19 Serologija PDS

Embed Size (px)

Citation preview

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    1/19

    SEROLOKA DIJAGNOSTIKAINFEKTIVNIH BOLESTI

    Prim.dr.sc. Oktavija akovi Rode

    Klinika za infektivne bolesti

    Dr. Fran Mihaljevi, Zagreb

    ETIOLOKA DIJAGNOSTIKA INFEKTIVNIH BOLESTI

    DIREKTNA iz klinikog materijala: Izravna detekcija uzronika ili njegovih dijelova

    antigeni, nukleinske kiseline detekcija antigena imunofluorescentnim ili imunoenzimskim testom

    metode molekularne biologije za detekciju genoma

    elektronski mikroskop

    svjetlosni mikroskop (inkluzijska tjeleca)

    Izolacija uzronika (kultivacija) stanine kulture (CPE, hemadsorpcija, potvrda testom neutralizacije, interferencije,

    imunofluorescencije); oploena jaja; pokusne ivotinje; bakterioloke podloge

    INDIREKTNA

    Dokaz specifinog imunog odgovora -serologija

    KATEGORIJE IMUNOSNOG ODGOVORA

    STANINA IMUNOST (limfociti T)

    HUMORALNA IMUNOST (limfociti B)

    IMUNOGLOBULINI = PROTUTIJELAIgM, IgG, IgA, (IgE, IgD)

    KARAKTERISTIKE PROTUTIJELA

    Karakteristike IgG IgM IgA IgD IgE

    % ukupnih IgG 75 9 15 0.2 0.004

    Prolaz kroz

    placentu+ - - ? -

    Poluvrijeme

    ivota u krvi(dani)

    21 10 6 3 2

    Aktivacija

    komplementa

    Klasini put ++ +++ - - -

    Alternativni put - - + - -

    Glavna obiljeja

    Neutralizacija

    toksina,

    opsonizacija

    bakterija,

    aktivacija

    komplementa;majinaprotutijela

    Primarni odgovor

    na antigenu

    stimulaciju,

    receptor za

    antigene na

    povrini ly B;aglutinacija

    Sekretorna

    protutijela;

    titi mukoznemembrane

    Prisutan na

    povrini ly B,vee antigene;potie ly B naprodukciju

    protutijela

    Medijator

    alergijskog

    odgovora;

    rezistencija na

    helminte

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    2/19

    PRIMARNI I SEKUNDARNI IMUNOSNI ODGOVOR IMUNOSNI ODGOVOR

    ZNAAJKE HUMORALNOG IMUNOSNOGODGOVORA KOJE SE KORISTE U SEROLOGIJI

    Dinamika stvaranja protutijela

    Primarni odgovor

    Sekundarni anamnestiki odgovor Specifian (monoklonski)

    Nespecifian (poliklonski)

    SEROLOGIJA

    =

    DIJAGNOSTICIRANJE BOLESTI

    ODREIVANJEM REAKCIJEPROTUTIJELA I ANTIGENA

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    3/19

    UZORCI ZA SEROLOKU OBRADU

    PARNI SERUMI

    prvi ili akutni serum uzeti to ranije u poetku bolesti

    drugi ili parni (rekonvalescentni serum) uzeti oko 2-3 tjedna kasnije

    POSTUPAK S UZORKOM

    u sterilnu epruvetu (bez dodataka) u aseptikim uvjetimauzeti 5-10 mL pune krvi ostaviti na sobnoj temperaturi da se odvoji koagulum centrifugirati (na 3000 rpm / 5-10 minuta)

    oprezno odvojiti supernatant - SERUM

    UVANJE seruma na +2-80 C do 7 dana za dulje uvanje uzorke alikvotirati i uvati na -200 C

    TRANSPORT UZORAKA u adekvatno zatienimposudama u hladnim uvjetima

    KVALITETA UZORKA ZNAAJNO UTJEE NAREZULTATE TESTIRANJA !

    ODREIVANJE PROTUTIJELA UDRUGIM TJELESNIM TEKUINAMA

    LIKVOR, ONA VODICA

    PROBLEM PORIJEKLA PROTUTIJELA !

