１． 抗原の賦活化法

丸いアクリル枠の上に耐熱ガラスを載せます。 パイレックスの容器に賦活液を５００ｃｃ入れ、スライドグラスを金属ラック

に入れ、広い面を下にして置く。 容器に付いている蓋をし、耐熱ガラスの上にセットする。 蓋の上部に空いている２つの穴に熱電対温度センサーとエアー用の金属の棒を

差し入れ、エアースイッチを押す。 ※ 賦活液の中に界面活性剤が入っている場合にはエアースイッチは入れない。

熱電対温度計使用 設定温度９０～９８℃ 出力６ 連続照射タイマー２０～２５分

試料は常温から賦活液に入れ、マイクロウェーブの照射を始めること。 高温になってから試料は入れない。（試料へのダメージが大きくなるため） ５００ｃｃの賦活液が設定温度に達するまで約５分かかる。 高温を１５分間行いたい時は、常温から高温になる５分間を足して連続照射タ

イマーは２０分にする。

２． 免疫組織化学染色法

黒い試料板を庫内にセットする。染色バットが載る面を上側にセットする。 専用の染色バットに約５ｃｃの水を入れる。 染色バットの中には１０枚までスライドグラスが入り、１０枚以上行うときは

染色バットを重ね、最大５枚まで重ねることができます。 赤外線温度計使用 設定温度 ３７℃ 実際には３～１５分ほど照射しても抗体の温度は５℃くらいしか上がりません。

出力 ２ （染色バット１～２枚） ３ （ 〃 ３～５枚） 間欠照射 ４秒 on , ３秒 off 処理時間 通常 ＭＷ照射

１５～３０分 → ３～４分 １～２時間 → ５～７分 オーバーナイト → １５～２０分 マイクロウェーブ照射後の水洗は１０～３０秒程度の洗いでもバックグラウン

ドの抜ける染色をおこなうことができます。 マイクロウェーブを照射することで水分子が動き、抗原抗体反応が促進される

と思われます。 反応時間が短いためにバックグラウンドに抗体が付着しないため、水洗は短時

間の処理で済みます。 しかし全ての抗体がうまくいくとは限りません。 ※１０～１５％程度はマイクロ波との相性が合わないものがあります。 合わないものは通常の方法でしてください。 ＤＡＢの処理時間は通常よりも１．５倍～２倍の時間がかかることもあります。

３．特殊染色法

例 ・ ＰＡＭ ・ ＫＢ ・ グロコット ・ グルメリウス 他 ドーゼにスライドグラスと染色液をセットし、ドーゼを庫内の中心に置き、赤

外線温度計にて温度測定を行う。 前処理と後処理の２回に分けて照射します。 ・前処理

赤外線温度計使用 設定温度 ６０℃ 出力５ 連続照射 ３０秒～１分 ６０℃に達したら一度取り出し、スライドグラスを上下に動かし、

上下の温度斑をなくす。 そしてまた元の位置に置く。 ・後処理 １０℃位下がりますので、出力はそのままで 間欠照射 on, off 処理時間 通常 ＭＷ照射

１～２時間 → ５～１０分前後 オーバーナイト→ ３０～４０分 但し、ＰＡＭは処理時間が短く、後処理の時間は２～５分間染色性を見ながら

止める。

４．ＦＩＳＨ及びインサイチューハイブリダイゼーション法

試料板の材質は塩ビを使用し、試料板中には温度斑をなくすために水が入って

いる。 急激に温めることと、６０℃以上の温度では使用しない。 ・利点 ＦＩＳＨは通常４８時間以内の固定とされているが、施設により固定条件は異

なり、安定した結果を得ることができませんでした。 マイクロウェーブをハイブリに使用することにより、固定時間の不安定さから

くるシグナルの不具合を改善させることができ、安定した結果を得ることがで

きます。 マイクロウェーブをハイブリに使用することで全処理のキットが全く要らなく

なるため、安価でできます。

赤外線温度計を使用し、設定温度４３℃でハイブリをします。 前処理として予め試料板を温めておく必要があります。 出力４で連続照射１０～２０分。

実際のハイブリは試料板の温度が３９～４０℃くらいに冷めてから始めます。 ４３℃の状態から照射し始めると、マイクロウェーブは設定温度に達すると照

射されないため、必ず温度が３９～４０℃に下がってから照射します。 ハイブリダイゼーション 出力 ４ 間欠照射 秒 on, 秒 off 処理時間 ６０分 この後はシグナルの安定性をもたせるため、恒温槽（４２℃）でオーバーナイ

トさせます。

５． 脱灰・脱脂法

ポイント 処理する溶液は冷蔵庫にて必ず冷やしておきます。 テフロン板を庫内にセットし、容器をこの上に載せます。 液の蒸発を防ぐ意味で、サランラップや専用の蓋（真ん中に穴が開いたもの）

をかぶせます。 設定温度を４５～５０℃と決めているため、最初の温度が高いと直ぐに設定温

度に達してしまい、マイクロ波があたりません。 マイクロ波の効果を高めるために必ず冷やす必要があります。 照射方法・照射時間は液量により、条件が異なります。 赤外線温度計 設定温度 ４５～５０℃ 出力 間欠照射 on, off 処理時間 ・脱灰 この機種で使用できる溶液は蟻酸、K‐ＣＸ。 通常方法に比べ、１／１０くらいの時間短縮になります。

・脱脂 溶液の種類は問いません。 オーバーナイトするものが３０分～２時間程度になります。 ※溶液により脱脂効果の強弱があるため、照射時間は異なります。