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11577 OET SuperSf9ちらしp - 研究用試薬・受託解析 …¬‚ashBACTM の改良版: 分泌タンパク質や膜タンパク質など発現の難しいタンパク質の収量UPを実現!flashBACGOLD

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組換えタンパク質の収率が格段にUP!

superSf9 cells® は、タンパク質を安定的に発現させる為に Sf9 細胞に改良を加えた昆虫細胞です。様々なタイプの組換えタンパク質発現用に3種類の細胞をご用意しており、同社の flashBACTM

システム ( 次ページ参照 ) と一緒にお使いいただくと最大限の効果を発揮します。(すべてのバキュロウイルス発現ベクターシステムに対応)

特長● 安定的にタンパク質を発現

● 長期にわたってのタンパク質発現が可能

● 従来のSf9細胞と比べて、       タンパク質の収率が 15倍アップ

バキュロウイルス発現システム用細胞株 super SF9 cells®

通常のタンパク質発現用  superSF9-1● 安定した発現を大腸菌等で確認済のタンパク質用

● 細胞内・膜・分泌タンパク質に最適

毒性タンパク質発現用  superSF9-2● 毒性タンパク質用

● 不安定なタンパク質にも理想的

未知のタンパク質発現用  superSF9-3● SF9-1 と SF9-2 の中間の表現型

● 特性が未知のタンパク質発現などに理想的

SF9

superSF9-2

感染後経過日数→

SF9

superSF9-3

感染後経過日数→

Oxford Expression Technologies メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格

superSf9-1 cells® 600102 1×107 cells ¥150,000superSf9-2 cells® 600103 1×107 cells ¥150,000superSf9-3 cells® 600104 1×107 cells ¥150,000Sf9 Cells 600100 1×107 cells ¥55,000

比べてください

この発現量の

差を・・・

SF9

superSF9-1

感染後経過日数→

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精製ステップ不要! ワンステップ バキュロウイルスタンパク質発現システム

flashBAC™

● 精製ステップ不要のワンステップ発現系● ウイルスストックが7~ 10日で得られます

● プラークアッセイ不要

● ハイスループットに対応

● 組み換え効率 100%

flashBAC™シリーズは、バキュロウイルスベースのリコンビナントタンパク質の過剰発現を簡単かつ迅速に行うことができる画期的なシステムです。

 flashBAC™ は、組換えウイルス精製ステップが不要の新しいバキュロウイルス発現システムです。flashBAC™ のポリヘドリン領域には、昆虫細胞内でウイルスが増殖するのに必要な遺伝子(ORF1629)が一部欠損したものと、BAC(Bacterial Artificial Chromosome) が含まれます。flashBAC™ DNA と、目的遺伝子を含むトランスファーベクターが相同組換えを起すと、同時に昆虫細胞内で増殖可能な遺伝子の欠損部位が正常部位と組換わり、機能が回復します(図 1)。非組換えウイルスは昆虫細胞内での増殖は不可能ですが、組換えウイルスは増殖が可能であるため、プラークアッセイや精製等のスクリーニングを必要とせずに直接培養上清を昆虫細胞に使用することができます。

 flashBAC™ は、組換えウイルス精製ステップが不要の新しいバキュロウイルス発現システムです。flashBAC™ のポリヘドリン領域には、昆虫細胞内でウイルスが増殖するのに必要な遺伝子(ORF1629)が一部欠損したものと、BAC(Bacterial Artificial Chromosome) が含まれます。flashBAC™ DNA と、目的遺伝子を含むトランスファーベクターが相同組換えを起すと、同時に昆虫細胞内で増殖可能な遺伝子の欠損部位が正常部位と組換わり、機能が回復します(図 1)。非組換えウイルスは昆虫細胞内での増殖は不可能ですが、組換えウイルスは増殖が可能であるため、プラークアッセイや精製等のスクリーニングを必要とせずに直接培養上清を昆虫細胞に使用することができます。

ORF1629GENElef 2

ChiA

Reconbinant Virus

ChiA

lef 2 BAC

flashBAC

GENElef 2 ORF1629

Transfer Vector

flashBACTM DNA と目的遺伝子を含むトランスファーベクターが相同組換えを起こすと、

昆虫細胞内で増殖可能な組換えウイルスができる。

(1) (2) (3) (4) (5)

商品名

flashBAC™

flashBACGOLD™

flashBACULTRA™

特長

オリジナル品。細胞質 /核タンパク質の発現に。

flashBAC™ の改良版。分泌 /膜タンパク質の収量をUP!

flashBACGOLD™ の改良版。

細胞質 /核 /分泌 /膜タンパク質の収量を UP !