    ANTIBODY INDEX(AI)

    Uz TEKUINU iz koje se ele odreditiprotutijela obavezno je

    ISTOVREMENO UZETI SERUM!

    Iz istovremeno oduzetih uzoraka, npr.

    likvora i seruma, uz odreivanje specifinihprotutijela treba odrediti i

    ukupne imunoglobuline i/ili albumin i/ili

    surogat protutijela

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    4/19

    PROCJENAKRVNO-MODANE MEMBRANE

    1. normalan kvocijent IgG

    Qukupni< Qlim

    AI = Qspec: Qukupni

    Qspec = specifini IgG u likvoru : specifini IgG u serumu

    Qukupni = ukupni IgG u likvoru : ukupni IgG u serum

    Reiberova formulaza procjenukrvno-modane membrane

    2. poveani kvocijent IgG

    npr. u multiplom mijelomu ili nekim kroninim bolestima

    Qukupni> Qlim

    AI = Qspec: Qlim

    Qlim (IgG) = 0.93 x Qalb2 + (6 x 10-6) - 1.7 x 10-3

    Qlim (IgM) = 0.67 x Qalb2 + (120 x 10-6) - 7.1 x 10-3

    Interpretacija nalaza likvorskih protutijela

    ant ibody indeksAI

    AI 0.5-1.5 Referentne vrijednosti za zdrave osobe

    Nema intratekalne sinteze

    AI 1.5-2.0 (4.0) Granini nalaz

    AI > 2.0 (4.0) Znaajan nalaz likvorskih protutijela

    METODE U SEROLOGIJI

    REAKCIJA VEZANJA KOMPLEMENTA (RVK)

    REAKCIJA AGLUTINACIJE Bakterijska

    Latex

    Hemaglutinacija

    Inhibicija hemaglutinacije

    REAKCIJA PRECIPITACIJE

    Precipitacija u epruveti Gel imunodifuija

    Protusmjerna imunoelektroforeza

    NEUTRALIZACIJA Virusa

    Toksina

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    5/19

    NOVIJE METODE

    RADIOIMUNOTEST (RIA)

    FLUORESCENTNI IMUNOTEST (IFA)

    ENZIMSKI IMUNOTEST (EIA, ELISA)

    IMUNOBLOT / WESTERN BLOT (WB)

    REKOMBINANTNI IMUNOBLOT TEST (RIBA)

    TESTOVI AVIDNOSTI

    EIA enzyme immunoassayELISA enzyme linked immunosorbent assay

    EIA / ELISA IZRAAVANJE REZULTATA

    Reaktivno Nereaktivno

    Granino (siva zona)

    Toka cut off

    KVALITATIVNO: pozitivno / negativno

    KVANTITATIVNO: jedinice prema naputku proizvoaa: OD (ekstinkcija) Index (ratio) VE (value ELISA) IU/mL U/mL AU/mL titar

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    6/19

    ODREIVANJE STAROSTI INFEKCIJE

    PRAENJE TITRA PROTUTIJELA U PARNIMSERUMIMA

    TESTOVI AVIDNOSTI IgG

    AVIDNOST = vrstoa veze antigena i protutijela

    protutijela vee avidnosti javljaju se kasnije tijekominfekcije

    promjena niske avidnosti u visoku unutar 6 mjeseci!

