.2002

Kyogoku K.,HatayamaK.,AND Komatsu,M.,

Constituentsofchinesecreudedrug"kushen".

Isolation offivenew flavonoidsand for-

mononetin, Chem.pharm.Bull., 21: p.27733

-2738,1973

LeungD.Y,BieberT.,Atopicdermatitis.Lancet

361:p.151-160,2003

LiXiuyingetal.,Treatmentof50patientswith

candidaalbicansvaginitisbycortexsophorae,

Chinese Journalof Integrated Traditional

ChineseandWesternMedicine6(2):p.146-147,

2000

MatsuokaH,MakiN,YoshidaS,AraiM.,Wang

J,,OikawaY etal.,A mousemodelofthe

atopiceczemadermatitissyndromebyre-

peated application ofa crude extractof

housedust mite Dermatophagoides farina.

Allergy,58(2):p.139-45,2003

OmoyukiO,Yasuharu S,MegumiF,Eriko Y,

YoshikoS etal.,Dermatophagoidesfarinae

extractinducesseveredermatitisinNC/Nga

mice,whichiseffectivelysuppressedbythe

administration of tacrolimus ointment

.,IntermationalImmunohamacology.9:p.403-

411,2009

VestergaardC,YoneyamaH,MuraiM,Nakamura

K, Tamaki K, Terashima Y, et al.,

OverproductionofTh2-specipicchemokinesin

NC/Ngamiceexhibitingatopicdermatitis-like

lesions.JClinInveset,104(8):p.1907-105,1999

Page 11: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

대한피부미용학회지 제7권 제3호 249

A studytheeffectofkushendistilledwaterextractcream

toNC/Ngamice.

Song,Da-Hae・Kim,Hyung-Ju†Dept.ofbiologicalengineeringofKon-kukUniversity

Abstract

AtopicDermatitisisarecurringskinconditioncharacterizedbyrash,dryness,anditching.The

itchingisoftensoseverethatitleadstoscratching,infection,andsleepdisturbance.Thereisno

knownsinglecauseforeczema,howeverallergiesareoftenimplicated-manypatientswithatopic

eczemahaveincreasedbloodlevelsofClassEImmunoglobulins,whicharetypicallyassociatedwith

allergicreactions.Thediseasecanoccuratanyage,butitismostcommonininfants,children,and

youngadults.

ToexamineeffectSophoraflavescensradixfrom distilledwaterextractcream usedtoNC/Nga

mousegetinatopycontrol.

The atopic drumatitis patients are extremely sensitized with BMAC allergens like

Dermatophagoidesfarinae.sorepeatedapplicationofBMAC ointmenttotheNC/Ngamicecaused

increaseindermatitisscoresandserum IgE.

After2weeksapplicationwithkushencream totheNc/Ngamice,itcauseddecreaseindermatitis

scores,serum IgE,skinerythemavalues andincreasemoisture․sebum valuesinthebackandear

skin.

Inview oftheresults,introductionofthekushencream foratopicdermatitis isexpectedtobe

anappropriatesupplementarytreatmentforpatientswhosufferfrom frequentrecurrenceofatopic

dermatitis.

keyword:atopicdermatitis,Sophoraflavescensradix,Dermatophagoidesfarinae,NC/Ngamice.

Page 12: 아토피피부염의동물모델인 NC/Ngamice에 …•„토피_송다혜.pdf14)DingTing,etal.,Thepreparingandclinical ... asher,ELX50,U.S.A),scale ... Edema(부종/혈종) Excoriation/erosion

250