タンパク質の安定化と収量増加のために欠損させた遺伝子

chiA V-Cath p10 p74 p26

● ●

● ● ● ● ●

■flashBAC™シリーズの特長

p10 遺伝子を欠損すると polh 活性が増加するため、リコンビナントタンパク質の発現、核および細胞の安定性が増加します。さらに長期のタンパク質発現を保証します。

p74 遺伝子を欠損すると、リコンビナントバキュロウイルスのバイオ

セーフティプロファイルが増加し、昆虫腸壁が損傷しません。

p26 遺伝子は、機能が明らかになっていない 240 アミノ酸ポリペプチ

ドで、5’ 末端は、p10 と相同です。p26 の 3’ 末端を削除し、lacZ または p10 を融合すると in vitro においてウイルス複製に影響がないこと

が示されています。(3)

(4)chiA は外因性または内因性キチナーゼ活性をコードするキチナーゼ遺伝子です。chiA が欠損すると、分泌性タンパクおよび膜タンパクの発現が大幅に改善されます。

V-cath 遺伝子を欠損させると、分泌系パスウェイの発現効果が増加し、分

泌タンパク質や膜タンパク質のリコンビナントタンパク質の収量が劇的に

向上します。

(1)

(2) (5)

Oxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格flashBACTM 100149 3 回分 ¥68,000 100150 5 回分 ¥105,000 100151 24 回分 ¥332,000 100152 96 回分 ご照会

構成内容・flashBAC™ DNA ・ トランスファーベクターDNA(lacZ レポーター遺伝子含 ) ( ポジティブコントロール )

図 1

本システムは、昆虫細胞内のポリヘドリン領域との相同組換えを利用した多くのベクター(例:pBacPAK8/9、pAcUW31、pBacPAK-His1/2/3 など)と互換性があります。

本システムは、昆虫細胞内のポリヘドリン領域との相同組換えを利用した多くのベクター(例:pBacPAK8/9、pAcUW31、pBacPAK-His1/2/3 など)と互換性があります。

 また、一般的にバキュロウイルスは、感染後期に宿主のクチクラを破壊し、組織の液状化を引き起こす酵素キチナーゼ(chitinase : chiA) を有します。キチナーゼは、感染昆虫細胞内で小胞体と結合し、タンパク質分泌経路を完全にふさいでしまいます。 flashBAC™ システムでは、chiA が欠損しているので、分泌性タンパクおよび膜タンパクの発現システムも大幅に改善されました。

 また、一般的にバキュロウイルスは、感染後期に宿主のクチクラを破壊し、組織の液状化を引き起こす酵素キチナーゼ(chitinase : chiA) を有します。キチナーゼは、感染昆虫細胞内で小胞体と結合し、タンパク質分泌経路を完全にふさいでしまいます。 flashBAC™ システムでは、chiA が欠損しているので、分泌性タンパクおよび膜タンパクの発現システムも大幅に改善されました。

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flashBACTM の改良版: 分泌タンパク質や膜タンパク質など発現の難しいタンパク質の収量UPを実現!

flashBACGOLD™

Oxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格flashBACGOLD™ 100200 3 回分 ¥82,000 100201 5 回分 ¥127,000 100202 24 回分 ¥399,000 100203 96 回分 ご照会

構成内容・flashBACGOLD™ DNA ・トランスファーベクターDNA(lacZレポーター遺伝子含) (ポジティブコントロール)

● タンパク質分解を減らして更に収量UP!● タンパク質分泌を最大限にし、膜タンパク質ターゲティングを改良

flashBAC™システムから更にV-Cath(2) を欠損させたシステムです。V-Cathは、プロモーターが最も活動的になる感染後期の組換えタンパク質を分解してしまう為、この遺伝子を欠損させると、組換えタンパク質の収量が劇的に向上します。

flashBACGOLDTM から遺伝的荷重を除いたシステム: 発現の難しいタンパク質の発現を劇的にUP!

flashBACULTRA™

Oxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格flashBACULTRA™ 100300 5 回分 ¥146,000