    TUMAENJESEROLOKOG NALAZA

    KLINIAR MIKROBIOLOG

    VANI IMBENICI ZA INTERPRETACIJUSEROLOKIH NALAZA

    vrijeme oduzimanja uzorka

    nespecifini poticaji imunogodgovora

    ukriene reakcije

    anamnestiki odgovor

    Vrijeme oduzimanja uzorka

    Parni uzorci1. akutni serum

    2. rekonvalescentni serum

    SEROKONVERZIJA PORAST TITRA PROTUTIJELA

    POJAVA SPECIFINIH IgM PROTUTIJELA

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    7/19

    Nespecifini poticaj

    POLIKLONSKA AKTIVACIJA LIMFOCITA B

    daje stvarne pozitivne rezultate

    Ukriene reakcije

    ZAJEDNIKE ANTIGENE DETERMINANTE

    npr. HSV-1 vs. HSV-2

    mumps vs. parainfluenca

    HHV-6 vs. CMV

    Anamnestiki odgovor

    POTICANJE REAKTIVACIJE IMUNOSNOGODGOVORA

    proizvodnja protutijela za ranije upoznat antigen

    original antigenic sin

    RAZLOZI LANO NEGATIVNIH SEROLOKIHREZULTATA

    VRIJEME UZIMANJA UZORAKA prije stvaranja specifinih protutijela

    KOMPETICIJA IgM i IgG za vezna mjesta na nosau IgM lano negativan u suviku IgG

    LOKALNE INFEKCIJE (npr. genitalni HSV, C.trachomatis)

    REKURENTNA INFEKCIJA HSV nema porasta titra protutijela

    IMUNONEKOMPETENTNI imunokompromitirani koji ne razvijaju porast protutijela ili do porasta dolazi sporo -

    djeca

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    8/19

    RAZLOZI LANO POZITIVNIH SEROLOKIHREZULTATA

    ANTIGLOBULINI (reumatoidni faktor IgM) UKRIENA REAKTIVNOST POLIKLONSKA AKTIVACIJA LIMFOCITA B NEKVALITETAN UZORAK

    ikterian, hemoliziran, lipemian, kontaminiran

    Anamnestiki odgovor Transplacentarni prijenos

    Transfuzije

    EVALUACIJA TESTOVA

    OSJETLJIVOST (%) Stvarno pozitivni /(stvarno pozitivni + lano negativni) x100

    SPECIFINOST (%) Stvarno negativni /(stvarno negativni + lano pozitivni) x100

    POZITIVNA PREDIKTIVNA VRIJEDNOST (%) Stvarno pozitivni /(stvarno pozitivni + lano pozitivni) x100

    NEGATIVNA PREDIKTIVNA VRIJEDNOST (%) Stvarno negativni /(stvarno negativni + lano negativni) x100

    KATEGORIZACIJA RUTINSKIH METODA U VIROLOKOJ DIJAGNOSTICI

    VirusKultura

    stanica

    Izravna dijagnostika

    (EIA, aglutinacija)

    Mikroskop

    (EM, DFA,

    imunohistokemija)

    DNA/RNAImunosni

    odgovor

    Arbo (KME) C D C B A

    CMV A D B B A

    EBV D D B B A

    Parvo B19 D C C A A

    Mumps A C B B A

    Rubela B D C B A

    Morbili B C B B A

    HSV A B A B B

    VZV A D A C B

    Adeno A A B C B

    Influenza A A A C B

    Parainfluenza A C A C C

    RSV A A A C C

    Entero A D D A C

    HHV-6 C C C B C

    D T

    I O

    J K

    A S

    G O

    N P

    O L

    S A

    T ZI M

    K O

    A Z

    E

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    9/19

    TO

    K

    S

    O

    P

    L

    A

    Z

    M

    O

    ZA

    Seroloka dijagnostika toksoplazmoze

    Neizravna dijagnostika detekcija protutijela

    IMUNOSNI ODGOVOR

    Osnovna i najpouzdanija uz pravilnu interpretaciju!

    Toxoplasma gondiiIgM

    Javljaju se rano - unutar jednog tjedna nakon poetka infekcije

    Obino nestaju unutar 6-9 mjeseci nakon infekcije

    Mogu perzistirati vie od 18 mjeseci

    Perzistiraju predugo (godinama) da bi bili dobar indikatorrecentne infekcije!

    IgM u novoroenadi retestirati nakon 7-10 dana

    prijelaz od majke pri porodu !? poluvrijeme ivota IgM = 3-5 dana

    Toxoplasma gondiiIgG

    Javljaju se kasnije, postepeno rastu

    Vrh oko 2-5 mjeseci nakon poetka klinikih simptoma

    Pokazatelj imunosti

    Praenje dinamike protutijela pomae u odreivanjuvremena infekcije

    TESTOVI AVIDNOSTI IgG promjena niske avidnosti u visoku unutar 6 mjeseci!

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    10/19

    Toxoplasma gondiiIgA

    Pojava oko 5 dana nakon IgM

    Nestaju kad IgG poinje padati, neto ranije nego IgM

    Obino nestaju nakon 6-12 mjeseci

    Perzistira mjesecima (do vie od 1 godine)

    kontroverze je li IgA pouzdaniji indikator konatalne infekcije negoIgM (?)

    SEROLOKA DIJAGNOSTIKA TOKSOPLAZMOZE - I

    Odreivanje protutijela IgM, IgG, IgA, (IgE)

    Metode: Enzimski imunotest (EIA, ELISA)

    Imunosorbentni aglutinacijski test (ISAGA)

    Imunofluorescencija (IFA)

    Izraavanje testova jedinice: internacionalne jedinice, titar, indeks, vrijednost optike gustoe

    TEST AVIDNOSTI PROTUTIJELA IgG

    Sabin Feldmanov dye test test bojanja tahizoita metilenom

    Tahizoiti izgube afinitet za metilensko modrilo uprisutnosti protutijela IgG

    Indirektna hemaglutinacija (IHA)

    RVK

    SEROLOKA DIJAGNOSTIKA TOKSOPLAZMOZE - II

    By Wilson M, McAuley JB. in Murray Manual of clinical microbilogy, 1999

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    11/19

    Seroloka dijagnostika toksoplazmoze

    Negativan IgM i/ili IgG iskljuuje akutnu toksoplazmozu U akutnoj infekciji oba moraju biti prisutna!

    Ako je screening IgG pozitivan treba napraviti IgM

    Kod sumnje na akutnu infekciju uzorke poslati ureferentni centarza dijagnostiku toksoplazmoze

    IgA (IgE), test avidnosti protutijela

    Interpretacija nalaza komercijalnihserolokih testova za T.gondii

    I-III

    IgG IgM Nalaz i/ili interpretacija za odrasle

    Negativno Negativno Nema seroloke potvrde infekcije s toksoplazmom.

    Negativno GraninoMogue rana faza akutne infekcije ili lano pozitivno. Uzetinovi serumako je drugi serum opet isti vjerojatno nemainfekcije s toksoplazmom.

    Negativno PozitivnoMogue akutna infekcija ili lano pozitivno. Uzeti novi serum ako je drugi serum opet isti vjerojatno lano -pozitivno.

    Interpretacija nalaza komercijalnih

    serolokih testova za T.gondiiII-III

    IgG IgM Nalaz i/ili interpretacija za odrasle

    Granino Negativno Neodreeno. Uzeti novi serum za testiranje ili retestirati prvi naIgG s drugim tipom testa.

    Granino Granino Neodreeno. Uzeti novi serum za testiranje IgM i IgG.

    Granino Pozitivno Mogue akutna infekcija s toksoplazmom. Uzeti novi serum zatestiranje IgM i IgG. Ako je rezultat drugog seruma isti ili IgGpostane pozitivan, poslati oba seruma u referentni laboratorij na

    dodatna testiranja.

    Interpretacija nalaza komercijalnih

    serolokih testova za T.gondiiIII-III

    IgG IgM Nalaz i/ili interpretacija za odrasle

    Pozitivno Negativno Infekcija s toksoplazmom prije vie od godinu dana.

    Pozitivno Granino Infekcija toksoplazmom vjerojatno prije vie od godinu dana ililano pozitivna reakcija IgM. Uzeti novi serum za testiranjeIgM. Ako je rezultat drugog seruma isti, oba seruma treba

    poslati referentni laboratorij na dodatna testiranja.Pozitivno Pozitivno Mogue nedavna infekcija unutar zadnjih 12 mjeseci ili lano

    pozitivna reakcija IgM. Poslati uzorak u referentni laboratorij na

    dodatna testiranja.