100301 24 回分 ご照会構成内容・flashBACULTRA™ DNA・トランスファーベクターDNA(lacZ レポーター遺伝子含 ) ( ポジティブコントロール )

flashBACULTRA™ は、flashBACGOLD™か ら さ ら に p10(3)、p74(4)、p26(5) 遺伝子を欠損させることで、リコンビナントウイルスゲノム由来の不要な遺伝的荷重を取り除き、バキュロウイルスの発現を劇的に向上させました。

● 分泌系パスウェイおよび小胞体からより効果的に輸送できます。

● 細胞の安定性と生存率が向上します。

● リコンビナントタンパク質の分泌および収量が向上します。

● タンパク質の分解を抑えます。

高効率!新タイプの昆虫細胞用トランスフェクション試薬

baculoFECTIN™ バキュロウイルストランスフェクション試薬

Oxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格baculoFECTIN™ transfection reagent 300101 150 µL ¥25,000 300102 1 mL ¥118,000

baculoFECTIN™は、新多孔質ナノ粒子と、その中に包埋されたカチオンポリマーによって構成されます。baculoFECTIN™がバキュロウイルス DNA と結合すると、ナノ粒子が DNA 複合体を形成し、これによりヌクレアーゼによる DNA の分解を防ぎながら、複合体が昆虫細胞の中に選択的に取り込まれます。

● 従来の脂質タイプのトランスフェクション試薬と比較して、高い遺伝子導入効率です。

● 昆虫細胞 (Sf9、Sf21) をはじめ、ほ乳細胞や初代培養細胞など、幅広い細胞にも使用可能です。

● 毒性は最小限に抑えられています。

図2. トランスフェクション後に得られたリコンビナントウイルスの力価 x107 pfu/mL0 1 2 3 4 5 6

5 µl 他社 N

5 µl BaculoFECTINTM

3 µl BaculoFECTINTM

5 µl 他社 L

パーフェクトシステムをお選びいただくために: flashBACTM、flashBACGOLDTM, flashBACULTRATM が各 3回分入ったパック

flashBAC™ Selection BoxOxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格flashBAC™ selection box

100400 9 回分 ¥150,000・flashBACTM DNA 3回分・flashBACGOLDTM DNA 3回分・flashBACULTRATM DNA 3回分

構成内容

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 ● 希望販売価格 ・・・ 「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は2011年9月1日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。 ● 使 用 範 囲 ・・・ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。

Oxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格TitrePLUS™ Kit, flashBAC™ + baculoQUANT™ 100700 5 回分 ¥161,000 100701 24 回分 ご照会 Titre PLUS™ Kit, flashBACGOLD™ + baculoQUANT™ 100702 5 回分 ¥180,000 100703 24 回分 ご照会 TitrePLUS™ Kit, flashBACULTRA™ + baculoQUANT™ 100706 5 回分 ¥191,000 100707 24 回分 ご照会

バキュロウイルス発現キットと力価測定キット がセットになりました

titrePLUS™ Kitバキュロウイルス発現システム flashBAC™ シリーズとバキュロウイルス力価測定キット baculoQUANT™がセットになっています。

バキュロウイルス力価測定キット

baculoQUANT™

Oxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格baculoQUANT™ one-step titration kit 100600 5 回分 ¥72,000

100601 26 回分 ¥189,000

たったの 2 時間でウイルス力価をワンステッ

プで測定するキットです。定量リアルタイム

PCR(qPCR)法をベースとしたアッセイ法

で、ウイルスゲノムに特異的な ABgene

蛍光プローブを用いて測定します。

● 力価測定がたったの 2時間● プラークアッセイ、イムノアッセイ不要● 全ての AcMNPV ベースのバキュロウイルス発現系と互換性● 正確に力価を測定

・Forward and reverse primers・Probe

・Control baculovirus DNA・User manual

・Resarch-use licence構成内容

オールインワンのバキュロウイルスタンパク質発現キット

baculoCOMPLETE™

Oxford Expression Technologies  メーカー略号:OET

品名 品番 包装 希望販売価格baculoCOMPLETETM ALL-IN-ONE Baculovirus Protein Expression Kit

400100 5 回分 ¥156,000

昆虫細胞での組換えタンパク質発現に必要な試薬がすべて含まれています。各コンポネントは、タンパク質の収量と組換えウイルスの最適

なタイターで得られるよう最適化されています。

・flashBACULTRATM DNA ・トランスファーベクターコントロールDNA・baculoFECTINTM トランスフェクション試薬

・baculoGROWTM 昆虫細胞用培地・Sf9 細胞

構成内容

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