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    12/19

    Dokaz konatalne toksoplazmoze

    Potvrena akutna toksoplazmoza tijekom trudnoe Dokaz parazita - PCR, kultivacija Protutijela IgM u fetalnoj krvi

    Potvrditi nalaz u novom uzorku nakon jednog tjedna

    IgG prolaze transplacentarno, dok IgM i IgA ne prolaze

    U 20-30% inficiranih fetusa ne mogu se dokazati IgM,ni IgA Kontrola UZV

    rane promjene mozga (hidrocefalus, kalcifikati), jetre (poveanje,kalcifikati, ascites)

    RAZLIKOVANJE AKUTNE ODKRONINE TOKSOPLAZMOZE

    Nemogue iz jednog uzorka seruma!

    Praenje dinamike titra protutijela

    Test avidnosti IgG

    Direktna dijagnostika PCR, kultivacija uzronika

    Lyme borelioza (LB)

    UZRONIK

    Borrelia burgdorferi sensu lato:

    Borrelia burgdorferi sensu stricto

    Borrelia afzelii

    Borrelia garinii

    Borrelia spielmanii

    Borrelia lusitaniae

    Borrelia bissettii

    Borrelia valaisiana

    Klinike manifestacije LB

    LB JE MULTISISTEMNA UPALNA BOLEST!

    Simptomi raznoliki, nespecifini: upuuju na borelije

    potpuno nespecifini

    esto diferencijalno dijagnostiki nejasno

    64% pacijenata s LB se ne sjea ugriza krpelja!

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    13/19

    Lyme borelioza (LB)

    Povezana s genospecijesom koji uzrokuje bolest

    Borrelia afzelii: kone manifestacije (ACA)

    Borrelia garinii: neuroborelioza

    Borrelia burgdorferi sensu stricto: artritis

    Lyme borelioza (LB)

    Tick bite

    Abortive: 95% Lyme-Borreliosis: 5%

    Earlydissemination

    Early localized

    84%

    Self limited 92%

    8%

    Chronic manifestation

    (skin, joints, brain)

    14%

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    14/19

    LB faza 3.

    Kronine manifestacije: 6-12 mjeseci

    Dermatoborelioza:Acrodermatitis chronicaatrophicans (ACA)

    Neuroborelioza: ACA - associated mono(poly)-neuritis;

    progresivni encefalomijelitis

    Artritis:Mono (poly-) arthritis

    DIJAGNOSTIKA LB

    KLINIKA SLIKA - tipine klinike manifestacije

    MIKROBIOLOKA DIJAGNOSTIKA IZRAVNA

    KULTIVACIJA, IZOLACIJA

    PCR

    NEIZRAVNA SEROLOKO TESTIRANJE

    SEROLOKI TESTOVI

    Odreivanje specifinih IgM i IgG protutijela

    Uzorci: serum, likvor, sinovijska tekuina

    Nastanak specifinih protutijela u LBovisi o:

    fenotipskim karakteristikama borelija

    razliitoj antigenskoj strukturi borelija

    razliitoj geografskoj rasprostranjenosti borelija

    sposobnosti bolesnika da reagira na infekciju

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    15/19

    Borrelia burgdorferi IgM

    Pojava nekoliko tjedana nakon poetka bolesti

    Vrh nakon 3-6 tjedana

    Pad nakon 6 mjeseci

    Mogua perzistencija godinama nakon terapije

    Ne mora biti znak akutne infekcije!

    Borrelia burgdorferi IgG

    Pojava nekoliko tjedana nakon IgM

    4-6 tjedana nakon infekcije >= 90% pacijenataima prisutna IgG

    Vrh 5 mjeseci do 7 godina nakon poetka bolesti

    Spori pad titra protutijela

    IMUNOSNI ODGOVOR NA

    B. burgdorf erisensu lato

    Javlja se relativno kasno - nekoliko tjedana do nekolikomjeseci nakon infekcijeprotutijela IgM nakon 3-6 tjedanaprotutijela IgG od 6. tjedna do nekoliko mjeseci kasnije

    Kod nekih pacijenata imunosni odgovor se ne razvija imunosna nereaktivnost bolesnika na infekciju

    slabi ili spori reaktori

    Specifina protutijela nisu protektivna dijagnostiko znaenje

    Prisutna u zdravih osoba

    Metode odreivanja specifinih protutijelaIgM i IgG nakon infekcije

    B.burgdorferisensu lato

    Imunoenzimski test (EIA)

    Imunofluorescentni test (IFA)

    Imunoblot test (Western blot (WB))

    Testovi hemaglutinacije

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    16/19

    Seroloki testovi Nisu standardizirani Specifinost i osjetljivost je razliita

    Testovi se razlikuju prema:vrsti borelije, odnosno soju unutar vrste od kojeg se

    pripravlja antigen

    nainu priprave antigena cijela borelija proieni borelijski antigeni rekombinantni antigeni

    metodi testiranja

    Kriteriji seroloke dijagnostike premaCenters for Disease Control (CDC)

    Seroloka dijagnostika u dva koraka

    Sve reaktivne i granine rezultate EIA ili IFA trebadodatno testirati imunoblot (WB) testom

    Ako je nalaz WB negativan, reaktivne EIA/IFAtestove treba interpretirati kao lano pozitivne!

    BORELIOZA NIJE SEROLOKA DIJAGNOZA

    TIPIAN SEROLOKI NALAZ ZA LB FAZA 1. IgG negativno, IgM pozitivno

    AT detektirana u 20-50%

    ALI: Protutijela se mogu pojaviti kasno IgM se uope ne mora pojaviti (oprez: reinfekcije)

    IgM moe biti pozitivan mjesecima (ekstremno godinama) ak i nakonuspjene antibiotske terapije

    Ustrajno negativan IgG mogui je pokazatelj uspjenosti terapije faze 1.

    LYME BORELIOZA

    TIPIAN SEROLOKI NALAZ ZA LB FAZA 2.

    IgG (slabo) pozitivan, IgM pozitivanAT detektirana u 70-90 %

    ALI:IgG mogu ostati negativna

    rijetko; veinom u djece s parezom facialisa

    IgM moe biti negativan (kao u reinfekciji)

    Neuroboreliozu treba dijagnosticirati jedino u paru likvor/serum

    Likvor/ serum indeks koji upuuje na intratekalnu produkcijuAT moe biti pozitivan mjesecima unato adekvatnoj terapiji

    Porast titra IgG moe se dogoditi i tijekom terapije

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    17/19

    BORELIOZA JE KLINIKA DIJAGNOZA

    TIPIAN SEROLOKI NALAZ ZA LB FAZA 3.

    IgG visoki titar, IgM pozitivan ili negativanAT detektirana u gotovo 100%

    Negativan IgM moe jo uvijek znaiti progresivnu fazuborelioze

    !!! Visoki IgG bez klinikih simptoma nije indikacija zaantibiotsku terapiju

    OZNAKA VIRUS PODOBITELJ BOLESTI

    HHV-1 Herpes simplex virus - 1(HSV-1)

    1 Gingivostomatitis, herpes labialis,

    keratokonjunktivitis, encefalitis, genitalni her pes

    HHV-2 Herpes simplex virus - 2(HSV-2)

    1

    Genitalni herpes, neonatalne infekcije, meningitis,

    gingivostomatitis, herpes labialis

    HHV-3 Varicella zoster virus(VZV)

    2 Vodene kozice, zoster

    HHV-4 Epstein-Barr virus(EBV)

    1

    Infektivna mononukleoza (IM); Burkittov limfom;

    nazofaringealni karcinom; limfoproliferativne bolesti,

    XLP; T-stanini limfom; Hodgkinov limfom

    HHV-5 Cytomegalovirus(CMV)

    1

    Asimptomatska infekcija; IM; retinitis; infekcije u

    imunokompromitiranih; konatalne infekcije

    HHV-6 Human herpesvirus - 6(HHV-6)

    2 Mononukleoza; roseola infantum (Exanthema

    subitum)

    HHV-7 Human herpesvirus 7(HHV-7)

    2 Mononukleoza?; roseola infantum; pytiriasis rosea?

    HHV-8 Human herpesvirus 8(HHV-8, KSHV)

    2 Kaposiev sarkom; multicentrina Castelmanovabolest; primarni efuzijski (tekui) limfom (PEL)

    HUMANI HERPESVIRUSI

    VCA (viral capsid anti gen) VCA IgM pojava u 2-3 tjednu infekcije VCA IgG pojava 4-7 tjedana nakon pojave simptoma;

    perzistira doivotno

    EA-D (early antigen dif fuse) EA-D IgG vrh u 3. tjednuprisutni tijekom replikacije virusa

    EBNA (EBV nuclear antigen) marker prijelaza akutne u rekonvalescentnu fazu (6-12. tjedan);

    uglavnom perzistiraju doivotno

    Epstein-Barrov virus (EBV) EBV

    PRIMARNA INFEKCIJAAKUTNA FAZA PROLAZNA SUBAKUTNA FAZA REKONVALESCENTNA FAZA

    RANIJA (PROLA) INFEKCIJA

    REAKTIVACIJA

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    18/19

    Seroloki status u EBV infekcijiVCA IgM VCA IgG EA-D IgG EBNA IgG EBV infekcija

    - - - - EBV negativan

    -

    -

    -/+#

    +

    +*

    +#

    -

    -

    +#

    +

    -

    +#

    Ranija (prola) EBVinfekcija

    +

    +

    +

    -

    +

    +/ -

    -

    -

    Primarna EBV

    infekcija

    (akutna faza)

    +

    -

    +

    +*

    +

    -

    +

    -

    Primarna EBV

    infekcija

    (prolazna faza)

    -

    -

    +*

    +

    -

    +

    -

    +

    Primarna EBV

    infekcija

    (rekonvalescentna

    faza)

    -/+# +# +# +#Reaktivacija EBV

    infekcije

    Anti-CMV IgM Pojava 3-4 dana nakon infekcije

    Pad nakon nekoliko tjedana i dalje sporo kroz 4-6mjeseci

    Trajanje do 8 mjeseci, a u transplantiranih do 2godine

    Anti-CMV IgG

    Pojava 1 tjedan nakon pojave IgM

    Cytomegalovirus

    (CMV)

    RAZLIKOVANJE PRIMARNE ISEKUNDARNE INFEKCIJE Reaktivacija moe inducirati IgM

    HETEROTIPNI IMUNI ODGOVOR ukriena reaktivnost

    INDUKCIJA POLIKLONOG IMUNOSNOGODGOVORA LIMFOCITA B

    Problemi interpretacije serolokognalaza u CMV infekciji

    Seroloka dijagnostika HSV

    PRIMARNA INFEKCIJA SEROKONVERZIJA kasno, nakon 2-3 tjedna

    Zajedniki epitopi izmeu HSV-1 i HSV-2 rezultirajuukrienom reaktivnosti protutijela

    Rekombinantini antigeni u testovima

    REKURIRAJUE INFEKCIJE NEMA POUZDANE SEROLOKE METODE !!

    NAJEE NEMA ZNAAJNE PROMJENETITRA PROTUTIJELA !!

  • 7/26/2019 19 Serologija PDS

    19/19

    Anti-HSV IgM

    Neonatalna HSV infekcija

    Recentna primarna genitalna infekcijatrudnice

    CNS infekcije Molekularna dijagnostika !!!

    Odreivanje protutijela u likvoru, iako se IgMjavljaju kasno

    Varicella zoster virus (VZV)

    Anti VZV IgM Pojava 2-5 dana nakon simptoma

    Vrh 8-11 dana kasnije

    Pad unutar nekoliko tjedana nakon smirivanjasimptoma

    ~Trajanje ~3 mjeseca

    Anti-VZV IgG Pojava 4-6 dana nakon simptoma

    Vrh 4-8 tjedana kasnije

    Postepeni pad tijekom nekoliko godina

    Doivotno prisutna u niskom titru

    Varicella zoster virus (VZV)

    Anti-VZV IgA Pojava 3-5 dana nakon poetka osipa

    Trajanje 1-3 tjedna nakon smirivanja osipa;povien 1-2 mjeseca; postepeni pad

    Obino nedetektabilna 4 mjeseca nakonsmirivanja infekcije

    ~ 10% odraslih moe imati detektabilnu niskurazinu IgA

    Znaajan pokazatelj reaktivacije VZV !

    Varicella zoster virus (VZV)